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斑马鱼Tph1a蛋白表达、纯化及对脂代谢基因的影响
1
作者
顾
嘉泽
钟翔麒
+7 位作者
吴冠举
张雨茜
张樾
孙金娣
成成
蔡月凤
陈香凝
高迎莉
《扬州大学学报(农业与生命科学版)》
CAS
北大核心
2021年第3期61-67,共7页
对斑马鱼色氨酸羟化酶1a (Tph1a)进行原核表达、纯化,探究其在斑马鱼脂代谢中的作用。根据大肠埃希菌的偏爱密码序列,优化斑马鱼tph1a编码区,插入原核表达载体pET-28a,构建融合蛋白表达质粒,并诱导表达、纯化和复性后,腹腔注射斑马鱼,...
对斑马鱼色氨酸羟化酶1a (Tph1a)进行原核表达、纯化,探究其在斑马鱼脂代谢中的作用。根据大肠埃希菌的偏爱密码序列,优化斑马鱼tph1a编码区,插入原核表达载体pET-28a,构建融合蛋白表达质粒,并诱导表达、纯化和复性后,腹腔注射斑马鱼,检测其对脂代谢基因表达的影响。结果表明:重组蛋白Tph1a表达形式为包涵体;纯化和复性后的蛋白质具有57 ku的特异性条带;腹腔注射复性蛋白后,高脂组斑马鱼acc、pgc1α基因等表达上调,lpl基因表达下调,且pgc1α基因的表达丰度远高于其他脂代谢基因。这一研究成功构建了原核表达载体pET-28a-tph1a,获得体外高效表达;该蛋白质不仅诱导肥胖斑马鱼的长链脂肪酸合成阻滞,更促进脂肪酸氧化与分解,为探究Tph1a在鱼类脂代谢调控中的功能奠定了基础。
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关键词
斑马鱼
Tph1a蛋白
原核表达
脂代谢基因
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题名
斑马鱼Tph1a蛋白表达、纯化及对脂代谢基因的影响
1
作者
顾
嘉泽
钟翔麒
吴冠举
张雨茜
张樾
孙金娣
成成
蔡月凤
陈香凝
高迎莉
机构
江苏海洋大学江苏省海洋生物技术重点实验室
江苏海洋大学海洋科学与水产学院
江苏海洋大学江苏省海洋生物资源与环境重点实验室
出处
《扬州大学学报(农业与生命科学版)》
CAS
北大核心
2021年第3期61-67,共7页
基金
江苏省高校自然科学基金面上项目(17KJB240001,17KJB2400003)
江苏省“双创博士”基金资助项目(201801-202012)
+3 种基金
江苏省自然科学基金青年基金项目(BK20170450)
江苏省海洋生物技术重点实验室开放课题(HS2017001)
江苏省高校大学生创新创业训练计划项目(201811641093X)
连云港市“海燕计划”项目(2017-QD-014)。
文摘
对斑马鱼色氨酸羟化酶1a (Tph1a)进行原核表达、纯化,探究其在斑马鱼脂代谢中的作用。根据大肠埃希菌的偏爱密码序列,优化斑马鱼tph1a编码区,插入原核表达载体pET-28a,构建融合蛋白表达质粒,并诱导表达、纯化和复性后,腹腔注射斑马鱼,检测其对脂代谢基因表达的影响。结果表明:重组蛋白Tph1a表达形式为包涵体;纯化和复性后的蛋白质具有57 ku的特异性条带;腹腔注射复性蛋白后,高脂组斑马鱼acc、pgc1α基因等表达上调,lpl基因表达下调,且pgc1α基因的表达丰度远高于其他脂代谢基因。这一研究成功构建了原核表达载体pET-28a-tph1a,获得体外高效表达;该蛋白质不仅诱导肥胖斑马鱼的长链脂肪酸合成阻滞,更促进脂肪酸氧化与分解,为探究Tph1a在鱼类脂代谢调控中的功能奠定了基础。
关键词
斑马鱼
Tph1a蛋白
原核表达
脂代谢基因
Keywords
zebrafish
Tph1a protein
prokaryotic expression
lipid metabolism-related genes
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
斑马鱼Tph1a蛋白表达、纯化及对脂代谢基因的影响
顾
嘉泽
钟翔麒
吴冠举
张雨茜
张樾
孙金娣
成成
蔡月凤
陈香凝
高迎莉
《扬州大学学报(农业与生命科学版)》
CAS
北大核心
2021
0
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