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血吸虫病治疗前后IgG及其亚类的变化和疗效考核的研究 被引量：18
1
作者 魏泉德 石佑恩 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1998年第1期30-32,共3页
目的：欲寻找一种用于血吸虫病疗效考核的IgG亚类短期抗体。方法：用各种ELISA方法检测了264份治疗前和治疗后不同时间慢性血吸虫病人及50份正常人血清中的可溶性虫卵抗原（SEA）和成虫抗原（AWA）特异性IgG、IgG1和IgG4，以及日本血吸... 目的：欲寻找一种用于血吸虫病疗效考核的IgG亚类短期抗体。方法：用各种ELISA方法检测了264份治疗前和治疗后不同时间慢性血吸虫病人及50份正常人血清中的可溶性虫卵抗原（SEA）和成虫抗原（AWA）特异性IgG、IgG1和IgG4，以及日本血吸虫31／32kD肠相关抗原（GAA）。结果：治疗前IgG阳性率（SEA97．6％，AWA100％）与IgG1（SEA94％，AWA95．2％）无差别，高于IgG4（SEA62．7％，AWA73．4％）及GAA（62．7％）阳性率；治疗后IgG4消退较快，治疗后12月时阴转率达97．6％。正常血清检测上述四种指标假阳性率均在3％左右，无差别。结论：IgG1的诊断价值与IgG相仿，二者与粪检符合率均较高；而IgG4可能为一种短期抗体，可望作为疗效考核的评价指标。 展开更多
关键词 日本血吸虫 疗效 考核 IGG亚类 短期抗体
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LAMP技术在病原微生物检测中的应用 被引量：22
2
作者 张如胜 魏泉德 《华南预防医学》 2007年第5期45-49,共5页
环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术是近年来发展出的一种敏感、特异、方便快捷的核酸扩增技术。与传统PCR方法相比,LAMP不需要热循环,为等温扩增,且由于LAMP反应中产生大量的副产物-白色焦磷酸镁沉淀,... 环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术是近年来发展出的一种敏感、特异、方便快捷的核酸扩增技术。与传统PCR方法相比,LAMP不需要热循环,为等温扩增,且由于LAMP反应中产生大量的副产物-白色焦磷酸镁沉淀,扩增产物可不经过电泳,通过肉眼观察或浊度计即可判定结果。因此LAMP是一种不需要热循环仪、肉眼即可判定结果的高度特异和敏感的DNA扩增方法,适合于现场、战时野外或条件较差的实验室进行病原微生物的快速检测。近年LAMP技术在病原微生物检测方面已有广泛应用,本文就这一方面的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 环介导等温扩增 病原微生物
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环介导等温扩增(LAMP)技术检测沙门菌属方法的建立 被引量：18
3
作者 欧新华 张如胜 +2 位作者 宋克云 苏良 魏泉德 《实用预防医学》 CAS 2008年第6期1945-1947,共3页
建立一种检测沙门菌属快速敏感的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法。针对沙门菌属侵袭蛋白(invA)基因序列的六个区域设计四条LAMP引物,65℃保温约60min,完成对沙门菌属的扩增,扩增产物经电泳和酶... 建立一种检测沙门菌属快速敏感的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法。针对沙门菌属侵袭蛋白(invA)基因序列的六个区域设计四条LAMP引物,65℃保温约60min,完成对沙门菌属的扩增,扩增产物经电泳和酶切鉴定。利用LAMP和普通PCR方法同时检测4株沙门菌和9株非沙门菌(对照组)来验证LAMP方法的特异性;将肠炎沙门菌菌液做一系列10倍稀释后用LAMP和PCR方法进行检测来比较两者敏感性。4株沙门菌扩增出LAMP特征性梯状条带,9株非沙门菌没有出现LAMP扩增,LAMP产物的特异性通过限制性内切酶得到了证实;LAMP检测沙门菌属的特异性与普通PCR相同,但其敏感性比普通PCR高10倍,LAMP检测沙门菌属的检测下限为10cfu/ml,PCR检测下限为100cfu/ml。LAMP检测速度相比PCR更快速,在60min内即可完成扩增反应。建立了一个快速、特异、敏感的沙门菌属LAMP检测方法。 展开更多
关键词 环介导等温扩增 沙门菌属 侵袭蛋白
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珠海市2011-2015年细菌性食物中毒事件的标本检测结果分析 被引量：18
4
作者 杨春晓 莫韵韶 魏泉德 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第6期788-791,共4页
目的了解珠海市细菌性食物中毒事件的特点,为细菌性食物中毒的判定、控制和预防提供科学依据。方法依据两版《食品微生物学检验标准》(分别于2004-01-01和2010-06-01实施)中的方法对2011-2015年珠海市细菌性食物中毒事件的标本进行检测... 目的了解珠海市细菌性食物中毒事件的特点,为细菌性食物中毒的判定、控制和预防提供科学依据。方法依据两版《食品微生物学检验标准》(分别于2004-01-01和2010-06-01实施)中的方法对2011-2015年珠海市细菌性食物中毒事件的标本进行检测,并将检测结果进行统计分析。结果 2011-2015年珠海市共发生37起细菌性食物中毒事件(共430份标本),检出22起(共检出致病菌124株),细菌性食物中毒事件原因查明率为59.46%。引起细菌性食物中毒事件的致病菌主要以副溶血性弧菌为主(检出97株,占菌株总数78.23%),其次是金黄色葡萄球菌(检出12株,占菌株总数9.68%)。采集标本检出率是以肛拭标本最高(检出77株,占菌株总数62.10%),其次是粪便标本(检出17株,占菌株总数13.71%)。致病菌检出的季节性分布表明:明显集中在第3季度(检出致病菌99株,占检出菌株总数的79.84%),其次是第二季度(检出致病菌16株,占检出菌株总数12.90%)。结论 2011-2015年珠海市细菌性食物中毒事件以副溶血性弧菌和金黄色葡萄球菌为主要病原菌,致病菌检出的季节性分布集中在第2、3季度。提高全民卫生意识,加强食品生产、加工、储存过程食源性致病菌的监测和监督管理工作,减少食物中毒的发生。 展开更多
关键词 细菌性 食物中毒 致病菌 季节性分布
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抗菌肽的原核表达及应用前景 被引量：8
5
作者 魏泉德 余新炳 《国际医学寄生虫病杂志》 CAS 2006年第4期206-210,共5页
抗菌肽是具有抗菌活性的一类短肽,广泛存在于生物界,是先天免疫的重要防御成分,其杀细胞机制为在靶细胞膜上穿孔,靶细胞因渗透压改变而死亡。抗菌肽具有广谱抗菌活性,并有抗病毒、抗真菌、抗寄生虫及抗肿瘤等生物活性,有良好的应用前景... 抗菌肽是具有抗菌活性的一类短肽,广泛存在于生物界,是先天免疫的重要防御成分,其杀细胞机制为在靶细胞膜上穿孔,靶细胞因渗透压改变而死亡。抗菌肽具有广谱抗菌活性,并有抗病毒、抗真菌、抗寄生虫及抗肿瘤等生物活性,有良好的应用前景,使其走向临床的最大挑战是如何用基因工程技术低成本大量生产抗菌肽产品。该文综述了抗菌肽的原核表达研究进展及其应用前景。 展开更多
关键词 抗菌肽 融合表达 大肠杆菌 转基因工程
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2008年-2016年珠海市市售食品中病原菌污染状况分析 被引量：12
6
作者 杨春晓 方艳梅 +3 位作者 袁筱茜 董莉 魏泉德 陈丹丹 《中国卫生检验杂志》 CAS 2017年第15期2158-2161,共4页
目的了解珠海市市售食品病原菌污染状况,为进行食品风险评估和制定食品安全风险管理决策提供技术依据。方法根据《广东省食源性致病菌监测工作手册》、《广东省食品安全风险监测工作手册》和GB 4789中的标准操作程序,对2008年-2016年珠... 目的了解珠海市市售食品病原菌污染状况,为进行食品风险评估和制定食品安全风险管理决策提供技术依据。方法根据《广东省食源性致病菌监测工作手册》、《广东省食品安全风险监测工作手册》和GB 4789中的标准操作程序,对2008年-2016年珠海市市售食品进行监测,并将实验室检测结果进行统计分析。结果共检测珠海市市售食品1 199份,致病菌阳性样品277份,总检出率为23.10%。检出7种致病菌共309株,分别是副溶血性弧菌、创伤弧菌、金黄色葡萄球菌、沙门菌、单核细胞增生李斯特菌、阪崎肠杆菌和铜绿假单胞菌。对其中562份食品进行卫生指示菌检测,细菌总数或大肠菌群不合格样品共246份,总不合格率为43.77%。结论珠海市市售食品存在不同程度的食源性致病菌污染,卫生指示菌不合格情况比较严重,存在一定安全风险和隐患,应加强食品安全管理,减少食源性疾病的发生。 展开更多
关键词 市售食品 食品安全 病原菌 污染状况 分析
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霍乱弧菌基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术谱库的构建 被引量：12
7
作者 张丽荣 黄辉涛 +3 位作者 方艳梅 林毅雄 魏泉德 李柏生 《中国卫生检验杂志》 CAS 2018年第2期172-175,共4页
目的利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MAIDI-TOF MS)技术构建霍乱弧菌谱库。方法选取56株有代表性的霍乱弧菌,在相同环境下培养,通过生化、分子生物学及血清型鉴定,利用MAIDI-TOF MS对56株霍乱弧菌进行质谱数据采集,建立数据库。... 目的利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MAIDI-TOF MS)技术构建霍乱弧菌谱库。方法选取56株有代表性的霍乱弧菌,在相同环境下培养,通过生化、分子生物学及血清型鉴定,利用MAIDI-TOF MS对56株霍乱弧菌进行质谱数据采集,建立数据库。另选取10株野生霍乱弧菌及104株非霍乱弧菌用自建数据库进行MAIDI-TOF MS检测及评价。结果自建数据库对10株野生霍乱弧菌鉴定,阳性率为100%,对104株非霍乱弧菌鉴定,均无误判,菌种鉴定结果可靠。56株霍乱菌株的聚类分析发现,MALDI-TOF-MS分型与血清型抗原分类之间无相关性,不同血清型间的质谱数据差异不明显,不能用于区分血清型别。结论本研究建立的霍乱弧菌谱库对霍乱弧菌的鉴定准确性高,适用于实际检测。本研究结果填补了谱库中缺失的霍乱弧菌谱库,建立了霍乱弧菌的MAIDI-TOF MS检测鉴定平台,同时也为其他细菌建立或补充完善谱库提供了很好的方法借鉴。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术 谱库
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珠海市2012―2014年腹泻病例沙门菌血清型分布和耐药情况分析 被引量：10
8
作者 方艳梅 杨春晓 +2 位作者 张丽荣 袁筱茜 魏泉德 《华南预防医学》 2017年第5期474-477,共4页
目的分析2012―2014年珠海市哨点医院腹泻病例沙门菌的血清型分布和耐药情况。方法在珠海市2家哨点监测医院中选择以腹泻症状为主诉的门诊病例,采集病例粪便样本进行沙门菌分离培养、生化鉴定和血清学分型,采用药敏纸片法(K-B法)进行12... 目的分析2012―2014年珠海市哨点医院腹泻病例沙门菌的血清型分布和耐药情况。方法在珠海市2家哨点监测医院中选择以腹泻症状为主诉的门诊病例,采集病例粪便样本进行沙门菌分离培养、生化鉴定和血清学分型,采用药敏纸片法(K-B法)进行12种抗生素的药敏试验。结果分离培养共获得沙门菌535株,分成46种血清型,常见血清型分别为Ⅰ4,5,12∶i∶-、鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌和斯坦利沙门菌,共占检出菌株总数的74.8%(400/535)。535株菌株耐药率较高的抗生素有磺胺复合物、氨苄西林、四环素、链霉素、萘啶酮酸,耐药率分别为84.3%、62.8%、61.7%、56.4%和50.7%;较为敏感的抗生素是三代或四代头孢类抗生素头孢噻肟、头孢他啶和头孢吡肟,耐药率分别为6.5%、4.1%和5.4%。535株沙门菌的多重耐药率为69.9%,其中多重耐药谱为ASSu T+(同时对氨苄西林、链霉素、磺胺类和四环素4种或更多种抗生素耐药)的占64.2%(240/374)。沙门菌Ⅰ4,5,12∶i∶-和鼠伤寒沙门菌的多重耐药情况最为严重,多重耐药率分别为96.9%(155/160)和97.8%(87/89)。结论珠海市腹泻病例沙门菌常见血清型为Ⅰ4,5,12∶i∶-和鼠伤寒沙门菌,沙门菌多重耐药情况较为严重,但对三、四代头孢类抗生素较为敏感,可作为临床治疗沙门菌感染首选用药。 展开更多
关键词 沙门菌 血清分型 微生物敏感性试验
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珠海市2007-2008年乙型流感病毒基因特性分析 被引量：10
9
作者 张丽荣 林毅雄 +5 位作者 李红霞 魏泉德 张静涛 方艳梅 周兰兰 郑予柯 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期847-850,共4页
目的了解珠海市近两年乙型流感病毒的基因变异情况。方法采集珠海市流感样病例样本进行流感病毒的分离和鉴定,并对分离到的乙型流感病毒进行核酸的提取,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增病毒基因后进行病毒血凝素HA1基因核苷酸序... 目的了解珠海市近两年乙型流感病毒的基因变异情况。方法采集珠海市流感样病例样本进行流感病毒的分离和鉴定,并对分离到的乙型流感病毒进行核酸的提取,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增病毒基因后进行病毒血凝素HA1基因核苷酸序列测定,用Mega、DNA Star、GeneDoc软件对测序结果进行分析处理,并与WHO推荐的疫苗株基因序列进行比对。结果 2007-2008年分离的乙型流感毒株分属于Yamagata系和Victoria系两个谱系,谱系内毒株间距离很近。Yamagata系毒株与B/Brisbane/3/2007的核苷酸同源性极高,在99.4%~99.7%之间;Victoria系乙型流感病毒株与B/Malasia/2506/2004的核苷酸同源性亦很高,在98.6%~99.1%之间。与疫苗株和其它流行株相比,本次分离的两个谱系毒株均未发现核苷酸的丢失和插入,但均增加一个潜在的糖基化位点。结论珠海市人群交替流行着Yamagata系和Victoria系两个抗原性不同的进化系的乙型流感病毒,病毒的基因发生了变异。2007-2008两年WHO推荐的乙型流感疫苗株与我地区当年流行株为不同谱系毒株,预防保护效果不好。 展开更多
关键词 乙型流感病毒 血凝素基因 核苷酸序列 Yamagata系 Victoria系
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2008年珠海肠道病毒71型分子流行病学研究 被引量：8
10
作者 张丽荣 林毅雄 +4 位作者 李红霞 魏泉德 方艳梅 郑予柯 张静涛 《实用预防医学》 CAS 2009年第1期54-57,共4页
目的通过扩增VP1节段的核苷酸序列,对2008年珠海暴发流行的EV 71进行种系进化分析。方法选取10例手足口病暴发流行中的EV71阳性病例标本用一对特异引物进行VP1全基因核苷酸序列扩增,由生物技术公司在ABI3730型自动测序仪上测序,序列结果... 目的通过扩增VP1节段的核苷酸序列,对2008年珠海暴发流行的EV 71进行种系进化分析。方法选取10例手足口病暴发流行中的EV71阳性病例标本用一对特异引物进行VP1全基因核苷酸序列扩增,由生物技术公司在ABI3730型自动测序仪上测序,序列结果用Claxter、DNA Star、Mega软件进行分析。结果本文的10株病毒与C基因型代表株比较接近,核苷酸同源性在88.2%～99.2%之间,氨基酸同源性在98.7%～99.7%之间;尤其与C4基因型最为相近,与C4基因型相比较核苷酸同源性在97.6%～99.2%之间,氨基酸同源性在99.3%～99.7%之间;而与A、B基因型代表株比较差异较大,核苷酸同源性只在81.8%～84.4%之间,氨基酸同源性在94.6%～98.0%之间;说明本文的10株病毒皆属于EV71病毒C基因型、C4亚型。结论珠海和新会的病毒株可能与阜阳和浙江分离的EV71病毒有相同的起源,均属于C4亚型,并且C4亚型病毒在中国大陆可能有较广泛的分布和传播,因此加强各地流行的EV71病毒基因特征分析,进而探索EV71病毒的可能进化途径,对于肠道病毒的基础研究和防范EV71在中国的大规模暴发与流行具有重要意义。 展开更多
关键词 肠道病毒71型 VP1 分子流行病学
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珠海市海产品中2种致病性弧菌污染状况 被引量：8
11
作者 杨春晓 方艳梅 +1 位作者 魏泉德 董莉 《中国卫生检验杂志》 CAS 2018年第14期1784-1785,1792,共3页
目的了解珠海市海产品中副溶血性弧菌和创伤弧菌2种致病性弧菌的污染状况,为评估珠海市海产品弧菌污染水平和制定监督管理制度提供科学依据。方法根据《广东省食品安全风险监测工作手册》对2012年-2017年珠海市的海产品进行定性检测和... 目的了解珠海市海产品中副溶血性弧菌和创伤弧菌2种致病性弧菌的污染状况,为评估珠海市海产品弧菌污染水平和制定监督管理制度提供科学依据。方法根据《广东省食品安全风险监测工作手册》对2012年-2017年珠海市的海产品进行定性检测和定量分析,并将数据进行统计分析。结果近年来珠海市海产品中副溶血性弧菌检出率为39.19%(154/393),创伤弧菌检出率为19.92%(53/213),两者检出率间差异有统计学意义(χ2=27.32,P<0.05)。在各类海产品中牡蛎副溶血性弧菌的检出率和创伤弧菌的检出率均高于其他海产品。海产品中副溶血性弧菌、创伤弧菌的污染水平存在季节性差异。应用MPN法对副溶血性弧菌和创伤弧菌进行定量分析发现副溶血性弧菌平均含量(中位数为20 MPN/g)低于创伤弧菌平均含量(中位数为43 MPN/g)。结论珠海市海产品中副溶血性弧菌和创伤弧菌的污染情况比较严重,应对海产品的污染状况密切关注,以预防食物中毒的出现,减少食品安全事件的发生。 展开更多
关键词 海产品 副溶血性弧菌 创伤弧菌 污染
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禽流感病毒实验检测研究进展 被引量：7
12
作者 魏泉德 谭爱军 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期986-990,共5页
禽流感病毒(avian influenza viruses,AIV)给人类健康已带来严重威胁,而实验室快速、准确的诊断技术对禽流感的预防、控制及应急反应决策起着极其关键的作用,这使其成为了研究热点并取得了巨大进步。就禽流感的实验检测技术研究进展从... 禽流感病毒(avian influenza viruses,AIV)给人类健康已带来严重威胁,而实验室快速、准确的诊断技术对禽流感的预防、控制及应急反应决策起着极其关键的作用,这使其成为了研究热点并取得了巨大进步。就禽流感的实验检测技术研究进展从病毒分离、免疫学诊断及分子诊断3个方面加以综述。 展开更多
关键词 禽流感 病毒 实验诊断
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DNA疫苗在小鼠体内的组织分布及安全性研究 被引量：4
13
作者 魏泉德 叶苓 +1 位作者 徐劲 余新炳: 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第5期9-11,F003,共4页
目的　通过检测绿色荧光蛋白基因在小鼠体内的表达 ,研究质粒 pEGFP -N3在组织分布及应用安全性。 方法　带有增强绿色荧光蛋白 (EnhanceGreenFluorescentProtein ,EGFP)基因的质粒pEGFP -N3的转化、扩增、大量提取及纯化 ,左大腿肌注BA... 目的　通过检测绿色荧光蛋白基因在小鼠体内的表达 ,研究质粒 pEGFP -N3在组织分布及应用安全性。 方法　带有增强绿色荧光蛋白 (EnhanceGreenFluorescentProtein ,EGFP)基因的质粒pEGFP -N3的转化、扩增、大量提取及纯化 ,左大腿肌注BALB/c小鼠 ,注射后不同时间剖杀 ,取注射部位肌肉、心、脑、肝、脾、肾作冰冻切片 ,荧光显微镜下镜检。结果　质粒pEGFP -N3在小鼠注射部位肌肉及心内膜细胞内表达EGFP ,荧光 4 8h内最强 ,1w明显减弱 ,2w消失。其它组织及对照组无黄绿色荧光。结论　外源性EGFP基因能在小鼠细胞内表达 ,它可作为基因表达的检测标签 ,而质粒 pEGFP -N3不与机体染色体重组 ,应用安全 ,可作为DNA疫苗的理想载体。 展开更多
关键词 荧光蛋白 DNA疫苗 安全性 小鼠 GFP EGFP
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环介导等温扩增技术快速检测肠出血型大肠杆菌O157：H7 被引量：7
14
作者 张如胜 宋克云 +1 位作者 苏良 魏泉德 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期919-921,共3页
肠出血型大肠杆菌（enterohemorrhagic Escherichia coli，EHEC）主要包括O157：H7、O26：H11和O111等几种血清型，其中O157：H7是典型菌株，对人有很强的致病力。有研究表明O157：H7导致的感染占EHEC感染的50％～80％，它能引起出血性... 肠出血型大肠杆菌（enterohemorrhagic Escherichia coli，EHEC）主要包括O157：H7、O26：H11和O111等几种血清型，其中O157：H7是典型菌株，对人有很强的致病力。有研究表明O157：H7导致的感染占EHEC感染的50％～80％，它能引起出血性结肠炎、阑尾炎、食管狭窄和结肠穿孔等严重胃肠道并发症。我国目前对EHEC O157：H7的检测主要依靠传统的细菌学检测，细菌的分离鉴定需时5—7d，不利于快速诊断。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157:H7 快速检测 出血型 扩增技术 EHEC感染 细菌学检测 介导 出血性结肠炎
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粤西地区恶性肿瘤患者弓形虫抗体的调查 被引量：7
15
作者 赖秀球 朱家勇 魏泉德 《广东医学》 CAS CSCD 1998年第4期281-282,共2页
关键词 肿瘤 弓形体 抗体 流行病学
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PCR技术检测金黄色葡萄球菌肠毒素A、B、C、E基因的研究 被引量：7
16
作者 何晖 刘华章 魏泉德 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2012年第7期1585-1587,1590,共4页
目的:建立检测金黄色葡萄球菌肠毒素SEA、SEB、SEC、SEE的PCR方法,实现同一台PCR仪、同一PCR反应条件下同时检测SEA、SEB、SEC、SEE,用于金黄色葡萄球菌肠毒素食物中毒的诊断。方法:根据已公布的SEA、SEB、SEC、SEE编码的基因序列,设计... 目的:建立检测金黄色葡萄球菌肠毒素SEA、SEB、SEC、SEE的PCR方法,实现同一台PCR仪、同一PCR反应条件下同时检测SEA、SEB、SEC、SEE,用于金黄色葡萄球菌肠毒素食物中毒的诊断。方法:根据已公布的SEA、SEB、SEC、SEE编码的基因序列,设计4对引物,优化反应条件,建立检测方法,对特异性和敏感性进行分析,并对扩增产物进行测序鉴定。结果:方法特异性分析表明能很好区分各种肠毒素基因型,灵敏度达0.8-1.0×102 CFU/ml。结论:建立了一种在同一台PCR仪、同一PCR条件下同时检测SEA、SEB、SEC、SEE的方法,可用于金黄色葡萄球菌肠毒素食物中毒的诊断和肠毒素的分型检测。 展开更多
关键词 PCR 金黄色葡萄球菌 肠毒素
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广东省珠海市两种常见沙门菌血清型的分子分型分析 被引量：7
17
作者 方艳梅 杨春晓 +2 位作者 张丽荣 李柏生 魏泉德 《疾病监测》 CAS 2018年第9期718-723,共6页
目的研究珠海市沙门菌1,4,[5],12:i:–和鼠伤寒沙门菌的耐药和遗传学特征,为食源性疾病分子流行病学调查提供参考数据。方法用纸片法进行抗生素敏感试验,根据PulseNet监测网络公布的沙门菌脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型方案与欧洲食源性疾... 目的研究珠海市沙门菌1,4,[5],12:i:–和鼠伤寒沙门菌的耐药和遗传学特征,为食源性疾病分子流行病学调查提供参考数据。方法用纸片法进行抗生素敏感试验,根据PulseNet监测网络公布的沙门菌脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型方案与欧洲食源性疾病监测网公布的鼠伤寒沙门菌多位点可变数目串联重复序列分析分型方案,对从腹泻病例分离的121株鼠伤寒沙门菌和S. 1,4,[5],12:i:–进行PFGE和MLVA分型。结果药敏试验结果显示,鼠伤寒沙门菌和S. 1,4,[5],12:i:–的多重耐药株分别为45株(45/51,88.24%)和51株(51/70,72.86%),2种菌多重耐药率差异有统计学意义(χ~2=4.256,P=0.039),两者的耐药率>50.00%的抗生素分别是氨苄西林、四环素、复方磺胺甲恶唑和氯霉素。121株沙门菌经PFGE分型后获得88个型别,2种菌株间没有明显聚类特征,但鼠伤寒沙门菌的型别更为分散,优势型别PT15的11株菌包含了2种血清型。MLVA分型结果显示5个位点中以STTR5和STTR6的重复数变化最多,分别是11和14个重复数,STTR9和STTR3次之,95.87%的菌株在STTR10p位点无扩增产物。经MLVA分型后获得50个型别,优势型别为MT18和MT10,分别有23株和11株菌,均包含了2种血清型,经构建最小生成树分析发现91.74%(111株)菌株分布在Ⅰ群。结论珠海市2种菌株的多重耐药率较高,分子分型型别多样,但鼠伤寒沙门菌型别更为分散,两者遗传特征相似。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门菌 沙门菌1 4 [5] 12:i:– 脉冲场凝胶电泳 多位点可变数目串联重复序列分析 分子分型
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2013年广东省珠海市手足口病病原学研究 被引量：7
18
作者 周兰兰 魏泉德 +3 位作者 张丽荣 林毅雄 李红霞 郑予柯 《中国卫生检验杂志》 CAS 2015年第10期1596-1599,共4页
目的了解2013年珠海市手足口病病原构成和流行病学规律。方法收集2013年珠海市手足口病临床诊断病例粪便标本215份,采用荧光RT-PCR和巢式RT-PCR进行病原学检测。结果 215份病例中,183例肠道病毒阳性,其中EV71阳性45例(24.59%)、Cox A16... 目的了解2013年珠海市手足口病病原构成和流行病学规律。方法收集2013年珠海市手足口病临床诊断病例粪便标本215份,采用荧光RT-PCR和巢式RT-PCR进行病原学检测。结果 215份病例中,183例肠道病毒阳性,其中EV71阳性45例(24.59%)、Cox A16阳性8例(4.37%)、非EV71/非Cox A16的其他肠道病毒阳性130例(71.04%)。130例其他肠道病毒阳性标本中,113例的序列测定结果 Cox A6有93例(50.82%),Cox A10有9例(4.92%),Cox A2、Cox A5、Cox A4、Cox A20、Cox A14和Echo9各有少部分病例。8个血清型与各原型株之间的遗传距离较远,但每个型别的毒株都有高度相似的国内株存在。Cox A6和EV71检出高峰分别在9月和5月;Cox A6和EV71病例间平均年龄差异有统计学意义(P<0.05);Cox A6、EV71、Cox A10和Cox A16病例间男女比例差异无统计学意义(P=0.54)。结论 2013年珠海市手足口病前4位病原体依次为Cox A6、EV71、Cox A10和Cox A16。Cox A6和EV71发病有较明显的季节性,Cox A6组的平均年龄<EV71组。 展开更多
关键词 手足口病 病原学 分子分型 流行病学
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环介导等温扩增技术快速检测副溶血性弧菌 被引量：7
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作者 张如胜 宋克云 +1 位作者 苏良 魏泉德 《国际检验医学杂志》 CAS 2009年第3期217-219,共3页
目的建立一种检测副溶血性弧菌(Vp)快速且特异的环介导等温扩增(LAMP)检测方法。方法针对副溶血性弧菌不耐热溶血素(tlh)基因特异性序列的6个位点设计4条LAMP引物,65℃保温约60 min,完成对副溶血性弧菌的扩增,扩增产物经肉眼、SYBRGree... 目的建立一种检测副溶血性弧菌(Vp)快速且特异的环介导等温扩增(LAMP)检测方法。方法针对副溶血性弧菌不耐热溶血素(tlh)基因特异性序列的6个位点设计4条LAMP引物,65℃保温约60 min,完成对副溶血性弧菌的扩增,扩增产物经肉眼、SYBRGreen I染色、电泳和酶切鉴定。利用LAMP和普通PCR方法同时检测1株副溶血性弧菌和12株非副溶血性弧菌来验证LAMP方法的特异性;将副溶血性弧菌菌液作一系列10倍稀释后用LAMP和PCR方法进行检测,比较两者敏感性。结果 1株副溶血性弧菌出现LAMP扩增反应:通过肉眼、SYBR Green I染色和电泳均能观察到LAMP扩增产物的出现,酶切证实了LAMP产物的特异性;12株非副溶血性弧菌未出现LAMP扩增。LAMP检测tlh基因的特异性和敏感性与普通PCR相同,LAMP检测tlh基因的检测下限为15 cfu/mL。结论建立了一种快速、敏感、特异的副溶血性弧菌检测方法,适合日常监测及快速检测的需要。 展开更多
关键词 核酸扩增技术 弧菌 副溶血性 溶血素蛋白质类 临床实验室技术
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LAMP技术用于霍乱弧菌检测的研究 被引量：7
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作者 陈传 凌霄 +3 位作者 郭震 邵筱 张如胜 魏泉德 《生命科学研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期412-416,共5页
霍乱是由霍乱弧菌感染所引起的,属于甲类传染病.因此,建立一种快速、灵敏、特异的检测方法,对霍乱的预防和控制工作有十分重要的现实意义.通过霍乱弧菌外膜蛋白的ompW基因设计特异引物,建立霍乱弧菌的LAMP检测方法,同时对细菌进行扩增... 霍乱是由霍乱弧菌感染所引起的,属于甲类传染病.因此,建立一种快速、灵敏、特异的检测方法,对霍乱的预防和控制工作有十分重要的现实意义.通过霍乱弧菌外膜蛋白的ompW基因设计特异引物,建立霍乱弧菌的LAMP检测方法,同时对细菌进行扩增以检测该方法的灵敏度和特异性,并与普通PCR进行比较.实验的全部反应可在2 h内完成,且反应结果可通过肉眼观测直接判定;实验中霍乱弧菌的LAMP检测方法灵敏度是普通PCR的100倍,最低检出下限为10-5;检测霍乱弧菌均为阳性,其它13株非霍乱菌则全部阴性,特异度为100%.结果表明:该方法能快速、灵敏、特异性地检测霍乱弧菌,为快速检测病原微生物起到了很好的借鉴作用. 展开更多
关键词 核酸扩增技术 霍乱弧菌 检测体系
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