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中药地龙抗血栓活性研究进展 被引量：32
1
作者 吴娅丽 马韫楠 杜守颖 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期3015-3018,共4页
血栓为心肌梗死、脑卒中、静脉栓塞的共同发病原因,心脑血管疾病成为全球的主要死因。地龙为我国传统中药之一,具有清热定惊、平肝息风、活血通络、平喘利尿等功效;在东亚,地龙作为抗凝剂和纤溶药物应用历史悠久。文章从活性成分、作用... 血栓为心肌梗死、脑卒中、静脉栓塞的共同发病原因,心脑血管疾病成为全球的主要死因。地龙为我国传统中药之一,具有清热定惊、平肝息风、活血通络、平喘利尿等功效;在东亚,地龙作为抗凝剂和纤溶药物应用历史悠久。文章从活性成分、作用机制、毒副作用、临床应用等方面,通过查阅文献和查找数据库,对中药地龙的抗血栓活性成分进行综述,为临床指导用药和进一步开发奠定基础。 展开更多
关键词 地龙 抗血栓 研究进展
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基于网络药理学的地龙平喘作用机制研究 被引量：28
2
作者 马韫楠 吴娅丽 +5 位作者 钟宛凌 汪文杰 杨万青 张经纬 李鹏跃 杜守颖 《中国现代中药》 CAS 2021年第10期1737-1746,共10页
目的:基于网络药理学方法研究地龙平喘的作用机制。方法:通过中国知网(CNKI)数据库、百链数据库、PubMed数据库文献检索和SwissADME平台筛选获得地龙活性化合物;通过SwissTargetPrediction预测活性成分的潜在靶点,并与OMIM、DrugBank数... 目的:基于网络药理学方法研究地龙平喘的作用机制。方法:通过中国知网(CNKI)数据库、百链数据库、PubMed数据库文献检索和SwissADME平台筛选获得地龙活性化合物;通过SwissTargetPrediction预测活性成分的潜在靶点,并与OMIM、DrugBank数据库中哮喘的疾病靶点数据进行比对,获得地龙平喘的作用靶点;通过STRING 11.0平台分析靶点的蛋白质相互作用网络;通过Matascape数据库对地龙平喘靶点进行基因本体(GO)分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;采用Cytoscape 3.7.1软件构建成分-靶点-通路网络;通过豚鼠离体气管平滑肌诱导收缩实验验证地龙提取物对胆碱能受体兴奋引起的气管平滑肌收缩的抑制作用。结果:共收集地龙平喘活性成分56个,包括氨基酸、脂肪酸、核苷酸等,预测其作用靶点包括前列腺素G/H合酶2、毒蕈碱型乙酰胆碱受体家族、β2-肾上腺素受体等67个,潜在调控花生四烯酸代谢、胆碱能神经突触信号、色氨酸代谢等通路和生物过程。验证实验结果表明,地龙提取物对胆碱能受体兴奋引起的离体气管平滑肌收缩有明显的舒张作用。结论:地龙的平喘作用具有多成分、多靶点、多途径作用的特点,为地龙平喘作用机制的进一步研究提供了参考。 展开更多
关键词 地龙 平喘 网络药理学 作用机制
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通俗环毛蚓抗血栓活性蛋白成分的快速富集及活性考察 被引量：9
3
作者 张经纬 杨万青 +4 位作者 马韫楠 汪文杰 钟宛凌 毕嘉谣 杜守颖 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第22期166-171,共6页
目的:以地龙品种中的通俗环毛蚓为研究对象,对其蛋白总提物进行纯化富集以获得抗血栓活性蛋白成分(PvQ),对PvQ进行抗血栓活性研究,以期为地龙的抗血栓物质基础研究提供参考。方法:采用AKTA-Pure型蛋白纯化系统,以体外活性为导向,富集通... 目的:以地龙品种中的通俗环毛蚓为研究对象,对其蛋白总提物进行纯化富集以获得抗血栓活性蛋白成分(PvQ),对PvQ进行抗血栓活性研究,以期为地龙的抗血栓物质基础研究提供参考。方法:采用AKTA-Pure型蛋白纯化系统,以体外活性为导向,富集通俗环毛蚓PvQ;采用纤维蛋白平板法、纤维蛋白原-凝血酶时间法(Fibg-TT法)对PvQ的纤溶及抗凝活性进行测定;利用体外血栓溶解试验评价PvQ对体外血栓的溶解能力,同时,考察了不同温度及pH对PvQ活性的影响。结果:成功富集得到通俗环毛蚓PvQ,活性测定表明其具有显著的纤溶及抗凝活性。体外血栓试验结果显示,37℃孵育5 h后PvQ可水解超过80%的血栓块。此外,温度和pH对于PvQ活性影响显著,在≥60℃或酸性条件(pH<7)下PvQ活性显著降低或失活,而在≤50℃和碱性条件下PvQ活性则不受影响或受较少影响。结论:建立了可行的通俗环毛蚓PvQ制备方法,PvQ可同时作用于纤维蛋白和纤维蛋白原,从而发挥双重纤溶作用,表现出良好的纤溶及抗凝活性,为其用于治疗血栓性疾病提供了科学阐释,并可为地龙抗血栓蛋白类产品的开发提供参考。 展开更多
关键词 地龙 通俗环毛蚓 抗凝活性 纤溶活性 蛋白纯化 温度 抗血栓活性
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地龙抗凝血活性体外评价方法的建立 被引量：8
4
作者 吴娅丽 马韫楠 +2 位作者 张琦 喻祥龙 杜守颖 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第20期2527-2530,共4页
目的建立一种基于全自动血凝分析仪测定纤维蛋白原-凝血酶时间的地龙及其相关制剂的抗凝血活性的体外评价方法。方法以威廉环毛蚓提取物为研究对象,采用BCA蛋白测定法测定可溶性蛋白含量,以抗凝血活性为指标,建立纤维蛋白原-凝血酶时间... 目的建立一种基于全自动血凝分析仪测定纤维蛋白原-凝血酶时间的地龙及其相关制剂的抗凝血活性的体外评价方法。方法以威廉环毛蚓提取物为研究对象,采用BCA蛋白测定法测定可溶性蛋白含量,以抗凝血活性为指标,建立纤维蛋白原-凝血酶时间法测定活性,以活性浓度与可溶性蛋白浓度的比值(比活)作为活性评价指标。结果10批地龙提取物可溶性蛋白含量为(26.56±3.57)%,比活为(34.64±3.98)U·μg^-1。其比活大小与蚓激酶标准品(43.60 U·μg^-1)相当,且是市售蚯蚓酶(22.17 U·μg^-1)比活的1.5倍。结论采用BCA蛋白测定法测定地龙提取物可溶性蛋白,方法简便、可靠;所建立的纤维蛋白原-凝血酶时间法,操作简便,人为影响因素小,结果客观准确,可用于实时测定,重复性和仪器精密度良好,线性范围较广,具有可行性,可用于地龙及其制剂活性的评价。 展开更多
关键词 威廉环毛蚓 可溶性蛋白 纤维蛋白原-凝血酶时间 比活
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通俗环毛蚓、参环毛蚓、赤子爱胜蚓的分子鉴定及纤溶、抗凝活性对比 被引量：3
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作者 杨麒琳 马韫楠 +6 位作者 杨万青 汪文杰 钟宛凌 樊箫雨 杨天姿 杜守颖 李鹏跃 《中南药学》 CAS 2023年第2期427-432,共6页
目的 鉴定参环毛蚓、通俗环毛蚓以及药典外研究较多的赤子爱胜蚓,再比较3种鲜体蚯蚓在两种不同提取方法下的纤溶和抗凝活性,并检测乙醇沉淀物的分子量。方法 采用DNA分子鉴定法鉴别3种蚯蚓。采用水提法提取鲜体蚯蚓蛋白,进一步采用乙醇... 目的 鉴定参环毛蚓、通俗环毛蚓以及药典外研究较多的赤子爱胜蚓,再比较3种鲜体蚯蚓在两种不同提取方法下的纤溶和抗凝活性,并检测乙醇沉淀物的分子量。方法 采用DNA分子鉴定法鉴别3种蚯蚓。采用水提法提取鲜体蚯蚓蛋白,进一步采用乙醇沉淀法对水提物中的蛋白进行富集,利用纤维蛋白平板法和纤维蛋白原-凝血酶时间法(Fibg-TT法)测定纤溶活性和抗凝活性,利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测3种蚯蚓乙醇沉淀物的分子量。结果 以线粒体细胞色素c氧化酶亚基I(COI)基因片段为识别片段准确鉴定出了3种蚯蚓。比较3种蚯蚓水提液的抗血栓活性:参环毛蚓水提液的抗凝活性和纤溶活性最强,而赤子爱胜蚓水提液活性最弱;比较3种蚯蚓乙醇沉淀物的抗血栓活性:参环毛蚓乙醇沉淀物的纤溶活性最强,而通俗环毛蚓乙醇沉淀物的抗凝活性最强;赤子爱胜蚓的乙醇沉淀物纤溶和抗凝活性均最弱。参环毛蚓和通俗环毛蚓乙醇沉淀物的蛋白分子量主要分布在25~70 kDa,赤子爱胜蚓乙醇沉淀物的蛋白分子量主要分布在25~40 kDa。结论 药典地龙品种通俗环毛蚓和参环毛蚓的纤溶、抗凝活性远大于药典外的常用品种赤子爱胜蚓,3种蚯蚓中抗血栓活性蛋白有明显差异;乙醇沉淀法可有效富集抗血栓蛋白。 展开更多
关键词 通俗环毛蚓 参环毛蚓 赤子爱胜蚓 分子鉴定 抗凝活性 纤溶活性
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基于电子舌技术与人工口尝综合评价相结合的布洛芬口服液矫味工艺研究
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作者 苑蕊 屈云萍 +8 位作者 王艳 张雅宣 钟宛凌 樊箫雨 沈慧娟 马韫楠 叶津宏 白洁 杜守颖 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期2404-2411,共8页
本实验通过研究不同矫味剂单独使用及联合使用对布洛芬口服液的矫味效果,以优化矫味配方。首先利用电子舌技术广泛筛选矫味剂种类与质量分数,采用人工口尝法并结合AHP-模糊数学法、Box-Behnken设计试验深入综合评价不同矫味剂组合对布... 本实验通过研究不同矫味剂单独使用及联合使用对布洛芬口服液的矫味效果,以优化矫味配方。首先利用电子舌技术广泛筛选矫味剂种类与质量分数,采用人工口尝法并结合AHP-模糊数学法、Box-Behnken设计试验深入综合评价不同矫味剂组合对布洛芬口服液的矫味效果,优化矫味配方并进行验证。研究获得了北京中医药大学审查委员会的伦理批准(伦理号:2024BZYLL0102)。结果显示,通过单因素试验分别筛选出矫味剂质量分数与种类,Box-Behnken响应面连用AHP-模糊数学法拟合得到函数模型:Z=688.310 11-3 023.722 22X_(1)-11.477 00X_(2)+62.721 67X_(3)+14.600 00X_(1)X_(2)-179.666 67X_(1)X_(3)-3.152 00X_(2)X_(3)+4 031.111 11X_(1)^(2)+0.525 28X_(2)^(2)+9.772 00X_(3)^(2),该模型稳定可靠,确定矫味的最佳配方为甜菊苷3.9 g·L^(-1),木糖醇100 g·L^(-1),甲基-β-环糊精30 g·L^(-1),验证试验综合评分均值为88.14,RSD为0.39%,具有可行性。本研究通过客观与主观结合实现了布洛芬口服液口感的改善,并建立了3种类型矫味剂联合使用改善药物口感的方法,筛选出布洛芬口服液的最优矫味配方,极大改善了原制剂的口感,提高了患者的顺应性,可为制剂的不良口感改善提供新思路。 展开更多
关键词 布洛芬口服液 矫味剂 模糊数学综合评价法 层次分析法 Box-Behnken响应面
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基于网络药理学和蛋白组学的地龙抗血栓作用机制研究 被引量：1
7
作者 吴娅丽 马韫楠 +5 位作者 李伟霞 王晓艳 张辉 杨柳青 唐进法 杜守颖 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2023年第10期76-82,I0019,I0020,共9页
基于网络药理学和蛋白组学技术探究地龙抗血栓的物质基础及作用机制。首先通过网络药理学方法对地龙小分子活性成分进行研究,基于文献检索收集地龙化学成分101个,包括核苷酸、有机酸、氨基酸及寡肽、脂类及其他,构建成分数据库,预测成... 基于网络药理学和蛋白组学技术探究地龙抗血栓的物质基础及作用机制。首先通过网络药理学方法对地龙小分子活性成分进行研究,基于文献检索收集地龙化学成分101个,包括核苷酸、有机酸、氨基酸及寡肽、脂类及其他,构建成分数据库,预测成分作用靶标共798个;以课题组前期已验证的地龙抗血栓靶点(纤维蛋白原、纤维蛋白、纤溶酶原)为基础,通过BioGRID数据库挖掘与其具直接作用的靶点1046个,为潜在抗血栓靶点库,二者共有靶点81个;根据核心靶点蛋白互作网络及成分-靶点-通路网络分析,发现脂类、氨基酸和寡肽类成分为主要抗血栓成分,纤连蛋白、纤溶酶原、促分裂原活化蛋白激酶-14、基质金属蛋白酶-9、表皮生长因子受体、凝血酶原、纤维蛋白原等为地龙抗血栓核心靶点,通过调控黏着斑、白细胞跨内膜转移、补体与凝血、细胞周期及坏死性凋亡等发挥作用。继而采用TMT同位素标记法进行定量蛋白组学研究,以斑马鱼为模式生物,以课题组前期分离纯化地龙抗血栓活性蛋白DPf3为研究对象,预测地龙大分子活性成分抗血栓的作用机制,其潜在调控通路包括结氨基酸代谢、紧密连接、坏死性凋亡、吞噬、甘油磷酸代谢等。反映了地龙多成分、多靶点、多功效的特性,为其临床使用提供依据,为其抗血栓机制的进一步验证提供方向,并为采用现代药理学技术研究中药动物药提供参考。 展开更多
关键词 网络药理学 蛋白组学 地龙 抗血栓 作用机制
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