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内皮型一氧化氮合酶基因启动子区DNA甲基化调控同型半胱氨酸致内皮细胞损伤的机制 被引量:18
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作者 姜怡邓 孙炜炜 +3 位作者 马胜 王菊 巩慧慧 马长剑 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期115-119,共5页
目的探讨内皮型一氧化氮合酶基因启动子区DNA甲基化在同型半胱氨酸致内皮细胞损伤中的作用机制。方法原代培养人脐静脉内皮细胞,加入0、50、100、200、500μmol/L同型半胱氨酸和100μmol/L同型半胱氨酸+维生素B12+叶酸的培养液中孵育72 ... 目的探讨内皮型一氧化氮合酶基因启动子区DNA甲基化在同型半胱氨酸致内皮细胞损伤中的作用机制。方法原代培养人脐静脉内皮细胞,加入0、50、100、200、500μmol/L同型半胱氨酸和100μmol/L同型半胱氨酸+维生素B12+叶酸的培养液中孵育72 h。MTT法检测人脐静脉内皮细胞的增殖活性;实时定量PCR测定内皮型一氧化氮合酶mRNA表达;化学比色法测定内皮型一氧化氮合酶活性;硝酸还原酶法检测一氧化氮生成量。巢式降落式甲基化特异性PCR法检测内皮型一氧化氮合酶基因启动子区DNA甲基化改变;同位素法检测DNA甲基化转移酶的活性。结果人脐静脉内皮细胞与不同浓度同型半胱氨酸孵育72 h后,人脐静脉内皮细胞的增殖活性降低,内皮型一氧化氮合酶mRNA表达、内皮型一氧化氮合酶活性和一氧化氮的含量明显下降。内皮型一氧化氮合酶基因启动子序列DNA甲基化程度随同型半胱氨酸浓度的升高而增加,且DNA甲基化转移酶活性升高,而叶酸和维生素B12有一定拮抗作用,与对照组比较差异有显著性(P<0.05和P<0.01)。结论同型半胱氨酸可导致内皮型一氧化氮合酶基因启动子区序列高甲基化修饰,并出现相应的内皮型一氧化氮合酶基因表达下调,这可能是同型半胱氨酸致内皮细胞损伤的重要机制之一。 展开更多
关键词 同型半胱氨酸 内皮型一氧化氮合酶 DNA甲基化
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FoxO1 DNA甲基化在同型半胱氨酸致肝细胞凋亡中的作用 被引量:12
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作者 谢琳 丁宁 +4 位作者 徐灵博 姜怡邓 杨晓玲 马胜 焦运 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第16期2659-2662,2669,共5页
目的探讨叉头状转录因子O1(Fox O1)及其DNA甲基化在同型半胱氨酸(Hcy)诱导的内质网应激致肝细胞凋亡中的作用。方法将人肝细胞分为对照组(0μmol/L Hcy)、Hcy组(100μmol/LHcy)、干预组(100μmol/L Hcy+叶酸+维生素B12),干预细胞48 h后... 目的探讨叉头状转录因子O1(Fox O1)及其DNA甲基化在同型半胱氨酸(Hcy)诱导的内质网应激致肝细胞凋亡中的作用。方法将人肝细胞分为对照组(0μmol/L Hcy)、Hcy组(100μmol/LHcy)、干预组(100μmol/L Hcy+叶酸+维生素B12),干预细胞48 h后,流式细胞术检测肝细胞凋亡水平;实时荧光定量PCR(q PCR)检测内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、激活转录因子6(ATF6)、X盒结合蛋白-1(XBP-1)及C/EPB同源蛋白(CHOP)的表达水平;q PCR和Western blot分别检测Fox O1m RNA及蛋白的表达水平;巢式甲基化特异性PCR(n MS-PCR)检测Fox O1 DNA甲基化水平。结果与对照组相比,Hcy组肝细胞凋亡水平增加(P<0.05),GRP78、ATF6、XBP-1、CHOP m RNA水平升高(P<0.001,P<0.01,P<0.001,P<0.001),同时Fox O1 m RNA及蛋白水平升高(P<0.01,P>0.05),而其DNA甲基化水平降低(P<0.05);干预组较Hcy组凋亡水平降低(P<0.05),GRP78、ATF6、XBP-1、CHOP m RNA水平降低(P<0.001,P<0.01,P<0.01,P<0.001),Fox O1 m RNA及蛋白水平降低(P<0.001,P>0.05),而其DNA甲基化水平升高(P<0.05)。结论 Fox O1 DNA高甲基化可能在同型半胱氨酸诱导的内质网应激致肝细胞凋亡中发挥重要作用。 展开更多
关键词 同型半胱氨酸 肝细胞凋亡 内质网应激 FOXO1 DNA甲基化
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菊芋基因组DNA提取方法的比较 被引量:11
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作者 赵孟良 韩睿 +1 位作者 马胜 李莉 《中国蔬菜》 北大核心 2012年第07X期41-44,共4页
采用改良CTAB法、改进的高盐SDS法及两种植物基因组DNA提取试剂盒法等4种方法提取菊芋基因组DNA,并进行电泳分析、质量检测及ISSR引物扩增检测。结果表明,改良CTAB法优于其他3种方法,提取的DNA质量较好、纯度较高,能够满足ISSR-PCR扩增... 采用改良CTAB法、改进的高盐SDS法及两种植物基因组DNA提取试剂盒法等4种方法提取菊芋基因组DNA,并进行电泳分析、质量检测及ISSR引物扩增检测。结果表明,改良CTAB法优于其他3种方法,提取的DNA质量较好、纯度较高,能够满足ISSR-PCR扩增要求。 展开更多
关键词 菊芋 基因组DNA 提取方法
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三十份菊芋资源亲缘关系的SRAP分析 被引量:11
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作者 马胜 韩睿 +2 位作者 任鹏鸿 杨世鹏 李莉 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第5期1212-1217,共6页
利用SRAP分子标记技术对30份菊芋资源进行了基因组多态性分析。用22对扩增稳定且清晰的具有多态性DNA条带的引物组合,进行菊芋的SRAP-PCR扩增。共扩增出160条条带,其中多态性条带114条,多态性比率为71%,表明菊芋资源在DNA水平上存在广... 利用SRAP分子标记技术对30份菊芋资源进行了基因组多态性分析。用22对扩增稳定且清晰的具有多态性DNA条带的引物组合,进行菊芋的SRAP-PCR扩增。共扩增出160条条带,其中多态性条带114条,多态性比率为71%,表明菊芋资源在DNA水平上存在广泛差异。利用NTSYS软件统计分析出资源间遗传距离在0.04~0.42之间。应用UPGMA得出聚类结果,将30份菊芋资源划分为2大类群,第2大类群分为6个亚类群。聚类结果与传统的形态学分类略有不同,可结合两种方法为菊芋资源亲缘关系的研究提供理论基础。 展开更多
关键词 菊芋 SRAP 亲缘关系 聚类分析
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脂肪酸结合蛋白4在Hcy致泡沫细胞胆固醇聚积中的作用 被引量:10
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作者 郭伟 马胜 +10 位作者 张辉 李淑强 高婷婷 和杨杨 杨晓玲 徐华 杨晓明 卢冠军 贾月霞 曹军 姜怡邓 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2016年第8期757-762,共6页
目的探讨脂肪酸结合蛋白4(FABP4)在同型半胱氨酸(Hcy)致泡沫细胞胆固醇聚积中的作用和意义。方法体外复制THP-1单核细胞/泡沫细胞模型,油红O染色验证模型复制是否成功,给予100μmol/L Hcy处理细胞24 h后,实时定量PCR和Western blot检测... 目的探讨脂肪酸结合蛋白4(FABP4)在同型半胱氨酸(Hcy)致泡沫细胞胆固醇聚积中的作用和意义。方法体外复制THP-1单核细胞/泡沫细胞模型,油红O染色验证模型复制是否成功,给予100μmol/L Hcy处理细胞24 h后,实时定量PCR和Western blot检测泡沫细胞中FABP4 mRNA和蛋白的表达;体外构建FABP4过表达载体,双酶切法鉴定;转染FABP4至泡沫细胞,荧光倒置显微镜观察转染效率;胆固醇检测试剂盒检测细胞内胆固醇聚积情况。结果油红O染色显示泡沫细胞质内充满了大量红染脂质颗粒,胞核呈蓝色,且100μmol/L Hcy处理后细胞内胆固醇含量升高了2.4倍(P<0.01);实时定量PCR结果显示100μmol/L Hcy处理后泡沫细胞中FABP4 mRNA表达上调(P<0.01);Western blot检测结果显示FABP4的蛋白表达与其mRNA表达变化一致(P<0.01)。FABP4过表达载体转染细胞后,可见大量绿色荧光蛋白表达;重组质粒组泡沫细胞中FABP4的表达水平明显升高(P<0.01),细胞内胆固醇含量升高1.9倍,差异具有显著性(P<0.01)。结论 FABP4表达上调可能是Hcy致泡沫细胞胆固醇聚积的重要机制之一。 展开更多
关键词 同型半胱氨酸 脂肪酸结合蛋白4 泡沫细胞
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氧化低密度脂蛋白与高密度脂蛋白比值在同型半胱氨酸致ApoE-/-鼠动脉粥样硬化中的意义 被引量:10
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作者 王菊 杨安宁 +4 位作者 孙炜炜 巩慧慧 马胜 马长剑 姜怡邓 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期18-21,共4页
目的探讨ox-LDL/HDL在同型半胱氨酸(Hcy)致ApoE-/-鼠动脉粥样硬化(AS)中的意义。方法选用SPF级5周龄雄性ApoE-/-小鼠为研究对象,随机分为3组:对照组,高蛋氨酸组,folic acid and VitB12干预组。所有小鼠喂养14周后处死,进行后续实验。行... 目的探讨ox-LDL/HDL在同型半胱氨酸(Hcy)致ApoE-/-鼠动脉粥样硬化(AS)中的意义。方法选用SPF级5周龄雄性ApoE-/-小鼠为研究对象,随机分为3组:对照组,高蛋氨酸组,folic acid and VitB12干预组。所有小鼠喂养14周后处死,进行后续实验。行主动脉病理切片HE染色;全自动生化分析仪检测血清Hcy、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、总胆固醇(TC)含量,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清ox-LDL含量。结果与对照组比较,高蛋氨酸组与folic acid and VitB12干预组动脉粥样硬化斑块面积不同程度的增大,高蛋氨酸组ApoE-/-小鼠主动脉内膜见灶性病变部位隆起并突入动脉腔内,富含粥样坏死物质。高蛋氨酸组血清Hcy、LDL、TC和ox-LDL均升高,血清HDL含量减少,LDL/HDL、TC/HDL及ox-LDL/HDL升高,与对照组比较差异有显著性(P<0.05);叶酸与维生素B12可以改善高蛋氨酸所致的改变。血清Hcy浓度与LDL/HDL比值(γ=0.4938,P<0.05)、TC/HDL比值(γ=0.4474,P<0.05)及ox-LDL/HDL比值(γ=0.5434,P<0.05)均呈正相关。结论 ox-LDL/HDL比值更能预测和反映Hcy诱导AS形成及进展程度,在探索防治AS途径中更有价值。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 同型半胱氨酸 ox-LDL/HDL
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在载脂蛋白E基因敲除小鼠和人脐静脉平滑肌细胞中同型半胱氨酸对B1和Alu重复序列甲基化的影响 被引量:9
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作者 吴凯 马胜 +5 位作者 孙炜炜 王菊 曹成建 马长剑 杨安宁 姜怡邓 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期785-790,共6页
目的观察同型半胱氨酸对载脂蛋白E基因敲除小鼠不同组织和人脐静脉平滑肌细胞中B1和Alu序列甲基化水平的影响,为进一步阐明同型半胱氨酸致动脉粥样硬化形成的分子机制提供理论和实验依据。方法复制高同型半胱氨酸血症载脂蛋白E基因敲除... 目的观察同型半胱氨酸对载脂蛋白E基因敲除小鼠不同组织和人脐静脉平滑肌细胞中B1和Alu序列甲基化水平的影响,为进一步阐明同型半胱氨酸致动脉粥样硬化形成的分子机制提供理论和实验依据。方法复制高同型半胱氨酸血症载脂蛋白E基因敲除小鼠模型,给予不同饮食14周后,分别取小鼠心脏组织、血管及白细胞;原代培养人脐静脉平滑肌细胞,用50、100、200及500μmol/L同型半胱氨酸干预培养72 h后,抽提组织、白细胞及平滑肌细胞的基因组DNA,采用巢式降落式甲基化特异性PCR法分别检测不同组织和细胞中B1和Alu序列甲基化水平的变化。结果饲以高蛋氨酸饮食的载脂蛋白E基因敲除小鼠心脏组织、血管和白细胞中B1重复序列甲基化水平下降明显,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.05和P<0.01);在同型半胱氨酸干预的平滑肌细胞中Alu序列甲基化水平下降显著(P<0.05和P<0.01)。结论同型半胱氨酸引起B1和Alu序列低甲基化改变可能是其导致动脉粥样硬化发生发展的重要机制之一。 展开更多
关键词 B1和Alu重复序列 甲基化 同型半胱氨酸 载脂蛋白E基因敲除小鼠 血管平滑肌细胞
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ABCA1 DNA甲基化水平与AS及血脂的关系 被引量:9
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作者 韩学波 张慧萍 +5 位作者 马胜 曹成建 杨程 王艳华 孙炜炜 姜怡邓 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期426-429,共4页
目的探讨动脉粥样硬化(AS)患者血中三磷酸腺苷结合盒运转体A1(ABCA1)DNA甲基化水平与AS的发生、发展及血脂变化的关系。方法用颈动脉多普勒超声对患者检查、用全自动生化分析仪检测患者血脂水平,以确诊AS患者;收集AS组及正常对照组外周... 目的探讨动脉粥样硬化(AS)患者血中三磷酸腺苷结合盒运转体A1(ABCA1)DNA甲基化水平与AS的发生、发展及血脂变化的关系。方法用颈动脉多普勒超声对患者检查、用全自动生化分析仪检测患者血脂水平,以确诊AS患者;收集AS组及正常对照组外周血标本各30例,以荧光定量PCR检测2组的ABCA1 mRNA表达,采用巢式降落式甲基化特异性PCR(nMS-PCR)法检测其ABCA1 DNA甲基化水平,并分析其与血脂水平相关性。结果与正常组相比,AS组甘油三酯(TG)含量升高2.17倍(P<0.01),胆固醇(CHOL)含量升高1.21倍(P<0.05),高密度脂蛋白(HDL)升高0.83倍,低密度脂蛋白(LDL)升高1.18倍(P<0.05);与正常对照组相比,AS组患者ABCA1 mRNA水平降低了63.3%(P<0.01),ABCA1 DNA甲基化水平,AS组较正常对照组升高了1.38倍(P<0.01);血脂水平与ABCA1 DNA甲基化水平呈正相关(r=0.489 8,P<0.01)。结论外周血中ABCA1 DNA高甲基化与AS的发生、发展密切相关。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 三磷酸腺苷结合盒运转体 DNA甲基化 血脂 MRNA表达量
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菊芋SSR-PCR反应体系优化及3个品种的分子鉴别 被引量:7
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作者 任鹏鸿 韩睿 +1 位作者 马胜 李莉 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第6期2441-2446,共6页
本研究通过单因子优化试验和L16(45)正交试验设计的方法,对菊芋SSR-PCR反应体系进行优化。结果表明,20μl最佳反应体系:10×PCR扩增缓冲液,2.5 mmol/L Mg2+,0.20 mmol/L dNTPs,0.30μmol/L正反引物,0.2 U Taq DNA聚合酶和50 ng模板... 本研究通过单因子优化试验和L16(45)正交试验设计的方法,对菊芋SSR-PCR反应体系进行优化。结果表明,20μl最佳反应体系:10×PCR扩增缓冲液,2.5 mmol/L Mg2+,0.20 mmol/L dNTPs,0.30μmol/L正反引物,0.2 U Taq DNA聚合酶和50 ng模板DNA。利用该优化体系,从100个SSR引物组合中筛选出12个清晰且多态性高的引物组合对3个品种的菊芋DNA序列进行扩增,得到58个位点,其中多态性位点39个,多态率为67.2%;建立3个菊芋品种分子识别卡,用2对引物组合的6个多态性位点即可将其分开。本研究为后续应用SSR分子标记技术对菊芋进行种质资源分子遗传学方面的研究提供依据。 展开更多
关键词 菊芋 SSR-PCR 优化 引物筛选 分子鉴别
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血清SAM/SAH在Hcy引起动脉粥样硬化基因组DNA甲基化中的作用 被引量:8
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作者 张辉 郭伟 +7 位作者 高婷婷 马燕琼 惠淑宁 马胜 杨晓玲 蒋袁絮 田珏 姜怡邓 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2017年第2期129-133,共5页
目的探讨血清S-腺苷甲硫氨酸(SAM)/S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)比值在同型半胱氨酸(Hcy)致载脂蛋白E基因敲除(Apo E―/―)小鼠血管动脉粥样硬化(As)B1重复序列DNA甲基化改变中的作用。方法 36只饲养4周龄Apo E―/―小鼠,随机分为三组:模型... 目的探讨血清S-腺苷甲硫氨酸(SAM)/S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)比值在同型半胱氨酸(Hcy)致载脂蛋白E基因敲除(Apo E―/―)小鼠血管动脉粥样硬化(As)B1重复序列DNA甲基化改变中的作用。方法 36只饲养4周龄Apo E―/―小鼠,随机分为三组:模型对照组、高蛋氨酸组、叶酸+Vit B12干预组,每组12只,分别给予不同饮食;另取健康4周龄雄鼠(SPF级C57BL/6J)12只作为正常对照组,饲以普通饮食。饲养15周后,HE染色观察血管内动脉斑块的形成,高效液相色谱检测血清中Hcy、SAM、SAH的水平改变,n MS-PCR检测各组小鼠动脉粥样硬化斑块中Bl重复序列DNA甲基化改变。结果高蛋氨酸组血清Hcy与正常对照组相比升高约2.39倍(P<0.01),HE染色可见高蛋氨酸组中有动脉斑块形成;与正常对照组相比,模型对照组、高蛋氨酸组SAM/SAH增加了1.68倍和2.75倍(P<0.01);高蛋氨酸组B1重复序列DNA甲基化水平降低11.8%(P<0.05),且与SAM/SAH比值呈明显负相关(r=-0.3638,P=0.0210)。结论 ApoE―/―小鼠中B1重复序列发生DNA低甲基化改变,且与SAM/SAH呈负相关,提示血清SAM/SAH可作为一个判断血管As的生物学指标。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 B1重复序列 DNA甲基化 S-腺苷甲硫氨酸/S-腺苷同型半胱氨酸
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液态金属腐蚀研究进展 被引量:7
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作者 付沙沙 马胜 +4 位作者 马胜 王嘉琪 吕萍 陈翰韬 邢建东 《中国铸造装备与技术》 CAS 2020年第4期34-42,共9页
低熔点液态金属的应用十分广泛,涉及核工业、热浸镀、压铸工业等,近年来更是在液态金属电池、计算机技术、生物靶向给药等多个领域得到迅猛发展。而液态金属带来的腐蚀与流动空化损伤问题不容小觑,是当前制约各个行业高速发展的重要原... 低熔点液态金属的应用十分广泛,涉及核工业、热浸镀、压铸工业等,近年来更是在液态金属电池、计算机技术、生物靶向给药等多个领域得到迅猛发展。而液态金属带来的腐蚀与流动空化损伤问题不容小觑,是当前制约各个行业高速发展的重要原因之一。综述了工业领域中各类液态金属腐蚀的进展以及液态金属空化腐蚀近况,并讨论了液态金属腐蚀的主要机理和防护对策。 展开更多
关键词 液态金属 研究进展 腐蚀 空化
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大小蓟对脓毒症大鼠心功能和血浆炎症因子水平影响的研究 被引量:7
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作者 杨晓玲 吴凯 +7 位作者 朱光荣 马胜 杨安宁 田珏 蒋袁絮 贾月霞 李桂忠 姜怡邓 《宁夏医学杂志》 CAS 2016年第6期484-486,共3页
目的观察大蓟和小蓟对脓毒症休克大鼠心功能和血浆炎症因子的影响。方法复制脓毒症休克大鼠模型,用BL-420生物机能实验系统测定大鼠血流动力学改变,ELISA法检测血浆IL-1β、TNF-α和IL-6水平。结果脓毒症休克模型组大鼠心功能显著降低,... 目的观察大蓟和小蓟对脓毒症休克大鼠心功能和血浆炎症因子的影响。方法复制脓毒症休克大鼠模型,用BL-420生物机能实验系统测定大鼠血流动力学改变,ELISA法检测血浆IL-1β、TNF-α和IL-6水平。结果脓毒症休克模型组大鼠心功能显著降低,血浆IL-1β、TNF-α、IL-6水平显著升高;大蓟干预后,大鼠心功能显著低于模型组,血浆炎症因子水平与模型组相比较差异无统计学意义(P>0.05)。小蓟干预后,大鼠心功能有所恢复,IL-1β、TNF-α、IL-6水平降低。结论在治疗脓毒症休克大鼠的过程中,大蓟主要发挥降压作用,而小蓟主要发挥抗炎作用。 展开更多
关键词 大蓟 小蓟 脓毒症休克 炎症因子
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TRPC6 DNA甲基化在同型半胱氨酸致胰岛β细胞焦亡中的作用研究 被引量:5
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作者 揭育祯 杨慧霞 +6 位作者 周瑜瑾 张喜文 虎小忠 柳杨 丁宁 卢冠军 马胜 《广东医学》 CAS 2022年第2期162-168,共7页
目的探讨瞬时感受器电位通道6(TRPC6)DNA甲基化在同型半胱氨酸致胰岛β细胞焦亡中的作用。方法20只cbs^(+/-)小鼠随机分为2组,每组10只。对照组为正常普通饮食,高蛋氨酸组为高蛋氨酸饮食(普通饮食中加入1.7%蛋氨酸)。采用全自动生化分... 目的探讨瞬时感受器电位通道6(TRPC6)DNA甲基化在同型半胱氨酸致胰岛β细胞焦亡中的作用。方法20只cbs^(+/-)小鼠随机分为2组,每组10只。对照组为正常普通饮食,高蛋氨酸组为高蛋氨酸饮食(普通饮食中加入1.7%蛋氨酸)。采用全自动生化分析仪检测小鼠血糖水平;Western blot检测焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β和TRPC6的表达;qRT-PCR测定胰岛β细胞TRPC6 mRNA表达水平;qRT-PCR和Western blot检测DNMT1、DNMT3a及DNMT3b mRNA和蛋白的表达;采用巢式降落式特异性PCR(nMS-PCR)测验TRPC6 DNA甲基化水平;Pearson相关系数对胰腺组织中TRPC6甲基化水平与血糖以及细胞焦亡水平进行相关性分析。结果与对照组比较,高蛋氨酸组中cbs^(+/-)小鼠血糖水平明显升高(P<0.01);NLRP3、Caspase-1以及IL-1β表达水平显著升高(P<0.01);TRPC6的mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。同时,高蛋氨酸组TRPC6启动子区DNA甲基化水平降低(P<0.01),DNMT1 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),而DNMT3a和DNMT3b蛋白表达变化未有统计学意义(P>0.05);Pearson相关性分析发现TRPC6甲基化水平与血糖水平(r=-0.7824,P=0.0075)以及NLRP3(r=-0.7775,P=0.0081)、Caspase-1(r=-0.8992,P=0.0004)、IL-1β(r=-0.6691,P=0.0344)蛋白表达均呈负相关。结论同型半胱氨酸可以诱导胰岛β细胞焦亡的发生,而TRPC6 DNA低甲基化表达可能是Hcy诱导胰岛β细胞焦亡发生的重要机制之一。 展开更多
关键词 同型半胱氨酸 胰岛Β细胞 TRPC6 DNA甲基化 焦亡
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环状RNA hsa-circ-0001360在同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用
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作者 况园军 于素美 +7 位作者 钟颖怡 章旭红 马胜 杨安宁 郝银菊 熊建团 焦运 姜怡邓 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第25期4060-4064,共5页
背景:同型半胱氨酸水平上升会诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡,但机制尚不清楚。目的:探讨hsa-circ-0001360在同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡中的作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,将其分为对照组、同型半胱氨酸组、干扰... 背景:同型半胱氨酸水平上升会诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡,但机制尚不清楚。目的:探讨hsa-circ-0001360在同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡中的作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,将其分为对照组、同型半胱氨酸组、干扰对照组、干扰对照+同型半胱氨酸组、干扰hsa-circ-0001360组、干扰hsa-circ-0001360+同型半胱氨酸组、过表达对照组、过表达对照+同型半胱氨酸组、过表达hsa-circ-0001360组和过表达hsa-circ-0001360+同型半胱氨酸组,同型半胱氨酸的干预浓度均为100μmol/L。干预细胞72 h后,应用Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达;流式细胞仪检测细胞的凋亡率;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测hsa-circ-0001360的表达水平。结果与结论:①与对照组相比,同型半胱氨酸组人脐静脉内皮细胞中Caspase-3和Bax的表达明显升高(P<0.01),Bcl-2的表达明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显增高(P<0.01);②与对照组相比,同型半胱氨酸组人脐静脉内皮细胞中hsa-circ-0001360的表达明显升高(P<0.01);③hsa-circ-0001360在人脐静脉内皮细胞的细胞质中表达显著高于细胞核(P<0.01);④与干扰对照组或干扰对照+同型半胱氨酸组相比,干扰hsa-circ-0001360组和干扰hsa-circ-0001360+同型半胱氨酸组人脐静脉内皮细胞中Caspase-3、Bax的表达明显降低(P<0.01),Bcl-2的表达明显升高(P<0.01),细胞凋亡率明显降低(P<0.01);⑤与过表达对照组或过表达对照+同型半胱氨酸组相比,过表达hsa-circ-0001360组和过表达hsa-circ-0001360+同型半胱氨酸组人脐静脉内皮细胞中Caspase-3、Bax的表达明显升高(P<0.01),Bcl-2的表达明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.01);⑥以上结果表明,hsa-circ-0001360可以促进同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 同型半胱氨酸 hsa-circ-0001360 人脐静脉内皮细胞 细胞凋亡 环状RNA
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MMP-9/TIMP-1在HHcy致ApoE^(-/-)小鼠肾脏损伤中的作用机制 被引量:6
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作者 孔繁琪 马胜 +8 位作者 张辉 和杨杨 赵丽 孙炜炜 曹成建 王艳华 田珏 杨晓玲 姜怡邓 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2015年第6期541-548,共8页
目的探讨高同型半胱氨酸血症(HHcy)导致Apo E-/-小鼠肾脏损伤的作用机制,为HHcy所致肾脏疾病的预防和治疗提供理论和实验依据,为肾病患者的疾病监测提供新的指标。方法将5周龄雄性纯合子Apo E-/-小鼠随机分组:Apo E-/-对照组饲以普通饮... 目的探讨高同型半胱氨酸血症(HHcy)导致Apo E-/-小鼠肾脏损伤的作用机制,为HHcy所致肾脏疾病的预防和治疗提供理论和实验依据,为肾病患者的疾病监测提供新的指标。方法将5周龄雄性纯合子Apo E-/-小鼠随机分组:Apo E-/-对照组饲以普通饮食,Apo E-/-高蛋氨酸组饲以高蛋氨酸饮食,Apo E-/-干预组饲以加叶酸和维生素B12的高蛋氨酸饮食,5周龄SPF级C57BL/6J雄鼠饲以普通饮食作为正常对照组,喂养14周后,生化分析仪测定血清同型半胱氨酸(Hcy)、肌酐及尿素浓度,透射电镜和PAS染色检测小鼠肾脏损伤情况,荧光定量PCR检测肾脏基质金属蛋白酶9(MMP-9)和组织型基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)m RNA表达水平,并以免疫组织化学染色法分析肾脏MMP-9蛋白表达,ELISA检测TIMP-1蛋白表达。结果与正常对照组相比,Apo E-/-高蛋氨酸组血清Hcy、肌酐及尿素浓度分别升高了3.66倍、1.1倍和1.6倍(P<0.01);透射电镜和PAS染色结果显示,Apo E-/-高蛋氨酸组较正常对照组肾脏损伤明显,荧光定量PCR结果显示MMP-9及TIMP-1 m RNA表达则分别升高了5.25倍和1.38倍(P<0.01);免疫组织化学结果显示Apo E-/-高蛋氨酸组MMP-9表达较正常对照组明显升高(P<0.01);ELISA结果显示Apo E-/-高蛋氨酸组TIMP-1蛋白表达比正常对照组明显升高(P<0.01)。与Apo E-/-高蛋氨酸组相比,Apo E-/-干预组血清Hcy浓度下降,且肌酐和尿素浓度均降低(P<0.01);透射电镜和PAS染色结果显示,Apo E-/-干预组肾脏损伤较Apo E-/-高蛋氨酸组减轻。血清Hcy浓度与其肌酐及尿素浓度呈正相关(r2=0.4344,P<0.0001;r2=0.4478,P<0.0001),与MMP-9/TIMP-1比值也呈正相关(r2=0.39309,P<0.001),且小鼠肾脏MMP-9/TIMP-1比值与肌酐及尿素浓度也成正相关(r2=0.1464,P<0.05;r2=0.3027,P<0.01)。结论 HHcy可能是经MMP-9/TIMP-1比例上调致细胞外基质降解,继而导致肾脏损伤。 展开更多
关键词 高同型半胱氨酸血症 基质金属蛋白酶9 组织型基质金属蛋白酶抑制剂1 肾脏损伤
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含硅高硼高速钢高温抗氧化及热震性能研究 被引量:5
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作者 吕萍 高义民 +5 位作者 马胜 陈翰韬 马胜 商瑾 王天元 王嘉琪 《热加工工艺》 北大核心 2020年第6期40-43,共4页
采用砂型铸造技术制备出Si含量为2.00wt%的高硼高速钢,研究了该钢800℃高温抗氧化性能和抗热震性能,并与M2高速钢进行对比。结果表明:含硅高硼高速钢在800℃下氧化100 h后的氧化增重比M2高速钢低2个数量级;同时在800℃保温30 min水淬下... 采用砂型铸造技术制备出Si含量为2.00wt%的高硼高速钢,研究了该钢800℃高温抗氧化性能和抗热震性能,并与M2高速钢进行对比。结果表明:含硅高硼高速钢在800℃下氧化100 h后的氧化增重比M2高速钢低2个数量级;同时在800℃保温30 min水淬下循环50次的抗热震损伤性能是M2高速钢的5~8倍。含硅高硼高速钢高抗氧化性的原因是氧化膜致密连续,且氧化膜主要由Fe-Cr尖晶石(FeCr2O4层)及内氧化层SiO2构成,内氧化层与M2B硼化物在界面处的微凸体形成界面钉子效应,提高了膜/基结合强度;而该钢高的抗热震性能来源于其优异的抗裂纹萌生和扩展能力。 展开更多
关键词 高温氧化 热震性能 高硼高速钢 内氧化 界面效应
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声像资料网上阅览的实现方法 被引量:7
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作者 邝缵枢 万勇 +2 位作者 方芬 马胜 傅敏 《图书情报知识》 CSSCI 北大核心 2000年第4期38-40,共3页
图书馆如何将馆藏录音带、录像带等声像资料进行数字化处理 ,实现网上视听阅览 ,本文结合实际 。
关键词 声像资料 图书馆 网上阅览 多媒体数据库
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互动式头针结合沉浸式虚拟现实康复系统对脑卒中偏瘫患者上肢功能的影响 被引量:6
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作者 姜财 黄墩兵 +5 位作者 郭进华 郭苗苗 李小梅 余圣贤 马胜 林忠华 《按摩与康复医学》 2022年第9期1-4,共4页
目的:探讨互动式头针结合沉浸式虚拟现实康复系统对脑卒中偏瘫患者上肢功能的影响。方法:选取符合标准的脑卒中偏瘫患者50例,随机分为对照组和试验组,每组25例。两组患者均给予常规康复治疗,对照组在常规康复治疗基础上,予以沉浸式虚拟... 目的:探讨互动式头针结合沉浸式虚拟现实康复系统对脑卒中偏瘫患者上肢功能的影响。方法:选取符合标准的脑卒中偏瘫患者50例,随机分为对照组和试验组,每组25例。两组患者均给予常规康复治疗,对照组在常规康复治疗基础上,予以沉浸式虚拟现实康复系统进行运动功能训练;试验组在互动式头针的同时予以沉浸式虚拟现实康复系统进行运动功能训练,分别于治疗前、治疗8周后采用VAS评分、FMA-UE评分和MBI评分评估两组患者上肢疼痛、运动功能和日常生活活动能力。结果:治疗后,两组患者VAS评分均较治疗前降低,FMA-UE和MBI评分较治疗前升高,差异均有统计学意义(P<0.05);组间比较结果显示,试验组VAS评分低于对照组,FMA-UE和MBI评分高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:互动式头针结合沉浸式虚拟现实康复系统能更好地促进脑卒中偏瘫患者上肢运动功能障碍恢复,提高其日常生活活动能力,该方案值得在临床上推广与应用。 展开更多
关键词 互动式头针 沉浸式虚拟现实康复系统 脑卒中 偏瘫 上肢功能
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同型半胱氨酸引起平滑肌细胞LDLR启动子区DNA甲基化改变的位点分析 被引量:5
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作者 杨安宁 王菊 +6 位作者 杨晓玲 马长剑 孙炜炜 马胜 王磊 徐华 姜怡邓 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1507-1510,共4页
目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)引起平滑肌细胞低密度脂蛋白受体(LDLR)启动子区DNA甲基化改变的特点及机制。方法原代培养人脐静脉平滑肌细胞(VSMCs)并鉴定,用50、100、200、500μmol·L-1Hcy干预,巢式降落式甲基化特异性PCR(nMS-PCR)... 目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)引起平滑肌细胞低密度脂蛋白受体(LDLR)启动子区DNA甲基化改变的特点及机制。方法原代培养人脐静脉平滑肌细胞(VSMCs)并鉴定,用50、100、200、500μmol·L-1Hcy干预,巢式降落式甲基化特异性PCR(nMS-PCR)法检测LDLR甲基化改变,甲基敏感性限制性内切酶HpaII和BssHII分析LDLR DNA甲基接受能力。结果 50、100、200、500μmol·L-1Hcy组平滑肌细胞LDLR启动子区DNA去甲基化(P<0.05),经限制性内切酶HpaII消化后,LDLR启动子区C↓CGG序列被酶切,经限制性内切酶BssHII消化后,LDLR启动子区GC↓GCGC序列被酶切,与对照组比较,DNA甲基接受能力下降,其中HpaII引起的效果更明显。结论 Hcy可使平滑肌细胞LDLR启动子区DNA去甲基化的效应偏重于一般的CpG二核苷酸序列,CpG岛所受影响相对较小。 展开更多
关键词 同型半胱氨酸 低密度脂蛋白受体 启动子 DNA甲基化 甲基接受能力 平滑肌细胞
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衰老心肌细胞缺氧后处理中miR-204的作用 被引量:5
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作者 徐灵博 郝银菊 +6 位作者 丁宁 谢琳 马胜 车双双 杨晓玲 姜怡邓 张鸣号 《广东医学》 CAS 北大核心 2017年第18期2764-2767,共4页
目的探索miR-204在衰老心肌细胞缺氧后处理中的作用。方法经D-半乳糖诱导心肌细胞衰老后,随机分为对照组(ONC组)、缺氧复氧组(OAR组)、后处理组(OIPO组)。采用ELISA法检测培养基中c Tn-Ι的含量;微板法检测LDH的含量;XTT法检测细胞活性... 目的探索miR-204在衰老心肌细胞缺氧后处理中的作用。方法经D-半乳糖诱导心肌细胞衰老后,随机分为对照组(ONC组)、缺氧复氧组(OAR组)、后处理组(OIPO组)。采用ELISA法检测培养基中c Tn-Ι的含量;微板法检测LDH的含量;XTT法检测细胞活性;荧光定量PCR法检测miR-204的mRNA表达,并确定miR-204与c Tn-Ι、LDH的相关性。结果与ONC组相比,OAR、OIPO组c Tn-Ι、LDH的含量均增加(P<0.05,P<0.01);与OAR组相比,OIPO组c Tn-Ι、LDH的含量无显著性改变。与ONC组相比,OAR、OIPO组miR-204的表达均降低(P<0.01);相关性分析显示miR-204与c Tn-Ι、LDH呈现负相关。结论缺氧后处理对缺氧复氧所致的衰老心肌细胞损伤的保护作用减弱与miR-204有关。 展开更多
关键词 缺氧后处理 衰老 miR-204
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