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环境因素对海水来源肠杆菌的生长影响及tetA 耐药基因的表达实验研究
1
作者 韦孟咪 梁枫 +5 位作者 胡高垚 周鹤 许士兰 林妍 吴纪贞 龙文芳 《预防医学论坛》 2019年第5期328-330,共3页
目的了解不同环境因素对肠杆菌科细菌生物量的影响和耐药基因的表达差异及环境因素对肠杆菌科细菌种群的影响,为探讨环境因素对肠杆菌科细菌的耐药表型及tetA的耐药影响机制提供依据。方法以野生型的肺炎克雷伯细菌为主要研究对象(大肠... 目的了解不同环境因素对肠杆菌科细菌生物量的影响和耐药基因的表达差异及环境因素对肠杆菌科细菌种群的影响,为探讨环境因素对肠杆菌科细菌的耐药表型及tetA的耐药影响机制提供依据。方法以野生型的肺炎克雷伯细菌为主要研究对象(大肠埃希氏菌为对比),经如下条件进行培养:盐度(0.00%、0.90%、1.80%、2.70%)、紫外处理(于无菌工作台30 W紫外灯处理时间为0、10、20、30 min),然后提取细菌总RNA、经反转录及Realtime-PCR,再根据2^(-ΔΔCt)计算tetA基因相对表达量。结果当盐度为中等浓度时(1.80%)基因tetA的表达量最大,且高盐度及高紫外照射时长(照射30 min)时,目的基因表达量相对较小;其中盐度及紫外培养的组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论该海洋来源的多重耐药肺炎克雷伯菌能耐一定盐度,但在高盐度和高紫外照射时长时细菌的tetA基因的表达受到一定的限制。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 肺炎克雷伯细菌 紫外线 盐度 定量PCR
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亚抑菌浓度抗生素对海水浴场来源肺炎克雷伯菌的接合及intI突变影响
2
作者 林彦伶 梁枫 +3 位作者 胡高垚 韦孟咪 许士兰 龙文芳 《中国卫生检验杂志》 CAS 2019年第4期389-392,399,共5页
目的探讨不同水环境介质及亚抑菌浓度抗生素对肺炎克雷伯菌的生长、耐药表型及抗性基因转移的影响。方法对海水浴场来源的肺炎克雷伯菌进行不同亚抑菌浓度的氧氟沙星、头孢他啶抗生素传代培养、运用DNAstar分析I类整合子(IntI)突变类型... 目的探讨不同水环境介质及亚抑菌浓度抗生素对肺炎克雷伯菌的生长、耐药表型及抗性基因转移的影响。方法对海水浴场来源的肺炎克雷伯菌进行不同亚抑菌浓度的氧氟沙星、头孢他啶抗生素传代培养、运用DNAstar分析I类整合子(IntI)突变类型及突变位点,以耐药菌为供体菌,EC600为受体菌进行耐青霉素、氧氟沙星的质粒接合实验。结果经亚抑菌浓度抗生素研究发现2种抗生素亚抑菌浓度海水与生理盐水传代培养下的细菌生物量均有明显差异。但头孢他啶亚抑菌浓度下,海水介质比生理盐水介质的影响大。传代培养240 h后,细菌耐药能力增强。亚抑菌浓度抗生素作用下耐药菌的IntI突变类型主要集中于氨基酸的缺失与插入,突变位点集中在262～273。此外,4株耐青霉素耐药基因肺炎克雷伯菌成功接合,接合效率分别是2.6×10^(-6)、4.2×10^(-6)、6.0×10^(-6)、3.6×10^(-6),1株氧氟沙星1/16mic亚抑菌浓度刺激下的肺炎克雷伯菌成功接合,接合效率是6.4×10^(-6)。结论亚抑菌浓度抗生素对肺炎克雷伯菌传代培养存在差异,有诱导自发性突变的可能;证明了耐药基因可伴随接合型质粒转移。 展开更多
关键词 亚抑菌浓度抗生素 I类整合子 突变 接合
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