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几种新的蝎毒神经毒素的纯化及它们某些性质和结构的初步研究 被引量:5
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作者 胡纫秋 王森 +1 位作者 刘建宁 雷克 《Zoological Research》 CAS CSCD 1989年第3期185-193,共9页
经Sephadex G-50和Sp-Sephadex C-25两次柱层析,从山东马氏钳蝎(Buthus martensi Karsch)粗毒中分离纯化得到8种哺乳动物神经毒(BmK Ⅰ-Ⅷ)和一种甲壳动物神经毒(CT)。纯度鉴定表明它们在聚丙烯酰胺凝胶电泳和等电聚焦电泳时均呈现一条... 经Sephadex G-50和Sp-Sephadex C-25两次柱层析,从山东马氏钳蝎(Buthus martensi Karsch)粗毒中分离纯化得到8种哺乳动物神经毒(BmK Ⅰ-Ⅷ)和一种甲壳动物神经毒(CT)。纯度鉴定表明它们在聚丙烯酰胺凝胶电泳和等电聚焦电泳时均呈现一条主带。除BmK Ⅳ外,其等电点在7.9—9.1之间,但BmK Ⅳ呈酸性,其等电点为5.3。SDS-PAGE测得它们的分子量为6000—8000。哺乳动物神经毒的氨基酸组成中Asp的含量较多,而不含Met,CT的氨基酸组成中Gly的含量高于Asp,且含Met,但缺乏Ile和Val。 Bmk Ⅲ和Bmk Ⅳ的N端部分序列比较,发现N端序列具有较强的保守性,15个残基中相同的残基占60%,各组份的CD谱显示它们的主链构象很相似,主要二级结构是β折迭,不含或含较少α-螺旋。 展开更多
关键词 蝎毒 神经毒素 纯化
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马氏钳蝎毒昆虫类神经毒素的分离、纯化及性质研究 被引量:4
2
作者 董北 胡纫秋 +4 位作者 王锦兰 雷克 罗林儿 程会文 周培爱 《生物化学杂志》 CSCD 1989年第5期467-473,共7页
经Sephadex G-50,sp-Sephadex C-25二步柱层析法,从山东马氏钳蝎(Bu-thus martensii Karch)粗毒中分离出四种对美洲(虫非)蠊有强直麻痹反应的毒性蛋白组份。其中二个组分在SDS聚丙烯酰胺电泳和等电聚焦电泳上均呈现单一区带,命名为BmK ... 经Sephadex G-50,sp-Sephadex C-25二步柱层析法,从山东马氏钳蝎(Bu-thus martensii Karch)粗毒中分离出四种对美洲(虫非)蠊有强直麻痹反应的毒性蛋白组份。其中二个组分在SDS聚丙烯酰胺电泳和等电聚焦电泳上均呈现单一区带,命名为BmK IT-Ⅰ,BmK IT-Ⅱ其pI分别为8.2和8.4,分子量分别为8400和7560。同时还分析了二个组份的氨基酸组成。经DABITC/PITC双偶合法测定了BmKIT-Ⅰ和BmK IT-Ⅱ的N端部份氨基酸排列顺序,它们分别为H_2NVal.Arg.Asp.Ala……H_2NVal.Arg.Asp.Gly……。 电生理学研究表明,纯化的BmK IT-I(1×10^(-5)g/ml)对(虫非)蠊腹Ⅵ神经节的突触传递有阻断作用,阻断后用生理溶液洗,则突触传递可恢复。从同一蝎毒粗毒中分离纯化的哺乳动物类神经毒素BmKⅢ在浓度高出100倍(1×10^(-3)g/ml)时也可以阻断(虫非)蠊腹Ⅵ神经节的突触传递,但用生理溶液冲洗没有观察到恢复。 展开更多
关键词 蝎毒 昆虫类神经毒素 纯化
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金环蛇(Bungarus fasciatus)蛇毒类心脏毒素的纯化及生化分析 被引量:2
3
作者 肖昌华 张洪基 雷克 《Zoological Research》 SCIE CAS 1981年第1期49-54,共6页
金环蛇(Bungarus fasciatus)蛇毒经磷酸纤维素P11柱层析分离所得的第8峰(即类心脏毒素),再经磺乙基—葡聚糖凝胶G—25柱层析分离得8A、8B。再将8A、8B分别经葡聚糖凝胶G—50柱层析,得纯化的类心脏毒素A、B。经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为... 金环蛇(Bungarus fasciatus)蛇毒经磷酸纤维素P11柱层析分离所得的第8峰(即类心脏毒素),再经磺乙基—葡聚糖凝胶G—25柱层析分离得8A、8B。再将8A、8B分别经葡聚糖凝胶G—50柱层析,得纯化的类心脏毒素A、B。经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单一的条带。无酶活性。其氨基酸组成及含量基本与Shiau Lin 1975等所测定的结果一致。 展开更多
关键词 心脏毒素 葡聚糖凝胶 柱层析分离 生化分析 蛇毒类 金环蛇 聚丙烯酰胺凝胶电泳 的纯化
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眼镜王蛇(Ophiophagus hannah)蛇毒四个神经毒组份的纯化和某些性质的研究 被引量:2
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作者 孙欣 杨长久 +1 位作者 陈锡兰 雷克 《Zoological Research》 SCIE CAS 1981年第4期363-370,共8页
根据前文报导的方法(蔡景霞等人,1980),用羧甲基纤维素葡聚糖凝胶C25分离我国广西眼镜王蛇(Ophiophasus hannah)蛇毒,获得十七个蛋白组份。其中组份7、8、9和11蛋白回收率比较高,且具有明显的抗去极化神经肌肉阻遏作用。由于它们还含有... 根据前文报导的方法(蔡景霞等人,1980),用羧甲基纤维素葡聚糖凝胶C25分离我国广西眼镜王蛇(Ophiophasus hannah)蛇毒,获得十七个蛋白组份。其中组份7、8、9和11蛋白回收率比较高,且具有明显的抗去极化神经肌肉阻遏作用。由于它们还含有磷酸单酯酶,磷酸二酯酶,5’—核苷酸酶和核糖核酸酶等酶活性,我们进一步用羧甲基纤维素CM32和葡聚糖凝胶G50纯化了组份7、8、9和11。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,它们均为单一条带,且具有神经肌肉阻遏作用,没有磷酸单酯酶等酶活性。随后测定了它们的氨基酸组成和N—末端氨基酸。根据离体大白鼠膈神经膈肌标本和去神经大白鼠膈肌标本实验和氨基酸组成测定结果表明,眼镜王蛇毒似乎既含长链神经毒也含短链神经毒,它们的作用部位是在神经肌肉突触后膜,对突触前膜没有影响,都是突触后神经毒素。 展开更多
关键词 突触前膜 作用部位 羧甲基纤维素 眼镜王蛇 神经毒 神经肌肉 核糖核酸酶 磷酸二酯酶
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东亚马氏钳蝎(Buthus martensi Karsch)神经毒素组分BmK Ⅲ的激光拉曼光谱研究 被引量:1
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作者 朱敏 胡纫秋 雷克 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第2期121-125,共5页
毒素BmKⅢ是从马氏钳蝎毒液中提取的一个毒性最强的α类神经毒素.从该组分的水溶液和重水溶液拉曼光谱(450—1750cm^(-1))的分析,可以确定其分子的二级结构中以β折迭为主,有较大量的β回折结构和一定数量的无规卷曲,α螺旋不多.采用Lip... 毒素BmKⅢ是从马氏钳蝎毒液中提取的一个毒性最强的α类神经毒素.从该组分的水溶液和重水溶液拉曼光谱(450—1750cm^(-1))的分析,可以确定其分子的二级结构中以β折迭为主,有较大量的β回折结构和一定数量的无规卷曲,α螺旋不多.采用Lippert提出的线性方程组法计算得到分子中含β折迭41.7%,α螺旋17.7%,无规卷曲40.6%.分子中的四对二硫键均为gauche—gauche—gauche构型.侧链芳香性氨基酸残基大多数暴露在分子表面.文中对有有关毒素构象方面的问题进行了讨论. 展开更多
关键词 钳蝎 神经毒素 激光拉曼光谱
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长效胰岛素的分子设计研究 被引量:1
6
作者 王大成 曾宗浩 +2 位作者 叶元杰 雷克 王家槐 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第4期601-609,共9页
以工程化制备由分子内在因素制导的可溶性长效胰岛素为目标,提出以“增加次级键,稳化寡聚体”原理,用以减缓注射进入体内的胰岛素六聚体的解聚速率,形成能持续供应胰岛素单体的“库”,从而获得长效作用。据此以精确的胰岛素三维结构为基... 以工程化制备由分子内在因素制导的可溶性长效胰岛素为目标,提出以“增加次级键,稳化寡聚体”原理,用以减缓注射进入体内的胰岛素六聚体的解聚速率,形成能持续供应胰岛素单体的“库”,从而获得长效作用。据此以精确的胰岛素三维结构为基础,进行了分子设计和计算机模拟,提出了对胰岛素的B链c端和N端修饰产生长效性的分子改造方案,重点分析了B2Lys/Arg和B31Lys/Arg胰岛素。用化学半合成制备的上列二种胰岛素,生物学测试表明确有长效性。2埃分辨率B31-Arg人胰岛素晶体结构的测定显示了Arg-B31与相邻分子Glu-B21间存在一对附加氢键作为长效效应的主要结构基础,证实分子设计思想的基本正确性。 展开更多
关键词 长效胰岛素 分子设计 计算机模拟
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东亚马氏钳蝎哺乳动物类神经毒素Ⅲ的快原子轰击酶谱分析 被引量:1
7
作者 张海鹰 王光辉 雷克 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1991年第12期1493-1496,共4页
应用快原子轰击酶谱分析检验了东亚马氏钳蝎哺乳动物类神经毒素Ⅲ的氨基酸序列,对前人用 Edman 降解法测定的序列作了两处修正:(1)第60位氨基酸残基是脯氨酸而不是色氨酸;(2)(?)-端氨基酸是组氨酸而不是甘氨酸.分别用羧肽酶 B 降解和部... 应用快原子轰击酶谱分析检验了东亚马氏钳蝎哺乳动物类神经毒素Ⅲ的氨基酸序列,对前人用 Edman 降解法测定的序列作了两处修正:(1)第60位氨基酸残基是脯氨酸而不是色氨酸;(2)(?)-端氨基酸是组氨酸而不是甘氨酸.分别用羧肽酶 B 降解和部分胰蛋白酶酶解后的质谱数据进一步证实了以上的修正.在分析中采用了化学修饰方法以减少表面抑制效应,从而得到完整的快原子轰击酶谱. 展开更多
关键词 蝎毒神经毒素 氨基酸序列 FAB酶谱
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一种长效胰岛素的分子设计和目标产品制备 被引量:1
8
作者 许文清 曾宗浩 +2 位作者 雷克 王家槐 王大成 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期142-150,共9页
按照“增加次级键,稳化寡聚体”以产生长效性的分子设计原理,以精确的胰岛素三维结构为基础,通过计算机模拟提出对残基B2-Val→Lys/Arg的分子改造方案,并预测它能在不影响生物活力的条件下产生长效效应。在此基础上,用化学半合成的方法... 按照“增加次级键,稳化寡聚体”以产生长效性的分子设计原理,以精确的胰岛素三维结构为基础,通过计算机模拟提出对残基B2-Val→Lys/Arg的分子改造方案,并预测它能在不影响生物活力的条件下产生长效效应。在此基础上,用化学半合成的方法制备了目标产品desB1-LysB2胰岛素,并进行了产物活力和基本性质测定。结果表明,与天然胰岛素相比较,该目标产品保有基本的降血糖生物活力(82%),表现出显著的长效效应。 展开更多
关键词 长效胰岛素 分子设计 胰岛素
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长效胰岛素研究(Ⅰ):分子设计和目标产品制备
9
作者 王大成 曾宗浩 +1 位作者 雷克 许文清 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1992年第5期5-9,共5页
关键词 长效胰岛素 分子设计 糖尿病
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分子生物学
10
作者 雷克 《生命科学》 CSCD 1989年第5期5-9,共5页
(一) 分子生物学在现代生命科学中的地位和作用生命运动是物质运动的最高级形式。人类长期以来不断研究探索生命运动的本质和规律,这方面知识的积累和充实形成了生物学。早期的生物学研究较偏重于宏观的描述。随着研究工作的进展,特别... (一) 分子生物学在现代生命科学中的地位和作用生命运动是物质运动的最高级形式。人类长期以来不断研究探索生命运动的本质和规律,这方面知识的积累和充实形成了生物学。早期的生物学研究较偏重于宏观的描述。随着研究工作的进展,特别是现代物理、化学等概念和技术的渗透,生物学研究日益从宏观发展到微观,从现象深入到本质,从结构联系到功能。 展开更多
关键词 生命运动 带头学科 最高级形式 分子生物 现代物理 结构联系 生物大分子结构 分子动力学 生物膜 序列分析
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眼镜王蛇(OPhiophagus hannah)毒中L-氨基酸氧化酶的分离纯化和理化性质的研究
11
作者 雷克 胡纫秋 王锦兰 《Zoological Research》 SCIE CAS 1981年第S01期43-50,共8页
本文报道了眼镜王蛇毒中L-氨基酸氧化酶的纯化及某些性质。从眼镜王蛇毒中所分离L-氨基酸氧化酶在比活力及同王酶谱方面与从其他蛇毒来源的L-氨基酸氧化酶存在显著不同。 聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示该酶是均一的。根据梯度聚丙烯酰胺... 本文报道了眼镜王蛇毒中L-氨基酸氧化酶的纯化及某些性质。从眼镜王蛇毒中所分离L-氨基酸氧化酶在比活力及同王酶谱方面与从其他蛇毒来源的L-氨基酸氧化酶存在显著不同。 聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示该酶是均一的。根据梯度聚丙烯酰胺平板凝胶电泳测定其全酶分子量约为1.5×10^(5)道尔顿。在S、D、S梯度聚丙烯酰胺凝酸电泳上测得其分子量为7.3×10^(4)道尔顿。表明该酶是由相同分子量的二个亚基组成。紫外吸收光谱显示每个酶含2个FAD辅基。 展开更多
关键词 眼镜王蛇毒 紫外吸收光谱 道尔顿 聚丙烯酰胺 凝胶电泳
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STUDIES ON THE AMINO ACID SEQUENCE AND MOLECULAR EVOLUTION OF MAMMAL NEUROTOXIN Ⅲ FROM THE EAST-ASIA SCORPION (Buthus marttensii KARCH)
12
作者 刘建宁 杨端 雷克 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1988年第18期1571-1572,共2页
The neurotoxins from scorpions are one kind of low molecular toxic proteins which can bind with sodium channels of excitable membranes. They have aroused intense scientific interest because of the potential use of sco... The neurotoxins from scorpions are one kind of low molecular toxic proteins which can bind with sodium channels of excitable membranes. They have aroused intense scientific interest because of the potential use of scorpion toxins as tools for neurobiological studies. We reported previously the isolation and purification of neurotoxins of scorpion venom which was collected from Yidu region, Shandong Province, (Bi- 展开更多
关键词 Shandong purification isolation EAST ACID VENOM INTENSE finished residues drift
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