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植物甜蛋白Mabinlin Ⅱ在大肠杆菌中的表达 被引量：4
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作者 王昌博 黄东彦 +4 位作者 胡文锋 罗文华 李雪玲 颜少帆 陈永泉 《现代食品科技》 EI CAS 2011年第4期384-389,共6页
本研究从马槟榔种子中扩增得到天然植物甜蛋白Mabinlin Ⅱ的全长cDNA序列(M1),并通过特异引物PCR去除部分5’端序列得到修饰型的基因序列(M2)。将M1与M2分别克隆至表达载体pET43.1a(+),并分别转化表达宿主菌Escherichia coli BL21(DE3)... 本研究从马槟榔种子中扩增得到天然植物甜蛋白Mabinlin Ⅱ的全长cDNA序列(M1),并通过特异引物PCR去除部分5’端序列得到修饰型的基因序列(M2)。将M1与M2分别克隆至表达载体pET43.1a(+),并分别转化表达宿主菌Escherichia coli BL21(DE3)和Rosetta(DE3),成功构建出BL21(DE3)/pET43.1a-M1(缩写B-M1)、BL21(DE3)/pET43.1a-M2(缩写B-M2)、Rosetta(DE3)/pET43.1a-M1(缩写R-M1)、Rosetta(DE3)/pET43.1a-M2(缩写R-M2)四个表达系统。经IPTG诱导表达后证明,R-M1的重组甜蛋白表达量最高,并可检测到轻微甜味和后甜感。同时利用镍柱对R-M1诱导表达的目的蛋白进行纯化,得到单一条带的重组甜蛋白。 展开更多
关键词 甜味蛋白 马槟榔 Mabinlin Ⅱ 大肠杆菌 诱导表达
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