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线粒体蛋白质组学研究进展 被引量：9
1
作者 许静怡 陈超翔 +2 位作者 韩锦艳 杭纬 颜晓梅 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1257-1264,共8页
线粒体是细胞能量代谢、生物合成和细胞死亡的调控中心,其功能异常会导致许多疾病的产生。线粒体蛋白质组学研究为解析线粒体的生理功能、探索线粒体相关疾病的发病机制及促进线粒体为靶向的药物研发提供重要理论依据。本文对线粒体蛋... 线粒体是细胞能量代谢、生物合成和细胞死亡的调控中心,其功能异常会导致许多疾病的产生。线粒体蛋白质组学研究为解析线粒体的生理功能、探索线粒体相关疾病的发病机制及促进线粒体为靶向的药物研发提供重要理论依据。本文对线粒体蛋白质组学的研究方法,尤其是近年的技术发展以及线粒体蛋白质组学的性质及其应用进行总结,并对其未来的发展前景和挑战进行展望。 展开更多
关键词 线粒体 蛋白质组学 质谱 疾病 评述
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抗霉素A直接刺激线粒体所引起的超氧阴离子含量和膜电位变化的单线粒体水平研究 被引量：2
2
作者 陈莎 张翔 +2 位作者 张舒越 陈超翔 颜晓梅 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期525-530,共6页
建立了抗霉素A直接刺激提纯线粒体所引起的超氧阴离子(O2-.)含量和膜电位变化的单线粒体水平快速测定方法.利用杜恩斯(Dounce)匀浆装置,结合差速离心法,从HeLa细胞中提纯线粒体,经抗霉素A刺激和特异性荧光探针染色后,采用实验室自行研... 建立了抗霉素A直接刺激提纯线粒体所引起的超氧阴离子(O2-.)含量和膜电位变化的单线粒体水平快速测定方法.利用杜恩斯(Dounce)匀浆装置,结合差速离心法,从HeLa细胞中提纯线粒体,经抗霉素A刺激和特异性荧光探针染色后,采用实验室自行研制的超高灵敏流式检测装置对线粒体进行快速、灵敏地逐一检测.与此同时,利用传统流式细胞仪在细胞水平对抗霉素A刺激所引起的O2-.含量和线粒体膜电位的变化进行了测定.实验结果表明,抗霉素A直接刺激线粒体能引起O2-.含量增加36%,膜电位下降16%;而抗霉素A在细胞水平能使得细胞中O2-.含量增加约3倍,膜电位的荧光信号增加1倍.研究结果表明,抗霉素A能直接诱导线粒体产生O2-.并引起膜电位的小幅度下降,所建立的线粒体活性参数微弱信号检测的新方法将有助于更深入地了解线粒体的功能以及药物的作用机理. 展开更多
关键词 线粒体 超氧阴离子 线粒体膜电位 超高灵敏流式检测 抗霉素A
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线粒体荧光标记的单颗粒水平高通量评估方法 被引量：1
3
作者 韩锦艳 许静怡 +3 位作者 张翔 周颖星 陈超翔 颜晓梅 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1171-1177,共7页
线粒体是真核细胞能量代谢和信号转导的调控中枢,虽然各种灵敏、特异的线粒体荧光标记技术已经被广泛应用于线粒体研究,但仍缺乏单线粒体水平的荧光染色性能评估方法。基于超高灵敏流式检测技术(High sensitivity flow cytometry,HSFCM... 线粒体是真核细胞能量代谢和信号转导的调控中枢,虽然各种灵敏、特异的线粒体荧光标记技术已经被广泛应用于线粒体研究,但仍缺乏单线粒体水平的荧光染色性能评估方法。基于超高灵敏流式检测技术(High sensitivity flow cytometry,HSFCM)能对单个线粒体进行高灵敏、高通量、多参数定量分析的独特优势,本研究发展了一种单线粒体水平的荧光标记高通量评估方法。将携带靶向线粒体绿色荧光蛋白基因的p Ac GFP1-Mito质粒转染至人宫颈癌He La细胞中,用G418筛选出稳定转染细胞,分别从瞬时转染和稳定转染的细胞中提取线粒体。此外,从未转染质粒的正常He La细胞中提取线粒体,分别进行Mito Tracker Green标记以及SYTO 62线粒体DNA染色,应用实验室自行研制的超高灵敏流式检测装置在单线粒体水平对这4种线粒体标记方法的荧光亮度、标记效率和稳定性进行评估。实验结果表明,稳定转染细胞中单个线粒体的绿色荧光蛋白(GFP)荧光亮度为瞬时转染的17.7倍,比Mito Tracker Green标记的线粒体亮度高约两个数量级,且标记稳定性好。本研究为线粒体标记方法的选择提供了一种先进的分析方法。 展开更多
关键词 线粒体 超高灵敏流式检测技术 瞬时转染 稳定转染 染料标记
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小学数学课堂提问现状及其改进策略
4
作者 陈超翔 《儿童大世界（教学研究）》 2018年第10期139-139,共1页
随着我国小学教育改革的不断深入,小学数学课堂提问现状及其改进策略成为了教育工作者关注的话题.本文针对小学数学课堂提问现状进行分析,从精心设置问题、有效调控提问以及加强学生主体地位三个方面进行详细阐述,希望能够为相关教育工... 随着我国小学教育改革的不断深入,小学数学课堂提问现状及其改进策略成为了教育工作者关注的话题.本文针对小学数学课堂提问现状进行分析,从精心设置问题、有效调控提问以及加强学生主体地位三个方面进行详细阐述,希望能够为相关教育工作者提供有效的意见与建议. 展开更多
关键词 小学数学 课堂提问 现状
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