目的探讨自主循环恢复(return of spontaneous circulation,ROSC)后大鼠脑细胞中低氧诱导因子-1α(bypoxia·induciblefactor-hx,HIF-1α )的表达及β-七叶皂苷钠对其影响。方法清洁级SD成年大鼠60只,随机(随机数字法)分3...目的探讨自主循环恢复(return of spontaneous circulation,ROSC)后大鼠脑细胞中低氧诱导因子-1α(bypoxia·induciblefactor-hx,HIF-1α )的表达及β-七叶皂苷钠对其影响。方法清洁级SD成年大鼠60只,随机(随机数字法)分3组(n=20)。(1)实验组:ROSC后即刻腹腔注射β-七叶皂苷钠(5ms/kg)一次;(2)对照组:ROSC后即刻腹腔注射等量生理盐水一次;(3)假手术组:未经历心搏骤停-心肺复苏和未给药。采用窒息合并冰氯化钾停跳液法制备大鼠心搏骤停-心肺复苏模型。分别在ROSC后1、6、12、24h抽血,然后处死取脑组织。ELISA检测血清NSE、s100β,免疫组化和Real—timePCR检测脑细胞HIF-1α、VEGF、EPO蛋白和mRNA。各组同一时间点之间比较采用成组t检验,组内不同时间点之间比较采用单因素方差分析,多重比较采用Bonferroni法。相关性分析采用Pearson法。结果与假手术组比较,ROSC后1、6、12和24h对照组大鼠血清NSE与stoop明显升高(P〈0.05),脑细胞中HIF-1α、VEGF、EPO蛋白和mRNA表达均明显增加(P〈0.05)。与对照组比较,ROSC后1、6、12、24h实验组大鼠血清NSE与$100~明显降低(P〈0.05),脑细胞中HIF-1α、VEGF、EPO蛋白和mRNA表达均明显增加(P〈0.05)。ROSC后大鼠脑细胞HIF-1αmRNA与EPOmRNA、VEGFmRNA均呈正相关(r=0.866,P〈0.05;r=0.952,P〈0.01)。结论心肺复苏后大鼠脑细胞HIF-1α表达增加,β-七叶皂苷钠能上调HIF.1et转录和蛋白表达,可能是通过增加EPO、VEGF基因转录及蛋白表达而增加脑细胞对缺血缺氧的耐受性,从而起神经保护作用。展开更多
文摘目的探讨自主循环恢复(return of spontaneous circulation,ROSC)后大鼠脑细胞中低氧诱导因子-1α(bypoxia·induciblefactor-hx,HIF-1α )的表达及β-七叶皂苷钠对其影响。方法清洁级SD成年大鼠60只,随机(随机数字法)分3组(n=20)。(1)实验组:ROSC后即刻腹腔注射β-七叶皂苷钠(5ms/kg)一次;(2)对照组:ROSC后即刻腹腔注射等量生理盐水一次;(3)假手术组:未经历心搏骤停-心肺复苏和未给药。采用窒息合并冰氯化钾停跳液法制备大鼠心搏骤停-心肺复苏模型。分别在ROSC后1、6、12、24h抽血,然后处死取脑组织。ELISA检测血清NSE、s100β,免疫组化和Real—timePCR检测脑细胞HIF-1α、VEGF、EPO蛋白和mRNA。各组同一时间点之间比较采用成组t检验,组内不同时间点之间比较采用单因素方差分析,多重比较采用Bonferroni法。相关性分析采用Pearson法。结果与假手术组比较,ROSC后1、6、12和24h对照组大鼠血清NSE与stoop明显升高(P〈0.05),脑细胞中HIF-1α、VEGF、EPO蛋白和mRNA表达均明显增加(P〈0.05)。与对照组比较,ROSC后1、6、12、24h实验组大鼠血清NSE与$100~明显降低(P〈0.05),脑细胞中HIF-1α、VEGF、EPO蛋白和mRNA表达均明显增加(P〈0.05)。ROSC后大鼠脑细胞HIF-1αmRNA与EPOmRNA、VEGFmRNA均呈正相关(r=0.866,P〈0.05;r=0.952,P〈0.01)。结论心肺复苏后大鼠脑细胞HIF-1α表达增加,β-七叶皂苷钠能上调HIF.1et转录和蛋白表达,可能是通过增加EPO、VEGF基因转录及蛋白表达而增加脑细胞对缺血缺氧的耐受性,从而起神经保护作用。
文摘目的探索原花青素B1的抗炎活性及其抗炎机制。方法以人急性单核细胞白血病细胞系(THP-1)为模型,设立不含脂多糖(LPS)的磷酸盐缓冲溶液(PBS)处理THP-1细胞为对照组,检测不同浓度原花青素B1(50、100、150、200 mg/L)对THP-1细胞活力的影响。分别应用1 mg/L的LPS(LPS组)、1 mg/L的LPS联合原花青素B1 50 mg/L(处理A组)、1 mg/L的LPS联合原花青素B1 100 mg/L(处理B组)预处理THP-1细胞,收集各组THP-1细胞上清液,应用双抗体夹心亲和素-生物素-过氧化物酶复合物-酶联免疫吸附法测定各组THP-1细胞中TNF-α的释放水平。应用实时定量PCR法测定各组THP-1细胞My D88 m RNA和髓样分化蛋白2(MD-2)m RNA的表达情况。结果不同浓度原花青素的THP-1细胞活力与对照组比较,差异有统计学意义(F=31.35,P<0.001),进一步比较发现,50、100 mg/L原花青素的THP-1细胞活力与对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05),而150、200 mg/L原花青素的THP-1细胞活力均明显低于对照组(P均<0.05)。处理A、B组的TNF-α水平较LPS组均显著减低(P均<0.05),且处理B较处理A组下降更为明显(P<0.05)。对照组、LPS组及处理A组间My D88 m RNA和MD-2m RNA的表达差异均有统计学意义(F=62.500、46.700,P均<0.001),且LPS组的My D88 m RNA和MD-2 m RNA表达均较对照组及处理A组明显升高(P均<0.05),处理A组的My D88 m RNA和MD-2 m RNA表达高于对照组(P均<0.05)。结论原花青素B1可明显抑制LPS介导的炎症反应,负性调节Toll样受体-My D88信号通路,可能是其抑制炎症反应的潜在机制。