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1株产耐盐碱高温淀粉酶嗜盐菌的筛选和鉴定 被引量:6
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作者 赵庆新 +1 位作者 袁生 蔡信之 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第15期6173-6176,共4页
[目的]研究极端嗜盐菌SYM菌株的形态和生理生化特点及其所产胞外淀粉酶性质。[方法]从江苏省盐城市射阳盐场筛选得到1株极端嗜盐菌SYM菌株,对其进行形态、生理生化和分子水平的鉴定,并对其产生的淀粉酶部分酶学性质进行研究。[结果]SYM... [目的]研究极端嗜盐菌SYM菌株的形态和生理生化特点及其所产胞外淀粉酶性质。[方法]从江苏省盐城市射阳盐场筛选得到1株极端嗜盐菌SYM菌株,对其进行形态、生理生化和分子水平的鉴定,并对其产生的淀粉酶部分酶学性质进行研究。[结果]SYM菌株能在饱和NaCl浓度下生长,菌体细胞壁含有嗜盐古细菌特征性的甘油二醚衍生物,菌体形态为球状,菌落显橙红,经生理生化和16 SrD-NA基因序列同源性分析鉴定为嗜盐古细菌嗜盐深红菌属。SYM菌株淀粉酶最佳反应条件为1.15 mol/L NaCl、pH值7.0和温度70℃。NaCl浓度为2.65 mol/L时,酶活可以保持最高酶活的61%;80℃时,酶活可保持最高酶活的69%;pH值13.0时,酶活可保持最高酶活的76%。[结论]SYM菌株产生的淀粉酶是一种能耐受高盐高碱高温的极端酶。 展开更多
关键词 嗜盐菌 鉴定 淀粉酶 酶活
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产果胶酸裂解酶的耐盐碱性菌株分离及培养条件 被引量:7
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作者 赵庆新 《南京师大学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期89-93,共5页
从江苏省沿海滩涂国家丹顶鹤自然保护区盐碱土样中,分离得到一株果胶酸裂解酶产生菌ZQX8,经形态、生理生化特征和16SrDNA鉴定,初步鉴定为枯草芽孢杆菌.该株菌的最佳培养条件为37℃、pH6.5、0.1~0.25mol/LNaCl,但在pH7~9之间,0.5~1.0m... 从江苏省沿海滩涂国家丹顶鹤自然保护区盐碱土样中,分离得到一株果胶酸裂解酶产生菌ZQX8,经形态、生理生化特征和16SrDNA鉴定,初步鉴定为枯草芽孢杆菌.该株菌的最佳培养条件为37℃、pH6.5、0.1~0.25mol/LNaCl,但在pH7~9之间,0.5~1.0mol/LNaCl浓度下仍然能较好的生长,表现出一定的耐盐性和耐碱性.该菌分泌的胞外果胶酸裂解酶的最佳底物为果胶酸,在培养基中酶活达到4U/mL.该果胶酸裂解酶在40~60℃,pH8~10的碱性条件下酶活较高,在600mmol/LNaCl存在的条件下,也能保持较高的酶活,显示该酶具有一定的耐碱性和耐盐性. 展开更多
关键词 盐碱土 枯草芽孢杆菌 果胶酸裂解酶 耐盐性 耐碱性
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米曲霉(Aspergillus oryzae)果胶酸内切水解酶(PGA)在原核系统中重组表达 被引量:1
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作者 张宇玲 赵庆新 +3 位作者 朱泓 孙静 袁生 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期101-105,共5页
果胶酶具有广阔的商业用途,在食品工业上主要用于果汁和酒类的澄清、提高植物油的提取率、提高水果的硬度和植物纤维脱胶。米曲霉(Aspergillusoryzae)一直用于传统发酵食品的生产,自然条件下其果胶酶的产量较低。文献报道的果胶酶的重... 果胶酶具有广阔的商业用途,在食品工业上主要用于果汁和酒类的澄清、提高植物油的提取率、提高水果的硬度和植物纤维脱胶。米曲霉(Aspergillusoryzae)一直用于传统发酵食品的生产,自然条件下其果胶酶的产量较低。文献报道的果胶酶的重组表达成功的例子较少,且活性较低。通过RT-PCR的方法,获得不含信号肽的果胶酸内切水解酶A(polygalacturonaseA,PGA)的cDNA,PGAcDNA连入pET-28a(+)载体,构建pET-28a(+)-pga质粒。pET-28a(+)-pga转化Turner(DE3)placⅠ细胞,得到转化子pET-28a(+)-pga-Turner(DE3)placⅠ,首次实现了米曲霉PGA在大肠杆菌系统中过表达,进一步对PGA在大肠杆菌系统中表达的条件进行了研究。在37℃、220r/min条件培养pET-28a(+)-pga-Turner(DE3)placⅠ细胞,OD600至0·8左右时,用500μmol/Lisopropylβ-D-thiogalactogalactopyranoside(IPTG)进行诱导表达,在15℃和170r/min条件下继续培养24h,表达效果最好,相对于每毫升培养基而言,产酶可达到70u/mL,是米曲霉自然条件产酶量的87·5倍,远优于文献报道的重组表达的PGA酶活。 展开更多
关键词 米曲霉 果胶酸水解酶 大肠杆菌 原核表达
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