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一株致多器官功能衰竭非O1/O139群霍乱弧菌的鉴定 被引量:12
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作者 陈昱希 黄健 +6 位作者 陈安林 陈泽慧 骆诗露 徐梅 李晓婷 闵迅 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第8期831-834,共4页
目的对1例不洁饮食致多器官衰竭患者血液中霍乱弧菌进行鉴定。方法取患者静脉血进行细菌的分离培养,观察细菌的形态特征,并进行生化试验、质谱鉴定、血清学检测、16SrRNA分析、毒力基因检测。结果分离菌初步鉴定为非O1/O139群霍乱弧菌。... 目的对1例不洁饮食致多器官衰竭患者血液中霍乱弧菌进行鉴定。方法取患者静脉血进行细菌的分离培养,观察细菌的形态特征,并进行生化试验、质谱鉴定、血清学检测、16SrRNA分析、毒力基因检测。结果分离菌初步鉴定为非O1/O139群霍乱弧菌。MALDI-TOF MS鉴定该菌为霍乱弧菌,置信度99.9%。16SrRNA扩增产物测序后经blast分析,与数据库中霍乱弧菌相似性为99%。该菌无毒力基因ctx、Tcp,毒力基因lolB、toxR、rtxC、hlyA、Hap、PrtV、ompU均阳性。结论该致病菌为非O1/O139群霍乱弧菌,患者发生急骤性多器官功能衰竭死亡可能与该菌携带lolB、toxR、rtxC、hlyA、Hap、PrtV、ompU等毒力基因密切相关。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 非O1/O139群 鉴定 毒力基因
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肺炎链球菌蛋白质疫苗研究进展 被引量:5
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作者 骆诗露 黄健 +3 位作者 朱杰华 陈泽慧 闵迅 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第10期102-104,共3页
随着肺炎链球菌(SP)耐药菌株的不断出现使得疫苗研发备受关注,但目前使用的荚膜多糖及其结合疫苗有很大局限性。因此,针对SP主要毒力因子的蛋白质疫苗迅速发展,其中SP单一蛋白质疫苗包括溶血素、表面蛋白A、表面黏附素A、三组氨酸蛋白D... 随着肺炎链球菌(SP)耐药菌株的不断出现使得疫苗研发备受关注,但目前使用的荚膜多糖及其结合疫苗有很大局限性。因此,针对SP主要毒力因子的蛋白质疫苗迅速发展,其中SP单一蛋白质疫苗包括溶血素、表面蛋白A、表面黏附素A、三组氨酸蛋白D、黏附毒力因子A,蛋白质联合疫苗包括多价重组蛋白质联合疫苗、多价蛋白质融合疫苗,已取得一定实验和临床效果,有望替代多糖疫苗。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 重组蛋白 联合疫苗 融合疫苗
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2型糖尿病患者合并脑白质病变的危险因素分析
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作者 蔡月娣 梁碧 +5 位作者 陈存伟 覃东红 杨丹佳 刘丹 谭经 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第S02期40-46,共7页
目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者合并脑白质病变的危险因素。方法纳入T2DM患者242例,根据脑白质病变评分分为无脑白质病变组(FA0)58例,轻度脑白质病变组(FA1)58例,中度脑白质病变组(FA2)79例,重度脑白质病变组(FA3)47例,方差分析脑白质病... 目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者合并脑白质病变的危险因素。方法纳入T2DM患者242例,根据脑白质病变评分分为无脑白质病变组(FA0)58例,轻度脑白质病变组(FA1)58例,中度脑白质病变组(FA2)79例,重度脑白质病变组(FA3)47例,方差分析脑白质病变与年龄、病程、体重指数(BMI)、受教育程度、血压、血糖、胰岛素、血脂及脑白质病变相关标志物等因素的关系,并采用Logistic回归分析影响脑白质病变的相关危险因素。结果方差分析显示,与无脑白质病变组比较,患者脑白质病变与年龄、病程、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)相关(P<0.05);与中度脑白质病变组比较,患者脑白质病变与餐后血糖(PBG)相关(P均<0.05);与重度脑白质病变组比较,患者脑白质病变与年龄、病程、FBG、PBG、HbA1c、空腹胰岛素(FINS)、稳态模型评估的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、C反应蛋白(CRP)相关(P<0.05)。脑白质病变越严重的患者认知功能越差(P<0.05)。Logistic回归分析显示年龄、病程、胰岛素抵抗、FBG、HbA1c、PBG、HO-MA-IR、CRP、认知障碍为2型糖尿病患者合并脑白质病变的危险因素。结论病程长、血糖控制不佳、胰岛素抵抗明显、伴有炎症及认知障碍的糖尿病老年患者,脑白质病变越严重。有脑白质病变认知障碍基础的患者更容易发展为重度脑白质病变。 展开更多
关键词 2型糖尿病 脑白质病变 血糖 胰岛素抵抗 炎症因子 认知障碍
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肺炎链球菌TCSs中WalR的克隆表达、保守性及抗原表位分析 被引量:2
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作者 骆诗露 +3 位作者 黄健 朱杰华 陈泽慧 闵迅 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期194-199,共6页
通过构建PET28a-WalR表达载体并在大肠杆菌BL21中表达WalR重组蛋白,以评价其对C57小鼠的免疫原性;并分析其在不同血清型肺炎链球菌中的保守性和B细胞的抗原表位。以肺炎链球菌D39血清型WalR基因为模板,构建重组质粒PET28a-WalR并转入BL2... 通过构建PET28a-WalR表达载体并在大肠杆菌BL21中表达WalR重组蛋白,以评价其对C57小鼠的免疫原性;并分析其在不同血清型肺炎链球菌中的保守性和B细胞的抗原表位。以肺炎链球菌D39血清型WalR基因为模板,构建重组质粒PET28a-WalR并转入BL21诱导表达目的蛋白质。采用Clustal X 2.1软件对WalR蛋白在不同血清型S.pn中的保守性进行分析;利用DNASTAR软件对其B细胞抗原表位进行分析。结果显示,成功构建PET28a-Wal R重组表达载体,经IPTG诱导后有大量高纯度的目的蛋白质,但其主要以包涵体形式存在;Wal R蛋白在不同血清型肺炎链球菌中高达99.4%,其B细胞抗原表位可能位于9-16、35-42、95-111、113-135、150-161、200-218等氨基酸序列位点。成功获得大量以包涵体形式表达的肺炎链球菌Wal R重组蛋白,并对其保守性和抗原表位进行了系统分析。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 WalR 重组蛋白 保守性 抗原性
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淋菌孔蛋白PorB原核表达与抗原表位及保守性分析
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作者 骆诗露 黄健 +4 位作者 陈昱希 朱杰华 陈泽慧 闵迅 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期2190-2192,2202,共4页
目的构建淋菌PorB原核表达载体以制备PorB重组蛋白,并分析其B淋巴细胞抗原表位及在不同血清型淋菌菌株中的保守性,以评价其作为淋菌候选蛋白疫苗的可行性。方法以淋菌标准菌株基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增出PorB基因,并构建原核表... 目的构建淋菌PorB原核表达载体以制备PorB重组蛋白,并分析其B淋巴细胞抗原表位及在不同血清型淋菌菌株中的保守性,以评价其作为淋菌候选蛋白疫苗的可行性。方法以淋菌标准菌株基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增出PorB基因,并构建原核表达载体ppSUMO-PorB,酶切鉴定成功后转化至大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱导后行SDS-PAGE,检测蛋白表达情况;从Genebank中找出不同淋菌血清型的PorB蛋白质氨基酸序列,并用ClustalX 2.1软件分析其序列保守性,DNASTAR软件预测其B淋巴细胞抗原表位。结果大肠埃希菌BL21(DE3)有PorB蛋白表达,并以包涵体表达形式存在;PorB蛋白在不同血清型淋菌菌株间具有较高的保守性(达95.7%),PorB蛋白的B淋巴细胞抗原表位主要位于152~157、166~179、201~216、246~253、260~267、295~303、311~318等氨基酸区段。结论成功构建ppSUMO-PorB原核表达载体,并在原核系统中得到了包涵体形式的PorB蛋白,且该蛋白保守性高,可以作为淋菌蛋白疫苗候选靶点。 展开更多
关键词 淋菌 PorB蛋白 原核表达 保守性
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肺炎链球菌SP2108蛋白的原核表达及免疫原性分析
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作者 骆诗露 黄健 +3 位作者 陈泽慧 朱杰华 闵迅 《遵义医学院学报》 2016年第4期382-386,共5页
目的制备纯化的肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)SP2108蛋白,分析其在常见S.pn菌株中的保守性,并评价其作为S.pn候选疫苗的可行性。方法利用PCR法扩增全长SP2108基因,将其克隆至原核表达载体p Cold TF中,转化E.coli BL21(DE3)... 目的制备纯化的肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)SP2108蛋白,分析其在常见S.pn菌株中的保守性,并评价其作为S.pn候选疫苗的可行性。方法利用PCR法扩增全长SP2108基因,将其克隆至原核表达载体p Cold TF中,转化E.coli BL21(DE3)后IPTG诱导蛋白表达,经Ni-NTA树脂纯化获得高纯度的目的蛋白;将纯化蛋白免疫C57BL/6小鼠制备多克隆抗体,并用间接ELISA检测效价,Western blot鉴定该蛋白在6种常见S.pn菌株的保守性。从Genebank中找出不同S.pn菌株的SP2108蛋白质氨基酸序列,并用Clustal X 2.1软件分析其序列保守性。结果获得了可溶性形式的SP2108蛋白,该重组蛋白免疫小鼠后可获得高滴度的多克隆抗体;Western blot验证了SP2108蛋白在6株常见S.pn菌株中均有表达;SP2108蛋白在不同型别S.pn中氨基酸序列保守性为100%。结论原核表达并纯化了SP2108蛋白,该蛋白保守性高,免疫小鼠后可获得高滴度的多克隆抗体,可能是一种较好的S.pn候选蛋白疫苗。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 SP2108蛋白 原核表达 保守性 C57BL/6小鼠
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