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HPLC–AFS联用测定海产品中砷的形态 被引量:18
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作者 刘守廷 蒋天成 +3 位作者 李健梅 罗平 宋业成 《化学分析计量》 CAS 2013年第1期11-14,共4页
建立了高效液相色谱–原子荧光分光光度法测定海产品中无机砷(As V,AsⅢ)、有机砷(DMA,MMA,AsB)含量的方法。样品经含10%(体积分数)HCl的提取液振荡提取、离心分离、二路形态分析预处理、高效液相色谱分离,用原子荧光光度计检测As(Ⅲ),D... 建立了高效液相色谱–原子荧光分光光度法测定海产品中无机砷(As V,AsⅢ)、有机砷(DMA,MMA,AsB)含量的方法。样品经含10%(体积分数)HCl的提取液振荡提取、离心分离、二路形态分析预处理、高效液相色谱分离,用原子荧光光度计检测As(Ⅲ),DMA,MMA,As(V);四路条件(过氧化氢氧化和开启紫外灯)形态分析预处理装置处理,高效液相色谱分离,原子荧光光度计测定AsB。As(Ⅲ)线性范围为0~100.00μg/L,r2=0.999 7;DMA线性范围为0~100.00μg/L,r2=0.999 3;MMA线性范围为0~100.00μg/L,r2=0.999 0;As(V)线性范围为0~100.00μg/L,r2=0.999 1;AsB线性范围为0~200.00μg/L,r2=0.999 4。3个样品加标回收率为As(Ⅲ)86.7%~89.4%,DMA 111.2%~117.0%,MMA 109.7%~111.6%,As(V)83.8%~90.7%,AsB 88.3%~90.4%。用该方法测定虾仁(干)5个价态测定结果的相对标准偏差为3.07%~9.93%(n=6)。5个价态的检出限(S/N=2)为As(Ⅲ)0.29μg/L,DMA 0.36μg/L,MMA 0.27μg/L,As(V)0.56μg/L,AsB 1.46μg/L。该方法适用于海产品中As(Ⅲ),DMA,MMA,As(V),AsB含量的测定。 展开更多
关键词 高效液相色谱-原子荧光光度法 形态分析 海产品
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微波样品消解-电感耦合等离子体质谱法测定北部湾海产品中重金属的含量 被引量:13
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作者 蒋天成 刘守廷 +4 位作者 罗平 班雁华 黄丽娟 熊刚 《理化检验(化学分册)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期93-96,共4页
北部湾海产品样品在硝酸-过氧化氢(4+3)混合液中经微波消解处理,采用电感耦合等离子体质谱法测定样品溶液中7种重金属(铬、铜、砷、镉、锑、汞、铅)的含量.采用内标法消除基体的影响.方法的检出限(3s)在0.018~0.23 μg·L-1之间.... 北部湾海产品样品在硝酸-过氧化氢(4+3)混合液中经微波消解处理,采用电感耦合等离子体质谱法测定样品溶液中7种重金属(铬、铜、砷、镉、锑、汞、铅)的含量.采用内标法消除基体的影响.方法的检出限(3s)在0.018~0.23 μg·L-1之间.按方法分析海虾样品做精密度试验,上述7元素测定值的相对标准偏差(n=6)在1.4%~8.8%之间.方法用于黄鱼(GBW 08573)和扇贝(GBW 10024)两个国家标准物质中重金属含量的测定,测定值与认定值相符. 展开更多
关键词 电感耦合等离子体质谱法 微波消解 海产品 重金属
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库仑滴定法快速测定电解二氧化锰硫酸根含量 被引量:1
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作者 刘泽斌 宋业成 +2 位作者 何京明 刘守廷 《中国锰业》 2022年第3期100-103,共4页
采用库仑滴定法,以三氧化钨做催化剂,炉温1153℃下测定电解二氧化锰中硫酸根含量,得到满意的检测结果。2个样品分别测定15次和11次平行样,测定结果的相对标准偏差分别为2.73%和1.91%,2个样品分别做5个平行样的加标回收,加标回收率为91.4... 采用库仑滴定法,以三氧化钨做催化剂,炉温1153℃下测定电解二氧化锰中硫酸根含量,得到满意的检测结果。2个样品分别测定15次和11次平行样,测定结果的相对标准偏差分别为2.73%和1.91%,2个样品分别做5个平行样的加标回收,加标回收率为91.4%~107.5%,与《无汞碱性锌-二氧化锰电池用电解二氧化锰》(QB/T 2629—2004)中硫酸钡重量法测定结果比较,2个样品相对偏差分别为-3.45%和-3.77%。方法环保、快速、设备便宜、成本低、操作简单方便,重复性好,结果准确,适用于电解二氧化锰硫酸根含量的快速测定,其应用前景广阔。 展开更多
关键词 库仑滴定法 快速测定 电解二氧化锰 硫酸根
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白砂糖和冰糖中二氧化硫残留量的快速测定 被引量:2
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作者 刘守廷 蒋天成 +4 位作者 罗平 宋业成 谭芳维 倪湖权 《食品科技》 CAS 北大核心 2013年第3期312-314,共3页
用蒸馏水直接溶解白砂糖和冰糖样品,碘标准溶液滴定其二氧化硫含量,取6个样品与国标GB/T5009.34—2003蒸馏法进行方法比对验证,结果吻合很好。对3个样品分别进行6次平行样品重复性试验,其相对标准偏差分别为2.5%、2.6%、3.0%。该法准确... 用蒸馏水直接溶解白砂糖和冰糖样品,碘标准溶液滴定其二氧化硫含量,取6个样品与国标GB/T5009.34—2003蒸馏法进行方法比对验证,结果吻合很好。对3个样品分别进行6次平行样品重复性试验,其相对标准偏差分别为2.5%、2.6%、3.0%。该法准确可靠、简单快速、易操作、检测成本低,适用于企业在线生产对二氧化硫残留量的质控检测,同时也适用于大批量白砂糖和冰糖中二氧化硫残留量的快速测定和市场监管监控的快速检测。 展开更多
关键词 白砂糖 冰糖 二氧化硫 快速测定
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广西市售龙眼(荔枝)干、桂圆肉、保鲜龙眼中SO_2残留量测定及评价 被引量:1
5
作者 刘守廷 蒋天成 +5 位作者 叶开富 罗平 李健梅 谭芳维 唐琼 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2013年第3期750-751,754,共3页
目的:了解广西市售龙眼(荔枝)干、桂圆肉、保鲜龙眼中SO2的残留情况,为市场监管部门加强食品安全监督提供参考。方法:2010年-2012年随机抽取广西市场上的保鲜龙眼、龙眼(荔枝)干、桂圆肉64个样品,按GB/T5009.34-2003《食品中亚硫酸盐的... 目的:了解广西市售龙眼(荔枝)干、桂圆肉、保鲜龙眼中SO2的残留情况,为市场监管部门加强食品安全监督提供参考。方法:2010年-2012年随机抽取广西市场上的保鲜龙眼、龙眼(荔枝)干、桂圆肉64个样品,按GB/T5009.34-2003《食品中亚硫酸盐的测定》第二法测定SO2残留量。结果:符合国家卫生标准的43份,合格率67%,其合格率从高到低依次为保鲜龙眼(100%)﹥龙眼干(75%)﹥荔枝干(69%)﹥桂圆肉(50%)。结论:广西市售龙眼(荔枝)干、桂圆肉中,超国家卫生标准的达33%,不同程度地存在SO2残留量超标的情况,桂圆肉中最高SO2残留量超国家卫生标准8.6倍。 展开更多
关键词 龙眼(荔枝)干 桂圆肉 保鲜龙眼 SO2残留量 测定及评价
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硫代硫酸钠滴定法测定铜铟镓硒太阳能靶材中硒
6
作者 宋业成 刘泽斌 +3 位作者 何京明 刘守廷 赖华 《化学分析计量》 CAS 2022年第1期13-17,共5页
建立了测定铜铟镓硒太阳能靶材中硒的硫代硫酸钠滴定法。用硝酸-盐酸混合液(3∶1)在低温加热条件下消解铜铟镓硒靶材样品,在盐酸介质中,用亚硫酸将亚硒酸还原为单质硒沉淀与其它杂质分离,用酸溶解沉淀,在硫酸介质中,加入碘化钾,以淀粉... 建立了测定铜铟镓硒太阳能靶材中硒的硫代硫酸钠滴定法。用硝酸-盐酸混合液(3∶1)在低温加热条件下消解铜铟镓硒靶材样品,在盐酸介质中,用亚硫酸将亚硒酸还原为单质硒沉淀与其它杂质分离,用酸溶解沉淀,在硫酸介质中,加入碘化钾,以淀粉作指示剂,用硫代硫酸钠标准溶液滴定,计算硒的含量。该方法适合质量分数为30%~70%的硒的测定,靶材中铜、铟、镓对测定结果无影响。该法测定结果的相对标准偏差为0.1%~0.5%(n=12),测定硒质量分数为99.999%的标准物质,平均回收率为99.7%,样品的加标回收率为98.69%~99.83%。 展开更多
关键词 容量法 铜铟镓硒太阳能靶材
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MicroRNA-7基因敲减小鼠模型的鉴定 被引量:10
7
作者 朱顺飞 李永菊 +6 位作者 陈超 胡燕 赵娟娟 郭萌萌 秦娜琳 徐林 《遵义医学院学报》 2014年第6期582-586,590,共6页
目的鉴定miR-7基因敲减小鼠模型,为进一步研究miR-7的生物学功能奠定基础。方法常规剪取7只miR-7基因敲减(miR-7 knock down,miR-7KD)小鼠的脚趾和尾巴,分别用来提取基因组DNA和总RNA;剪取1只WT(wild-type,WT)小鼠的尾巴,提取其总RNA;... 目的鉴定miR-7基因敲减小鼠模型,为进一步研究miR-7的生物学功能奠定基础。方法常规剪取7只miR-7基因敲减(miR-7 knock down,miR-7KD)小鼠的脚趾和尾巴,分别用来提取基因组DNA和总RNA;剪取1只WT(wild-type,WT)小鼠的尾巴,提取其总RNA;将提取的两组小鼠的总RNA逆转录成c DNA;分别以基因组DNA和c DNA为模板,用特异性引物PCR技术扩增目的基因增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)片段;提取WT和miR-7KD小鼠7个不同组织器官的总RNA,利用Real-time PCR探针法检测各组织器官中miR-7成熟体的表达水平;HE染色观察miR-7KD小鼠心脏、肺脏以及结肠的形态学结构改变。结果 PCR结果显示,模型小鼠的脚趾基因组DNA和尾巴c DNA中均能扩增出载体目的基因EGFP片段;Real-time PCR结果显示,miR-7KD小鼠心脏、肝脏和脾脏等组织器官miR-7成熟体的表达水平较WT小鼠均显著下调(P<0.05);HE染色结果显示,miR-7KD小鼠心脏、肺脏以及结肠形态学结构发生了明显的病理性改变。结论成功鉴定了miR-7基因敲减小鼠模型,为后续深入探讨该分子的生物学功能提供重要实验基础。 展开更多
关键词 miRNA-7 基因敲减 鉴定 表达
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miR-126敲减增强小鼠CD4^+T细胞体内活性并促进其向Th1细胞分化 被引量:7
8
作者 崔盼盼 胡燕 +5 位作者 陈超 赵娟娟 郭萌萌 周涯 徐林 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期347-351,共5页
目的观察miR-126基因敲减(KD)小鼠体内CD4+T细胞活性的变化并探讨其意义。方法利用磁珠活化细胞分选技术(MACS)分选miR-126KD小鼠脾脏CD4+CD62L+T细胞,实时定量PCR检测细胞内miR-126成熟体的表达水平;荧光激活细胞分选术(FACS)检测CD4+... 目的观察miR-126基因敲减(KD)小鼠体内CD4+T细胞活性的变化并探讨其意义。方法利用磁珠活化细胞分选技术(MACS)分选miR-126KD小鼠脾脏CD4+CD62L+T细胞,实时定量PCR检测细胞内miR-126成熟体的表达水平;荧光激活细胞分选术(FACS)检测CD4+T细胞表面活化标志CD69、CD62L和CD44分子以及Ki-67的表达变化;膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ/PI)双染色法结合流式细胞术检测CD4+T细胞的凋亡情况;实时定量PCR检测CD4+T细胞功能相关细胞因子白细胞介素4(IL-4)、IL-10、IL-12、转化生长因子β(TGF-β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)的mRNA水平变化。结果与野生型(WT)小鼠组相比,miR-126KD小鼠组CD4+T细胞内miR-126成熟体的表达显著下调;FACS结果显示miR-126KD小鼠CD4+T细胞表达CD62L的比例明显减少,而表达CD69、CD44以及Ki-67细胞的比例显著增加,CD4+T细胞的体内凋亡比例显著减少;CD4+T细胞中IL-4、IL-10的mRNA水平明显降低,而IL-12、TGF-β、TNF-α以及IFN-γ的mRNA水平显著增加。结论 miR-126KD小鼠体内CD4+T细胞的活性显著增强并促进其向Th1细胞分化。 展开更多
关键词 微小RNA-126 基因敲减 CD4+T细胞 活性 细胞因子
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miRNA-126基因敲减小鼠肠系膜淋巴结T淋巴细胞比例的变化 被引量:7
9
作者 张忆雄 胡燕 +6 位作者 郭萌萌 朱顺飞 赵娟娟 周涯 郑静 徐林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1157-1160,共4页
目的:研究miRNA-126基因敲减小鼠肠系膜淋巴结T及B淋巴细胞数量的变化。方法:检测miRNA-126基因敲减(KD)小鼠肠系膜淋巴结的体积、重量和淋巴结细胞总数;HE染色检测小鼠肠系膜淋巴结的病理形态学变化;流式细胞术(FACS)检测淋巴结中T及B... 目的:研究miRNA-126基因敲减小鼠肠系膜淋巴结T及B淋巴细胞数量的变化。方法:检测miRNA-126基因敲减(KD)小鼠肠系膜淋巴结的体积、重量和淋巴结细胞总数;HE染色检测小鼠肠系膜淋巴结的病理形态学变化;流式细胞术(FACS)检测淋巴结中T及B淋巴细胞数量的变化。结果:与野生型(WT)小鼠相比,miR-126KD小鼠肠系膜淋巴结体积、重量和淋巴结细胞总数均显著增加(P<0.05),且病理形态学发生异常;肠系膜淋巴结中B淋巴细胞比例和数量无变化(P>0.05),CD4+T细胞数量无变化,而CD4+T细胞百分数明显减少(P<0.05),CD8+T细胞百分数和绝对数量均显著增加(P<0.05)。结论:miRNA-126敲减后可显著影响肠系膜淋巴结中T淋巴细胞的数量,提示miRNA-126可能影响肠系膜淋巴结的免疫功能。 展开更多
关键词 miRNA-126基因敲减 肠系膜淋巴结 B细胞 T细胞
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microRNA-7基因敲减对小鼠CD4^+SP细胞胸腺发育的影响 被引量:6
10
作者 朱顺飞 +5 位作者 陈超 赵娟娟 郭萌萌 张忆雄 秦娜林 徐林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1173-1177,共5页
目的:研究microRNA-7(miRNA-7,miR-7)基因敲减对小鼠CD4+SP细胞胸腺发育的影响。方法:检测miR-7基因敲减(miR-7 knock down,miR-7KD)和野生型(Wild-type,WT)小鼠胸腺重量及细胞总数变化;HE染色观察miR-7KD小鼠胸腺的形态学结构改变;FAC... 目的:研究microRNA-7(miRNA-7,miR-7)基因敲减对小鼠CD4+SP细胞胸腺发育的影响。方法:检测miR-7基因敲减(miR-7 knock down,miR-7KD)和野生型(Wild-type,WT)小鼠胸腺重量及细胞总数变化;HE染色观察miR-7KD小鼠胸腺的形态学结构改变;FACS检测胸腺CD4+单阳性(Single positive,SP)细胞的比例并计算细胞总数,同时检测CD4+SP细胞CD44及CD62L表达变化;核抗原Ki-67染色法检测CD4+SP细胞的增殖情况;FACS检测CD4+SP细胞的凋亡变化;Western blot技术检测胸腺中总ERK1/2和磷酸化ERK1/2表达水平变化。结果:与WT小鼠相比,miR-7KD小鼠胸腺体积、重量以及细胞总数均显著减少,且形态学结构发生改变(P<0.05);FACS结果显示,miR-7KD小鼠胸腺CD4+SP细胞比例明显降低,且细胞总数减少(P<0.05)。此外,CD4+SP细胞的CD44表达水平显著增加,而CD62L表达水平明显减少(P<0.05);同时,CD4+SP细胞增殖及凋亡比例均显著增加(P<0.01);最后,miR-7KD小鼠胸腺中ERK1/2以及磷酸化ERK1/2的表达均明显下调(P<0.05)。结论:miR-7基因敲减后可显著影响CD4+SP细胞的胸腺发育,这可能与细胞活化水平及ERK1/2信号通路改变有关。 展开更多
关键词 微小RNA-7 基因敲减 胸腺 CD4^+SP细胞
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下调miRNA-21表达对人结肠癌HCT116细胞体外生长的影响 被引量:6
11
作者 赵娟娟 +6 位作者 李永菊 郭萌萌 周涯 秦娜琳 郑静 罗军敏 徐林 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期6-12,共7页
研究下调miRNA-21表达对人结肠癌HCT116细胞体外生长的影响。利用反义核酸技术设计针对miRNA-21成熟体的ASO序列,构建pcDNA-6.2-miRNA-21-ASO真核表达载体(命名为p-miR-21-ASO);将重组载体p-miR-21-ASO体外瞬时转染HCT116细胞,real-time... 研究下调miRNA-21表达对人结肠癌HCT116细胞体外生长的影响。利用反义核酸技术设计针对miRNA-21成熟体的ASO序列,构建pcDNA-6.2-miRNA-21-ASO真核表达载体(命名为p-miR-21-ASO);将重组载体p-miR-21-ASO体外瞬时转染HCT116细胞,real-time PCR检测细胞中miRNA-21的表达变化;CCK-8法及克隆形成实验检测HCT116细胞的增殖及克隆形成能力改变;划痕法观察HCT116细胞的体外迁移能力变化;western blot检测细胞中VEGF蛋白的表达变化。结果显示,p-miR-21-ASO载体能下调miRNA-21的表达(P<0.05);CCK-8及克隆形成实验结果显示HCT116细胞的增殖及克隆形成能力明显下降(P<0.05);划痕实验结果发现细胞的体外迁移能力削弱(P<0.05);western blot检测结果表明转染组细胞VEGF表达下调(P<0.05)。结果表明,下调miRNA-21能明显抑制HCT116细胞的体外生长,这可能与VEGF的表达降低有关。 展开更多
关键词 MIRNA-21 结肠癌 真核表达
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RFID技术在电网建设管理中的应用
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作者 金津 卢振强 +2 位作者 熊文林 胡巍 《通信电源技术》 2024年第18期70-72,共3页
为促进能源向清洁低碳化转型,实现“双碳”目标,国家大力推进智能电网建设,在电力行业中应用了多种新兴技术,其中射频识别(Radio Frequency Identification,RFID)技术凭借高稳定性和高效率受到重视。简要介绍RFID技术的原理和组成,并结... 为促进能源向清洁低碳化转型,实现“双碳”目标,国家大力推进智能电网建设,在电力行业中应用了多种新兴技术,其中射频识别(Radio Frequency Identification,RFID)技术凭借高稳定性和高效率受到重视。简要介绍RFID技术的原理和组成,并结合电网建设的管理现状,深入探讨和分析RFID技术在电网建设中的应用,为后续的研究提供理论基础。 展开更多
关键词 射频识别(RFID)技术 电网建设管理 实时定位 智能电网
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microRNA-7对小鼠肠系膜淋巴结αβT淋巴细胞组成的影响 被引量:5
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作者 赵娟娟 朱顺飞 +7 位作者 徐华林 胡燕 郭萌萌 周涯 秦娜琳 郑静 徐林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1163-1168,共6页
目的:研究miR-7(MicroRNA-7,miRNA-7)对小鼠肠系膜淋巴结αβT淋巴细胞比例的影响并初步探讨其意义。方法:利用miR-7基因敲减(Knockdown,KD)小鼠模型,观察其肠系膜淋巴结大小、重量和淋巴结细胞总数,以及HE染色的病理学变化;流式细胞术(... 目的:研究miR-7(MicroRNA-7,miRNA-7)对小鼠肠系膜淋巴结αβT淋巴细胞比例的影响并初步探讨其意义。方法:利用miR-7基因敲减(Knockdown,KD)小鼠模型,观察其肠系膜淋巴结大小、重量和淋巴结细胞总数,以及HE染色的病理学变化;流式细胞术(FACS)检测淋巴结中αβT淋巴细胞亚群(CD3+T细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞)以及CD4+T细胞和CD8+T细胞的活化相关分子CD69、CD62L和功能相关因子IFN-γ表达的情况。结果:与野生型(Wild type,WT)小鼠相比,miR-7KD小鼠肠系膜淋巴结大小、重量指数和淋巴结细胞总数均显著增高(P<0.05),且HE染色显示MLNs有病理性改变;肠系膜淋巴结中αβCD3+T细胞比例增加显著,其中以CD4+T细胞比例变化最为明显(P<0.05),而CD19+B淋巴细胞比例明显下调(P<0.05),但各亚群细胞总数均明显增加(P<0.05);最后,CD4+T细胞和CD8+T细胞中的CD62L+细胞的比例均显著下调(P<0.05),而CD69+细胞和IFN-γ+细胞比例均显著上调(P<0.05)。结论:miR-7敲减后可显著影响肠系膜淋巴结中αβT淋巴细胞的组成比例,提示其对肠系膜淋巴结中淋巴细胞的组成和功能具有重要的调控作用。 展开更多
关键词 miR-7基因敲减 肠系膜淋巴结 ΑΒT细胞
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microRNA-7敲减对内毒素诱导小鼠急性肺损伤的影响 被引量:5
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作者 赵娟娟 徐华林 +7 位作者 郭萌萌 周涯 陈超 秦娜琳 郑静 田丹 徐林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1257-1261,共5页
目的:观察microRNA-7(miR-7)敲减对内毒素诱导小鼠急性肺损伤的影响并探讨其意义。方法:利用脂多糖(LPS)腹腔注射(10 mg/kg体重)野生型(Wild type,WT)小鼠和miR-7基因敲减(Knockdown,KD)小鼠建立急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)模型... 目的:观察microRNA-7(miR-7)敲减对内毒素诱导小鼠急性肺损伤的影响并探讨其意义。方法:利用脂多糖(LPS)腹腔注射(10 mg/kg体重)野生型(Wild type,WT)小鼠和miR-7基因敲减(Knockdown,KD)小鼠建立急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)模型;HE染色观察肺组织病理学变化;计算肺泡灌洗液(BAL)中的细胞总数;Real-time PCR检测肺组织炎症相关因子表达变化;流式细胞术(FACS)进一步检测BAL中固有免疫细胞γδT细胞、F4/80巨噬细胞(Macrophages,Mφ)和适应性免疫细胞CD4^+T细胞和CD8^+T细胞的比例和绝对数变化;FACS检测CD4^+T细胞活化相关分子CD62L和CD69的表达水平。结果:相对野生型(Wild type,WT)小鼠,HE染色显示miR-7KD小鼠的肺组织小血管充血和炎性细胞浸润明显减少,病理性损伤明显减轻;Real-time PCR结果显示促炎性细胞因子IL-6的表达水平显著降低(P<0.01),而抗炎性细胞因子IL-4、TGF-β的表达水平明显增加(P<0.05);同时,BAL中总细胞数显著减少(P<0.05);FACS检测进一步显示miR-7KD小鼠的BAL中F4/80^+Mφ细胞的比例及绝对数均明显下调(P<0.05),而γδT细胞的比例上调(P<0.05),但其细胞绝对数无差异(P>0.05);BAL中CD4^+T细胞和CD8^+T细胞的比例及其绝对数均显著降低(P<0.05);最后CD4^+T细胞活化膜分子CD62L的表达水平明显上调(P<0.05),而CD69的表达水平显著下调(P<0.05)。结论:miR-7敲减可减轻ALI模型小鼠的肺部损伤,提示其可能在ALI发生中发挥了重要调控作用。 展开更多
关键词 miR-7基因敲减 急性肺损伤 肺泡灌洗液 免疫细胞
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基于SYBR Green Ⅰ的茎-环Real-time PCR定量检测miRNA-7方法的建立 被引量:5
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作者 赵娟娟 徐华林 +7 位作者 郭萌萌 周涯 陈超 秦娜琳 郑静 田丹 徐林 《遵义医学院学报》 2015年第6期636-641,共6页
目的本研究旨在利用常规荧光燃料SYBR GreenⅠ,通过茎-环法设计原理,建立有效检测微小RNA-7(miR-7)的Real-time PCR方法。方法利用miRBase数据库获得miR-7的成熟体序列,分别设计1条miR-7特异性反转录引物,以及Real-time PCR上游和下游引... 目的本研究旨在利用常规荧光燃料SYBR GreenⅠ,通过茎-环法设计原理,建立有效检测微小RNA-7(miR-7)的Real-time PCR方法。方法利用miRBase数据库获得miR-7的成熟体序列,分别设计1条miR-7特异性反转录引物,以及Real-time PCR上游和下游引物;观察不同退火温度和不同引物浓度对扩增miR-7的Ct值影响,选择最优的退火温度和引物浓度;测定不同稀释度RNA下Real-time PCR扩增miR-7的效果;并利用该方法检测小鼠4个器官中miR-7的灵敏性和特异性。结果在基于SYBR GreenⅠ的茎-环Real-time PCR检测法中,miR-7扩增的最优退火温度为60℃,最优引物浓度为10μmol/L;在不同稀释度RNA下miR-7的Ct值线性关系较好,且在模板RNA低于100 pg的条件下,该方法仍可有效检测miR-7分子;最后有效检测出小鼠4个不同器官中miR-7的差异性表达。结论成功建立基于SYBR GreenⅠ的茎-环Real-time PCR定量检测miRNA-7的方法,可为后续研究miR-7的生物学功能提供了重要工作基础。 展开更多
关键词 茎-环Real-time PCR法 SYBR GreenⅠ 微小RNA-7 表达
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自身启动子调控miR-7真核表达载体的构建及其意义 被引量:4
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作者 郭萌萌 廖珍媛 +6 位作者 赵娟娟 胡燕 陈超 秦娜琳 郑静 徐林 《遵义医学院学报》 2015年第3期219-225,共7页
目的构建带有miR-7自身启动子的miR-7重组真核表达载体,研究其对人肺癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法预测miR-7启动子序列,设计含有该序列和miR-7前体序列目的片段的引物,PCR扩增后亚克隆入p GL3.0-Basic载体以构建miR-7自身启动子... 目的构建带有miR-7自身启动子的miR-7重组真核表达载体,研究其对人肺癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法预测miR-7启动子序列,设计含有该序列和miR-7前体序列目的片段的引物,PCR扩增后亚克隆入p GL3.0-Basic载体以构建miR-7自身启动子调控的真核表达载体p GL3.0-Basic-miR-7-promoter(命名为p-miR-7-pro);将所构建载体转染人肺癌95D细胞,Real-time PCR探针法检测95D细胞中miR-7的表达水平;MTT和克隆形成实验分别检测95D细胞的增殖和克隆形成能力;划痕法观察95D细胞体外迁移能力的变化;FACS检测95D细胞的凋亡情况。结果酶切和测序结果证明成功构建p-miR-7-pro真核表达载体,转染95D细胞后可有效表达miR-7;与对照组相比,p-miR-7-pro转染组95D细胞的体外增殖能力受到明显的抑制(0.60±0.03 vs 0.19±0.05,P<0.05);同时其迁移能力也显著降低(473±7 vs 99±2,P<0.05);而细胞凋亡则显著增加(9.233±0.586%vs 12.967±0.643%,P<0.05)。结论成功构建由自身启动子调控的miR-7真核表达载体,为后续研究miR-7在肺癌基因治疗中的作用提供重要实验基础。 展开更多
关键词 miR-7 真核表达 肺癌 95D细胞 增殖 迁移 凋亡
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糖尿病健康管理的研究进展 被引量:3
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作者 饶丽华 饶东华 《中国当代医药》 2020年第9期17-20,共4页
糖尿病是常见的内分泌代谢性疾病,是当前威胁人类健康的最主要的慢性病之一。除常规治疗用药,健康管理对于有效减少糖尿病的发展及其并发症的发生均发挥着至关重要的作用。本文对糖尿病的健康管理要素进行综述,旨在促进形成“健康管理... 糖尿病是常见的内分泌代谢性疾病,是当前威胁人类健康的最主要的慢性病之一。除常规治疗用药,健康管理对于有效减少糖尿病的发展及其并发症的发生均发挥着至关重要的作用。本文对糖尿病的健康管理要素进行综述,旨在促进形成“健康管理—定期监测—防治结合—控制血糖”的良性循环,进一步为糖尿病的诊治提供思路。 展开更多
关键词 糖尿病 健康教育 医疗资源 自我管理 家庭监督
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微RNA-7与肿瘤关系的研究进展 被引量:3
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作者 赵娟娟 +4 位作者 郭萌萌 秦娜琳 郑静 田丹 徐林 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期482-486,共5页
目前,肿瘤的发病率逐年增加,且严重危害人类健康,然而其发生和发展机制仍未阐明。新近研究发现,一类长度约22个核苷酸的内源性非编码RNA分子——微RNA(microRNA,miRNA)在肿瘤的发生和发展过程中具有重要调控作用。微RNA-7(microRNA-7,mi... 目前,肿瘤的发病率逐年增加,且严重危害人类健康,然而其发生和发展机制仍未阐明。新近研究发现,一类长度约22个核苷酸的内源性非编码RNA分子——微RNA(microRNA,miRNA)在肿瘤的发生和发展过程中具有重要调控作用。微RNA-7(microRNA-7,miR-7)是miRNAs家族的重要成员之一。现有的研究显示,miR-7与包括乳腺癌和肺癌在内多种肿瘤的发生、生长、转移以及预后等密切相关,推测其可作为肿瘤临床诊治的新靶标。本文就miR-7与肿瘤的相关研究进展进行综述。 展开更多
关键词 肿瘤 微RNAS 诊断 治疗 MiRNA-7
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微小RNA-21与肿瘤关系的研究进展 被引量:3
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作者 徐华林 赵娟娟 +6 位作者 郑文 卢佳 雷良玉 郭萌萌 罗军敏 徐林 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期707-712,共6页
已有资料显示,一群长度为22~24个核甘酸(nucleotide,nt)的内源性、短小非编码RNA—微小RNA(micro RNA,mi RNA,mi R),不仅广泛存在于多种生物体中,而且参与包括肿瘤在内的多种疾病的发生过程。近年来的研究发现,mi RNAs家族成员mi R... 已有资料显示,一群长度为22~24个核甘酸(nucleotide,nt)的内源性、短小非编码RNA—微小RNA(micro RNA,mi RNA,mi R),不仅广泛存在于多种生物体中,而且参与包括肿瘤在内的多种疾病的发生过程。近年来的研究发现,mi RNAs家族成员mi R-21与肺癌、胃癌和宫颈癌等多种肿瘤的发生、生长、转移以及预后等密切相关,推测其可作为多种肿瘤临床诊治的新靶标。本文就mi R-21与这些肿瘤的发生关系、调控机制以及诊断和治疗等相关的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 肿瘤 微RNA 诊断 治疗 MI R-21
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内毒素耐受状态下脾脏CD4^+Foxp3^+调节性T细胞的比例变化及意义 被引量:3
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作者 卢佳 +5 位作者 贾力 赵娟娟 郭萌萌 徐华林 张继东 徐林 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期289-293,288,共6页
以5mg/kg浓度LPS腹腔注射C57BL/6小鼠建立内毒素耐受模型,观察注射72h及8d后脾脏大小、重量及总细胞数;HE染色观察脾脏病理学变化;FACS检测CD4+Foxp3+Treg细胞比例并计算其细胞总数;同时检测CD4+Foxp3+Treg细胞功能相关膜分子CTLA-4的... 以5mg/kg浓度LPS腹腔注射C57BL/6小鼠建立内毒素耐受模型,观察注射72h及8d后脾脏大小、重量及总细胞数;HE染色观察脾脏病理学变化;FACS检测CD4+Foxp3+Treg细胞比例并计算其细胞总数;同时检测CD4+Foxp3+Treg细胞功能相关膜分子CTLA-4的相对表达;Ki-67染色法检测CD4+Foxp3+Treg细胞的增殖情况;PI染色法检测CD4+Foxp3+Treg细胞的凋亡情况;Real-time PCR技术检测脾脏中TGF-β的相对表达。结果发现与对照组相比,LPS注射72h后脾脏大小、重量及细胞总数显著增加(P<0.05),且发生病理学改变;脾脏中CD4+Foxp3+Treg细胞比例和数量显著减少(P<0.05),CTLA-4表达水平显著降低(P<0.05);同时,增殖比例明显减少,凋亡比例增加(P<0.05);最后,脾脏中TGF-β的相对表达水平显著减少。LPS注射8d后脾脏大小、重量及细胞总数均与对照组相比无差异(P>0.05),且脾脏组织结构未见改变;脾脏中CD4+Foxp3+Treg细胞比例及数量仍减少(P<0.05),而其表达CTLA-4水平增加(P<0.05),且凋亡和增殖比例无明显差异(P>0.05);最后,脾脏组织中TGF-β的相比表达显著增加。结果表明,内毒素耐受状态下,CD4+Foxp3+Treg细胞比例发生明显改变,可能与细胞凋亡和增殖变化有关。 展开更多
关键词 LPS 内毒素耐受 脾脏 CD4+Foxp3+T细胞
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