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吉林省规模化猪场断奶仔猪大肠杆菌分离鉴定与耐药表型及耐药基因检测 被引量：7
1
作者 冀亚路 姜秋杰 +8 位作者 袭恒豫 张昊 毕斓婷 陈椿桦 付殿国 孙长江 冯新 顾敬敏 韩文瑜 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期2357-2363,共7页
为了解"禁抗"前吉林省不同地区规模化生猪养殖场耐药现状以及耐药基因存在情况,本研究对吉林省20个市(县)35个规模化生猪养殖场断奶仔猪的粪便样本进行大肠杆菌分离鉴定、药物敏感性测定以及耐药基因检测,共采集粪便样本1144... 为了解"禁抗"前吉林省不同地区规模化生猪养殖场耐药现状以及耐药基因存在情况,本研究对吉林省20个市(县)35个规模化生猪养殖场断奶仔猪的粪便样本进行大肠杆菌分离鉴定、药物敏感性测定以及耐药基因检测,共采集粪便样本1144份(994份腹泻粪便样本,150份健康粪便样本),通过平板划线、16S rRNA测序以及生化鉴定,共分离到892株大肠杆菌,总分离率为77.97%。药物敏感性测定结果表明,大肠杆菌分离株存在严重的多重耐药性,其中对β-内酰胺类、大环内酯类、四环素类、磺胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类以及氯霉素类抗生素耐药率较高。相比之下,大肠杆菌分离株对头孢类和多磷类抗生素耐药率较低,未发现多黏菌素耐药菌株。对不同猪场的175株大肠杆菌分离株进行耐药基因检测,共检出15种耐药基因,bla;(30.85%)、floR(57.14%)、aac(3)-Ⅰb(36.57%)、ant(3)-Ⅰa(66.28%)、aac(3)-Ⅱb(40.57%)、sulⅠ(37.71%)以及aac(6)-Ⅰb(41.71%)检出率较高。其中,含有2类以上抗生素耐药基因的大肠杆菌比例高达82.28%(144/175)。本研究结果表明,吉林省猪场大肠杆菌存在严重的多重耐药性,并携带多种耐药基因,为临床用药、进一步研究大肠杆菌耐药分子机制以及"禁抗"前了解吉林省大肠杆菌耐药情况提供依据。 展开更多
关键词 断奶仔猪 大肠杆菌 耐药性 耐药基因
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仔猪致泻性大肠杆菌毒力因子多重PCR检测方法的建立与应用 被引量：5
2
作者 毕斓婷 冀亚路 +10 位作者 袭恒豫 张昊 陈椿桦 姜秋杰 付殿国 牛伟 孙长江 冯新 吕伟 顾敬敏 韩文瑜 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期250-255,共6页
本研究以致泻性大肠杆菌(DEC)的4种毒力因子EAST1、LT、STa和STb为模板设计特异性引物并优化各项反应条件,以建立仔猪DEC的多重PCR检测方法。该方法具有较好的特异性,只对DEC产生特异性条带,对非DEC及其他病菌则呈阴性。利用所建立的多... 本研究以致泻性大肠杆菌(DEC)的4种毒力因子EAST1、LT、STa和STb为模板设计特异性引物并优化各项反应条件,以建立仔猪DEC的多重PCR检测方法。该方法具有较好的特异性,只对DEC产生特异性条带,对非DEC及其他病菌则呈阴性。利用所建立的多重PCR方法对吉林省各猪场采集的样本进行检测,结果表明,在测定的猪场中,携带EAST1毒力基因的阳性菌株引起的大肠杆菌感染广泛存在,携带STb毒力基因的阳性菌株次之,携带STa及LT毒力基因的阳性菌株引起的大肠杆菌感染相较于以上2个毒力因子在所测猪场中占比略低。综上所述,本方法的建立为DEC中常见毒力因子的快速检测及分子流行病学调查提供了新的手段。 展开更多
关键词 致泻性大肠杆菌 毒力因子 多重PCR
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引种仔猪进境及传代后肠道菌群演替发育规律 被引量：1
3
作者 陈椿桦 李响 +6 位作者 王颖 许智强 李可 刘蔓莉 王卓 宋战昀 冯新 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期883-891,共9页
我国每年从国外大量引进生猪种质资源,生猪养殖的重引进、轻选育,易陷入“引种-退化-引种”的不良循环。本研究以种猪肠道菌群演替发育规律为核心,分析目前饲养方式和环境因素对肠道菌群的影响,为种猪引进后的饲养管理提供改进依据。以... 我国每年从国外大量引进生猪种质资源,生猪养殖的重引进、轻选育,易陷入“引种-退化-引种”的不良循环。本研究以种猪肠道菌群演替发育规律为核心,分析目前饲养方式和环境因素对肠道菌群的影响,为种猪引进后的饲养管理提供改进依据。以从法国引进的杜洛克、皮特兰、长白断奶仔猪为研究对象,分(35±5)日龄、(280±5)日龄和子代(35±5)日龄3个阶段采集粪便样品,用Illumina Miseq平台对样品微生物组的16S rRNA基因V3~V4区进行分析和比较,阐述种猪肠道菌群演替发育规律,探讨饲养方式和环境因素改变对肠道菌群的影响。结果显示,皮特兰种猪肠道菌群受环境影响大,与进境时(a组)相比,进境后(b组)菌群多样性降低,丰度显著增加,但经过传代后(d组)菌群多样性增加。3个品种进境后(b组)与传代后(d组)菌群结构变化趋势相同:在门水平,厚壁菌门、拟杆菌门丰度增加,变形菌门丰度显著降低;在属水平,仔猪肠道乳杆菌属和不动杆菌属丰度显著降低,链球菌属、普氏菌属、志贺菌属等丰度增加。在功能组成上,进境仔猪在我国经过1次传代后,功能组成上与刚进境时已没有交叉;仔猪视黄醇代谢,细胞色素P450对异生素的代谢极显著下调(P<0.01);氟苯甲酸甲酯降解以及肽聚糖合成功能显著下调(P<0.05)。因此,本研究认为环境条件对仔猪进境后肠道菌群多样性具有显著影响,传代也不能逆转已经产生的变化,环境因素引起仔猪肠道菌群变化是性状退化或不能稳定遗传的因素之一,提示仔猪引种后应加强科学化的饲养管理,注重对仔猪乳杆菌、视黄醇等物质的补充。 展开更多
关键词 生猪养殖 跨境引种 肠道菌群 环境 遗传
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超声诊断在艰难梭菌小鼠感染模型CSS分级评价中的应用 被引量：1
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作者 高晨程 俞添贺 +2 位作者 陈椿桦 王卓 冯新 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1017-1023,共7页
艰难梭菌是常见的院内致病菌之一,在世界范围内均有发生,近年来我国感染病例也有增多的趋势。动物感染模型是研究艰难梭菌的重要工具,本试验将超声诊断技术应用于艰难梭菌感染(CDI)小鼠模型的建立,将超声诊断的图像、参数及结果用于小... 艰难梭菌是常见的院内致病菌之一,在世界范围内均有发生,近年来我国感染病例也有增多的趋势。动物感染模型是研究艰难梭菌的重要工具,本试验将超声诊断技术应用于艰难梭菌感染(CDI)小鼠模型的建立,将超声诊断的图像、参数及结果用于小鼠感染的临床症状严重程度评分(CSS)分级系统中,为艰难梭菌小鼠感染模型评价以及临床诊断和治疗提供超声诊断影像学及数据参考。选用SPF级6~8周龄雄性C57BL/6小鼠,用混合抗生素诱导法建立感染模型。在造模后3 d进行CSS打分、超声诊断及解剖学鉴定。结果表明,CSS系统可以对模型组三类指标进行判定,且感染模型组与对照组呈现极显著性差异(P<0.01)。超声诊断对CDI造成的肠管病变的影像结果,与解剖学鉴定结果一致,解剖后的结肠病变胀气部位直径均值在低无回声区域长和宽均值区间,与长均值呈现极显著性差异(P<0.01),与宽均值相近为无显著差异(P>0.05)。本试验为艰难梭菌小鼠感染模型的建立提供了便捷、实时、准确的评价方法。 展开更多
关键词 CDI模型 CSS系统标准及分级 解剖学鉴定 超声诊断
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基因工程鲎素对小鼠非特异性免疫的影响及作用机制
5
作者 邓贺文 冯新 +2 位作者 陈椿桦 王卓 韩东 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期988-992,1016,共6页
抗菌肽具有抗感染和介导宿主天然免疫防御作用,是理想的抗生素替代物,实验室前期用研发的基因工程鲎素(TPI)对小鼠金黄色葡萄球菌感染模型开展的治疗效果显示,小鼠感染模型肺部及其他脏器中菌含量明显减少,肺部的病理变化减轻,治疗效果... 抗菌肽具有抗感染和介导宿主天然免疫防御作用,是理想的抗生素替代物,实验室前期用研发的基因工程鲎素(TPI)对小鼠金黄色葡萄球菌感染模型开展的治疗效果显示,小鼠感染模型肺部及其他脏器中菌含量明显减少,肺部的病理变化减轻,治疗效果较好。本试验在此基础上,从宿主天然免疫防御的角度开展了TPI对小鼠非特异免疫功能的影响及机制研究。用滴鼻的方式给小鼠使用TPI,测定不同剂量TPI对小鼠体征指标,包括:体质量、肺廓清指数、脾脏指数的影响。用腹腔注射的方式给小鼠使用TPI,测定非特异性免疫相关指标,包括:小鼠单核细胞和巨噬细胞的吞噬能力、小鼠β-防御素2(mBD-2)和小鼠胸腺肽β4的表达水平,结果显示与对照组相比,TPI可提高小鼠增重,可显著提高小鼠的巨噬细胞吞噬能力及廓清指数;可上调小鼠脏器中mBD-2和小鼠胸腺肽β4的表达水平,增强宿主防御能力,激活机体非特异性免疫,提示TPI不但能直接杀伤病原体,还能够激活和协同宿主防御肽共同发挥非特异免疫作用。 展开更多
关键词 鲎素 抗菌肽 非特异性免疫
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