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热毒宁注射液、参附注射液联合吉非替尼对非小细胞肺癌细胞增殖、干性特征及代谢的影响 被引量：5
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作者 肖真真 朱燕娟 +7 位作者 余娅娅 丁丽娜 马长菊 雷尘静 刘译鸿 常雪松 陈亚栋 张海波 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第18期45-53,共9页
目的:选用以清热为主的热毒宁注射液,以温阳为主的参附注射液,对比观察清热、温阳两个相反治则中药联合吉非替尼对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡、干性特征及代谢的影响。方法:选用不同的非小细胞肺癌细胞株,分别用吉非替尼(5、10、20μmo... 目的:选用以清热为主的热毒宁注射液,以温阳为主的参附注射液,对比观察清热、温阳两个相反治则中药联合吉非替尼对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡、干性特征及代谢的影响。方法:选用不同的非小细胞肺癌细胞株,分别用吉非替尼(5、10、20μmol·L-1)、热毒宁注射液(0.6%、0.9%)、参附注射液(0.6%、0.9%)、吉非替尼联合热毒宁注射液、吉非替尼联合参附注射液干预,采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测各组细胞的增殖情况;利用流式细胞术检测细胞的凋亡情况;运用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺癌干细胞标志物性别决定区Y框蛋白2(Sox2)、乙酰脱氢酶家族成员A1(ALDH1A1)mRNA及蛋白表达水平;采用飞秒激光无标记影像(FLI)技术检测肺癌细胞氧化还原比,运用能量代谢仪检测细胞的糖酵解水平。结果:与空白组比较,热毒宁注射液能降低肺癌细胞存活率(P<0.05),提高细胞凋亡率(P<0.05),下调干细胞标志物Sox2和ALDH1A1 mRNA及蛋白表达水平(P<0.05)、上调细胞的氧化还原比(P<0.05),而参附注射液对细胞存活率、细胞凋亡率、Sox2和ALDH1A1的mRNA、蛋白表达水平及细胞氧化还原比的影响差异无统计学意义。与吉非替尼单药比较,热毒宁注射液联合吉非替尼可明显抑制肺癌细胞存活率(P<0.05),促进肺癌细胞凋亡(P<0.05),下调干细胞标志物Sox2和ALDH1A1 mRNA及蛋白表达水平(P<0.05),上调细胞氧化还原比(P<0.05),下调细胞糖酵解质子流出速率(P<0.05),参附注射液联合吉非替尼对肺癌细胞的增殖、凋亡、干细胞标志物的表达水平、细胞氧化还原比及细胞糖酵解水平影响差异无统计学意义。结论:清热中药热毒宁注射液可能通过调控肿瘤细胞的代谢,抑制其干性特征来增强吉非替尼对肺癌细胞的增殖抑制和促凋亡作用,温阳中药参附注射液对吉非替尼无明显的� 展开更多
关键词 热毒宁注射液 参附注射液 吉非替尼 非小细胞肺癌(NSCLC) 干性特征 代谢
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知母、干姜对PI3K/AKT通路异常激活介导的非小细胞肺癌吉非替尼耐药的影响及机制研究 被引量：1
2
作者 余娅娅 朱燕娟 +7 位作者 肖真真 马长菊 丁丽娜 雷尘静 刘译鸿 常雪松 陈亚栋 张海波 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1525-1533,共9页
目的以知母、干姜分别作为清热和温阳治则的代表中药,联合表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)代表药物吉非替尼,探索寒、热不同药性中药对PI3K/AKT通路异常激活介导的非小细胞肺癌(NSCLC)耐药细胞生长及代谢的影响。方法采用... 目的以知母、干姜分别作为清热和温阳治则的代表中药,联合表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)代表药物吉非替尼,探索寒、热不同药性中药对PI3K/AKT通路异常激活介导的非小细胞肺癌(NSCLC)耐药细胞生长及代谢的影响。方法采用三维(3D)法培养PC-9-PIK3CA-Mutation(PC-9-PIK3CA-M,EGFR 19外显子突变合并PIK3CA突变)细胞和H1650(EGFR突变合并PTEN缺失)细胞,作为PI3K/AKT通路异常活化导致的EGFR-TKIs(吉非替尼)耐药模型。NSCLC-3D细胞分组:对照组、知母组、干姜组、吉非替尼组、吉非替尼+知母组、吉非替尼+干姜组。知母、干姜冻干粉浓度均为3200μg·mL^(-1),吉非替尼浓度为20μmol·L^(-1),干预24 h。采用ATP法检测细胞活性;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况;活性氧(ROS)荧光探针法检测细胞ROS水平。结果(1)在PC-9-PIK3CA-M-3D和H1650-3D细胞中,与对照组比较,10~80μmol·L^(-1)吉非替尼能显著抑制细胞活力(P<0.01);与吉非替尼组比较,吉非替尼+知母能显著抑制细胞活力(P<0.01),吉非替尼+干姜能显著促进细胞活力(P<0.05,P<0.01)。知母能协同促进吉非替尼的抗肿瘤作用,而干姜则拮抗吉非替尼的抗肿瘤作用。(2)在PC-9-PIK3CA-M-3D细胞中,与对照组比较,吉非替尼对细胞凋亡无显著影响(P>0.05),吉非替尼+知母能显著促进细胞凋亡(P<0.01),而吉非替尼+干姜能显著抑制细胞凋亡(P<0.05);与吉非替尼组比较,吉非替尼+知母能显著促进细胞凋亡(P<0.01)。在H1650-3D细胞中,与对照组比较,吉非替尼和吉非替尼+干姜对细胞凋亡无显著影响(P>0.05),吉非替尼+知母可显著促进细胞凋亡(P<0.01);与吉非替尼组比较,吉非替尼+知母可显著促进细胞凋亡(P<0.01)。(3)在PC-9-PIK3CA-M-3D细胞中,与对照组比较,吉非替尼组细胞线粒体ROS水平明显降低(P<0.05);在H1650-3D细胞中,与对照组比较,吉非替尼组细胞线粒体ROS水平无明显变化(P>0.05)。在PC-9- 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 吉非替尼 耐药 PI3K/AKT通路 知母 干姜 活性氧
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