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冬凌草甲素对急性肺损伤小鼠肺组织炎症的抑制作用及相关机制研究 被引量：4
1
作者 郭民 高继萍 +5 位作者 张瑞虎 景志杰 史泽雅 侯佳楠 霍怡彤 陈朝阳 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期441-445,共5页
目的研究冬凌草甲素(oridonin)对急性肺损伤(ALI)小鼠的抗炎作用及其机制。方法将24只Balb/c雄性小鼠随机分为4组:对照组、模型组、冬凌草甲素组和地塞米松(DEX)组,每组6只。小鼠腹腔注射冬凌草甲素(10 mg·kg^(-1))或地塞米松(5 mg... 目的研究冬凌草甲素(oridonin)对急性肺损伤(ALI)小鼠的抗炎作用及其机制。方法将24只Balb/c雄性小鼠随机分为4组:对照组、模型组、冬凌草甲素组和地塞米松(DEX)组,每组6只。小鼠腹腔注射冬凌草甲素(10 mg·kg^(-1))或地塞米松(5 mg·kg^(-1))1 h后,鼻内滴注脂多糖(0.5 mg·kg^(-1))作用12 h诱导急性肺损伤,设为冬凌草甲素组和地塞米松组;模型组小鼠仅鼻内滴注脂多糖作用12 h,建立急性肺损伤模型;对照组仅鼻内滴注等剂量生理盐水。采用HE染色检测肺组织病理损伤;酶联免疫吸附(ELISA)法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6;Western Blot法检测肺组织核因子κB(NF-κB)p65、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)相关蛋白质(ERK、p38和JNK)磷酸化。结果与对照组比较,模型组肺组织出现明显病理损伤,中性粒细胞和巨噬细胞浸润增多(P<0.01);与模型组比较,冬凌草甲素组和地塞米松组小鼠肺组织中性粒细胞和巨噬细胞浸润减少(P<0.05)。与对照组比较,模型组支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β和IL-6含量增加(P<0.01);与模型组比较,冬凌草甲素组和地塞米松组小鼠支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β和IL-6含量减少(P<0.01)。与对照组比较,模型组肺组织磷酸化的p65、ERK、p38和JNK增多(P<0.01);与模型组比较,冬凌草甲素组和地塞米松组肺组织磷酸化的p65、ERK、p38和JNK减弱(P<0.05,P<0.01)。结论冬凌草甲素可减轻急性肺损伤小鼠肺组织炎症反应,其作用机制与抑制NF-κB和MAPK信号通路有关。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 急性肺损伤 抑制 炎症因子 核因子κB(NF-κB) 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK) 小鼠
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中国地鼠26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基13的表达鉴定及生物信息学分析 被引量：1
2
作者 郭民 原梦 +6 位作者 秦轲茹 霍怡彤 王文桃 杜凯艳 张瑞虎 王海龙 陈朝阳 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第2期15-21,共7页
目的鉴定26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基13(PSMD13)在Ⅱ型糖尿病中国地鼠的表达及对其理化性质、信号肽、亚细胞定位、功能结构域等进行分析,为深入研究其功能提供理论依据。方法荧光定量PCR法检测PSMD13 mRNA在中国地鼠和糖尿病地鼠肝、... 目的鉴定26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基13(PSMD13)在Ⅱ型糖尿病中国地鼠的表达及对其理化性质、信号肽、亚细胞定位、功能结构域等进行分析,为深入研究其功能提供理论依据。方法荧光定量PCR法检测PSMD13 mRNA在中国地鼠和糖尿病地鼠肝、骨骼肌、脂肪和小肠组织的表达;PSMD13氨基酸序列从NCBI网站下载,氨基酸同源性分析采用DNAman软件;PSMD13蛋白的理化性质分析采用Prot Param在线工具;PSMD13蛋白的亲疏水性、信号肽、亚细胞定位采用Prot Scale软件分析;PSMD13蛋白结构域、二级结构分别采用Conserved Domain数据库和SOPMA工具分析;PSMD13蛋白质的互作蛋白及功能网络采用STRING数据库分析。结果RT-qPCR结果显示PSMD13 mRNA在糖尿病地鼠脂肪组织中表达下降;PSMD13位于中国地鼠第3号染色体,含有13个外显子,相对分子质量为42942.48,含有378个氨基酸残基;PSMD13理论等电点为6.1,属酸性蛋白;其与小鼠、大鼠、果蝇、猩猩和人PSMD13的氨基酸序列同源性高达97.78%;PSMD13蛋白质无信号肽、无跨膜结构,主要位于细胞质中;PSMD13蛋白质羧基端含有一个PCI结构域,与PSMD7、PSMD8、PSMA3、PSMC1和USP14等相互作用,参与泛素依赖性蛋白质分解代谢过程。结论PSMD13在糖尿病中国地鼠脂肪组织中表达下降,该蛋白质在进化上高度保守,参与蛋白质的蛋白酶体降解途径,其表达下调可能参与糖尿病的发生发展。 展开更多
关键词 中国地鼠 Ⅱ型糖尿病 26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基13蛋白质 生物信息学
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液相色谱-质谱联用鉴定抗菌肽Cbf-14凝胶的有关物质 被引量：1
3
作者 霍怡彤 徐柯卉 +4 位作者 陆宇婷 马菱蔓 周长林 杭太俊 宋敏 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期591-598,共8页
多肽Cbf-14是由14个氨基酸组成的新型抗菌肽。采用优化的反相高效液相色谱-电喷雾正离子化-四极杆飞行时间串联质谱(LC-ESI-QTOF/MS)检测方法,Agilent ZORBAX SB-Phenyl(150 mm×4.6 mm,3.5μm)色谱柱,以乙腈-20 mmol/L甲酸铵水溶液... 多肽Cbf-14是由14个氨基酸组成的新型抗菌肽。采用优化的反相高效液相色谱-电喷雾正离子化-四极杆飞行时间串联质谱(LC-ESI-QTOF/MS)检测方法,Agilent ZORBAX SB-Phenyl(150 mm×4.6 mm,3.5μm)色谱柱,以乙腈-20 mmol/L甲酸铵水溶液(甲酸调节pH为3.0)为流动相进行梯度洗脱,对Cbf-14凝胶中的有关物质进行了分离鉴定。在所建立的分析条件下,Cbf-14及其有关物质分离良好,检测并鉴定出Cbf-14凝胶及其强制降解试验样品中24个主要有关物质,其中5个为制剂生产工艺杂质,19个为降解产物,分析了有关物质的来源和多肽制剂的稳定性,为其生产工艺优化、贮存条件制定和质量控制提供了参考依据。 展开更多
关键词 抗菌肽Cbf-14凝胶 有关物质 结构鉴定 液相色谱-质谱联用
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他克莫司胶囊在健康人体内药动学一致性的预评估
4
作者 付晓婷 姜净 +3 位作者 霍怡彤 宋敏 尹莉芳 杭太俊 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期613-618,共6页
目的:建立人全血中他克莫司浓度的LC-MS/MS测定法,并用于他克莫司胶囊受试或参比药物在中国健康男性中单剂量空腹给药的一致性预评估。方法:采用单剂量给药,四周期、双序列、完全重复交叉、参比药物校正的平均生物等效性实验(RSABE)设计... 目的:建立人全血中他克莫司浓度的LC-MS/MS测定法,并用于他克莫司胶囊受试或参比药物在中国健康男性中单剂量空腹给药的一致性预评估。方法:采用单剂量给药,四周期、双序列、完全重复交叉、参比药物校正的平均生物等效性实验(RSABE)设计,12名健康受试者单剂量交叉口服1 mg他克莫司胶囊受试或参比药物后,0~120 h内间隔取血,对全血提取富集后测定他克莫司血药浓度,用WinNonlin7.0软件计算药动学参数并进行一致性预评估。结果:2次服用参比药物后主要药动学参数Cmax、AUC0-τ、AUC0-∞个体内标准差均>0.294,用RSABE的判断标准,参比药物与受试药物主要药代动力学参数Cmax、AUC0-τ、AUC0-∞的单侧95%置信区间上限(critbound)≤0,几何均数比值(GMR)点估计值(pointest)不超过0.80~1.25。故可以判定他克莫司胶囊受试与参比药物具有生物等效应。结论:建立的LC-MS/MS法准确灵敏度高,可用于他克莫司胶囊的药代动力学研究和临床一致性的评价。 展开更多
关键词 他克莫司胶囊 大环内酯类免疫抑制剂 液相色谱-串联质谱法 药代动力学 临床一致性 参比药物校正的平均生物等效性
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莲心碱通过抑制NF-κB激活Nrf2/HO-1通路发挥抗炎抗氧化作用 被引量：4
5
作者 张锐虎 姚茹 +4 位作者 史泽雅 郭民 霍怡彤 侯佳楠 陈朝阳 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期191-197,共7页
目的 探讨莲心碱(liensinine, lie)在脂多糖(lipid polysaccharides, lPS)诱导的RAW264.7细胞炎症模型中的抗炎抗氧化作用机制。方法 将细胞分为对照组(Control group),LPS组(LPS group),莲心碱(0.5、1、2μmol/L)组。采用CCK-8法筛选... 目的 探讨莲心碱(liensinine, lie)在脂多糖(lipid polysaccharides, lPS)诱导的RAW264.7细胞炎症模型中的抗炎抗氧化作用机制。方法 将细胞分为对照组(Control group),LPS组(LPS group),莲心碱(0.5、1、2μmol/L)组。采用CCK-8法筛选莲心碱的无细胞毒性浓度,Griess法检测一氧化氮(NO)的浓度,酶联免疫法(ELISA)检测前列腺素2(PGE2)的浓度以及促炎因子(TNF-α、IL-6和IL-1β)的含量、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测COX-2和iNOS mRNA的表达,DCFH-DA探针检测细胞中活性氧(ROS)含量,试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量,蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测NF-κB、MAPK和Nrf2/HO-1通路中关键蛋白的表达情况。结果 0~4μmol/L莲心碱对细胞活力无影响,与LPS组相比,莲心碱组(0.5、1、2μmol/L)细胞中的促炎因子含量下降(P<0.05),NO和PGE2浓度下降(P<0.05),COX-2和iNOS mRNA表达降低(P<0.05),NF-κB和MAPK通路被抑制(P<0.05),且具有剂量依赖性,莲心碱处理后ROS和MDA的含量显著低于LPS组(P<0.01),SOD的活性和GSH的含量显著高于LPS组(P<0.01),Nrf2/HO-1通路活性也较于LPS组显著增加(P<0.05)。结论 莲心碱通过抑制NF-κB和MAPK通路与激活Nrf2/HO-1通路发挥抗炎抗氧化作用。 展开更多
关键词 莲心碱 脂多糖 RAW264.7巨噬细胞 炎症 氧化应激
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