老年脑卒中后抑郁症脑电图特点及影响抑郁因素分析 被引量：29

1

作者 任延昆 陈子月 +5 位作者 李晓阳 张丽芳 杨潇 刘涛 乔钦增 魏双平 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2020年第3期253-257,共5页

目的探讨老年脑卒中后抑郁症(PSD)脑电图特点及影响抑郁发生的因素。方法选择老年脑卒中患者500例,根据是否存在PSD将患者分为PSD组200例(其中轻型组61例、中型组85例、重型组54例)和非PSD组300例。脑卒中发作7天内实施脑电图检查,观察... 目的探讨老年脑卒中后抑郁症(PSD)脑电图特点及影响抑郁发生的因素。方法选择老年脑卒中患者500例,根据是否存在PSD将患者分为PSD组200例(其中轻型组61例、中型组85例、重型组54例)和非PSD组300例。脑卒中发作7天内实施脑电图检查,观察脑电图振幅、频率,以及α、β、δ、θ波的分布,采用单因素和多元逐步Logistic回归分析老年脑卒中合并抑郁的影响因素。结果PSD组脑电图异常率为53.00%,明显高于非PSD组43.67%;低振幅δ波所占比例(68.00%)明显高于非PSD组54.00%(P<0.05)。重型组脑电图异常率61.11%明显高于轻型组32.79%(P<0.05)。单因素分析显示,文化程度、高血压史、抑郁症史、家庭关系、病灶部位、脑电图特点是PSD的影响因素。多元逐步Logistic回归分析显示,文化程度高、高血压史、抑郁症史、家庭不和、基底节病变、低振幅δ波和脑电图异常是老年PSD的独立危险因素(P<0.05)。结论老年PSD的脑电图主要呈低振幅δ波活动,文化程度、高血压史、抑郁症史、家庭关系、基底节病变、脑电图低振幅δ波等因素和PSD具有紧密的关系。 展开更多

关键词 脑卒中 抑郁症 脑电图 老年 影响因素

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“互联网+”时代下企业人力资源管理变革创新探究 被引量：13

2

作者 戚谢文静 陈子月 《中国商论》 2018年第22期92-93,共2页

随着当今信息技术的快速发展,"互联网+"时代下的传统人力资源管理越来越受到挑战。本文从传统人力资源管理在新时代下的不足研究出发,分析了"互联网+"对人力资源管理产生的新趋势,并从管理者观念、人才互动、人才... 随着当今信息技术的快速发展,"互联网+"时代下的传统人力资源管理越来越受到挑战。本文从传统人力资源管理在新时代下的不足研究出发,分析了"互联网+"对人力资源管理产生的新趋势,并从管理者观念、人才互动、人才激励、管理体系等方面提出一些对策,以期为"互联网+"时代下我国人力资源管理变革创新提供新思路。 展开更多

关键词 “互联网+” 人力资源管理 变革创新

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耳聋胶囊HPLC指纹图谱建立及5种成分测定 被引量：7

3

作者 彭小园 陈子月 +5 位作者 崔兵 王月 张闯 李爱英 刘兴超 张一昕 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期718-723,共6页

目的建立耳聋胶囊(黄芩、龙胆、木通等)HPLC指纹图谱,并测定绿原酸、龙胆苦苷、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量。方法该药物75%乙醇提取液的分析采用WondaSil C_(18)-WR色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱... 目的建立耳聋胶囊(黄芩、龙胆、木通等)HPLC指纹图谱,并测定绿原酸、龙胆苦苷、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量。方法该药物75%乙醇提取液的分析采用WondaSil C_(18)-WR色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃;检测波长280 nm。对HPLC指纹图谱进行聚类分析、主成分分析。以黄芩苷为内标,采用一测多评法测定5种成分含量。结果10批样品HPLC指纹图谱中有13个共有峰,相似度均大于0.990。各批样品分为3类,2个主成分累积方差贡献率达83.468%。5种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9995),平均加样回收率99.39%~101.50%,RSD 0.59%~1.63%。一测多评法所得结果与外标法接近。结论该方法简便、准确、可行,可用于耳聋胶囊的质量控制。 展开更多

关键词 耳聋胶囊 HPLC指纹图谱 化学成分 聚类分析 主成分分析 一测多评

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自拟中药方辅助盐酸帕罗西汀对老年脑卒中后抑郁患者疗效及脑电图的影响 被引量：8

4

作者 任延昆 陈子月 +4 位作者 李晓阳 张丽芳 韩卫坤 乔钦增 李社改 《南昌大学学报（医学版）》 CAS 2019年第6期28-32,共5页

目的探讨自拟中药方辅助盐酸帕罗西汀对老年脑卒中后抑郁(post-stroke depression,PSD)患者疗效及脑电图的影响。方法选择老年PSD患者200例,采用随机数字表法分为对照组和研究组,每组各100例。对照组给予盐酸帕罗西汀抗抑郁治疗,研究组... 目的探讨自拟中药方辅助盐酸帕罗西汀对老年脑卒中后抑郁(post-stroke depression,PSD)患者疗效及脑电图的影响。方法选择老年PSD患者200例,采用随机数字表法分为对照组和研究组,每组各100例。对照组给予盐酸帕罗西汀抗抑郁治疗,研究组在对照组的基础上给予自拟中药方。比较2组临床疗效和脑电图指标的差异。结果研究组治疗总有效率明显高于对照组(P<0.05)。治疗前,2组SDS、ADL评分比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,2组SDS评分较治疗前明显降低,ADL评分较治疗前明显增高,研究组明显优于对照组(均P<0.001)。治疗前,2组脑电图异常率比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后,2组脑电图异常率较治疗前明显降低,研究组明显低于对照组(P<0.05)。2组药物不良反应率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论自拟中药方辅助盐酸帕罗西汀对老年PSD患者疗效满意,可有效缓解抑郁程度,促进脑电图恢复正常,改善生活质量。 展开更多

关键词 脑卒中后抑郁 自拟中药方 盐酸帕罗西汀 脑电图 老年人

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深圳红树林湿地系统健康评价 被引量：5

5

作者 陈子月 卓子荣 陈卓杰 《中国人口·资源与环境》 CSSCI CSCD 北大核心 2016年第S1期149-152,共4页

本文以深圳市福田自然保护区红树林为例,基于压力-状态-响应(PSR)模型构建了深圳红树林湿地生态系统健康评价体系,并根据熵权法和GM(1,1)模型计算深圳市红树林2008-2018年的综合生态健康指数(CHI)。结果表明:深圳市福田红树林生态系统... 本文以深圳市福田自然保护区红树林为例,基于压力-状态-响应(PSR)模型构建了深圳红树林湿地生态系统健康评价体系,并根据熵权法和GM(1,1)模型计算深圳市红树林2008-2018年的综合生态健康指数(CHI)。结果表明:深圳市福田红树林生态系统的综合健康指数(CHI)呈现波动上升趋势,表明红树林生态系统为亚健康状态,个别年份的生态系统综合生态健康指数出现下降,但从整体上看综合生态健康情况呈现良好发展的趋势。 展开更多

关键词 PSR模型 熵权法 红树林 生态系统健康评估

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操作性游戏提升听障幼儿学习能力的研究

6

作者 陈子月 《中国听力语言康复科学杂志》 2024年第5期517-518,532,共3页

目的探讨操作性游戏对学前听障幼儿学习能力的影响。方法选取12所融合幼儿园40名听障幼儿作为研究对象,根据随机数字表法分为对照组和实验组各20名。对照组接受常规教学,实验组增加操作性游戏训练。采用希-内学习能力评估量表分别对两... 目的探讨操作性游戏对学前听障幼儿学习能力的影响。方法选取12所融合幼儿园40名听障幼儿作为研究对象,根据随机数字表法分为对照组和实验组各20名。对照组接受常规教学,实验组增加操作性游戏训练。采用希-内学习能力评估量表分别对两组幼儿实验前后学习能力进行差异分析。结果对照组希-内学习能力均值为87.35分,实验组均值为96.25分,实验组显著优于对照组(P<0.05)。结论操作性游戏能有效提升听障幼儿的学习能力。 展开更多

关键词 操作性游戏 听障幼儿 学习能力

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提取工艺对大米淀粉的理化性质影响 被引量：5

7

作者 陈子月 高维 秦新光 《粮食与油脂》 北大核心 2019年第11期63-65,共3页

通过试验测得碱提法和酶解法获取的2种淀粉的理化性质,得出如下结论:碱法大米淀粉中的直链淀粉高于酶法大米淀粉中的直链淀粉含量;碱法大米淀粉中支链淀粉含量低于酶法大米淀粉中支链淀粉含量;碱法大米淀粉和酶法大米淀粉的溶解度随着... 通过试验测得碱提法和酶解法获取的2种淀粉的理化性质,得出如下结论:碱法大米淀粉中的直链淀粉高于酶法大米淀粉中的直链淀粉含量;碱法大米淀粉中支链淀粉含量低于酶法大米淀粉中支链淀粉含量;碱法大米淀粉和酶法大米淀粉的溶解度随着温度的升高而增大,碱法大米淀粉的溶解度对温度更为敏感;2种大米淀粉的淀粉-碘可见光吸收光谱的形状十分相似,都有最大吸收峰;酶法提取的大米淀粉的冻融稳定性比碱法提取的大米淀粉好。 展开更多

关键词 碱法提取 酶法提取 支链淀粉 溶解度 可见光吸收光谱 冻融稳定性

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熟地黄高压炮制工艺研究 被引量：3

8

作者 陈子月 彭小园 +3 位作者 解伟松 孙双龙 刘兴超 肖学凤 《中国药业》 CAS 2022年第7期53-56,共4页

目的探讨熟地黄炮制工艺。方法采用高压蒸制法对地黄分别进行一次蒸制和二次蒸制,高压一次蒸制后,用水或黄酒焖润4 h后进行二次蒸制。采用高效液相色谱法测定熟地黄中梓醇、地黄苷D、毛蕊花糖苷和5-羟甲基糠醛(5-HMF)含量,色谱柱为Wonda... 目的探讨熟地黄炮制工艺。方法采用高压蒸制法对地黄分别进行一次蒸制和二次蒸制,高压一次蒸制后,用水或黄酒焖润4 h后进行二次蒸制。采用高效液相色谱法测定熟地黄中梓醇、地黄苷D、毛蕊花糖苷和5-羟甲基糠醛(5-HMF)含量,色谱柱为WondaSil®C_(18)-WR柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为210 nm,柱温为35℃,进样量为20μL。结果梓醇、5-HMF、地黄苷D、毛蕊花糖苷的质量浓度分别在0.00888~0.07992 mg/mL、0.00880~0.07920 mg/mL、0.01204~0.10836 mg/mL、0.00698~0.06282 mg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9999,1.0000,1.0000,0.9987,n=5);精密度、重复性、稳定性试验结果的RSD均小于2%;平均加样回收率分别为99.22%,100.33%,100.25%,100.00%,RSD分别为0.71%,1.36%,0.92%,1.13%(n=6)。熟地黄最佳炮制工艺为120℃条件下第1次蒸制10 min,后用水或黄酒焖润4 h,第2次蒸制20 min。结论所建立的方法可用于同时测定熟地黄中地黄中梓醇、地黄苷D、毛蕊花糖苷和5-HMF含量;高压2次蒸制法可大大缩短熟地黄炮制时间,可为工业化生产提供参考。 展开更多

关键词 熟地黄 高压炮制 梓醇 地黄苷D 毛蕊花糖苷 5-羟甲基糠醛 高效液相色谱法 含量

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绘本角色游戏对听障幼儿沟通交往能力发展的个案分析 被引量：3

9

作者 何鑫燕 高静怡 陈子月 《中国听力语言康复科学杂志》 2018年第6期456-459,共4页

目的借助绘本故事在角色游戏中的运用,提高学前听障幼儿的沟通交往能力。方法对1例听障幼儿在角色游戏中与融合班健听幼儿间沟通交往的情况做观察记录,比较绘本介入前后个案与同伴游戏交往的时长及同伴数量的变化。结果个案单次角色游... 目的借助绘本故事在角色游戏中的运用,提高学前听障幼儿的沟通交往能力。方法对1例听障幼儿在角色游戏中与融合班健听幼儿间沟通交往的情况做观察记录,比较绘本介入前后个案与同伴游戏交往的时长及同伴数量的变化。结果个案单次角色游戏中与同伴交往的时长从2.1 min增加到5.9 min,日同伴间游戏交往总时长从7.5 min增加到14.8min,两期数据相比较,差异有统计学意义(P<0.01);可以说出名字的同伴数量从2人增至9人。干预前后个案单次角色游戏与同伴交往的时长、与同伴日游戏交往总时长差异极显著(P<0.01)。结论以特定的绘本故事为载体,通过角色游戏的形式开展融合教育活动,可以提高该个案的沟通交往能力。 展开更多

关键词 绘本 角色游戏 听障幼儿 沟通交往

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双曲线的渐近线探究性教学设计与反思 被引量：1

10

作者 陈子月 《中学教研（数学版）》 2005年第5期11-14,共4页

数学新课程以转变学生的学习方式为着眼点，以学生的发展为本，以发展学生创新能力为本，要求在教学中渗透“探究性学习”．如何让他们主动参与、展开探究呢?这是新课程实施过程中急需解决的问题．《双曲线的简单几何性质》这部分内容... 数学新课程以转变学生的学习方式为着眼点，以学生的发展为本，以发展学生创新能力为本，要求在教学中渗透“探究性学习”．如何让他们主动参与、展开探究呢?这是新课程实施过程中急需解决的问题．《双曲线的简单几何性质》这部分内容中，双曲线的渐近线是一个难点．在建构主义理论指导下，笔者精心设计，以自主学习为前提，以合作交流为形式，以探究建构为目的，通过教师与学生、 展开更多

关键词 双曲线 渐近线 探究性教学 教学设计 教学反思 《双曲线的简单几何性质》 自主学习 高中 数学教学

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高中数学深度学习“疑、悟、习”三路径探索 被引量：1

11

作者 陈子月 《中学教研（数学版）》 2021年第10期26-28,共3页

文章针对目前高中数学存在“教缺引导少启发、学缺质疑少领悟、习缺重构少创新”等“浅教”“浅学”“浅素养”现状,提出深度学习.通过铺设“疑、悟、习”三路径,实施创景生疑、自学质疑、探究释疑领悟、互动解疑互悟、运用纠疑正悟、... 文章针对目前高中数学存在“教缺引导少启发、学缺质疑少领悟、习缺重构少创新”等“浅教”“浅学”“浅素养”现状,提出深度学习.通过铺设“疑、悟、习”三路径,实施创景生疑、自学质疑、探究释疑领悟、互动解疑互悟、运用纠疑正悟、自主建构会习、反思重构创新等七大策略,促进学生逐步从浅层学习走向深度学习,形成核心素养. 展开更多

关键词 深度学习 “疑、悟、习”三路径 核心素养

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浅谈健康扶贫存在的问题及对策 被引量：1

12

作者 陈子月 戚谢文静 《行政事业资产与财务》 2018年第13期36-37,共2页

因病致贫和因病返贫是现阶段精准扶贫工作推进的重大阻碍,而完善农村医疗保障制度是消除该障碍的最重要途径。本文结合笔者在精准扶贫第三方评估和省扶贫办公室实习的经历,以扶贫客体的利益为导向,从"防生病"、"能看病&q... 因病致贫和因病返贫是现阶段精准扶贫工作推进的重大阻碍,而完善农村医疗保障制度是消除该障碍的最重要途径。本文结合笔者在精准扶贫第三方评估和省扶贫办公室实习的经历,以扶贫客体的利益为导向,从"防生病"、"能看病"、"治好病"三个方面对当下健康扶贫存在的问题进行分析,并提出相应的对策。 展开更多

关键词 医疗保障 精准扶贫 健康扶贫

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谈数学思维可视化教学促进聋生数学思维品质提升

13

作者 陈子月 《现代特殊教育》 2022年第1期47-49,共3页

数学思维可视化教学是指利用形象、直观的外显表征方式呈现数学学习对象的本质属性、基本特征及数学学习对象间的关系网络,把数学中难以理解的抽象知识点以直观的方式展现在学生面前。聋校数学教师可开展基于图象表征、媒介表征、言语... 数学思维可视化教学是指利用形象、直观的外显表征方式呈现数学学习对象的本质属性、基本特征及数学学习对象间的关系网络,把数学中难以理解的抽象知识点以直观的方式展现在学生面前。聋校数学教师可开展基于图象表征、媒介表征、言语表征和肢体表征的数学思维可视化教学,共同促进聋生数学学习,提升聋生数学思维品质。 展开更多

关键词 聋校 数学 思维可视化

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新型3-烯色满酮拼接季碳氧化吲哚类化合物的合成

14

作者 谢丹 陈子月 +4 位作者 朱君 韩晓雪 张敏 刘雄利 邓国栋 《合成化学》 CAS 2022年第4期305-310,共6页

以色酮取代氧化吲哚(1)为原料,在有机碱DABCO的催化作用下,进攻3-烯色满酮2的烯键,发生Michael加成反应,然后脱除OBoc基团生成烯键,合成了9个未见文献报道的3-烯色满酮拼接季碳氧化吲哚类化合物(3a~3i),产率60%~87%,dr值为2:1~5:1,其结... 以色酮取代氧化吲哚(1)为原料,在有机碱DABCO的催化作用下,进攻3-烯色满酮2的烯键,发生Michael加成反应,然后脱除OBoc基团生成烯键,合成了9个未见文献报道的3-烯色满酮拼接季碳氧化吲哚类化合物(3a~3i),产率60%~87%,dr值为2:1~5:1,其结构经^(1)H NMR,^(13)C NMR和HR-MS(ESI-TOF)表征,并通过单晶培养确定了化合物3f的相对构型。该类化合物含有色酮、色满酮和氧化吲哚等3个具有潜在生物活性的骨架,在医药行业具有潜在应用价值。 展开更多

关键词 色满酮 季碳氧化吲哚 MICHAEL加成反应 三乙烯二胺 3-烯色满酮拼接季碳氧化吲哚 合成 相对构型

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GPS测绘技术在工程测绘中的应用分析

15

作者 陈子月 《科技创新导报》 2022年第7期128-130,共3页

在我国工程测绘项目的开展中,越来越多先进技术被应用其中,这使得我国工程建设的效率和质量得到了有效提升,同时也促进了该行业的进一步发展。在众多先进技术中,GPS测绘技术是现阶段我国使用较为广泛的一种,通过对这一技术的利用,企业... 在我国工程测绘项目的开展中,越来越多先进技术被应用其中,这使得我国工程建设的效率和质量得到了有效提升,同时也促进了该行业的进一步发展。在众多先进技术中,GPS测绘技术是现阶段我国使用较为广泛的一种,通过对这一技术的利用,企业能够获得更加精准的参数,同时,该方法使用起来也较为方便、快捷,因此,此技术得到了业界人士的青睐。测绘工作对于工程建设的开展是非常必要的,能够为工程建设工作提供较为可靠的参考数据,而这一技术的应用对于提高测量结果的准确性有着积极作用。基于此,本文展开了此方面的研究工作,并着重分析了此技术的应用要点,希望能够帮助相关企业更好地利用此技术,使GPS测绘技术的优势得到更好的发挥。 展开更多

关键词 测绘技术 工程测绘 应用分析 GPS

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中国与一带一路沿线主要国家的贸易分析——以巴基斯坦为例 被引量：1

16

作者 陈子月 《经贸实践》 2018年第10X期80-81,共2页

十八大以来,中国积极推进周边外交,提出了具有时代意义的"一带一路"伟大战略构想,该战略的实施大大促进了跨区域经济合作的发展。巴基斯坦是中国西南方重要的友好邻邦,同时也是"一带一路"战略的重要支点与示范国家... 十八大以来,中国积极推进周边外交,提出了具有时代意义的"一带一路"伟大战略构想,该战略的实施大大促进了跨区域经济合作的发展。巴基斯坦是中国西南方重要的友好邻邦,同时也是"一带一路"战略的重要支点与示范国家,因此研究巴基斯坦与中国的国际贸易关系有着重要的现实意义。本文通过对"一带一路"背景下中巴贸易进行研究,探讨中巴国际贸易合作的现状以及阻碍其发展的因素,并对此提出建议与对策。 展开更多

关键词 一带一路 巴基斯坦 国际贸易

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融合教育“卫星班”模式的实施策略 被引量：1

17

作者 严丽萍 陈子月 《现代特殊教育》 2017年第23期35-37,共3页

融合教育是特殊教育发展的趋势,"卫星班"是浙江省实施的一种融合教育安置方式。杭州聋人学校的"一校多点·两融多支持"融合教育"卫星班"模式,通过实施"多维支持系统、多级循环运作、多项干预措... 融合教育是特殊教育发展的趋势,"卫星班"是浙江省实施的一种融合教育安置方式。杭州聋人学校的"一校多点·两融多支持"融合教育"卫星班"模式,通过实施"多维支持系统、多级循环运作、多项干预措施"等策略,有效保障了融合教育的质量,满足了特殊学生的多元需求。 展开更多

关键词 融合教育 卫星班 模式构建 实施策略

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应用生物信息学挖掘肝母细胞瘤发病差异基因

18

作者 陈子月 伍耀豪 +4 位作者 曾乐祥 邱荣林 周嘉嘉 张杰 邓小耿 《岭南现代临床外科》 2018年第2期128-132,共5页

目的筛选肝母细胞瘤(hepatoblastoma)组织与小儿正常肝脏组织中的差异表达基因,探究肝母细胞瘤的发病机制,为其诊断和治疗提供新方向。方法从GEO数据库中检索获取肝母细胞瘤组织和小儿正常肝脏组织的芯片数据,通过R语言软件RSTUDIO筛选... 目的筛选肝母细胞瘤(hepatoblastoma)组织与小儿正常肝脏组织中的差异表达基因,探究肝母细胞瘤的发病机制,为其诊断和治疗提供新方向。方法从GEO数据库中检索获取肝母细胞瘤组织和小儿正常肝脏组织的芯片数据,通过R语言软件RSTUDIO筛选芯片中的差异表达基因,使用DAVID数据库对筛选所得的差异表达基因进行功能注释,通过STRING数据库构建蛋白质相互作用网络,并进行中心性分析。结果经筛选共获得肝母细胞瘤组织中290个差异表达基因,其中上调基因99个,下调基因191个(P<0.05)。GO(Gene Ontology)功能注释分析显示,上调差异基因主要涉及细胞分裂、细胞外外泌体、金属离子结合等94个功能簇,下调差异基因主要涉及脂蛋白代谢、细胞外外泌体、血红素结合等100个功能簇。蛋白质相互作用网络分析示IMPDH2、AGXT、ALDH1A1、ALDH2、PFAS、SERPINC1、AGXT2、KNG1、APOA1、MAT1A、APOC3和HSD17B6 12个基因为与其他节点关系最密切的核心调控基因。结论通过多种生物信息学方法联合分析三组高通量基因芯片,获得了肝母细胞瘤组织与正常小儿肝脏组织间的差异表达基因,并进一步从不同角度分析肝母细胞瘤异常增殖、转移等恶性生物学过程的发生机制,为肝母细胞瘤的诊断和治疗提供新方向。 展开更多

关键词 肝母细胞瘤 生物信息学 基因芯片 差异表达基因

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人FoxA1基因重组慢病毒载体的构建和鉴定

19

作者 蒋雯丽 邓小耿 +6 位作者 伍耀豪 曾乐祥 邱荣林 邓洁敏 周嘉嘉 张杰 陈子月 《岭南现代临床外科》 2016年第2期199-203,共5页

目的构建叉头盒蛋白A1（Forkhead-box A1,Fox A1）的重组慢病毒表达载体,为探究其功能和作用机制奠定基础。方法设计基因引物,采用聚合酶链反应（PCR）扩增出Fox A1的c DNA序列,然后将其克隆至PCDH-CMV-MCS-EF1a-GFP-puro慢病毒表达载体... 目的构建叉头盒蛋白A1（Forkhead-box A1,Fox A1）的重组慢病毒表达载体,为探究其功能和作用机制奠定基础。方法设计基因引物,采用聚合酶链反应（PCR）扩增出Fox A1的c DNA序列,然后将其克隆至PCDH-CMV-MCS-EF1a-GFP-puro慢病毒表达载体上,经PCR、双酶切反应及DNA测序鉴定,将阳性重组Fox A1表达载体、p CMV-VSV-G和p CMV-d R8.91包装质粒共转染到HEK-293T细胞进行病毒包装收集病毒浓缩液,然后再感染293T细胞,通过观察绿色荧光蛋白来计算病毒滴度,最后用病毒转染原代培养人皮肤成纤维细胞（HFFs）,通过实时荧光定量PCR检测Fox A1 m RNA的表达水平。结果重组慢病毒表达载体Fox A1经PCR扩增、酶切及测序鉴定正确,并得到滴度为1×10~8 TU/m L的病毒液,病毒感染人皮肤成纤维细胞后表达显著增强。结论成功构建了人Fox A1重组慢病毒载体,并可在HFFs内高效表达,为后续Fox A1的功能和机理研究奠定了实验基础。 展开更多

关键词 FoxA1 慢病毒 载体构建 过表达

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人肝细胞核因子4α联合组蛋白去乙酰化酶和甲基化转移酶抑制剂诱导成纤维细胞转分化为肝细胞的研究

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作者 邓洁敏 伍耀豪 +6 位作者 曾乐祥 蒋雯丽 张杰 周嘉嘉 邱荣林 陈子月 邓小耿 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第9期1496-1499,共4页

目的 利用人肝细胞核因子4α（HNF4A）与表观遗传修饰[组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACi）＋甲基化转移酶抑制剂（DNMTi）]联合诱导人成纤维细胞向肝细胞转分化，建立更为高效、新型的肝细胞转分化方法。 方法取第6～8代人皮肤成纤维细... 目的 利用人肝细胞核因子4α（HNF4A）与表观遗传修饰[组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACi）＋甲基化转移酶抑制剂（DNMTi）]联合诱导人成纤维细胞向肝细胞转分化，建立更为高效、新型的肝细胞转分化方法。 方法取第6～8代人皮肤成纤维细胞，置于5’氮杂胞苷（5-AzaC）与丙戊酸（VPA）中，并感染HNF4A重组慢病毒共同诱导20 d。用倒置相差显微镜动态观察诱导过程中的细胞形态变化，实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测并分析肝细胞特异性基因的表达，吲哚菁绿摄取实验、糖原过碘酸-无色品红（PAS）染色和尿素合成功能实验验证生物学功能。 结果 诱导过程中，细胞形态逐渐由长梭形转变为上皮样形态，并逐渐开始过表达肝特异基因及表现生物学功能。诱导第20天，细胞在形态学上有明显肝细胞上皮样变化，胞质丰富、核大而圆深染且核仁明显；Real-time PCR检测肝特异性基因均有不同程度的表达上调，以白蛋白（ALB）及转铁蛋白（TF）最显著，分别为118%及250%，差异有统计学意义（t＝7.418、5.131，P＝0.002、0.001）；吲哚菁绿摄取实验结果显示约35%呈阳性细胞；70%细胞呈糖原PAS染色阳性；尿素合成动态检测可见诱导细胞尿素分泌量呈逐增多趋势，到达肝样细胞（iHEPs）期（第20天），每106个细胞合成的尿素氮量达到了等量正常肝细胞合成的55%，即iHEPs从生物学功能上均显示转分化肝样细胞肝功能部分接近正常肝细胞水平。结论 HNF4A与表观遗传修饰（HDACi＋DNMTi）可以联合诱导人成纤维细胞转分化为肝细胞样细胞，肝样细胞在基因表达及生物学功能部分接近正常肝脏细胞。 展开更多

关键词 肝细胞 转分化 人肝细胞核因子4α 组蛋白去乙酰化 DNA甲基化

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