高通量测序技术分析酱香型白酒下造沙轮次的微生物多样性 被引量：23

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作者 吕锡斌 吴耀领 +11 位作者 郝飞 曾祥炼 张巧玲 陈良强 袁颉 罗汝叶 杨帆 王和玉 王莉 尉洪涛 韩培杰 白逢彦 《酿酒科技》 2019年第3期52-58,64,共8页

下沙、造沙是酱香型白酒的基础轮次,为探究酱香型白酒下沙、造沙轮次发酵过程中微生物群落结构的变化、微生物多样性与样品之间的关系,本研究采用了高通量测序对酒醅中细菌、真菌多样性进行了全面解析。结果表明,下沙、造沙分别检测到细... 下沙、造沙是酱香型白酒的基础轮次,为探究酱香型白酒下沙、造沙轮次发酵过程中微生物群落结构的变化、微生物多样性与样品之间的关系,本研究采用了高通量测序对酒醅中细菌、真菌多样性进行了全面解析。结果表明,下沙、造沙分别检测到细菌203个属和184个属,真菌160个属和109个属。下沙、造沙期间细菌优势菌属均为乳酸菌,堆积发酵结束,Weissella paramesenteroides、Pediococcus acidilactici、Lactobacillus panis占比可达80%以上,窖内7 d时的菌群结构发生较大变化,至窖内发酵结束,Lactobacillus panis、Lactobacillus sp.、Lactobacillus acetotolerans占比可达90%以上;下沙、造沙期间的真菌优势菌属均为酵母菌,下沙堆积到入窖,Pichia kudriavzevii均占绝对优势,占比在90%左右,造沙窖内发酵时,Saccharomyce scerevisiae大量繁殖,至窖内发酵结束达到22.32%,Pichia kudriavzevii占比仍达48.78%。该研究结果揭示,酱香型白酒下沙、造沙发酵过程中微生物的多样性,确定了下沙、造沙的主要微生物种类,反映了不同阶段微生物群落特点,为深入研究酿造机理提供参考依据。 展开更多

关键词 酱香型白酒 酒醅 高通量 菌群结构

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酱香型白酒酿造酒醅中酵母菌多样性研究 被引量：17

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作者 郝飞 吕锡斌 +11 位作者 吴耀领 曾祥炼 张巧玲 陈良强 袁颉 罗汝叶 杨帆 王和玉 王莉 尉洪涛 韩培杰 白逢彦 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期620-630,共11页

为解析酱香型白酒酿造酒醅中酵母菌的菌群结构,获取酒醅中的主要酵母菌,采用高通量测序法分析酱香型白酒酒醅中酵母菌多样性及主要功能菌群,同时采用可培养分离方法获取酒醅中酵母菌活性菌株。从酱香型白酒下沙至五轮次酒醅中共检出59... 为解析酱香型白酒酿造酒醅中酵母菌的菌群结构,获取酒醅中的主要酵母菌,采用高通量测序法分析酱香型白酒酒醅中酵母菌多样性及主要功能菌群,同时采用可培养分离方法获取酒醅中酵母菌活性菌株。从酱香型白酒下沙至五轮次酒醅中共检出59个属、129个种的酵母菌,分离得到酵母菌活性菌株41种,检测到的酵母菌种类与获得的酵母菌活菌在各香型白酒中最多。不同时期酒醅中的酵母菌种类和数量差异明显,其中下沙、造沙轮次以Pichia kudriavzevii为绝对优势酵母菌;一至五轮次随着轮次的递增,酒醅中优势酵母菌的种类增多,其中主要的优势酵母菌有Pichia kudriavzevii、Pichia manshurica、Zygosaccharomyces bailii、Saccharomyces cerevisiae、Candida apicola。酱香型白酒酒醅中蕴藏着极其丰富的酵母菌资源,对酵母菌菌群结构的解析有助于科学地认识酱香型白酒酿造过程中产酒与风味代谢机理,为发酵过程的调控提供一定依据。 展开更多

关键词 酵母 酱香型白酒 菌群结构 高通量测序 可培养方法

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六神曲发酵过程中微生物群落结构研究 被引量：16

3

作者 陈彦琳 王云庭 +6 位作者 关凯乐 周旭 韩培杰 王雪薇 白逢彦 杜杰 任玉珍 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第21期5219-5225,共7页

该文研究了采用同一发酵工艺的优化和部颁2组处方六神曲发酵过程中的微生物种类、优势物种及种群变化趋势,旨在明确六神曲发酵过程中的优势微生物种群,探寻六神曲药效物质来源。在规范发酵工艺的基础上,采用筛选优化组方和部颁标准组方... 该文研究了采用同一发酵工艺的优化和部颁2组处方六神曲发酵过程中的微生物种类、优势物种及种群变化趋势,旨在明确六神曲发酵过程中的优势微生物种群,探寻六神曲药效物质来源。在规范发酵工艺的基础上,采用筛选优化组方和部颁标准组方制备六神曲,分别利用8种不同培养基分离培养和高通量DNA测序技术分析了六神曲发酵过程中的5个时间点(0,17,41,48,65 h)样品中真菌和细菌的群落结构及生长过程。研究结果显示,2组处方的六神曲发酵初始阶段样品中真菌的物种多样性较高,优势类群为曲霉属。随着发酵进程,扣囊复膜酵母Saccharomycopsis fibuligera和米根霉Rhizopus oryzae自发酵起点后17 h即迅速上升为优势物种,直至发酵终点,而其他物种则自17 h被抑制在较低水平。发酵初始样品中细菌的物种多样性也较高,优势类群为肠杆菌属Enterobacter。进入发酵后17 h阴沟肠杆菌Enterobacter cloacae、戊糖片球菌Pediococcus pentosaceus、阪崎肠杆菌Cronobacter sakazakii等优势种数量快速增长,物种多样性降低。研究结果将为推进六神曲纯培养微生物发酵工艺提供科学依据。 展开更多

关键词 六神曲 发酵 高通量测序 优势菌群

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白酒发酵过程中常见酵母菌扣囊复膜酵母的研究进展 被引量：14

4

作者 王居伟 韩培杰 +5 位作者 王雪薇 周森 王勇 蔚慧欣 梁振荣 白逢彦 《广西科学》 CAS 2020年第1期1-9,共9页

扣囊复膜酵母(Saccharomycopsis fibuligera)是白酒曲和酒醅发酵前期的优势酵母菌,可分泌淀粉酶(α-淀粉酶、葡糖淀粉酶、生淀粉糖化酶)、蛋白酶、β-葡萄糖苷酶等水解酶类,降解大分子底物,为酿酒酵母等其他白酒发酵微生物的生长提供营... 扣囊复膜酵母(Saccharomycopsis fibuligera)是白酒曲和酒醅发酵前期的优势酵母菌,可分泌淀粉酶(α-淀粉酶、葡糖淀粉酶、生淀粉糖化酶)、蛋白酶、β-葡萄糖苷酶等水解酶类,降解大分子底物,为酿酒酵母等其他白酒发酵微生物的生长提供营养。扣囊复膜酵母与其他微生物的协同作用,对酒精的生成和白酒风味的形成都具有重要贡献。本文总结了扣囊复膜酵母的基本特征、产酶特性及其对白酒风味物质的影响,有助于优化白酒发酵条件,筛选优良菌株,提高白酒品质。 展开更多

关键词 扣囊复膜酵母 白酒 淀粉酶 蛋白酶 Β-葡萄糖苷酶

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生姜汁、大蒜汁对灵武长枣采后病原真菌抑菌效果的研究 被引量：12

5

作者 任玉锋 刘雅琴 +1 位作者 董博博 韩培杰 《北方园艺》 CAS 北大核心 2010年第7期145-147,共3页

用生姜汁、大蒜汁对灵武长枣采后主要病原真菌链格孢、粉红聚端孢、青霉属、黑根霉进行了体外抑菌效果的研究。结果表明:2种汁液对4种供试菌均有不同程度的抑制作用,抑菌效果大蒜汁>生姜汁;大蒜汁对4种供试菌的最低抑菌浓度分别是6.... 用生姜汁、大蒜汁对灵武长枣采后主要病原真菌链格孢、粉红聚端孢、青霉属、黑根霉进行了体外抑菌效果的研究。结果表明:2种汁液对4种供试菌均有不同程度的抑制作用,抑菌效果大蒜汁>生姜汁;大蒜汁对4种供试菌的最低抑菌浓度分别是6.25%、1.56%、6.25%、12.5%;生姜汁对4种供试菌的最低抑菌浓度分别为50%、6.25%5、0%5、0%。 展开更多

关键词 灵武长枣 病原真菌 抑菌效果 生姜汁 大蒜汁

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宁夏枸杞根际固氮解磷菌的分离研究 被引量：11

6

作者 贝盏临 任贤 +1 位作者 雷茜 韩培杰 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期176-177,共2页

采用NFM(无氮培养基)和PKO(无机培养基),从宁夏枸杞根际分离出47株具有固氮能力的菌株,采用溶磷圈法测定其溶磷能力,筛选出46株具有解磷能力的菌株,其溶磷圈直径(D)与菌落直径(d)的比值D/d最高为3.0、最低为1.1;筛选出固氮溶解无机磷能... 采用NFM(无氮培养基)和PKO(无机培养基),从宁夏枸杞根际分离出47株具有固氮能力的菌株,采用溶磷圈法测定其溶磷能力,筛选出46株具有解磷能力的菌株,其溶磷圈直径(D)与菌落直径(d)的比值D/d最高为3.0、最低为1.1;筛选出固氮溶解无机磷能力较强的菌株1株。 展开更多

关键词 宁夏枸杞 固氮菌 解磷菌 根际 分离筛选

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灵武长枣采后主要病原真菌的鉴定 被引量：11

7

作者 任玉锋 马爱瑛 +1 位作者 刘雅琴 韩培杰 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2012年第9期128-130,共3页

以灵武长枣为材料,分离得到在贮藏过程中引起腐烂病害的主要病原真菌4株,采用形态学及rDNA-ITS序列分析法进行鉴定。结果表明,4株病原真菌分别为黑根霉(Rhizopus stolonifer)、皮落青霉(penicillium crustosum)、链格孢[Alternaria alte... 以灵武长枣为材料,分离得到在贮藏过程中引起腐烂病害的主要病原真菌4株,采用形态学及rDNA-ITS序列分析法进行鉴定。结果表明,4株病原真菌分别为黑根霉(Rhizopus stolonifer)、皮落青霉(penicillium crustosum)、链格孢[Alternaria alternata(Fr.)Keissl]和粉红聚端孢[Trichoderma roseum(Pers.)Link]。 展开更多

关键词 灵武长枣 采后病害 病原真菌 形态特征 ITS序列分析 鉴定

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新疆传统发酵乳制品及酵头中酵母菌的分离鉴定 被引量：12

8

作者 王冠群 韩培杰 +3 位作者 杨文菊 王新宇 许倩 朱丽霞 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期691-698,共8页

研究了新疆传统发酵食品中的酵母菌菌群结构及其遗传多样性。采用YPD富集培养后稀释涂布的方法,从12个地区161份样品中分离得到472株酵母菌,通过YPD菌落形态、WL营养培养基聚类分析为16类,挑选不同表型的代表菌株11株进行5.8S-ITS区和26... 研究了新疆传统发酵食品中的酵母菌菌群结构及其遗传多样性。采用YPD富集培养后稀释涂布的方法,从12个地区161份样品中分离得到472株酵母菌,通过YPD菌落形态、WL营养培养基聚类分析为16类,挑选不同表型的代表菌株11株进行5.8S-ITS区和26S D1/D2区测序,通过国际核酸数据库分析鉴定菌种。从分离到的472株酵母菌中,共鉴定出6个属8个种,其中包括263株Saccharomyces cerevisiae,156株Issatchenkia orientalis,10株Torulaspora delbrueckii,9株Pichia fermentans,21株Saccharomyces unisporus,7株Metschnikowia pulcherrima,4株Pichia membranifaciens,2株Clavispora lusitaniae,地区优势菌东方伊萨酵母和酿酒酵母。不同基物与不同地区的菌群结构明显不同。上述结果表明新疆的酵母资源具有丰富多样,本研究初次全面地对新疆传统食品的酵母菌群落结构进行分析,为新疆传统食品微生物资源的开发利用,与传统食品的质量控制等奠定了基础。 展开更多

关键词 酵母菌 5.8S-ITS 26SrDNA 分离鉴定

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泸型酒酿造期间酒醅中可培养细菌的分离鉴定及其种群演替规律研究 被引量：10

9

作者 窦晓 韩培杰 +6 位作者 刘莉 张雨涵 贺佳美 卓晓轩 吴依阳 白逢彦 杨建刚 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期169-174,共6页

目的:为了系统的探究泸型酒酿造期间酒醅中细菌的多样性及演替变化规律,尽可能多的得到各时期可培养的占主体地位的细菌。方法:选用三种不同的培养基对各时期的酒醅样品进行分离计数,并通过16S rRNA基因序列分析法对分离得到的纯菌进行... 目的:为了系统的探究泸型酒酿造期间酒醅中细菌的多样性及演替变化规律,尽可能多的得到各时期可培养的占主体地位的细菌。方法:选用三种不同的培养基对各时期的酒醅样品进行分离计数,并通过16S rRNA基因序列分析法对分离得到的纯菌进行鉴定和系统发育分析。结果:分离得到258株细菌,其中250株分别属于29个种,其余8株鉴定到属(芽孢杆菌属)。在发酵过程中占优势的主体细菌主要为芽孢杆菌属,乳酸菌属细菌在发酵中期也较多。结论:泸型酒发酵过程中细菌的多样性很丰富,发酵前期细菌种类比较多,中期主要以乳酸菌属和芽孢杆菌属为主,后期芽孢杆菌属为主体。可以推测出乳酸菌属和芽孢杆菌属细菌对泸型酒的酿造形成具有特殊意义。 展开更多

关键词 酒醅 细菌 16S rRNA基因序列分析法 群落演替

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牛栏山二锅头酿造过程中的真菌多样性分析 被引量：7

10

作者 周森 韩培杰 +6 位作者 胡佳音 崔阳 赵卫鹏 王勇 郝文军 张如金 魏金旺 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期127-130,136,共5页

目的:分析牛栏山二锅头大茬酒醅发酵过程中真菌群落结构及多样性,确定发酵过程中优势真菌,为解析牛栏山二锅头的形成过程提供理论支撑。方法:将传统可培养分离方法和高通量测序技术相结合,对牛栏山二锅头大茬酒醅发酵过程真菌进行多样... 目的:分析牛栏山二锅头大茬酒醅发酵过程中真菌群落结构及多样性,确定发酵过程中优势真菌,为解析牛栏山二锅头的形成过程提供理论支撑。方法:将传统可培养分离方法和高通量测序技术相结合,对牛栏山二锅头大茬酒醅发酵过程真菌进行多样性分析。结果:采用传统分离方法从大茬酒醅中分离获得559株真菌,共分为13个不同的类群,主要为扣囊覆膜酵母、酿酒酵母、伞枝横梗霉。根据微生物数量变化确定大茬酒醅真菌演替规律,即扣囊覆膜酵母和伞枝横梗霉是发酵初期的主要真菌,以毕赤酵母为主的生香酵母和酿酒酵母在发酵前期快速增长;在顶火期,除酿酒酵母以外的真菌已无法分离到,酿酒酵母成为顶火期和发酵后期的主体真菌。高通量测序中共获得143种真菌OTU,主要包括酵母目、毛霉目、散囊菌目和丝孢酵母目,其中扣囊覆膜酵母是发酵前期的主要真菌,酿酒酵母是中期和后期的主要真菌。结论:大茬发酵过程中真菌多样性丰富,两种分析手段结果较为一致,确定了大茬酿造过程中主要真菌为扣囊覆膜酵母、伞枝横梗霉和酿酒酵母。 展开更多

关键词 真菌 扣囊覆膜酵母 酿酒酵母

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宁夏产枸杞根际固氮菌分离筛选研究 被引量：5

11

作者 贝盏临 任贤 +1 位作者 雷茜 韩培杰 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第2期582-583,共2页

[目的]从宁夏枸杞根际筛选出适合宁夏气候特点和固氮特性表现较好的有益工程菌株。[方法]采用NFM(无氮培养基)分离具有固氮能力的菌株,测定枸杞的根表、根表土壤、根际土壤的菌株分离及固氮菌株菌落生长情况。[结果]从根表分离出菌株的... [目的]从宁夏枸杞根际筛选出适合宁夏气候特点和固氮特性表现较好的有益工程菌株。[方法]采用NFM(无氮培养基)分离具有固氮能力的菌株,测定枸杞的根表、根表土壤、根际土壤的菌株分离及固氮菌株菌落生长情况。[结果]从根表分离出菌株的个数、生长速度、单个菌株增殖数量均比从根际土壤和根表土壤分离出的多。3个部位经纯化筛选后,共得到47株具有固氮能力的菌株,其中根表分离菌株最多。[结论]宁夏枸杞根表的菌株最多,根际土壤次之,根表土壤最少。 展开更多

关键词 枸杞 宁夏 固氮菌 根际 分离 筛选

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低温大曲酵母菌分离和计数培养方法优化 被引量：6

12

作者 关凯乐 韩培杰 +2 位作者 周森 季方 白逢彦 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1191-1201,共11页

低温大曲是清香型白酒酿造的核心因素之一,为酿造过程提供了物系、酶系和菌系。酵母菌是白酒发酵过程中最重要的功能微生物类群,研究大曲中的酵母菌种类和含量具有重要意义,对大曲质量评价也具有重要参考价值。但用常规酵母菌分离技术... 低温大曲是清香型白酒酿造的核心因素之一,为酿造过程提供了物系、酶系和菌系。酵母菌是白酒发酵过程中最重要的功能微生物类群,研究大曲中的酵母菌种类和含量具有重要意义,对大曲质量评价也具有重要参考价值。但用常规酵母菌分离技术和培养基从大曲中分离酵母菌时易受优势丝状真菌(霉菌)的干扰,霉菌常常很快长满培养皿,将酵母菌覆盖,难以对酵母菌进行定量计数、观察和分离纯化。本研究根据酒醅发酵过程中随乙酸和乳酸含量的升高,霉菌含量急剧降低而酵母菌含量逐渐升高的现象,用常规培养基YPD为基础培养基,测试了添加不同量的乙酸、乳酸和丙酸(后者为常用食品防腐和防霉剂),以及不同比例的乙酸乳酸组合物,对低温大曲中霉菌的抑制效果和对酵母菌生长的影响进行探究,发现在灭菌后的YPD中添加3.3mL/L乙酸、2.0mL/L丙酸或在乙酸乳酸1:3的情况下添加2.0mL/L乙酸,30℃培养3–5d之内可有效抑制低温大曲中的霉菌,实现对酵母菌的有效分离、计数和纯化培养,而单加乳酸对霉菌,特别是黄曲霉的抑制效果差。随后测试了以前我们从清香型白酒大曲和酒醅发酵过程中分离的13属18种酵母菌在这些培养基上的生长情况,发现这些酵母菌中的绝大多数,尤其是大曲和酒醅中的优势酵母菌种,均可以在这些加酸培养基上良好生长。综合考虑培养基的成本、配制的简便性及分离效果等因素,本研究推荐将灭菌后添加3.3mL/L乙酸的YPD固体培养基作为低温大曲酵母菌分离和定量计数的优化培养基。 展开更多

关键词 低温大曲 酵母菌分离 丝状真菌生长抑制 含有机酸的优化培养基

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新疆葡萄和葡萄酒相关酿酒酵母种群的结构特征 被引量：4

13

作者 贾佳 王冠群 +3 位作者 朱丽霞 韩培杰 郭东起 陈明 《大连工业大学学报》 CAS 北大核心 2018年第2期94-99,共6页

对新疆葡萄和葡萄酒相关酿酒酵母种内多样性和地域分化类群进行初步研究,推测其可能的形成原因。通过delta基因片段和12个微卫星位点基因对200多株新疆酿酒酵母进行分型、遗传多样性及群体分化特征分析,构建多维标度联系图,并对地域特... 对新疆葡萄和葡萄酒相关酿酒酵母种内多样性和地域分化类群进行初步研究,推测其可能的形成原因。通过delta基因片段和12个微卫星位点基因对200多株新疆酿酒酵母进行分型、遗传多样性及群体分化特征分析,构建多维标度联系图,并对地域特征关联性进行分析。结果表明,delta和SSR对酿酒酵母的基因分型率分别能达到70%和90%。新疆酿酒酵母种内多样性十分丰富,地域居群之间分化明显,在南疆内部各地域之间联系紧密,且具有由西向东的由远及近的进化层次,而北疆内部各地域类群联系十分疏松,没有明显的进化层次。酿酒酵母菌群结构特征明显受到多变的地域气候、截然不同的种植品种与种植方式等多重作用的影响。 展开更多

关键词 酿酒酵母 新疆葡萄 群体分化特征 delta基因 SSR

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铁路运输企业市场化运作机制的调查和思考 被引量：1

14

作者 韩培杰 《中国铁路》 北大核心 2005年第2期17-19,共3页

对当前运输企业之间关联交易存在的问题进行调查和分析,提出完善运输组织方式,加强财务清算信息管理等建议。

关键词 市场化运作机制 铁路运输企业 关联交易 财务清算 信息管理 运输组织方式 问题 调查 分析

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大曲生产期间可培养细菌的分离鉴定及其种群演替规律研究 被引量：2

15

作者 窦晓 韩培杰 +4 位作者 张宿义 周健 秦辉 白逢彦 杨建刚 《食品科技》 CAS 北大核心 2017年第4期27-32,共6页

为了揭示泸型酒酿造期间细菌的功能,通过16S rRNA基因序列分析法对大曲发酵过程不同时期可培养细菌进行了分离鉴定,进而分析了可培养细菌的种群演替规律。结果显示,在大曲生产不同时期共分离鉴定了122株细菌,其中有90株鉴定到种分属于1... 为了揭示泸型酒酿造期间细菌的功能,通过16S rRNA基因序列分析法对大曲发酵过程不同时期可培养细菌进行了分离鉴定,进而分析了可培养细菌的种群演替规律。结果显示,在大曲生产不同时期共分离鉴定了122株细菌,其中有90株鉴定到种分属于19个种;另外32株鉴定到属,分属于4个属。大曲生产前期[(0~5)d]细菌大量繁殖、主要细菌种类为Weissella confuse,Enterobacter mori,Lactobacillus pentosus,Kocuria palustris,Lactobacillus plantarum subsp.Plantarum。随着曲温达到最高(第7天),细菌种类及数量开始减少,到成品曲时(第90天)以芽孢杆菌为主(Bacillus anthracis和Bacillus subtilis subsp.inaquosorum)。研究结果对揭示大曲功能微生物及其作用具有一定的意义。 展开更多

关键词 大曲 细菌 16SrRNA基因序列分析法 群落演替

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完善分账核算配套服务 提升清算指标统计质量

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作者 韩培杰 《铁道运输与经济》 北大核心 2003年第8期34-35,共2页

随着铁路运输实施跨越式发展和财务体制改革分账核算的推进,运输统计数据作为有关清算项目的依据是铁路运输生产实绩的反映,统计信息的质量直接影响铁路局的整体经营效益。郑州铁路局针对机车清算指标统计质量存在的问题,采取加强培训,... 随着铁路运输实施跨越式发展和财务体制改革分账核算的推进,运输统计数据作为有关清算项目的依据是铁路运输生产实绩的反映,统计信息的质量直接影响铁路局的整体经营效益。郑州铁路局针对机车清算指标统计质量存在的问题,采取加强培训,提高原始信息记录填写质量等措施和方法,以确保财务分账核算的准确性。 展开更多

关键词 铁路运输企业 分帐核算 清算指标统计质量 运输统计数据 财务管理

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跨局部属排空车走行系数测算方法探讨

17

作者 韩培杰 《铁道运输与经济》 北大核心 2003年第3期53-55,共3页

在阐述跨局部属排空车走行系数定义的基础上,分析了合理测算跨局部属排空车走行公里对铁路局经济效益的影响,提出了跨局部属排空车走行系数测算方法和经济效果评价。

关键词 跨局部属排空车走行系数 测算方法 铁路局 经济效益 经济效果评价 《铁路货车统计规则》 铁路运输

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