缺血性脑卒中神经保护剂临床转化研究进展 被引量：15

1

作者 芦颖 韩化敏 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期683-688,共6页

脑卒中是中老年常见的急性脑血管病,是当今世界最主要的致死性疾病之一,其中缺血性脑卒中约占患者总数80%。我国脑卒中具有"高发病率、高死亡率、高致残率、高复发率、高经济负担"5大特点,是第一位死亡原因。除血管再通外,神... 脑卒中是中老年常见的急性脑血管病,是当今世界最主要的致死性疾病之一,其中缺血性脑卒中约占患者总数80%。我国脑卒中具有"高发病率、高死亡率、高致残率、高复发率、高经济负担"5大特点,是第一位死亡原因。除血管再通外,神经保护剂是目前最具潜力的一种脑卒中治疗策略。神经保护剂的研究已开展很长时间,目前已涉及49个种类,上百项临床试验,但多数药物在动物实验中证实有效,而在临床试验中无效或存在严重不良反应,其可能原因包括药物临床前实验及临床试验相关的多种复杂因素。本文重点阐述缺血性脑卒中神经保护剂临床转化过程中存在的问题及应对策略的相关研究进展。 展开更多

关键词 神经保护剂 缺血性脑卒中 临床转化 半暗带 脑卒中模型

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旋毛虫在小鼠先天性传播的初步研究 被引量：8

2

作者 王中全 韩化敏 崔晶 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期73-77,共5页

目的研究旋毛虫在小鼠的先天性传播并观察母鼠抗旋毛虫抗体对攻击感染的保护作用。方法将昆明小鼠分为受孕后感染组和感染后受孕组,子鼠出生后1d内剖杀,检查旋毛虫幼虫;将正常母鼠所产子鼠由感染旋毛虫的母鼠喂养,21d后宰杀,检查旋毛虫... 目的研究旋毛虫在小鼠的先天性传播并观察母鼠抗旋毛虫抗体对攻击感染的保护作用。方法将昆明小鼠分为受孕后感染组和感染后受孕组,子鼠出生后1d内剖杀,检查旋毛虫幼虫;将正常母鼠所产子鼠由感染旋毛虫的母鼠喂养,21d后宰杀,检查旋毛虫幼虫。用间接ELISA检测感染母鼠所产子鼠出生后不同时间的血清抗旋毛虫抗体,观察母鼠抗旋毛虫抗体对攻击感染的免疫保护。结果受孕后7d感染旋毛虫的母鼠所产的6只子鼠中有2只感染旋毛虫;感染旋毛虫后8d和22d受孕雌鼠所产子鼠的感染率分别为20%(2/10)和25%(2/8),从子鼠检获的旋毛虫均是未成囊的幼虫。交叉哺乳实验表明正常母鼠所产的30只子鼠未见旋毛虫感染。感染母鼠所产27只子鼠出生后1、7、24及40d的血清抗体阳性率分别为100%、100%、77.8%及14.8%,子鼠出生后40d攻击感染的减虫率为62.0%;感染母鼠所产子鼠血清被动转移小鼠的减虫率55.7%,与对照组比较差异有显著性(P<0.01)。结论旋毛虫在小鼠可经胎盘传播,母鼠的抗旋毛虫抗体对子鼠抗攻击感染可能具有部分保护作用。 展开更多

关键词 先天性传播 抗旋毛虫抗体 步研究 间接ELISA检测 旋毛虫幼虫 攻击感染 血清被动转移 部分保护作用 旋毛虫感染 抗体阳性率 经胎盘传播 出生后 昆明小鼠 不同时间 免疫保护 减虫率 母鼠 子鼠 感染后 感染率 显著性 对照组

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护理专业病原生物学与免疫学教学改革探讨 被引量：5

3

作者 王进 韩化敏 《河南职工医学院学报》 2007年第4期387-388,共2页

探讨如何培养面向基层、面向社区的高技能的实用型卫生人才,是医学高职高专院校的重要课题,因此专业课程体系的改革势在必行。该文就护理专业病原生物学与免疫学教学改革的必要性和具体方法进行了探索。

关键词 护理专业 教学改革 病原生物学 免疫学

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旋毛虫DNA疫苗诱导小鼠免疫应答的研究 被引量：3

4

作者 崔晶 王中全 +4 位作者 张红卫 韩化敏 卫海燕 晋雪香 李雍龙 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期100-104,共5页

目的　观察旋毛虫DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答。方法　将旋毛虫肌幼虫编码 31kDa抗原结构基因真核表达质粒pcDNA3-TspE1分别用肌肉注射和基因枪免疫BALB/c小鼠 ,免疫血清用旋毛虫肌幼虫冰冻切片及石蜡切片抗原进行IFAT检测 ,并用... 目的　观察旋毛虫DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答。方法　将旋毛虫肌幼虫编码 31kDa抗原结构基因真核表达质粒pcDNA3-TspE1分别用肌肉注射和基因枪免疫BALB/c小鼠 ,免疫血清用旋毛虫肌幼虫冰冻切片及石蜡切片抗原进行IFAT检测 ,并用旋毛虫肌幼虫可溶性抗原进行Westernblot分析。结果　IFAT表明 pcDNA3-TspE1接种BALB/c小鼠后产生的免疫血清与旋毛虫肌幼虫可产生阳性反应 ,在肌幼虫冰冻及石蜡切片上均显示黄绿色荧光。Westernblot检测结果显示 ,pcDNA3-TspE1接种小鼠后产生的免疫血清只能识别旋毛虫肌幼虫可溶性抗原中的 31kDa抗原组分 ,而 pcDNA3质粒接种小鼠后的血清不能与旋毛虫肌幼虫可溶性抗原发生免疫反应。结论　旋毛虫DNA疫苗 pcDNA3-TspE1能够诱导小鼠产生特异性体液免疫应答。 展开更多

关键词 旋毛虫 DNA疫苗 诱导 小鼠 免疫应答

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旋毛虫抗原基因Ts43原核表达及重组蛋白鉴定 被引量：4

5

作者 任道锋 崔晶 +1 位作者 王中全 韩化敏 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期539-542,共4页

目的原核表达旋毛虫相对分子质量(Mr)43 000抗原基因(Ts43)并对重组蛋白进行抗原性鉴定。方法将旋毛虫抗原基因Ts43克隆入原核表达载体pET30a(+),构建重组表达质粒pET30a(+)-Ts43,经测序分析正确后转化大肠埃希菌BL21,以异丙基-β-D硫... 目的原核表达旋毛虫相对分子质量(Mr)43 000抗原基因(Ts43)并对重组蛋白进行抗原性鉴定。方法将旋毛虫抗原基因Ts43克隆入原核表达载体pET30a(+),构建重组表达质粒pET30a(+)-Ts43,经测序分析正确后转化大肠埃希菌BL21,以异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹分析(Western blotting analysis)鉴定重组蛋白的抗原性。结果SDS-PAGE结果显示表达产物为Mr 41 000的重组融合蛋白,IPTG诱导4 h时表达量最大,薄层凝胶光密度扫描显示表达的融合蛋白占菌体蛋白总量的14.7%。Western blotting结果显示该重组蛋白可被旋毛虫、乡土旋毛虫及纳氏旋毛虫感染小鼠血清及旋毛虫病患者血清识别,与人芽囊原虫、微小隐孢子虫感染小鼠和正常小鼠血清和正常人血清无交叉反应,但与棘球蚴病、囊尾蚴病、日本血吸虫病、并殖吸虫病及华支睾吸虫病患者血清均有交叉反应。结论旋毛虫Ts43基因的重组蛋白具有较好的抗原性,但与某些寄生虫病患者血清有交叉反应。 展开更多

关键词 旋毛虫 Ts43基因 原核表达 重组蛋白 抗原性

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尼群地平和吲达帕胺小剂量联合应用的体会 被引量：4

6

作者 宋洁丽 程冠昌 +3 位作者 庞妩燕 庞春兰 郭明富 韩化敏 《中级医刊》 1998年第7期10-13,共4页

关键词 尼群地平 吲达帕胺 高血压 药物疗法

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旋毛虫DNA疫苗在中国仓鼠卵巢细胞中的表达(英文) 被引量：2

7

作者 崔晶 王中全 +3 位作者 韩化敏 卫海燕 张红卫 李雍龙 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期266-270,F003,共6页

目的　观察编码旋毛虫相对分子质量 (Mr) 3 10 0 0抗原的DNA疫苗 (重组真核表达质粒pcDNA3 TspE1)在中国仓鼠卵巢 (CHO)细胞中的体外表达 ,并分析其表达产物的抗原性。　方法　通过用阳离子脂质体Lipofectamine 2 0 0 0将重组质粒pcDNA... 目的　观察编码旋毛虫相对分子质量 (Mr) 3 10 0 0抗原的DNA疫苗 (重组真核表达质粒pcDNA3 TspE1)在中国仓鼠卵巢 (CHO)细胞中的体外表达 ,并分析其表达产物的抗原性。　方法　通过用阳离子脂质体Lipofectamine 2 0 0 0将重组质粒pcDNA3 TspE1转染CHO细胞 ,G418筛选阳性克隆 ,用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)、间接荧光抗体试验 (I FAT)、十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和蛋白质印迹法 (Westernblotting)对表达产物进行鉴定。　结果　RT PCR结果显示 ,pcDNA3 TspE1转染的CHO细胞在 876bp处有一条带 ,而用空质粒pcDNA3转染的CHO细胞未出现条带 ,表明pcDNA3 TspE1转染细胞中有TspE1基因转录。IFAT结果显示 ,pcDNA3 TspE1转染的CHO细胞与重组融合蛋白免疫小鼠血清反应呈现亮绿色荧光 ,而pcDNA3转染的CHO细胞及未转染细胞呈现橘黄色。Westernblotting显示在pcDNA3 TspE1转染的CHO细胞培养液中存在有一Mr约 3 10 0 0的蛋白带 ,且该条带能被重组融合蛋白免疫小鼠血清、旋毛虫肌幼虫可溶性抗原免疫兔血清、感染旋毛虫的小鼠及旋毛虫病患者血清识别。　结论　重组质粒pcDNA3 TspE1可转染CHO细胞 ,旋毛虫TspE1基因可在转染的CHO细胞中表达 ,表达蛋白能分泌到细胞培养上清中且具有旋毛虫? 展开更多

关键词 PCDNA3 转染 CHO细胞 旋毛虫 表达 血清 DNA疫苗 E1基因 中国仓鼠卵巢细胞 重组融合蛋白

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某高校中老年教职工脂肪肝患病情况及原因分析 被引量：2

8

作者 刘计荣 沙滨 +2 位作者 赵冰 杨立红 韩化敏 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2008年第19期3757-3757,3765,共2页

[目的]为了解某高校中老年教职工脂肪肝患病情况并分析可能的原因,以便寻找有效的预防与治疗途径。[方法]对北京某高校中老年教职工进行健康体检,收集体检资料进行分析。[结果]645名教职工脂肪肝患者的检出率为19.21%,男女检出率差异有... [目的]为了解某高校中老年教职工脂肪肝患病情况并分析可能的原因,以便寻找有效的预防与治疗途径。[方法]对北京某高校中老年教职工进行健康体检,收集体检资料进行分析。[结果]645名教职工脂肪肝患者的检出率为19.21%,男女检出率差异有统计学意义,男性40～50岁脂肪肝患病率最高,随年龄增长患病率降低,女性40～50岁患病率最低,随年龄增长而增加。[结论]某校中老年教职工脂肪肝患病率偏高,膳食不合理、缺乏锻炼、肥胖是主要原因,应加强对高校教职工健康理念及生活习惯的干预,预防脂肪肝的发生。 展开更多

关键词 脂肪肝 患病率 职业卫生服务

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旋毛虫Ts43基因克隆和序列分析 被引量：2

9

作者 韩化敏 崔晶 +2 位作者 王中全 卫海燕 晋雪香 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2005年第4期616-618,共3页

目的:构建编码旋毛虫相对分子质量43 000蛋白基因(Ts43)的原核表达载体,并对其序列进行分析.方法:应用RT-PCR方法从河南省南阳猪源旋毛虫获得旋毛虫基因Ts43,克隆人pGEMEX-1载体中构建重组质粒pGEMEX-Ts43,进行测序、同源性比较及抗原... 目的:构建编码旋毛虫相对分子质量43 000蛋白基因(Ts43)的原核表达载体,并对其序列进行分析.方法:应用RT-PCR方法从河南省南阳猪源旋毛虫获得旋毛虫基因Ts43,克隆人pGEMEX-1载体中构建重组质粒pGEMEX-Ts43,进行测序、同源性比较及抗原性预测分析.结果:所获基因的核苷酸序列与GenBank所登录的旋毛虫Ts43蛋白基因序列的同源性为99%.抗原性预测分析结果显示,河南省南阳猪源旋毛虫相对分子质量43 000的蛋白分子上存在有4个明显抗原活性的结构域,分别位于距翻译起点第26～28、101～105、185～193、275～295个氨基酸残基的肽链上.结论:成功构建了旋毛虫相对分子质量43 000蛋白抗原基因的原核表达载体. 展开更多

关键词 旋毛虫 抗原 基因克隆

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白细胞介素在旋毛虫感染中的作用 被引量：2

10

作者 韩化敏 崔晶 王中全 《热带病与寄生虫学》 2004年第3期180-184,共5页

白细胞介素(interleukin,IL)最初是指由白细胞产生而又在白细胞间发挥作用的一类细胞因子(cytokine,CK),虽然后来发现白细胞介素也可由其它细胞产生并能作用于其它细胞,但这一名称仍沿用至今,目前报道的白细胞介素有18种(IL-1～IL-18).... 白细胞介素(interleukin,IL)最初是指由白细胞产生而又在白细胞间发挥作用的一类细胞因子(cytokine,CK),虽然后来发现白细胞介素也可由其它细胞产生并能作用于其它细胞,但这一名称仍沿用至今,目前报道的白细胞介素有18种(IL-1～IL-18).随着分子免疫学、分子寄生虫学及寄生虫免疫学的发展,发现白细胞介素在旋毛虫感染的免疫应答中具有重要的生物学活性和免疫调节作用.宿主感染旋毛虫后,淋巴细胞在受到旋毛虫抗原刺激后被活化而分泌白细胞介素.多数白细胞介素可促进免疫活性细胞的分化和增殖,对免疫应答具有正调节作用,可提高宿主对旋毛虫感染的抵抗力和加速排虫反应;而有些白细胞介素则具有免疫抑制活性,对免疫应答具有负调节作用,可降低宿主对旋毛虫感染的抵抗力和延迟排虫反应. 展开更多

关键词 白细胞介素 旋毛虫感染 分子寄生虫学 免疫调节作用 分子免疫学 生物学活性 细胞因予 发挥作用 免疫应答 宿主感染 抗原刺激 淋巴细胞 细胞间

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两种跨膜蛋白携带myc于细胞表面的能力比较 被引量：2

11

作者 刘庆军 韩化敏 +1 位作者 张兆山 高斌 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1888-1894,共7页

在细胞表面表达具有某种功能的蛋白后,这些细胞就具备了某些新功能,可以对其进行功能研究和应用。将功能蛋白连接到某些跨膜蛋白的胞外区是实现目的蛋白表达于细胞表面的手段之一。本研究比较了2种跨膜蛋白A2TM和△LNGFR携带外源蛋白-my... 在细胞表面表达具有某种功能的蛋白后,这些细胞就具备了某些新功能,可以对其进行功能研究和应用。将功能蛋白连接到某些跨膜蛋白的胞外区是实现目的蛋白表达于细胞表面的手段之一。本研究比较了2种跨膜蛋白A2TM和△LNGFR携带外源蛋白-myc于细胞表面的能力。利用重叠PCR法合成的A2TM和△LNGFR基因片段与载体pEF/myc/ER和载体LL3.7进行酶切、连接、转化、鉴定,成功构建了pEF-A2TM、pL-A2TM和pL-LN真核表达载体。利用磷酸钙沉淀法转染293FT细胞,荧光显微镜下观察EGFP的表达、流式细胞术检测myc在细胞表面的表达情况,Western blotting检测myc目的蛋白的表达。pL-A2TM和pL-LN转染293FT细胞36 h后的荧光强度基本相同,表明A2TM和△LNGFR在细胞内表达的强度相似。流式细胞术分析显示,△LNGFR和A2TM均可在细胞表面表达,但A2TM只有在指示蛋白EGFP表达非常高的情况下才能在细胞表面被检测到。Western blotting显示△LNGFR表达量很高,而A2TM没有达到检测水平。结果表明,以糖基化形式存在的△LNGFR比没有糖基化的内源A2TM的表达更稳定,A2TM在表达量低时可能易被细胞内的蛋白酶降解,因而△LNGFR是一种能携带外源蛋白于细胞表面的比较理想的跨膜蛋白。 展开更多

关键词 跨膜蛋白 myc抗原决定簇 细胞表面 表达差异

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MHC-Ⅰ类肽组装复合体组分重要性的定量分析(英文)

12

作者 牛歌 马娟 +6 位作者 刘长振 马盼 韩化敏 赵云峰 张鸽 陶华 高斌 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2014年第9期904-915,共12页

TAP2、tapasin和calreticulin(CRT)是MHC-Ⅰ类内源性抗原加工和递呈途径肽组装复合体(PLC)中的3个重要蛋白质.虽然对于肽组装复合体及其单个蛋白组分在抗原加工递呈中的作用,国内外已有大量的研究,但是由于研究手段的缺乏,其在复合体中... TAP2、tapasin和calreticulin(CRT)是MHC-Ⅰ类内源性抗原加工和递呈途径肽组装复合体(PLC)中的3个重要蛋白质.虽然对于肽组装复合体及其单个蛋白组分在抗原加工递呈中的作用,国内外已有大量的研究,但是由于研究手段的缺乏,其在复合体中的相对重要性还未得到清楚和定量的分析.本文中我们建立了一种新型的抗原递送方法,利用猪链球菌溶血酶(SLY)对鼠纤维母细胞系K41及其CRT缺陷细胞系K42、tapasin缺陷细胞系90a及tapasin、TAP2双缺陷细胞系91a进行穿孔并定量递送入鸡卵清白蛋白(ovalbumin,OVA),使其被内源性加工处理后的多肽SIINFEKL与小鼠H2-Kb装配成复合物并被递呈至细胞表面.通过利用小鼠T杂交瘤细胞B3Z和单克隆抗体25D1.16识别并检测不同细胞表面SIINFEKL与小鼠H2-Kb复合物,我们发现CRT缺陷细胞系K42的抗原提呈能力相比91a及90a,较K41有着更大幅度的下降,说明CRT在提呈过程中可能有着较预期更重要的作用.本文是首个对抗原递呈途径蛋白相对重要性的研究,其研究结果对于进一步研究MHC-Ⅰ类抗原加工和递呈途径相关蛋白的作用提供了理论依据与研究手段. 展开更多

关键词 MHC-Ⅰ 肽组装复合体 猪链球菌溶血酶 定量分析

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旋毛虫感染与细胞因子

13

作者 韩化敏 崔晶 王中全 《河南预防医学杂志》 2004年第2期119-123,共5页

关键词 旋毛虫 细胞因子 综述

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CD3+CD16+类自然杀伤T细胞在胶质瘤患者外周血的研究 被引量：1

14

作者 刘增进 宋瑞鹏 +4 位作者 宋振宇 郭社卫 马斯奇 韩化敏 刘献志 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期937-939,共3页

目的:探讨类自然杀伤T细胞(NK-like T细胞)在胶质瘤患者外周血中的表达及其与临床的关系。方法:以2017年9月至2018年9月郑州大学第一附属医院经临床和病理确诊的34例胶质瘤患者为实验组,以12例健康自愿者为实验对照组,密度梯度离心方法... 目的:探讨类自然杀伤T细胞(NK-like T细胞)在胶质瘤患者外周血中的表达及其与临床的关系。方法:以2017年9月至2018年9月郑州大学第一附属医院经临床和病理确诊的34例胶质瘤患者为实验组,以12例健康自愿者为实验对照组,密度梯度离心方法分别提取实验组和对照组3 ml外周血内单核细胞(PBMCs),流式细胞分析外周血单核细胞(PBMCs)内CD3、CD45、CD16和CD56的表达情况,应用t检验分析比较NK-like T细胞占CD3+和CD45+细胞的比例在实验组和对照组中的差异,用Spearman相关分析分析外周CD3+CD16+NK-like T细胞在CD3+和CD45+细胞中比例和临床KPS评分的关系;用胞内染色流式细胞分析的方法,t检验分析实验组和对照组肿瘤坏死因子(TNF)-α+细胞和γ-干扰素(IFN-γ)+细胞占CD3+CD16+NK-like T细胞比例的差异。结果:与对照组比较,实验组外周血中CD3+CD16+NK-like T细胞在CD3+和CD45+细胞中比例明显下降[(8.772±2.704)%比(22.07±3.071)%,t=3.786,P<0.01;(3.027±1.033)%比(9.449±1.720)%,t=3.498,P<0.01)],并且CD3+CD16+细胞分泌细胞因子TNF-α和IFN-γ的能力(TNF-α+细胞和IFN-γ+细胞比例)明显下降[(42.24±4.12)%比(19.12±3.81)%,t=3.125,P<0.01;(41.13±5.02)%比(20.85±3.93)%,t=2.192,P<0.05)];IFN-γ+细胞和TNF-α+细胞平均荧光强度下降明显(201.00±11.22比95.71±4.19,t=3.483,P<0.01;147.25±6.39比87.45±3.66,t=2.883,P<0.01);CD3+CD16+NK-like T细胞在CD3+细胞或CD45+细胞中比例和临床KPS评分明显相关(r=0.186、0.207,P<0.05)。结论:胶质瘤改变了外周血CD3+CD16+NK-like T细胞的比例和功能,CD3+CD16+NK-like T细胞参与了胶质瘤的病理生理过程。 展开更多

关键词 胶质瘤 免疫 自然杀伤细胞 CD3+CD16+NK-like T细胞

原文传递

经皮球囊导管二尖瓣扩张术治疗风心病二尖瓣狭窄102例 被引量：1

15

作者 宋洁丽 庞春兰 +6 位作者 王桂萍 刘朋 张惠玲 宋娜 郭名富 韩化敏 李小黎 《中国介入心脏病学杂志》 1997年第4期159-160,共2页

对102例风湿性心脏辩膜病二尖瓣狭窄患者进行了经皮球囊导管二尖辩成形术。结果成功101例，二尖辩口面积由0．79±0．34cm2增至1．88±0．32cm2，跨瓣压差由259±077kPa降至0．83±0．42kPa，左房平均压由3．84±1... 对102例风湿性心脏辩膜病二尖瓣狭窄患者进行了经皮球囊导管二尖辩成形术。结果成功101例，二尖辩口面积由0．79±0．34cm2增至1．88±0．32cm2，跨瓣压差由259±077kPa降至0．83±0．42kPa，左房平均压由3．84±1．15kPa降至1．86±0．59kPa。1例发生脑梗塞，其他患者未出现严重合并症。本文对该术疗效、技术操作及严重合并症的预防进行了探讨。 展开更多

关键词 二尖瓣狭窄 二尖瓣扩张术 风湿性心脏病

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CD1d融合蛋白的表达及其在自然杀伤T细胞原代培养中的作用

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作者 刘计荣 赵冰 韩化敏 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期155-160,共6页

目的构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(-)-CD1d-hIgG1-BriA tag,建立稳定表达CD1d融合蛋白的细胞系,并检测该蛋白对体外培养人原代自然杀伤T(natural killing T,NKT)细胞的活化刺激功能,为肿瘤过继性免疫治疗提供新方法。方法从健康人外周... 目的构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(-)-CD1d-hIgG1-BriA tag,建立稳定表达CD1d融合蛋白的细胞系,并检测该蛋白对体外培养人原代自然杀伤T(natural killing T,NKT)细胞的活化刺激功能,为肿瘤过继性免疫治疗提供新方法。方法从健康人外周血提取CD1d全长基因作为目的 DNA片段,与真核表达载体pcDNA3.1(-)分别经双酶切后,酶切产物用T4 DNA连接酶连接,获得重组表达载体,经转染293T细胞、抗性筛选、质粒提取等步骤获得融合的重组质粒。将双酶切鉴定正确的质粒采用磷酸钙转染法导入CHO-K1细胞,经Western blot和ELISA法检测CD1d蛋白的表达,连续培养获得稳定表达CD1d的细胞系,经扩增培养收获培养液后,进行Protien A柱纯化。将纯化的CD1d蛋白用于人外周血经体外分离获得的单个核细胞的连续培养后,进行流式细胞术检测。结果质粒pcDNA3.1(-)-CD1d-hIgG1-BriA tag经双酶切鉴定构建正确。获得1株稳定表达CD1d蛋白的细胞株。纯化后的CD1d蛋白相对分子质量约196 000,能够激活单个核细胞中NKT细胞的扩增,培养第8天,CD3+CD56+NKT细胞显著增加,由培养前的0.30%扩增至4.99%。结论成功构建了pcDNA3.1(-)-CD1d-hIgG1-BriA tag真核表达质粒,建立了高效稳定表达CD1d蛋白的CHO-K1细胞株,为深入研究CD1d蛋白刺激活化NKT细胞奠定了实验基础,进一步证实了CD1d分子体外刺激NKT活化的功能,为最终免疫治疗提供了细胞。 展开更多

关键词 CD1d基因 基因重组 真核表达载体 自然杀伤T细胞

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人肺癌细胞特异性结合肽的筛选与验证

17

作者 樊敏杰 金瑾 韩化敏 《肿瘤基础与临床》 2017年第6期472-475,共4页

目的筛选人肺癌细胞特异性结合肽,为肿瘤诊断试剂及肿瘤药物的研制提供依据。方法以正常人支气管上皮细胞16HBE为吸附细胞,人肺癌细胞A549为靶细胞,利用噬菌体展示肽库经4轮差减吸附淘筛,采用细胞ELISA鉴定噬菌体与肺癌细胞结合的特异... 目的筛选人肺癌细胞特异性结合肽,为肿瘤诊断试剂及肿瘤药物的研制提供依据。方法以正常人支气管上皮细胞16HBE为吸附细胞,人肺癌细胞A549为靶细胞,利用噬菌体展示肽库经4轮差减吸附淘筛,采用细胞ELISA鉴定噬菌体与肺癌细胞结合的特异性并测序获得多肽序列。结果经4轮筛选噬菌体富集率逐级递增,共挑选394株噬菌体利用ELISA验证,将特异性较好的5株噬菌体克隆基因测序,获得重复率最高的序列(4/5)。结论利用噬菌体展示技术筛选出了与人肺癌细胞癌特异性结合的小分子多肽,为肺癌患者的早期诊断和靶向治疗奠定了基础。 展开更多

关键词 噬菌体展示 肺癌 特异性结合多肽

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某校高2006、2007级新生乙肝病毒携带情况分析 被引量：2

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作者 刘计荣 赵冰 +1 位作者 杨立红 韩化敏 《临床和实验医学杂志》 2008年第8期187-187,共1页

目的了解大学新生的乙肝病毒感染情况,为学校乙肝防治提供科学依据。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对华北电力大学2006、2007年新生进行乙肝五项检测,结果7325名新生乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性者检出378例,阳性率为5.16%,HBsAg、... 目的了解大学新生的乙肝病毒感染情况,为学校乙肝防治提供科学依据。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对华北电力大学2006、2007年新生进行乙肝五项检测,结果7325名新生乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性者检出378例,阳性率为5.16%,HBsAg、乙型肝炎病毒e抗体(抗-Hbe)、乙肝病毒核心抗体(抗-HBc)阳性率男生均高于女生(P<0.05),阳性率差异有统计学意义。结论该校新生HBsAg阳性率低于全国水平,男生阳性率高于女生。 展开更多

关键词 乙肝病毒 大学生 阳性检出率

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大学生水痘40例发病情况分析

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作者 刘计荣 韩化敏 +1 位作者 杨立红 赵冰 《临床和实验医学杂志》 2008年第3期181-181,共1页

目的探讨大学生水痘发生情况,临床表现及特点,为预防水痘在大学生中传播提供依据。方法对40例大学生水痘患者进行回顾性分析总结。结果40例水痘发生于大学一至四年级学生,发病有新生、居住地集中趋势。疾病特点是起病急,前驱症状明显,... 目的探讨大学生水痘发生情况,临床表现及特点,为预防水痘在大学生中传播提供依据。方法对40例大学生水痘患者进行回顾性分析总结。结果40例水痘发生于大学一至四年级学生,发病有新生、居住地集中趋势。疾病特点是起病急,前驱症状明显,全身症状、皮疹及瘙痒症状重。密切接触者容易感染。大学生水痘感染与精神紧张、学习压力大,抵抗力低等因素有关。结论水痘起病急,前驱症状明显,传染性强,由于大学生生活、学习集中,容易造成水痘爆发流行,学校医务人员应提高对水痘的认识,尽可能早诊断,早隔离,防止造成爆发流行。 展开更多

关键词 水痘 大学生 爆发流行

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