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胶体金免疫层析技术在兽医临床中的应用 被引量：9
1
作者 张玉雪 伍钢 +2 位作者 韦佳塔 刘琪琦 陈海兰 《动物医学进展》 北大核心 2020年第6期120-123,共4页
胶体金免疫层析技术(GICA)是将胶体金作为示踪物应用于硝酸纤维素膜上,在特定位置发生抗原抗体特异性反应信号的一种快速检测技术,以简便快速、成本低廉、安全无毒、特异性强等优点广泛应用于兽医临床检测。论文首先总结了GICA在动物疾... 胶体金免疫层析技术(GICA)是将胶体金作为示踪物应用于硝酸纤维素膜上,在特定位置发生抗原抗体特异性反应信号的一种快速检测技术,以简便快速、成本低廉、安全无毒、特异性强等优点广泛应用于兽医临床检测。论文首先总结了GICA在动物疾病诊断和动物源性食品安全检验中的应用,然后综述了GICA新型标记材料和新技术的结合与应用,最后展望了GICA在兽医临床应用的发展趋势。 展开更多
关键词 胶体金 免疫层析 动物疾病 食品安全 快速检测
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高通量测序技术在兽医临床中的应用 被引量：5
2
作者 伍钢 韦佳塔 +3 位作者 张玉雪 陈海兰 刘琪琦 江明生 《畜牧与兽医》 北大核心 2021年第1期130-135,共6页
高通量测序技术可一次同时测定几十万到几百万条核酸分子序列,在兽医临床上已被应用到畜禽疾病诊断、疾病监测、致病机理研究、耐药性分析等相关工作中。本综述结合应用实例对高通量测序技术在兽医临床的研究进展进行系统阐述,总结了高... 高通量测序技术可一次同时测定几十万到几百万条核酸分子序列,在兽医临床上已被应用到畜禽疾病诊断、疾病监测、致病机理研究、耐药性分析等相关工作中。本综述结合应用实例对高通量测序技术在兽医临床的研究进展进行系统阐述,总结了高通量测序技术在兽医临床应用中的局限性和解决措施,并展望了高通量测序技术在兽医临床的应用前景。 展开更多
关键词 高通量测序 兽医临床 动物传染病 病原鉴定 耐药性
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牛呼吸道合胞体病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量：5
3
作者 韦佳塔 侯广争 +3 位作者 伍钢 张玉雪 陈海兰 刘琪琦 《畜牧与兽医》 北大核心 2020年第12期121-126,共6页
本研究旨在建立牛呼吸道合胞体病毒(bovine respiratory syncytial virus,BRSV)实时荧光定量PCR(RT-qPCR)快速检测方法。通过查阅中外相关文献,设计并筛选出一对引物用于特异性扩增BRSV核衣壳(N)蛋白基因片段。对该目的基因进行克隆和... 本研究旨在建立牛呼吸道合胞体病毒(bovine respiratory syncytial virus,BRSV)实时荧光定量PCR(RT-qPCR)快速检测方法。通过查阅中外相关文献,设计并筛选出一对引物用于特异性扩增BRSV核衣壳(N)蛋白基因片段。对该目的基因进行克隆和测序后通过体外转录技术制备cRNA,计算体系中RNA的浓度;分装后验证其重复性与稳定性,并借助数字PCR进行联合定值确定参考品的最终浓度;使用该BRSV参考品作为模板,设计引物和探针,通过反应条件的优化,建立了BRSV RT-qPCR快速检测方法,并对其灵敏度、特异性、稳定性和准确性进行评价。结果表明,制备的BRSV参考品定值结果为(1.11±0.04)×1011拷贝数/mL。所建立的RT-qPCR快速检测方法能有效鉴定BRSV核酸参考品,最低可检出病毒核酸104拷贝数/mL;与另外8种反刍动物病原均无非特异性扩增,特异性强;对临床样本检测的结果与测序结果一致性达100%。结果显示,本研究建立的BRSV RT-qPCR快速检测方法特异性强、灵敏度高,具有较大的临床应用价值。 展开更多
关键词 牛呼吸道合胞体病毒 核酸参考品 实时荧光定量PCR
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一种基于量子点免疫层析技术的轮状病毒检测方法 被引量：4
4
作者 伍钢 张玉雪 +2 位作者 韦佳塔 刘琪琦 陈海兰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1367-1373,共7页
轮状病毒感染主要引起婴幼儿腹泻和胃肠炎,每年可导致数百万人住院治疗,对轮状病毒的快速测定是及时制定针对性治疗方案的关键,但现有检测技术存在或操作繁琐、耗时长,或灵敏度低、无法定量的问题。本研究将羧基化量子点微球与轮状病毒... 轮状病毒感染主要引起婴幼儿腹泻和胃肠炎,每年可导致数百万人住院治疗,对轮状病毒的快速测定是及时制定针对性治疗方案的关键,但现有检测技术存在或操作繁琐、耗时长,或灵敏度低、无法定量的问题。本研究将羧基化量子点微球与轮状病毒标记抗体Ab2偶联制备荧光标签,并喷涂在结合垫上,以轮状病毒捕获抗体Ab1和羊抗鼠IgG包被硝酸纤维素膜(nitrocellulose membrane,NC膜)分别作为检测线和质控线,将样品垫、结合垫、NC膜和吸水纸组装到PVC底板上,并切割成3 mm宽的试纸条。采用轮状病毒抗原检测国家参考品和临床样本,对所制备试纸条的特异性、灵敏度、稳定性和有效性进行考察。试纸条最低检测限为86.46 pg/mL,与柯萨奇病毒A16型、肠道腺病毒71型、大肠杆菌、副伤寒甲型沙门氏菌、副伤寒乙型沙门氏菌、副伤寒丙型沙门氏菌、痢疾志贺氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌及金黄色葡萄球菌均无交叉反应,常温保存2个月未造成其灵敏度和特异性下降,检测临床样本的结果与商品化胶体金试纸条方法符合率为100%。本研究所建立的量子点免疫层析方法灵敏度高、特异性强、操作方便、结合便携式荧光检测设备可实现定量分析,可用于粪便等样本中轮状病毒的快速和定量检测。 展开更多
关键词 量子点 免疫层析 轮状病毒 快速检测 定量分析
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