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腺相关病毒Anc80L65转染成年小鼠椭圆囊的实验研究 被引量：1
1
作者 王国鹏 贺璐 +2 位作者 郭婧滢 陈钟壡 龚树生 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2022年第1期21-25,共5页
目的探索腺相关病毒载体Anc80L65对正常和不同程度损伤的成年小鼠椭圆囊前庭感觉上皮的转染特性。方法将6周龄小鼠分为以下三组。1)正常对照组:将携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的Anc80L65病毒液(Anc80L65-GFP),经后... 目的探索腺相关病毒载体Anc80L65对正常和不同程度损伤的成年小鼠椭圆囊前庭感觉上皮的转染特性。方法将6周龄小鼠分为以下三组。1)正常对照组:将携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的Anc80L65病毒液(Anc80L65-GFP),经后半规管注射途径导入小鼠内耳;2)中度损伤组:行水平半规管注射导入150μg链霉素,术后2周通过后半规管注射导入Anc80L65-GFP病毒液;3)重度损伤组:行水平半规管注射导入400μg链霉素,术后2周行后半规管注射导入Anc80L65-GFP病毒液。导入病毒后4周取椭圆囊行免疫荧光染色,观察椭圆囊的形态及GFP在椭圆囊感觉上皮的表达情况。结果正常对照组:Anc80L65-GFP病毒液注射后,正常椭圆囊毛细胞无明显缺失,纤毛形态正常,GFP广泛分布于整个感觉上皮区域。中度损伤组:椭圆囊前庭毛细胞数量明显减少,支持细胞仍存活,GFP广泛分布于整个感觉上皮区域。高倍镜下见前庭支持细胞和毛细胞被转染。重度损伤组:椭圆囊的前庭毛细胞和支持细胞均被损伤,前庭感觉上皮演化为细胞大小不一、形态不规则的扁平上皮结构。在前庭扁平上皮中,GFP阳性细胞数量与对照组及中度损伤组相比明显减少。结论Anc80L65能高效转染正常和中度损伤后的成年小鼠椭圆囊前庭感觉上皮,但对重度损伤后形成的前庭扁平上皮的转染效率较低,这可能与其细胞属性发生改变有关。在未来的前庭基因治疗研究中,须根据前庭感觉上皮的不同损伤程度来选择合适的载体。 展开更多
关键词 腺相关病毒 前庭 毛细胞 支持细胞 基因转染
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锤骨-镫骨底板开窗术治疗先天性中耳畸形17例疗效分析 被引量：1
2
作者 陈钟壡 谢静 +1 位作者 赵鹏飞 龚树生 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CSCD 北大核心 2021年第8期806-811,共6页
目的总结行锤骨-镫骨底板开窗术(Malleostapedotomy,MS)的先天性中耳畸形患者的临床特征和术后疗效,探讨MS手术的安全性和有效性。方法回顾性分析2015年1月至2019年12月北京友谊医院17例(18耳)行MS手术的先天性中耳畸形患者的临床资料,... 目的总结行锤骨-镫骨底板开窗术(Malleostapedotomy,MS)的先天性中耳畸形患者的临床特征和术后疗效,探讨MS手术的安全性和有效性。方法回顾性分析2015年1月至2019年12月北京友谊医院17例(18耳)行MS手术的先天性中耳畸形患者的临床资料,其中男10例(11耳),女性7例(7耳),年龄7~48岁。分析总结患者的影像学检查、纯音测听、术中所见以及术后听力改善情况。使用SPSS23.0软件进行统计学分析。结果17例(18耳)患者均表现为患耳自幼听力差。术前颞骨高分辨率CT(HRCT)检查发现9耳有明确畸形(包括6耳砧骨长脚畸形、3耳镫骨前后弓畸形)。术前500、1000、2000、4000 Hz平均骨导听阈为(15.6±10.2)dB HL,平均气导听阈为(60.6±9.7)dB HL,平均气骨导差(45.0±8.9)dB。术中所见18耳均伴有砧骨长脚缺失或发育不全,12耳镫骨底板固定,6耳前庭窗闭锁,全部患者均行Piston假体MS手术。术后随访3个月~1年,平均骨导听阈(14.7±8.8)dB HL,平均气导听阈(37.7±11.6)dB HL,平均气骨导差(23.0±8.0)dB。手术前、后的平均气导阈值和平均气骨导差,差异均具有统计学意义(P值均<0.05),而手术前、后的平均骨导阈值,差异无统计学意义(P=0.550)。结论MS对于砧骨长脚缺失或发育不全、镫骨底板固定或前庭窗闭锁的先天性中耳畸形患者具有安全可靠的手术疗效。术前高分辨力颞骨CT对明显的听骨链畸形及面神经畸形的评估较好,对砧镫关节、镫骨底板固定及前庭窗闭锁的评估不足。合并中耳畸形的人工镫骨手术对术者手术经验和技巧的要求更高,术后听力改善明显,但依然存在一定程度的气骨导差。 展开更多
关键词 先天性中耳畸形 耳外科手术 锤骨-镫骨底板开窗术
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线粒体去乙酰化蛋白SIRT3在噪声诱导隐匿性听力损失中的作用 被引量：1
3
作者 杨紫荆 赵春丽 +3 位作者 梁文琦 陈钟壡 柳柯 龚树生 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第4期521-526,共6页
目的探讨线粒体去乙酰化蛋白(sirtuin-3,SIRT3)在噪声性隐性听力损失(noise-induced hidden hearing loss,NIHHL)中的作用。方法将注射过SIRT3抑制剂[3-(1H-1,2,3-triazol-4-yl)pyridine,3-TYP]与未经处理的C57BL/6J小鼠分别于100 dB白... 目的探讨线粒体去乙酰化蛋白(sirtuin-3,SIRT3)在噪声性隐性听力损失(noise-induced hidden hearing loss,NIHHL)中的作用。方法将注射过SIRT3抑制剂[3-(1H-1,2,3-triazol-4-yl)pyridine,3-TYP]与未经处理的C57BL/6J小鼠分别于100 dB白噪声下暴露2 h,并在噪声暴露(noise exposure,NE)后1 d和14 d进行测听。利用免疫荧光染色观察内毛细胞(inner hair cell,IHCs)带状突触(ribbon synapses,RS)的变化。冰冻切片下,4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)染色观察耳蜗内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的累积。结果与对照组相比,噪声组及3-TYP组小鼠均在噪声后出现短暂性听力阈值的升高,ROS的累积及带状突触的丢失。与噪声组小鼠相比,3-TYP组小鼠在噪声后第14天听力未恢复正常,带状突触丢失明显,且伴有ROS的显著累积。结论NE诱发了内耳的氧化应激反应,SIRT3可能通过抵抗氧化应激作用来保护耳蜗带状突触及听功能。 展开更多
关键词 SIRT3 噪声性隐性听力损失 带状突触 氧化应激
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后半规管途径导入不同血清型腺相关病毒转染小鼠耳蜗内毛细胞的效果比较
4
作者 刘珊 郭瑞 +6 位作者 宋新雨 于倩茹 陈钟壡 梁文琦 滕琪 龚树生 柳柯 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第4期527-534,共8页
目的探讨不同血清型的腺相关病毒经后半规管途径导入成年小鼠转染内耳细胞的效率及安全性。方法将20只6~8周C57BL/6J小鼠采用数字表法随机分为5组:腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)4组,AAV8病毒注射组、AAV9病毒注射组、AAVie病... 目的探讨不同血清型的腺相关病毒经后半规管途径导入成年小鼠转染内耳细胞的效率及安全性。方法将20只6~8周C57BL/6J小鼠采用数字表法随机分为5组:腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)4组,AAV8病毒注射组、AAV9病毒注射组、AAVie病毒注射组和Anc80L65病毒注射组,均采取后半规管路径进行注射,每只注射病毒溶液2μL;正常对照组,每只注射0.9%(质量分数)氯化钠注射液2μL,均以左耳为手术耳。各组于术前1 d及术后2周行听觉脑干反应(auditory brainstem response,ABR)检查,随后取材进行免疫荧光染色观察病毒在基底膜的分布情况。结果AAV8组:术后2周观察见耳蜗顶中转34.6%±1.8%内毛细胞被转染,中底转39.0%±5.9%内毛细胞表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP);AAV9组:术后2周见耳蜗顶中转92.5%±1.1%内毛细胞被转染,中底转94.6%±1.0%内毛细胞表达GFP;AAVie组:术后2周见耳蜗顶中转96.7%±1.5%内毛细胞被转染,中底转97.7%±0.8%内毛细胞表达GFP;Anc80L65组:术后2周见耳蜗顶中转62.5%±3.3%内毛细胞转染,中底转63.1%±6.1%内毛细胞表达GFP;正常对照组未见GFP表达。结论经半规管途径注射AAVie、AAV9病毒溶液可以高效转染到耳蜗内毛细胞,此结果对耳聋疾病的内耳基因治疗具有一定的参考意义。 展开更多
关键词 腺相关病毒 病毒转染 耳蜗 内毛细胞 后半规管
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脑脊液耳漏合并鼻咽部脑膜脑膨出脑脊液漏一例
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作者 陈钟壡 赵鹏飞 +1 位作者 周兵 龚树生 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期520-522,共3页
本文报告一例脑脊液耳漏合并鼻咽部脑膜脑膨出病例。男性患儿,头部外伤后反复发作性化脓性脑膜炎,经颞骨CT及MRI检查诊断为脑脊液耳漏,手术修补后1年之内脑膜炎再次反复发作,颅脑MRI水成像检查发现鼻咽部脑膜脑膨出,鼻内镜下手术修补,... 本文报告一例脑脊液耳漏合并鼻咽部脑膜脑膨出病例。男性患儿,头部外伤后反复发作性化脓性脑膜炎,经颞骨CT及MRI检查诊断为脑脊液耳漏,手术修补后1年之内脑膜炎再次反复发作,颅脑MRI水成像检查发现鼻咽部脑膜脑膨出,鼻内镜下手术修补,术后随访9年,未见复发。 展开更多
关键词 脑脊液耳漏 化脓性脑膜炎 鼻咽部 头部外伤 脑膜脑膨出 男性患儿 颅脑MRI 脑脊液漏
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