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血小板膜仿生纳米载体的制备和表征及其体外跨胎盘屏障转运效率研究
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作者 胡丹慧 潘玉雪 +6 位作者 王鹏 焦振娜 万国运 王海蛟 随俊慧 唐红波 陈红丽 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期321-327,共7页
利用血小板膜(PM)包覆聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒(PLGA NPs),制备成血小板膜仿生纳米粒(P-PLGA NPs)作为药物载体,评价载体的体外跨胎盘屏障转运效率。分别通过超声复合法、物理共挤法和共价连接法制备P-PLGA NPs。利用粒径仪、透射... 利用血小板膜(PM)包覆聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒(PLGA NPs),制备成血小板膜仿生纳米粒(P-PLGA NPs)作为药物载体,评价载体的体外跨胎盘屏障转运效率。分别通过超声复合法、物理共挤法和共价连接法制备P-PLGA NPs。利用粒径仪、透射电镜、能谱仪、SDS-PAGE和Elisa对P-PLGA NPs的理化特性表征,确定最优的制备方法。MTT法考察纳米载体对人绒毛膜癌细胞(BeWo b30)的毒性;流式细胞术探究BeWo b30摄取纳米载体的途径;利用Transwell构建体外胎盘屏障模型,考察纳米载体体外跨胎盘屏障效率。结果显示,PLGA NPs粒径为(174.1±23.4)nm,电势为(-32.3±5.6)mV,PM电势为(-24.5±1.8)mV;超声复合法、物理共挤法和共价连接法制备的P-PLGA NPs粒径分别为(269.1±32.9)、(425.0±36.6)、(823.4±73.1)nm,电势分别为(-24.1±3.8)、(-26.4±2.3)、(-23.5±2.9)mV,均显著高于PLGA NPs(P<0.05),接近PM电势;表面膜蛋白条带完整且均有特异性蛋白标志物P-选择素存在,初步证明血小板膜成功包覆在PLGA NPs表面。纳米载体在10~1000μg/mL浓度范围内,细胞存活率为90.5%~105.0%,和对照组相比差异无统计学意义,表明载体对细胞无明显毒性;与对照组相比,PLGA NPs组制霉素(NY)摄取抑制率为53%,P-PLGA NPs组阿米洛利(AMR)摄取抑制率为45%,初步证实摄取途径分别为小窝蛋白介导的内吞途径和巨胞饮途径。在胎盘屏障模型中,上室给药浓度为5和20μg/mL时,PLGA NPs转运效率分别高出P-PLGA NPs 1.6%和24.3%;上室给药浓度为100μg/mL时,P-PLGA NPs转运效率高出PLGA NPs 13.8%。研究表明,超声复合法制备的P-PLGA NPs粒径较小,分散均匀;增加纳米载体浓度,P-PLGA NPs跨胎盘屏障转运效率增高。 展开更多
关键词 血小板 仿生 纳米载体 聚乳酸-羟基乙酸共聚物 胎盘屏障
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