Nogo-B受体(Nogo-B receptor,NgBR)参与脂肪肝和胰岛素敏感性的形成,但是并不清楚肝X受体(liver X receptor,LXR)激动剂是否能够调控NgBR的表达。文章使用人工合成的LXR激动剂(T0901317和GW3965)分析其对肝源细胞系中NgBR表达的影响,构...Nogo-B受体(Nogo-B receptor,NgBR)参与脂肪肝和胰岛素敏感性的形成,但是并不清楚肝X受体(liver X receptor,LXR)激动剂是否能够调控NgBR的表达。文章使用人工合成的LXR激动剂(T0901317和GW3965)分析其对肝源细胞系中NgBR表达的影响,构建正常或突变NgBR启动子,通过双荧光素酶报告基因系统检测LXR激动剂对启动子活性的影响;采用CRISPR-CAS9方法建立LXRα或LXRβ基因敲除的HepG2细胞系,通过Western Blot检测相关基因的表达变化;向ApoE-/-小鼠腹腔注射LXR激动剂T0901317,分析小鼠肝脏中NgBR的表达变化。结果发现,LXR激动剂能够通过激活LXR促进NgBR蛋白的表达,该诱导作用是以LXRE依赖的方式进行的,并且LXR的表达发挥着重要作用。在体内实验中,也证明了LXR激动剂T0901317上调NgBR蛋白表达。结果表明,NgBR是LXR的靶蛋白,LXR通过结合NgBR启动子LXRE序列促进其转录和翻译。展开更多
文摘Nogo-B受体(Nogo-B receptor,NgBR)参与脂肪肝和胰岛素敏感性的形成,但是并不清楚肝X受体(liver X receptor,LXR)激动剂是否能够调控NgBR的表达。文章使用人工合成的LXR激动剂(T0901317和GW3965)分析其对肝源细胞系中NgBR表达的影响,构建正常或突变NgBR启动子,通过双荧光素酶报告基因系统检测LXR激动剂对启动子活性的影响;采用CRISPR-CAS9方法建立LXRα或LXRβ基因敲除的HepG2细胞系,通过Western Blot检测相关基因的表达变化;向ApoE-/-小鼠腹腔注射LXR激动剂T0901317,分析小鼠肝脏中NgBR的表达变化。结果发现,LXR激动剂能够通过激活LXR促进NgBR蛋白的表达,该诱导作用是以LXRE依赖的方式进行的,并且LXR的表达发挥着重要作用。在体内实验中,也证明了LXR激动剂T0901317上调NgBR蛋白表达。结果表明,NgBR是LXR的靶蛋白,LXR通过结合NgBR启动子LXRE序列促进其转录和翻译。