目的研究脓毒症小鼠血管内皮细胞是否存在铁死亡以及硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx-1)在这一过程中的表达。方法采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)构建脓毒症小鼠模型。将动物随机分成3组:假手术组(Sham组)、CLP...目的研究脓毒症小鼠血管内皮细胞是否存在铁死亡以及硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx-1)在这一过程中的表达。方法采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)构建脓毒症小鼠模型。将动物随机分成3组:假手术组(Sham组)、CLP组、铁死亡抑制剂组(Fer-1组)。观察12h后,取外周血制备血清,采用ELISA法检测各组小鼠外周血中Trx-1、血管内皮生长因子(VEGF)及内皮素-1(ET-1)的表达。提取及培养小鼠原代内皮细胞,应用荧光探针技术测定内皮细胞内Fe^(2+)及ROS的水平,试剂盒法测定内皮细胞内谷胱甘肽(glutathione,GSH)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平。结果与Sham组相比,CLP组内皮细胞内GSH含量降低,Fe^(2+)、ROS、MDA含量升高,Fer-1预处理能够缓解这一过程;与Sham组相比,CLP组Trx-1、ET-1及VEGF含量升高,Fer-1组较CLP组降低。结论脓毒症小鼠内皮细胞存在铁死亡,Trx-1在脓毒症铁死亡中高表达。展开更多
文摘目的研究脓毒症小鼠血管内皮细胞是否存在铁死亡以及硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx-1)在这一过程中的表达。方法采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)构建脓毒症小鼠模型。将动物随机分成3组:假手术组(Sham组)、CLP组、铁死亡抑制剂组(Fer-1组)。观察12h后,取外周血制备血清,采用ELISA法检测各组小鼠外周血中Trx-1、血管内皮生长因子(VEGF)及内皮素-1(ET-1)的表达。提取及培养小鼠原代内皮细胞,应用荧光探针技术测定内皮细胞内Fe^(2+)及ROS的水平,试剂盒法测定内皮细胞内谷胱甘肽(glutathione,GSH)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平。结果与Sham组相比,CLP组内皮细胞内GSH含量降低,Fe^(2+)、ROS、MDA含量升高,Fer-1预处理能够缓解这一过程;与Sham组相比,CLP组Trx-1、ET-1及VEGF含量升高,Fer-1组较CLP组降低。结论脓毒症小鼠内皮细胞存在铁死亡,Trx-1在脓毒症铁死亡中高表达。
