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FISH技术结合免疫表型分析在诊断多发性骨髓瘤中的作用 被引量:2
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作者 叶爱芳 +2 位作者 韩义香 胡晓霞 吴建波 《现代实用医学》 2013年第10期1172-1174,F0004,共4页
目的探讨多发性骨髓瘤(MM)相关的分子遗传学异常和免疫表型的改变在辅助诊断MM中的作用。方法运用商品化的MM相关遗传学异常的DNA探针RB1、P53、D13S319、1q21和IGH检测27例确诊MM中的分子水平的遗传学异常,采用多参数流式细胞术直接免... 目的探讨多发性骨髓瘤(MM)相关的分子遗传学异常和免疫表型的改变在辅助诊断MM中的作用。方法运用商品化的MM相关遗传学异常的DNA探针RB1、P53、D13S319、1q21和IGH检测27例确诊MM中的分子水平的遗传学异常,采用多参数流式细胞术直接免疫荧光技术,CD45/SSC设门,采用CD19/CD56/CD38/CD138对上述病例进行免疫分型检测。结果 27例中有19例检出1种或以上的细胞遗传学异常,占70.4%,2种以上异常占59.3%。可疑骨髓瘤细胞检出率同为70.4%,异常细胞比例为2.4%~68.2%,CD19、CD56、CD38、CD138阳性率分别为25.9%、37.0%、74.1%、70.4%。结论 CD45/SSC配合CD38/CD138设门可以较准确地分析异常骨髓瘤细胞群,结合分析荧光原位杂交检测的细胞遗传学改变结果和免疫分型结果,可以综合评价MM的疾病状态,从而更好地指导临床治疗。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 流式细胞术 荧光原位杂交
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流式免疫磁珠法检测BCR-ABL融合蛋白在白血病中的意义 被引量:1
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作者 章圣辉 毕来喜 +4 位作者 韩义香 吴建波 高申孟 叶爱芳 《温州医学院学报》 CAS 2011年第3期242-244,248,共4页
目的:探讨流式免疫磁珠(CBA)法检测白血病患者BCR-ABL融合蛋白的方法学评价及其意义。方法:采用CBA法检测64例白血病患者和10例正常人外周血白细胞中BCR-ABL融合蛋白表达,同时与实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)和荧光原位杂交(FISH)法比... 目的:探讨流式免疫磁珠(CBA)法检测白血病患者BCR-ABL融合蛋白的方法学评价及其意义。方法:采用CBA法检测64例白血病患者和10例正常人外周血白细胞中BCR-ABL融合蛋白表达,同时与实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)和荧光原位杂交(FISH)法比较。结果:正常人外周血白细胞BCR-ABL融合蛋白平均荧光强度(MFI)是10.58±3.88,64例白血病患者中BCR-ABL阳性25例,仅1例B-ALL患者检测结果与RQ-PCR结果不一致,与FISH检测结果完全一致。结论:CBA法检测BCR-ABL融合蛋白方法可靠,重复性好,简单,快速,具有良好的临床应用前景。 展开更多
关键词 BCR-ABL融合蛋白 白血病 细胞微球阵列 流式免疫磁珠法
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Musashi-2在急性髓系白血病干细胞中的表达研究 被引量:1
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作者 叶爱芳 韩义香 +3 位作者 章圣辉 李海英 吴建波 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1235-1238,共4页
本研究旨在探讨检测AML患者Musashi-2(Msi2)的表达与其他临床参数特别是CD34表达的相关性。提取临床初诊确诊为急性髓系白血病(AML)患者骨髓标本的总RNA,荧光定量RT-PCR检测患者Msi2的表达水平;流式细胞术检测上述病人的CD34表达水平;... 本研究旨在探讨检测AML患者Musashi-2(Msi2)的表达与其他临床参数特别是CD34表达的相关性。提取临床初诊确诊为急性髓系白血病(AML)患者骨髓标本的总RNA,荧光定量RT-PCR检测患者Msi2的表达水平;流式细胞术检测上述病人的CD34表达水平;综合分析其他实验室检查资料和患者的临床表现,分析初诊AML患者Msi2表达情况以及Msi2表达与CD34表达的相关性。结果表明:1初诊AML患者骨髓Msi2表达显著高于正常对照骨髓(P<0.05),各亚型中Msi2表达以M1、M4和M5中表达较高,显著高于AML其他亚型中的表达(P<0.05);2Msi2的表达与患者年龄、性别、初诊时外周血白细胞数、AML1/ETO融合基因、PML/RARa融合基因均无关(P>0.05);3CD34+组AML患者Msi2表达显著高于CD34-AML患者(P<0.05)。结论:Msi2表达于白血病干细胞,Msi2在初诊AML中高表达,以M1、M4和M5亚型中表达尤为显著,在CD34+AML患者中Msi2高表达。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 Musashi-2 CD34
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嗅鞘细胞的分离纯化及上清液中神经营养因子的测定
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作者 尹丽慧 叶爱芳 +2 位作者 吴建波 倪文飞 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期433-437,共5页
目的:创建理想的纯化嗅鞘细胞(OECs)的方法,并观察不同时间段OECs上清液中神经营养因子的含量,为选择OECs移植的最佳时机提供理论依据。方法:采用差速贴壁法结合免疫亲和吸附法纯化培养OECs,采用荧光染色法鉴定OECs并进行纯度测定;... 目的:创建理想的纯化嗅鞘细胞(OECs)的方法,并观察不同时间段OECs上清液中神经营养因子的含量,为选择OECs移植的最佳时机提供理论依据。方法:采用差速贴壁法结合免疫亲和吸附法纯化培养OECs,采用荧光染色法鉴定OECs并进行纯度测定;采用ELISA法检测培养上清液中神经生长因子(NGF),脑源性神经营养因子(BDNF)和胶质源性神经营养因子(GDNF)的水平。结果:通过上述方法,可以得到纯度85%以上的OECs,光镜下OECs突起细长,以典型的双极或三极细胞为主,背景有少量扁平的、折光性差的细胞存在;NGF、BDNF和GDNF在上清液中均有存在,其中NGF含量最高,NGF和BDNF含量随着培养时间延长逐渐升高,11 d达到高峰,GDNF仅在培养第11 d后检测到。结论:采用差速贴壁法结合免疫亲和吸附法可以获得较高纯度的OECs,培养1114 d,OECs数量多且分泌旺盛,适合用于细胞移植。 展开更多
关键词 嗅鞘细胞 原代培养 神经营养因子
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免疫抑制性受体LILRB2促进新型冠状病毒刺突蛋白介导的炎症过程 被引量:1
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作者 杨文倩 +4 位作者 赵路 曹力元 夏一秋 卢智刚 郑俊克 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1188-1196,共9页
目的·探究免疫抑制性受体白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员2(leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 2,LILRB2)在新型冠状(新冠)病毒感染所导致的免疫细胞炎症因子释放中的作用及机制,为新冠病毒肺炎治疗... 目的·探究免疫抑制性受体白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员2(leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 2,LILRB2)在新型冠状(新冠)病毒感染所导致的免疫细胞炎症因子释放中的作用及机制,为新冠病毒肺炎治疗提供潜在靶点。方法·收集包含刺突蛋白胞外段(S-ECD)的细胞上清液,分别使用Western blotting及流式细胞术检测上清液中蛋白表达情况及活性;通过流式细胞术及免疫共沉淀技术检测该上清液中S-ECD与LILRB2的结合;用刺突蛋白处理人单核细胞系THP1或人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),24 h后收集细胞,使用实时定量PCR技术检测相关炎症因子基因mRNA水平改变,同时使用酶联免疫吸附法检测细胞培养液中白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)及IL-1β含量;将si LILRB2通过Lipofectamine 3000试剂转染至人外周血CD33~+髓系细胞中,24 h后使用流式细胞术检测基因干扰效果;在对照组及LILRB2敲低的CD33~+髓系细胞中加入刺突蛋白培养24 h,使用酶联免疫吸附试剂盒检测细胞培养液中IL-6的含量变化。结果·实验成功构建可分泌具有生物活性的新冠病毒S-ECD的293T细胞转染体系;免疫共沉淀实验显示刺突蛋白与LILRB2蛋白存在相互作用,且流式细胞术结果提示刺突蛋白胞外段能够与细胞表面的LILRB2结合;与对照组相比,经刺突蛋白处理24 h的THP1细胞中IL-6、IL-8、精氨酸酶(arginase 1)及IL-2基因表达水平均有明显上调(均P<0.05);PBMC经刺突蛋白处理24 h后,IL-6、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、IL-8、IL-10及IL-1β的mRNA水平均显著上升(均P<0.05);酶联免疫吸附实验结果显示,在PBMC培养液中加入刺突蛋白能够提高上清液中IL-6及IL-1β的浓度(均P<0.05);使用S-ECD或刺突蛋白处理CD33~+髓系细胞,IL-1β及IL-6含量随之升高(均P<0.05);并且过表达LILRB2的THP1细胞经刺突蛋白刺激后展现了更强的IL-6分 展开更多
关键词 新型冠状病毒 刺突蛋白 白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员2 炎症因子 髓系细胞
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ES探针荧光原位杂交法检测bcr/abl融合基因
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作者 叶爱芳 +2 位作者 胡晓霞 尹丽慧 吴建波 《浙江实用医学》 2011年第3期163-164,175,共3页
目的探讨应用ES型bcr/abl探针(双色单融合)荧光原位杂交技术(FISH)在检测bcr/abl融合基因中的价值。方法慢性髓细胞性白血病(CML)初诊或复诊患者30例(骨髓标本43份),行普通染色体核型分析和ES型bcr/abl探针荧光原位杂交分析。结果 43份... 目的探讨应用ES型bcr/abl探针(双色单融合)荧光原位杂交技术(FISH)在检测bcr/abl融合基因中的价值。方法慢性髓细胞性白血病(CML)初诊或复诊患者30例(骨髓标本43份),行普通染色体核型分析和ES型bcr/abl探针荧光原位杂交分析。结果 43份骨髓标本,6份未做骨髓培养,6份培养失败,在其余31份培养成功的标本中,找到Ph1染色体9份,另有1份标本多次检查都发现存在21p+染色体异常;43份骨髓都经FISH检测,13份标本发现bcr/abl融合基因。结论 ES型bcr/abl探针对CML初诊病例的bcr/abl融合基因有较高的检出率;对复发病例,不仅能辅助诊断CML,而且在监测白血病微小残留病灶、判断疾病的进展上均有较高的灵敏度。 展开更多
关键词 慢性髓细胞性白血病 ES探针 荧光原位杂交技术 BCR/ABL融合基因
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