人碱性成纤维细胞生长因子基因在COS-7细胞中的表达及活性检测 被引量：3

1

作者 于凤山 段德义 +3 位作者 陈立南 秦丽华 徐群渊 姜传涛 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第z1期76-80,共4页

目的 获得人碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ），用于治疗神经系统疾病；克隆添加 Ｋｏｚａｋ序列的 ｂＦＧＦ ｃＤＮＡ序列，用于真核细胞表达。方法 提取国人脑胶质瘤细胞系 ＢＴ３２５总 ＲＮＡ，ＲＴ－ＰＣＲ法扩增 ｂＦＧＦ Ｃ... 目的 获得人碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ），用于治疗神经系统疾病；克隆添加 Ｋｏｚａｋ序列的 ｂＦＧＦ ｃＤＮＡ序列，用于真核细胞表达。方法 提取国人脑胶质瘤细胞系 ＢＴ３２５总 ＲＮＡ，ＲＴ－ＰＣＲ法扩增 ｂＦＧＦ ＣＤＮＡ片段，重组于 ｐＧＥＭ－３ｚｆ（＋）载体，测序正确后构建表达载体，转染猴肾成纤维细胞系 ＣＯＳ－７，Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ检测表达，收集培养上清用 ＰＣ－１２进行活性检测。结果ＲＴ－ＰＣＲ扩增到４７３ｂｐ的带有Ｋｏｚａｋ序列的ｃＤＮＡ片段；成功构建了真核表达载体；在ＣＯＳ－７得到了表达，并有一定的生物活性。结论 由克隆到的ｂＦＧＦ　ｃＤＮＡ片段构建的真核表达载体能在ＣＯＳ－７中表达、分泌．并具有生物活性。 展开更多

关键词 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) RT-PCR CDNA克隆 Western BLOT

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影响大鼠胚胎多巴胺能神经元原代培养因素的研究 被引量：4

2

作者 陈立南 徐群渊 +1 位作者 吕捷 张进禄 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期307-312,I006,共7页

目的　试图通过方法改进获得高纯度原代多巴胺能神经元 ,并研究 Matrigel及多聚左旋赖氨酸(poly- l- lysine,PL L )等不同基质对于大鼠胚胎 13d中脑黑质神经元突起生长的不同作用。　方法　无菌技术取得孕 13d SD大鼠胚胎 ,采用改进的... 目的　试图通过方法改进获得高纯度原代多巴胺能神经元 ,并研究 Matrigel及多聚左旋赖氨酸(poly- l- lysine,PL L )等不同基质对于大鼠胚胎 13d中脑黑质神经元突起生长的不同作用。　方法　无菌技术取得孕 13d SD大鼠胚胎 ,采用改进的取材方法 ,得到胎鼠腹侧中脑细胞 ,以较高密度 (1× 10 5 / cm2 )分别种入由 Matrigel及 PL L作为基质的塑料培养皿中。体外培养 5 d后 ,对培养物进行 TH免疫细胞化学染色 ,测量 TH免疫反应突起的长度并计算 TH免疫反应神经元占细胞总数的比例。　结果和结论　 1.采用改进的方法 ,能够得到高纯度的多巴胺能神经元 (多巴胺神经元占培养细胞总数的比例为 15 % ) ;2 .与 PL L相比 ,Matrigel能有效地促进多巴胺能神经元突起的生长 。 展开更多

关键词 原代神经细胞培养 多巴胺能神经元 PLL MATRIGEL

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人及大鼠基底神经节的三维重构及形态比较 被引量：3

3

作者 陈立南 徐群渊 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期217-221,共5页

利用计算机三维重构技术建立了人及大鼠基底神经节的三维数字化模型 ,并对两者的形态及核团构成进行了比较解剖学研究。在微型计算机上 ,提取人脑及大鼠脑立体定位图谱中含有基底神经节的连续层面 ,利用通用的三维建模及动画软件 3 DStu... 利用计算机三维重构技术建立了人及大鼠基底神经节的三维数字化模型 ,并对两者的形态及核团构成进行了比较解剖学研究。在微型计算机上 ,提取人脑及大鼠脑立体定位图谱中含有基底神经节的连续层面 ,利用通用的三维建模及动画软件 3 DStudio MAX,以三维放样的方法 ,在我国首次建立人及大鼠基底神经节的核团及纤维传导通路的三维数字模型 ,对人及大鼠的基底神经节进行了比较解剖学研究。并利用重构的三维模型建立虚拟现实文件 ,在神经解剖学研究中引入浏览器虚拟现实技术 ,实现了任意拆分、组装及旋转上述核团的功能。本研究显示 ,无论在形态上还是在毗邻关系上 ,人与大鼠的基底神经节的差异不大 ;由于人的直立而导致脑干吻尾轴旋转了一定角度 ,其内部核团的相互毗邻关系也随之发生变化 ,从而异于大鼠基底神经节内部核团的毗邻关系 ;基底神经节各个核团间的投射纤维以尽可能短的路径到达靶核团的相应区域 ,构成了拓扑投射关系的基础。 展开更多

关键词 三维重构 基底神经节 解剖学 虚拟现实 人 大鼠

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电穿孔法高效转染COS-7成纤维细胞系 被引量：2

4

作者 王伟 高秀来 陈立南 《解剖学研究》 CAS 2000年第2期91-94,T005,共5页

目的　以电穿孔法转染COS 7细胞系以得到较高的转染率。方法　以CMV/LacZ质粒转化COS 7细胞系 ,48小时后用X gal染色。观察不同的穿孔电压 (6 0 0V ,5 5 0V ,5 0 0V ,45 0V ,40 0V)、时间常数 (40us、10 0us)、操作温度 (室温 ,4℃ )、... 目的　以电穿孔法转染COS 7细胞系以得到较高的转染率。方法　以CMV/LacZ质粒转化COS 7细胞系 ,48小时后用X gal染色。观察不同的穿孔电压 (6 0 0V ,5 5 0V ,5 0 0V ,45 0V ,40 0V)、时间常数 (40us、10 0us)、操作温度 (室温 ,4℃ )、质粒浓度 (5us/ml,2 5us/ml)和细胞悬液体积 (2 0 0ul、40 0ul)对转染率的影响。结果　利用Eppendorf公司的Multiporator及低渗透压缓冲液转化COS 7细胞的最优条件是 :转化体积 40 0 μl,细胞密度 2× 10 6cells/ml,场强 2 0 0 0V/cm ,时间常数 10 0us,室温质粒浓度2 5 μg/ml。条件优化后COS 7转染率可达 85 %。 结论　优化的电穿孔法可得到较高的COS 7转染率。 展开更多

关键词 电穿孔 COS-7 LACZ 转染 细胞生物学

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异构数据库应用系统集成的简化方法 被引量：4

5

作者 李春强 柴玮岩 +1 位作者 刘健 陈立南 《国防科技大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第2期61-67,共7页

针对现有集成方法主要面向数据库系统层面的不足,重点讨论面向应用系统层面的集成方法。通过引入数据库应用系统的访问控制新视角,将访问控制层从应用层中划分出来,继而提出融入式访问控制技术,并基于该访问控制技术提出一种新的异构数... 针对现有集成方法主要面向数据库系统层面的不足,重点讨论面向应用系统层面的集成方法。通过引入数据库应用系统的访问控制新视角,将访问控制层从应用层中划分出来,继而提出融入式访问控制技术,并基于该访问控制技术提出一种新的异构数据库应用系统简化集成方法。通过实例展示了如何应用简化集成方法实现异构数据库应用系统的集成,并通过对比分析验证了新方法的优势。 展开更多

关键词 数据库应用系统 异构数据库 信息集成 访问控制 简化集成

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H.323协议跨越NAT网关的研究 被引量：2

6

作者 侯锡柱 马跃 陈立南 《北京邮电大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第2期91-94,共4页

对网络地址转换(NAT)及H.323呼叫过程进行了深入分析,H.323系列协议和应用依赖于端到端的网络,数据包不加修改地从源地址发送到目的地址.在NAT或防火墙的网络中,由于需要对协议的端口和地址进行转换或过滤,经过修改的地址与数据包载荷... 对网络地址转换(NAT)及H.323呼叫过程进行了深入分析,H.323系列协议和应用依赖于端到端的网络,数据包不加修改地从源地址发送到目的地址.在NAT或防火墙的网络中,由于需要对协议的端口和地址进行转换或过滤,经过修改的地址与数据包载荷内容不符,导致H.323呼叫不能正常进行.采用应用层网关模型,对NAT进行应用层扩展,提出了在使用NAT网关情况下H.323的跨网关呼叫的几个有效解决办法. 展开更多

关键词 网络地址转换 H.323 IP电话

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携带酪氨酸羟化酶基因的质粒和逆转录病毒在大鼠成纤维细胞和脑胶质细胞中表达效率的比较 被引量：1

7

作者 陈晴 段德义 +3 位作者 杨慧 孙成三 陈立南 徐群渊 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期76-80,共5页

目的　为提高体外转基因 (exvivo)治疗帕金森病大鼠模型的疗效 ,本实验拟比较两种基因表达载体介导的外源基因在两种不同运载细胞的瞬时表达效率。　方法　分别将酪氨酸羟化酶 (TH)基因的重组表达质粒和重组逆转录病毒导入原代培养的大... 目的　为提高体外转基因 (exvivo)治疗帕金森病大鼠模型的疗效 ,本实验拟比较两种基因表达载体介导的外源基因在两种不同运载细胞的瞬时表达效率。　方法　分别将酪氨酸羟化酶 (TH)基因的重组表达质粒和重组逆转录病毒导入原代培养的大鼠成纤维细胞和脑胶质细胞 ,用免疫组织化学检测TH的表达效率 ;Westernblot法检测样品中TH特异性条带并转换成A值 ,以比较其在不同细胞中表达的相对含量。　结果　免疫组织化学检测表明 ,表达质粒的转染率为 5 %～ 7% ,逆转率病毒的感染率为 18%～ 2 0 % ;根据GDNF标准品蛋白条带含量与Westernblot结果的相应A值的标准曲线 ,推断出质粒转染和逆转率病毒感染的成纤维细胞中单个阳性细胞表达的TH相对平均含量分别为 4 76× 10 - 2 A和 4 35× 10 - 2 A ,质粒转染和逆转率病毒感染的脑胶质细胞分别是 5 4 5×10 - 2 A和 5 0 5× 10 - 2 A。　结论　不论是质粒载体还是逆转录病毒载体所携带的外源基因在两种细胞的单个阳性细胞中的表达无显著性差异。但由于逆转录病毒载体的感染率高于质粒载体 ,对于原代培养的成纤维细胞和脑胶质细胞 ,逆转率病毒载体是一种更好的表达载体。 展开更多

关键词 帕金森病 酪氨酸羟化酶 质粒载体 逆转录病毒载体 成纤维细胞 脑胶质细胞

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以培养应用型人才为目标的《数据结构》课程改革探索——信管试点专业《数据结构》课程建设方案研究 被引量：1

8

作者 赵庆聪 陈立南 王磊 《教育教学论坛》 2013年第51期27-28,共2页

在多年《数据结构》课程教学的基础上,对现行的《数据结构》教学模式进行了分析研究,探索有效应用于课程教学的途径与方法,注重培养学生的实践、创新能力,以满足信息管理与信息系统试点专业高质量IT应用型人才培养目标的要求。

关键词 应用型人才 数据结构 课程改革

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代谢型谷氨酸受体在基底神经节功能中的作用 被引量：1

9

作者 秦丽华 陈立南 +1 位作者 于恩华 徐群渊 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期91-92,共2页

关键词 代谢型谷氨酸受体 基底神经节 功能

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IPRPS——一种简单有效的设计加权公平排队算法的模型

10

作者 陈立南 马跃 高占春 《计算机研究与发展》 EI CSCD 北大核心 2002年第1期35-40,共6页

PRPS是一种设计加权公平排队算法的数据包模型 ,Stiliadis指出 PRPS具有与设计加权公平排队算法的理想模型—— RPS相近的延迟和公平性特性 .但实际上 ,在最坏情况下 ,PRPS与 RPS会有很大的差距 .首先指出这种差距的存在 ,同时通过调节... PRPS是一种设计加权公平排队算法的数据包模型 ,Stiliadis指出 PRPS具有与设计加权公平排队算法的理想模型—— RPS相近的延迟和公平性特性 .但实际上 ,在最坏情况下 ,PRPS与 RPS会有很大的差距 .首先指出这种差距的存在 ,同时通过调节数据包进入 PRPS的时间 ,提出了一种简单有效地设计加权公平排队算法的模型—— IPRPS,并证明了 IPRPS具有与 展开更多

关键词 链路 业务流 服务质量 计算机网络 IPRPS 设计加权公平排队算法

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以提升实践能力为主线的C程序设计考核方案研究——信管专业C程序设计考试改革探索与实践

11

作者 赵庆聪 孙志恒 陈立南 《大学教育》 2013年第24期80-82,共3页

针对C程序设计课程目前的考试方式存在的问题进行了分析,提出关于信管专业C程序设计考试改革的设想与思路,制定出以提升实践能力为主线的考核方案,并且在实际教学中进行了初步实施,取得了良好效果。

关键词 C程序设计考核方案 实践能力

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基于结构方程模型的蔬菜质量安全风险分析

12

作者 赵庆聪 陈立南 《北京信息科技大学学报（自然科学版）》 2012年第4期21-27,共7页

把蔬菜生产各环节中影响蔬菜质量安全风险的因素分为蔬菜生产者安全生产行为、政策法规制度、社会环境3个方面,对于无法直接测量的影响因素,采用结构方程模型方法,设定了39个可测量指标,构建出蔬菜质量安全风险影响因素的概念模型,提出... 把蔬菜生产各环节中影响蔬菜质量安全风险的因素分为蔬菜生产者安全生产行为、政策法规制度、社会环境3个方面,对于无法直接测量的影响因素,采用结构方程模型方法,设定了39个可测量指标,构建出蔬菜质量安全风险影响因素的概念模型,提出了16个假设。通过对这些因素对蔬菜质量安全影响程度的分析,得出了蔬菜生产过程各环节影响蔬菜质量安全风险的主要因素,提出了应对措施,并建议全面构建蔬菜质量安全风险防范体系。 展开更多

关键词 蔬菜质量安全 结构方程模型 风险分析

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带6个组氨酸尾的可溶性GDNF第1受体的重组表达和活性分析

13

作者 陈立南 孙成三 +4 位作者 陈晴 段德义 杨慧 张进禄 徐群渊 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期157-160,共4页

目的　用DNA重组方法去除胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)受体 (GFRα 1)基因 3’ 端的与细胞膜糖基化磷脂酰肌醇 (GPI)相连的信号序列 ,使表达的GFRα 1以可溶性形式介导GDNF的作用。　方法　设计一对引物 ,其中下游引物含有 6个组氨... 目的　用DNA重组方法去除胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)受体 (GFRα 1)基因 3’ 端的与细胞膜糖基化磷脂酰肌醇 (GPI)相连的信号序列 ,使表达的GFRα 1以可溶性形式介导GDNF的作用。　方法　设计一对引物 ,其中下游引物含有 6个组氨酸密码子序列 ,以人GFRα 1全长cDNA为模板 ,PCR扩增编码可溶性GFRα 1序列并亚克隆于pBK RSV真核表达载体 ,转染COS 7细胞 ,收获培养上清 ,进行SDS PAGE及Western免疫印迹分析 ;使用钴离子金属螯合层析柱进行纯化 ;检测RET酪氨酸磷酸化以鉴定其生物学活性。　结果　Western免疫印迹证实培养上清液中有分子量为 6 0kD的特异阳性条带 ,与糖基化的GFRα 1分子量相符 ;金属螯合层析得到纯度达90 %以上的重组GFRα 1蛋白 ,每mlCOS 7培养上清中含有 0 5 μg。　结论　带 6个组氨酸尾的重组可溶性GFRα 1能够介导GDNF的作用 。 展开更多

关键词 蛋白纯化 真核表达 受体 表位标记 胶质细胞源性神经营养因子 受体酪氨酸激酶 重组表达

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C#应用开发入门课程教学方法改革建议

14

作者 陈立南 赵庆聪 王磊 《教育教学论坛》 2015年第51期73-74,共2页

通过C#应用开发入门课程学习,帮助学生进一步建立程序设计的思想,掌握程序设计的基本方法,提高学生编程能力和利用计算机解决专业问题的能力。通过对我校信息管理学院"C#应用开发入门"课程当前教学现状和存在问题进行研究,提... 通过C#应用开发入门课程学习,帮助学生进一步建立程序设计的思想,掌握程序设计的基本方法,提高学生编程能力和利用计算机解决专业问题的能力。通过对我校信息管理学院"C#应用开发入门"课程当前教学现状和存在问题进行研究,提出了今后课程改革的新思路与方法。 展开更多

关键词 课程改革 教学改革 教学手段

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