环磷酰胺致小鼠生精障碍作用研究 被引量：14

1

作者 陈指龙 张晓春 +1 位作者 薛立群 杨青 《动物医学进展》 北大核心 2017年第5期34-38,共5页

为探讨不同剂量环磷酰胺作用不同时间后诱导小鼠生精障碍的作用,将80只雄性ICR系小鼠随机分成20、40、80mg/kg体重环磷酰胺(CTX)处理组和生理盐水对照组,腹腔注射5d,每2d称重1次,2周和4周后分批检测睾丸指数、附睾指数、精子数和精子畸... 为探讨不同剂量环磷酰胺作用不同时间后诱导小鼠生精障碍的作用,将80只雄性ICR系小鼠随机分成20、40、80mg/kg体重环磷酰胺(CTX)处理组和生理盐水对照组,腹腔注射5d,每2d称重1次,2周和4周后分批检测睾丸指数、附睾指数、精子数和精子畸形率,并结合HE染色检测睾丸组织结构变化。结果显示,作用2周时,高剂量的CTX显著影响体重增长,而中低剂量组只有处理后短时间体重降低明显;睾丸的生精指数变化均不显著,但其组织结构发生不同程度的病理变化。作用4周时,只有高剂量组对体重产生显著的作用;生精指数包括睾丸指数、精子数以及精子畸形率,3个组与对照相比均表现出明显差异;睾丸发生病理学病变的程度随剂量的增加而更加明显。采用40mg/kg CTX腹腔注射5d,作用4周后能建立较为理想的小鼠生精障碍模型。 展开更多

关键词 环磷酰胺 生精障碍 睾丸 小鼠

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妊娠期代谢性疾病与胎盘发育 被引量：7

2

作者 范秀军 黄晨 +3 位作者 陈指龙 王鹤霏 黄斌斌 张键 《中国实用妇科与产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期959-963,共5页

通常妊娠期代谢性疾病的症状会伴随着胎儿和胎盘的娩出而缓解、暂时或完全恢复,所以胎儿和(或)胎盘在妊娠期的存在被认为是妊娠期代谢性疾病的主要病因或诱因。文章对妊娠期代谢性疾病与胎盘发育相关研究进行阐述,以期通过对现有研究进... 通常妊娠期代谢性疾病的症状会伴随着胎儿和胎盘的娩出而缓解、暂时或完全恢复,所以胎儿和(或)胎盘在妊娠期的存在被认为是妊娠期代谢性疾病的主要病因或诱因。文章对妊娠期代谢性疾病与胎盘发育相关研究进行阐述,以期通过对现有研究进展、研究方法以及近期研究趋势的了解,为本领域将来的研究方法和方向、疾病的早期诊断和防治以及改善孕期和母子健康提供参考和依据。 展开更多

关键词 妊娠期糖尿病 子痫前期 胎盘发育 靶向治疗

原文传递

白藜芦醇通过沉默调节蛋白1-解偶联蛋白2信号通路降低小鼠睾丸间质细胞TM3的氧化损伤 被引量：6

3

作者 张晓春 陈指龙 +3 位作者 方娟 黎陈 伍小松 杨青 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期2632-2640,共9页

本试验旨在研究白藜芦醇(RES)对氧化损伤小鼠睾丸间质细胞TM3的保护作用,并探索其可能的作用机制。首先,用不同浓度(0、150、200、250、300μmol/L)的过氧化氢(H2O2)处理小鼠睾丸间质细胞TM3 8 h,确定建立氧化损伤细胞模型的适宜H2O2浓... 本试验旨在研究白藜芦醇(RES)对氧化损伤小鼠睾丸间质细胞TM3的保护作用,并探索其可能的作用机制。首先,用不同浓度(0、150、200、250、300μmol/L)的过氧化氢(H2O2)处理小鼠睾丸间质细胞TM3 8 h,确定建立氧化损伤细胞模型的适宜H2O2浓度;然后,用不同浓度(0、2.5、5.0和10.0μmol/L)的RES分别处理正常细胞24 h,确定RES安全浓度;最后,用安全浓度的RES处理氧化损伤细胞24 h。在整个培养过程中采用i CELLigence实时无标记细胞功能分析仪监测细胞的增殖情况;待安全浓度的RES处理氧化损伤细胞结束后采用2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)探针法检测细胞中活性氧(ROS)的含量,实时荧光定量PCR(RT-q PCR)和蛋白质印迹(Western blotting)法分别检测沉默调节蛋白1(SIRT1)/解偶联蛋白2(UCP2)信号通路中关键因子SIRT1和UCP2 mRNA和蛋白质的相对表达量。结果表明:1)用浓度为150μmol/L及以上的H2O2处理细胞8 h后,极显著降低细胞存活率(P<0.01),因此确定150μmol/L为建立氧化损伤细胞模型的适宜H2O2浓度。2)用10.0μmol/L及以下浓度的RES处理正常细胞24 h后,细胞存活率均无显著变化(P>0.05);用2.5、5.0和10.0μmol/L的RES处理氧化损伤细胞24 h后,细胞存活率均显著提高(P<0.05),且各浓度RES组间无显著差异(P>0.05)。因此,选用5.0μmol/L为RES的安全浓度。3)用5.0μmol/L的RES处理氧化损伤细胞24 h后,细胞中ROS的含量极显著降低(P<0.01);细胞中SIRT1 mRNA和蛋白质的相对表达量极显著增加(P<0.01),而UCP2 mRNA和蛋白质的相对表达量则显著或极显著降低(P<0.01或P<0.05)。由此可见,适宜浓度的RES可激活SIRT1同时抑制UCP2的表达,UCP2通过负反馈调节方式减少细胞内ROS的生成,从而在一定程度上抑制TM 3细胞的氧化损伤。 展开更多

关键词 白藜芦醇 氧化损伤 沉默调节蛋白1 解偶联蛋白2 小鼠睾丸间质细胞TM3

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猪圆环病毒2型湖南株的分离鉴定与进化分析 被引量：6

4

作者 陈指龙 邓吉平 +5 位作者 湛洋 林源 王昌建 谭艳芳 杨青 袁安文 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1522-1530,共9页

为了解湖南某规模猪场引起繁殖障碍主要病原的感染情况,本研究通过荧光定量PCR检测了血液样品中的6种病原,发现存在PCV2感染。对阳性样品进行全基因组扩增、克隆和测序后,与国内外其他PCV毒株进行同源性比对,绘制系统遗传进化树,并通过... 为了解湖南某规模猪场引起繁殖障碍主要病原的感染情况,本研究通过荧光定量PCR检测了血液样品中的6种病原,发现存在PCV2感染。对阳性样品进行全基因组扩增、克隆和测序后,与国内外其他PCV毒株进行同源性比对,绘制系统遗传进化树,并通过猪肾细胞系对病毒进行分离培养及免疫荧光鉴定。结果显示,样品中分离的2株毒株均为PCV2d型,基因组全长均为1767 bp,其核苷酸同源性为99.7%,四处差异均位于ORF2区,其中命名为NX-P3-1毒株的第97位精氨酸突变为甘氨酸,位于衣壳蛋白T细胞表位区;与其他毒株相比,与海南HN1407株同源性最高,分别为99.7%和99.6%,遗传亲缘关系较为接近;PCV2d型毒株之间的差异主要位于B细胞表位区;免疫荧光鉴定显示NX-P3-1毒株可稳定感染和增殖。本研究为分析湖南PCV2流行情况提供了参考依据。 展开更多

关键词 猪圆环病毒2型 分离鉴定 进化分析 湖南省

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猪繁殖与呼吸综合征病毒湖南分离株ORF5基因的遗传进化分析 被引量：6

5

作者 邓吉平 陈指龙 +4 位作者 郭松扬念 张坤 许道军 杨青 袁安文 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第10期3795-3802,共8页

为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在湖南省地方猪保种场的感染情况,本研究在2019-2020年间从湖南省2个地方猪保种场采集287份全血样品。首先将血样混合成41份,采用RT-PCR或PCR法进行PRRSV病原检测,进一步通过高保真PCR扩增从PRRSV... 为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在湖南省地方猪保种场的感染情况,本研究在2019-2020年间从湖南省2个地方猪保种场采集287份全血样品。首先将血样混合成41份,采用RT-PCR或PCR法进行PRRSV病原检测,进一步通过高保真PCR扩增从PRRSV阳性样品中扩增PRRSV ORF5基因;测序后利用DNAStar软件分析获得的ORF5基因及其编码的GP5氨基酸与国内外不同PRRSV毒株的遗传进化关系;最后用PRRSV阳性血清接种Marc-145细胞,经盲传分离毒株,并用Reed-Muench法测定病毒滴度。结果显示,检测的41份混样中有3份PRRSV病原核酸呈阳性;从PRRSV阳性混样中单独扩增获得6条PRRSV ORF5基因序列,均属于PRRSV-2型的lineage 8分支,相似性为99.2%~99.8%;6条ORF5基因编码的GP5蛋白氨基酸序列在信号肽区域(第23位)、潜在的N-糖基化位点(第33位)和表位C(第59位)存在差异;PRRSV阳性血清接种Marc-145细胞盲传5代后出现明显的细胞病变,获得1株PRRSV毒株,命名为NX-1,病毒TCID50为4×10^(5)/mL。本研究表明,湖南省地方猪保种场存在PRRSV感染,感染的PRRSV属于PRRSV-2型的lineage 8,其GP5氨基酸序列存在的多处变异可能是造成疫苗免疫失败的原因之一,以上结果可为湖南省地方猪保种场的免疫防控提供一定参考。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV) ORF5基因 遗传进化分析

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细菌脂多糖急性暴露通过炎症反应诱导小鼠睾丸损伤 被引量：5

6

作者 张逢 陈指龙 +5 位作者 易思亮 许璐瑶 方娟 黎陈 傅胜才 杨青 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1099-1105,共7页

旨在研究细菌脂多糖(LPS)急性暴露对小鼠睾丸及其功能的影响。将健康雄性小鼠随机分为4组:对照组(Control)、1.25 mg·kg^(-1) LPS组、2.5 mg·kg^(-1) LPS组和5.0 mg·kg^(-1) LPS组,对照组腹腔注射200μL生理盐水,其余3... 旨在研究细菌脂多糖(LPS)急性暴露对小鼠睾丸及其功能的影响。将健康雄性小鼠随机分为4组:对照组(Control)、1.25 mg·kg^(-1) LPS组、2.5 mg·kg^(-1) LPS组和5.0 mg·kg^(-1) LPS组,对照组腹腔注射200μL生理盐水,其余3组注射等体积含不同剂量的LPS,作用12 h。收集睾丸组织制作石蜡切片,染色后观察其病理变化,记录体重、睾丸和附睾指数,并测定精子品质相关指标,用RT-qPCR法检测炎症相关基因TNF-α、IL-6、GAS6和TGF-β1的转录,同时用ELISA检测血清中睾酮(T)的含量。结果表明,与对照组相比,LPS急性暴露时,以剂量依赖性方式降低小鼠体重(P<0.05或P<0.01),同时显著降低睾丸指数(P<0.05或P<0.01)、精子密度(P<0.01)及精子活力(P<0.05或P<0.01),增加精子畸形率(P<0.05或P<0.01);使睾丸组织发生不同程度的病理学变化,表现在生精细胞凋亡,曲细精管管腔增大,精子数量减少等;导致血清中睾酮(T)的含量显著下降;另外,LPS还呈剂量依赖方式增加促炎因子TNF-α和IL-6及抑制抗炎因子GAS6和TGF-β1的转录。结果提示,细菌LPS急性暴露可通过破坏机体中炎症因子的平衡,使睾丸组织受到损伤从而导致生精障碍。 展开更多

关键词 脂多糖 睾丸 炎症因子 睾酮

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孕酮对子宫蓄脓犬子宫内膜基质细胞增殖的影响 被引量：1

7

作者 郭松扬念 常仁旭 +2 位作者 陈指龙 刘进辉 杨青 《动物医学进展》 北大核心 2023年第4期20-24,共5页

旨在研究子宫蓄脓对犬子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells,ESCs)增殖的影响及孕酮(progesterone,P_(4))的干预作用。收集健康犬和经腹部B超确诊患子宫蓄脓犬的子宫,采用胶原酶消化法分离ESCs,并通过细胞免疫荧光检测进行鉴定;... 旨在研究子宫蓄脓对犬子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells,ESCs)增殖的影响及孕酮(progesterone,P_(4))的干预作用。收集健康犬和经腹部B超确诊患子宫蓄脓犬的子宫,采用胶原酶消化法分离ESCs,并通过细胞免疫荧光检测进行鉴定;采用CCK-8法检测培养不同时间后两种ESCs的细胞活力及孕酮作用的影响。结果显示,胶原酶消化法可分离获得高纯度的犬ESCs;将分离的ESCs培养24 h和48 h时,子宫蓄脓犬ESCs的细胞活力显著高于健康犬(P<0.01)。用0、5、15、30 ng/mL等不同浓度P_(4)处理两种ESCs,当作用24 h时,两种细胞的活力与相应的对照比均无显著变化(P>0.05);作用48 h时,30 ng/mL的P_(4)可显著促进健康犬ESCs的增殖(P<0.01),而对子宫蓄脓犬ESCs的增殖具有显著的抑制作用(P<0.05);作用72 h时,3种浓度P_(4)均显著促进健康犬ESCs的增殖(P<0.01),但对子宫蓄脓犬ESCs的增殖均无显著影响(P>0.05)。以上结果表明,子宫蓄脓犬ESCs的快速增殖可能与子宫内膜的囊性增生密切相关,P_(4)可促进健康犬ESCs的增殖,但在一定程度上抑制子宫蓄脓犬ESCs的增殖。 展开更多

关键词 犬子宫蓄脓 子宫内膜基质细胞 孕酮

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猪伪狂犬病病毒感染对PK-15细胞增殖和热休克蛋白27、70和90表达的影响 被引量：4

8

作者 方娟 陈指龙 +3 位作者 黎陈 张逢 伍小松 杨青 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1441-1448,共8页

研究猪伪狂犬病病毒(PRV)-YY株感染对宿主细胞增殖和热休克蛋白(HSP)27、70和90表达的影响。用Reed-Muench法测定PRV-YY滴度后,用不同病毒量感染PK-15细胞,采用iCELLigence实时无标记细胞功能分析仪监测细胞的增殖,并用实时荧光定量PCR(... 研究猪伪狂犬病病毒(PRV)-YY株感染对宿主细胞增殖和热休克蛋白(HSP)27、70和90表达的影响。用Reed-Muench法测定PRV-YY滴度后,用不同病毒量感染PK-15细胞,采用iCELLigence实时无标记细胞功能分析仪监测细胞的增殖,并用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和免疫印迹试验(Western blot)分别检测感染后细胞中病毒核酸含量及三种HSPs mRNA和蛋白质表达的变化。结果表明,当用80 TCID50和100 TCID50的病毒量(滴度为106TCID50·0.1 mL^-1)感染细胞时,在所监测的时间内细胞指数均显著低于对照组;当感染60 h时,除10 TCID50感染组外,其余各组的细胞指数均极显著低于对照组(P<0.01);用10 TCID50病毒感染细胞60 h时,细胞中病毒核酸含量达峰值;当病毒黏附结束即感染0 h时,HSP70和90 mRNA的转录升高(P<0.01),两者分别在感染6、12 h后表达降低(P<0.01),而HSP27在感染0 h升高(P<0.05),3 h时极显著高于对照组(P<0.01),但在感染48 h后其表达降低;PRV感染细胞后三种HSP蛋白的变化趋势基本与其mRNA水平的变化类似(部分时间点不同)。结果表明,一定滴度的PRV可显著抑制PK-15细胞的增殖,PRV感染可诱导PK-15细胞迅速发生应激反应,使HSP27、70和90表达快速升高,三种HSP的快速应答可能在保护细胞免受PRV-YY的感染损伤起着重要作用。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病病毒 细胞增殖 热休克蛋白 表达

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白藜芦醇通过抑制炎症和细胞凋亡预防脂多糖对小鼠肝脏的损伤 被引量：3

9

作者 李川 张逢 +2 位作者 陈指龙 杨青 袁安文 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期1699-1707,共9页

本试验旨在研究白藜芦醇(RES)对脂多糖(LPS)诱导小鼠肝脏损伤的预防作用。首先,将50只小鼠随机分为5组,分别为对照组、LPS组、RES-L+LPS组、RES-M+LPS组、RES-H+LPS组,每组10只。其中,RES-L+LPS组、RES-M+LPS组、RES-H+LPS组小鼠分别连... 本试验旨在研究白藜芦醇(RES)对脂多糖(LPS)诱导小鼠肝脏损伤的预防作用。首先,将50只小鼠随机分为5组,分别为对照组、LPS组、RES-L+LPS组、RES-M+LPS组、RES-H+LPS组,每组10只。其中,RES-L+LPS组、RES-M+LPS组、RES-H+LPS组小鼠分别连续灌胃300μL含10(低剂量)、20(中剂量)和40 mg/kg BW(高剂量)RES的0.5%羧甲基纤维素钠溶液28 d,随后腹腔注射LPS(5.0 mg/kg BW)作用12 h;LPS组和对照组小鼠连续灌胃等体积的0.5%羧甲基纤维素钠溶液28 d,随后分别注射等体积的LPS和生理盐水作用12 h。处理结束后,称重,收集肝脏组织,计算肝脏指数;用苏木精-伊红(HE)染色后观察肝脏组织病理变化,并用原位缺口末端标记(TUNEL)法分析肝脏组织的凋亡情况;进一步采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肝脏中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)以及凋亡相关基因Bax和Bcl-2 mRNA的表达水平,采用蛋白质免疫印迹(Western Blot)法检测肝脏中Bax及Bcl-2蛋白的表达水平。结果显示:1)LPS诱导后,肝脏组织出现明显的组织病理学变化,可观察到细胞肿胀、部分细胞核深染、中央静脉充血及炎症细胞浸润等,用RES预处理可减少相关病理变化,且呈剂量依赖。通过TUNEL染色发现LPS诱导可引起肝组织中细胞发生凋亡,RES预处理可缓解其细胞凋亡,且以高剂量RES的作用效果较好。2)LPS诱导可极显著促进肝脏中炎症因子IL-6和TNF-α以及促凋亡基因Bax mRNA的表达(P<0.01),并极显著抑制肝脏中抗凋亡基因Bcl-2 mRNA的表达(P<0.01);RES预处理可在一定程度上抑制LPS诱导所致的基因表达的变化;进一步研究发现RES可极显著抑制LPS诱导所致的促凋亡蛋白Bax表达水平的上升(P<0.01),但对抗凋亡蛋白Bcl-2的作用不显著(P>0.05)。由此可见,LPS诱导导致小鼠肝脏发生组织病理损伤,用RES预处理可在一定程度上抑制炎症和细胞凋亡,降低肝脏损伤。 展开更多

关键词 白藜芦醇 脂多糖 肝脏 炎症因子 凋亡

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人滋养层细胞侵袭力分子调节机制研究 被引量：2

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作者 黎陈 陈指龙 +1 位作者 范秀军 杨青 《医学信息》 2019年第13期21-24,共4页

胎盘是妊娠过程中形成的暂时性的特异器官,它在母体和胎儿间起着重要的桥梁作用。滋养层细胞具有类似于肿瘤细胞迁移和浸润的能力,作为胎盘组织的主要组成细胞之一,在胚胎植入、胎盘的形成和发育等许多生理过程中发挥着重要的作用,但同... 胎盘是妊娠过程中形成的暂时性的特异器官,它在母体和胎儿间起着重要的桥梁作用。滋养层细胞具有类似于肿瘤细胞迁移和浸润的能力,作为胎盘组织的主要组成细胞之一,在胚胎植入、胎盘的形成和发育等许多生理过程中发挥着重要的作用,但同时也是多种毒素和病原微生物入侵时的靶细胞。滋养细胞侵入过度将导致绒毛膜癌等疾病的发生,浸润不足则可能造成流产、子痫前期等妊娠期疾病。目前,诸多研究表明在胎盘形成过程中,有许多分子和信号通路参与对其滋养层细胞的调控,但滋养层细胞迁移与浸润的具体机制尚不完全明确。本文对人滋养层细胞侵袭力分子调节机制进行了系统论述,旨在为研究病理性妊娠的发生、发展过程提供参考。 展开更多

关键词 人滋养层细胞 细胞迁移 细胞浸润 胎盘

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犬蛔虫与绦虫混合感染的病理学观察

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作者 刘犇 陈指龙 +2 位作者 郑文亚 庹云 许贻宇 《黑龙江畜牧兽医（下半月）》 北大核心 2016年第4期103-104,280,共3页

为了探讨蛔虫与绦虫混合感染犬的病理变化特征,为临床治疗提供相关依据,对一例因蛔虫与绦虫混合感染致死的病犬进行了组织病理学观察。结果表明:病犬胃肠黏膜损伤严重,黏膜层有大量细胞发生变性、坏死、脱落,并有炎性细胞浸润,十二指肠... 为了探讨蛔虫与绦虫混合感染犬的病理变化特征,为临床治疗提供相关依据,对一例因蛔虫与绦虫混合感染致死的病犬进行了组织病理学观察。结果表明:病犬胃肠黏膜损伤严重,黏膜层有大量细胞发生变性、坏死、脱落,并有炎性细胞浸润,十二指肠切片上发现蛔虫虫体结构,空肠切片上有绦虫节片结构;淋巴结严重出血,皮质和髓质炎性细胞浸润;肾小球变形、萎缩,髓质大量红细胞渗出;肝脏有蛔虫结构、瘀血,肝细胞发生变性;肺脏瘀血,肺泡中隔变宽、炎性细胞浸润。说明蛔虫与绦虫的混合感染对犬胃肠道损伤严重,对其他实质性器官造成不同程度的损伤。 展开更多

关键词 犬 蛔虫 绦虫 混合感染 病理学观察

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高寒地区电力机车冬季防寒举措探究

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作者 陈指龙 《电脑乐园》 2020年第10期452-452,共1页

我国土地面积广阔,南北跨度大,在高寒地区冬季气温可以达到非常低的程度,而电力机车作为较精密的铁路交通机车,其冬 季在高寒地区运行的防寒工作就成为了一个问题。本文章首先对高寒地区电力机车冬季防寒的必要性进行了简单阐述,其次对... 我国土地面积广阔,南北跨度大,在高寒地区冬季气温可以达到非常低的程度,而电力机车作为较精密的铁路交通机车,其冬 季在高寒地区运行的防寒工作就成为了一个问题。本文章首先对高寒地区电力机车冬季防寒的必要性进行了简单阐述,其次对高寒地区电 力机车冬季防寒的现存问题进行了探究,最后针对 高寒地区电力机车冬季防寒问题列举了几条参考性应对举措。 展开更多

关键词 高寒地区 电力机车 防寒举措

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