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基于有益微生物的对虾养殖应用研究 被引量：1
1
作者 陶思锐 《南方农机》 2019年第6期52-52,54,共2页
随着对虾养殖规模的不断扩大,不少问题开始显现。研究发现,有益微生物在对虾养殖过程中可以起到很好的作用。文章主要介绍5种有益微生物的生理生态特征、作用机理以及基于有益微生物的对虾养殖应用现状,最后提出了有益生微生物在对虾养... 随着对虾养殖规模的不断扩大,不少问题开始显现。研究发现,有益微生物在对虾养殖过程中可以起到很好的作用。文章主要介绍5种有益微生物的生理生态特征、作用机理以及基于有益微生物的对虾养殖应用现状,最后提出了有益生微生物在对虾养殖中的应用前景及展望。 展开更多
关键词 有益微生物 对虾养殖 应用研究
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非洲猪瘟病毒P30蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备 被引量：4
2
作者 刘影 陶思锐 +2 位作者 舒金琪 查银河 舒建洪 《浙江理工大学学报（自然科学版）》 2021年第5期691-696,共6页
利用原核表达系统表达纯化重组非洲猪瘟病毒P30蛋白,并进一步制备抗P30重组蛋白的多克隆抗体,为非洲猪瘟病毒诊断试剂盒的研发提供实验材料和理论依据。根据GenBank中非洲猪瘟结构蛋白P30序列,经密码子优化后合成相应的基因序列,构建重... 利用原核表达系统表达纯化重组非洲猪瘟病毒P30蛋白,并进一步制备抗P30重组蛋白的多克隆抗体,为非洲猪瘟病毒诊断试剂盒的研发提供实验材料和理论依据。根据GenBank中非洲猪瘟结构蛋白P30序列,经密码子优化后合成相应的基因序列,构建重组表达质粒pET-32a-P30并转化至大肠杆菌Rosetta感受态细胞中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达纯化后获得重组P30蛋白,并制备抗P30的多克隆抗体。结果表明:16℃、0.5 mmol/L IPTG诱导表达12 h获得质量浓度为0.6 mg/mL以上的重组P30蛋白,Western blot证实原核表达的P30具有较好的免疫原性,ELISA检测纯化后的多克隆抗体效价高达1∶5120000,且具有良好的抗原特异性。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 P30基因 原核表达 多克隆抗体
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猪圆环病毒2型抗原乳胶免疫层析试纸的构建与应用
3
作者 陶思锐 查银河 +1 位作者 何玉龙 舒建洪 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期999-1007,共9页
为构建一种强特异性、高灵敏度、检测快速、操作简便的猪圆环病毒2型(PCV2)抗原诊断方法,本研究通过原核表达系统表达Cap蛋白并制备相应的多克隆抗体。用多克隆抗体和乳胶微球制备免疫探针,将单克隆抗体和羊抗兔二抗分别包被于硝酸纤维... 为构建一种强特异性、高灵敏度、检测快速、操作简便的猪圆环病毒2型(PCV2)抗原诊断方法,本研究通过原核表达系统表达Cap蛋白并制备相应的多克隆抗体。用多克隆抗体和乳胶微球制备免疫探针,将单克隆抗体和羊抗兔二抗分别包被于硝酸纤维膜(NC膜)上的检测线(T线)和质控线(C线)。对工艺参数进行优化后进行试纸条的性能验证,结果显示,该试纸仅在PCV2抗原阳性血清下呈现阳性结果,与其他病毒抗原阳性血清无交叉反应;检出限为0.5 ng/m L;对150份临床样本进行检测,以PCR检测试剂盒的结果为金标准,试纸条的样本检出率为93.33%(140/150);该试纸在常温、20%湿度环境下可保存至少12个月。结果表明,本研究构建的PCV2抗原检测试纸具有强特异性、高灵敏度、良好稳定性、检测快速、操作简便的特点,可用于猪圆环病毒2型感染的早期诊断,对猪圆环病毒2型的预防具有重要意义。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 原核表达 乳胶微球 免疫层析
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