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鹿源多杀性巴氏杆菌的鉴定、分型及生物学特性分析 被引量:3
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作者 鱼海玮 +3 位作者 王宏图 冷婧 赵颖婕 胡建军 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第16期121-128,共8页
为了对新疆南疆某鹿场疑似感染多杀性巴氏杆菌的死亡马鹿肺脏样本中的分离菌株进行鉴定、分型及生物学特性分析,试验首先采用染色法和生化鉴定初步判定分离菌株的种类,然后通过PCR扩增分离菌株的16S rRNA基因、Kmt1基因、荚膜血清分型... 为了对新疆南疆某鹿场疑似感染多杀性巴氏杆菌的死亡马鹿肺脏样本中的分离菌株进行鉴定、分型及生物学特性分析,试验首先采用染色法和生化鉴定初步判定分离菌株的种类,然后通过PCR扩增分离菌株的16S rRNA基因、Kmt1基因、荚膜血清分型基因和LPS基因,进一步对分离菌株进行鉴定和分型,最后对分离菌株进行遗传进化分析和药敏试验。结果表明:分离菌株为荚膜血清D型、LPS基因L3型多杀性巴氏杆菌;该分离株的16S rRNA基因序列与多杀性巴氏杆菌参考株DY120818、GDZQ201401、PM-LK、PM-R1601、4085、FUP12、PM30、PM75、Tabriz31、Tabriz61的核苷酸序列相似性在99.9%~100%之间,Kmt1基因序列与多杀性巴氏杆菌参考株CSWRI-AH-PmAg16、HaiNGoosePm2012、Jhakhrana、M14、OND Duck、PMI030、PMUEL 1-BR-11、SichuanPm2014、VRI-Pm2的核苷酸序列相似性在94.9%~99.5%之间,荚膜血清分型基因与同为荚膜血清D型的多杀性巴氏杆菌参考株CSWRI-AH-PmD16、P934和P-4058的核苷酸序列相似性在97.4%~97.9%之间,LPS基因序列与同为L3型的多杀性巴氏杆菌参考株KF314826.1、P1059、P1662的核苷酸序列相似性在87.4%~98.6%之间。该分离株对头孢唑啉、新霉素、头孢曲松和氨苄西林高度敏感,对氯霉素、庆大霉素、卡那霉素和诺氟沙星中度敏感,对克林霉素耐药。说明试验成功分离出一株鹿源多杀性巴氏杆菌。 展开更多
关键词 马鹿 多杀性巴氏杆菌 Kmt1基因 荚膜血清型 脂多糖
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新疆南疆地区牛乳头瘤病毒1型的鉴定及基因型分析 被引量:3
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作者 王旭 鱼海玮 +2 位作者 孟凡艳 胡建军 《畜牧与兽医》 北大核心 2022年第1期89-93,共5页
对新疆南疆某农户疑似感染牛乳头瘤样本进行病原鉴定及基因分型。采集疑似感染乳头瘤病变组织,进行病理组织学检查,并以乳头瘤病毒(BPV)L1基因特异性引物(MY09/MY11)进行PCR扩增、测序,以及L1基因核苷酸同源性比对、系统进化树分析。结... 对新疆南疆某农户疑似感染牛乳头瘤样本进行病原鉴定及基因分型。采集疑似感染乳头瘤病变组织,进行病理组织学检查,并以乳头瘤病毒(BPV)L1基因特异性引物(MY09/MY11)进行PCR扩增、测序,以及L1基因核苷酸同源性比对、系统进化树分析。结果:患牛体表多处生长有菜花样瘤状物呈扁圆形且大小不一,病理组织学观察可见部分肿瘤细胞呈梭形,表皮细胞严重角质化并增生,棘细胞层增厚、胞质呈空泡状;经PCR扩增后得到的序列命名为AWT-1,AWT-1与BPV-1基因型参考株L1基因核苷酸同源性为98.6%,且与BPV-1基因型参考株在系统进化树处于同一分支上,确定为BPV-1型。与BPV-2和BPV-13型的亲缘关系密切,同为丁型乳头瘤病毒属(Deltapapillomavirus)。 展开更多
关键词 牛乳头状瘤 L1基因 基因型鉴定 序列分析
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新疆南疆地区某规模牛场牛病毒性腹泻病毒检测及基因分型 被引量:1
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作者 鱼海玮 黄跃杰 +3 位作者 朱广艺 王旭 胡建军 《畜牧与兽医》 北大核心 2022年第7期59-64,共6页
为掌握新疆南疆某规模牛场牛病毒性腹泻病毒(BVDV)感染的基因型,将该规模牛场所采集的血清样本经BVDV抗原ELISA检测阳性后作为PCR检测样本,针对BVDV基因组中5′-UTR、N^(pro)基因设计特异性引物,进行RT-PCR扩增,然后将目的基因进行测序... 为掌握新疆南疆某规模牛场牛病毒性腹泻病毒(BVDV)感染的基因型,将该规模牛场所采集的血清样本经BVDV抗原ELISA检测阳性后作为PCR检测样本,针对BVDV基因组中5′-UTR、N^(pro)基因设计特异性引物,进行RT-PCR扩增,然后将目的基因进行测序、BLAST比对和序列分析,并构建系统发育树。结果显示,该规模牛场4份样本皆为BVDV-1c型。本研究结果为南疆规模牛场制定科学合理的牛病毒性腹泻防控措施以及选择相应疫苗提供了理论参考。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病 5′-UTR基因 N 基因 系统进化树
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新疆南疆绵羊棘球蚴和细颈囊尾蚴的分子鉴定 被引量:2
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作者 丁繁萍 黄跃杰 +4 位作者 鱼海玮 孟凡艳 石长青 胡建军 《动物医学进展》 北大核心 2021年第12期130-133,共4页
为确定新疆南疆某羊场羊感染羊棘球蚴、细颈囊尾蚴的基因型,对新疆南疆某羊场1例棘球蚴、细颈囊尾蚴混合感染进行分子生物学鉴定。在临床诊断、剖检、镜检观察的基础上,分别采用棘球蚴COI、NDI基因和细颈囊尾蚴Cytb基因的引物进行PCR扩... 为确定新疆南疆某羊场羊感染羊棘球蚴、细颈囊尾蚴的基因型,对新疆南疆某羊场1例棘球蚴、细颈囊尾蚴混合感染进行分子生物学鉴定。在临床诊断、剖检、镜检观察的基础上,分别采用棘球蚴COI、NDI基因和细颈囊尾蚴Cytb基因的引物进行PCR扩增、测序、核苷酸同源性分析,并构建系统进化树。结果显示,该混合感染样品棘球蚴COI、NDI基因序列与GenBank中棘球蚴Sheep(G1)株(EF367301.1)高度同源,核苷酸同源性为100%,同属于棘球蚴G1型;细颈囊尾蚴Cytb基因序列与GenBank中细颈囊尾蚴IM4株(KT258035.1)高度同源,同源性为99.5%。结果表明,该病例为羊细粒棘球蚴G1基因型和细颈囊尾蚴的混合感染。 展开更多
关键词 绵羊 棘球蚴 细颈囊尾蚴 聚合酶链反应 鉴定
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牛源溶酪大球菌的分离鉴定及生物学特性分析
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作者 赵颖婕 +2 位作者 冷婧 王宏图 胡建军 《中国奶牛》 2022年第12期29-34,共6页
大球菌与发酵食品的香气和风味有关,鉴于该类细菌报道较少及间接对人类健康可能造成的影响,本文对牛源溶酪大球菌开展了相关研究。无菌采集新鲜牛肉组织样本,对其进行细菌分离培养,结合细菌形态学观察、生理生化试验、16S rRNA基因分析... 大球菌与发酵食品的香气和风味有关,鉴于该类细菌报道较少及间接对人类健康可能造成的影响,本文对牛源溶酪大球菌开展了相关研究。无菌采集新鲜牛肉组织样本,对其进行细菌分离培养,结合细菌形态学观察、生理生化试验、16S rRNA基因分析进行鉴定,采用纸片扩散法对菌株进行耐药性分析。结果显示,获得的一株革兰氏阴性菌经16S rRNA基因测序分析,其核苷酸同源性与溶酪大球菌参考株可达99%以上;生化试验鉴定,该分离株可分解α-葡萄糖苷酶、D-核糖和D-海藻糖,分解L-乳酸盐产碱和6.5%NaCl生长等;药敏试验结果显示该分离株对氯霉素、头孢曲松和庆大霉素等耐药,对四环素、新霉素等高度敏感;细菌耐药基因检测发现该菌含有头孢菌素类TEM、喹诺酮类gyrA和parC、外排泵类AcrAB等4种耐药基因。 展开更多
关键词 溶酪大球菌 分离 鉴定 耐药性
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