鸡新城疫病毒F基因和鸡IL-2重组DNA疫苗的构建 被引量：53

1

作者 姜永厚 陈奖励 +3 位作者 宋秀龙 童光志 孔宪刚 刘忠贵 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期81-84,共4页

利用已克隆到的新城疫D2 6株F基因和鸡IL_2基因 ,经过载体改建 ,将他们共同克隆于真核表达质粒pCDNA3上 ,经酶切分析、PCR鉴定证实成功构建了共表达鸡新城疫病毒F基因和鸡IL_2的重组质粒 。

关键词 新城疫 F基因 鸡IL-2 重组DNA疫苗

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鸡传染性支气管炎病毒S1基因免疫对鸡的保护作用 被引量：12

2

作者 陈洪岩 江国托 +4 位作者 杨奇伟 陈奖励 张宝山 刘胜旺 卢景良 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第4期250-253,共4页

将鸡传染性支气管炎病毒肾型 Ｔ 株 Ｓ１ 基因ｃ Ｄ Ｎ Ａ 连接于ｐｃ Ｄ Ｎ Ａ３ 的 Ｈｉｎｄ Ｉ Ｉ Ｉ与 Ｂａ ｍ Ｈ Ｉ位点之间构建含有 Ｃ Ｍ Ｖ 启动子及 Ｂ Ｇ Ｈｐｏｌｙ Ａ 信号序列的鸡传染性支气管炎病毒 Ｓ１ 蛋白真核表... 将鸡传染性支气管炎病毒肾型 Ｔ 株 Ｓ１ 基因ｃ Ｄ Ｎ Ａ 连接于ｐｃ Ｄ Ｎ Ａ３ 的 Ｈｉｎｄ Ｉ Ｉ Ｉ与 Ｂａ ｍ Ｈ Ｉ位点之间构建含有 Ｃ Ｍ Ｖ 启动子及 Ｂ Ｇ Ｈｐｏｌｙ Ａ 信号序列的鸡传染性支气管炎病毒 Ｓ１ 蛋白真核表达质粒。实验证明， Ｓ Ｐ Ｆ 鸡肌注免疫后血清 Ｉｇ Ｇ 抗体逐渐升高，至第３５ 日龄左右达到高峰，攻毒后血清 Ｉｇ Ｇ 抗体先下降而后升高，血清 Ｉｇ Ｇ 抗体升高幅度不及 Ｉ Ｂ 油苗免疫组。质粒 Ｄ Ｎ Ａ 免疫鸡攻毒后有４０ ％ 的鸡可耐过强毒的攻击，说明 Ｓ１ 基因在体内获得了表达并使鸡产生了一定的免疫力。 展开更多

关键词 S1基因 基因免疫 传染性支气管炎 IBV 鸡

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鸡IL-2基因的克隆及序列测定 被引量：18

3

作者 陈洪岩 刘胜旺 +2 位作者 陈奖励 张宝山 卢景良 《中国兽医科技》 CSCD 1999年第7期5-7,共3页

根据已发表的鸡白细胞介素２（ＩＬ２）基因序列设计引物，用ＲＴＰＣＲ方法从新城疫病毒感染的雏鸡脾淋巴细胞培养物中扩增出鸡的ＩＬ２基因ｃＤＮＡ，并进行序列测定，为进一步表达鸡ＩＬ２并深入研究其功能奠定了基础。

关键词 鸡IL-2基因 克隆 序列测定

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鸡IL-2在新城疫病毒F基因疫苗免疫中的作用 被引量：16

4

作者 姜永厚 刘忠贵 +2 位作者 陈奖励 宋秀龙 童光志 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期22-24,共3页

利用国内首次克隆成功的鸡 IL- 2基因真核表达质粒与新城疫病毒 (NDV) D2 6株 F基因真核质粒 (F基因疫苗 )联合免疫 SPF雏鸡 ,观察了其诱导的免疫应答及免疫保护作用 ,以及不同免疫方式对其免疫作用的影响。结果证实了国内克隆鸡 IL- 2... 利用国内首次克隆成功的鸡 IL- 2基因真核表达质粒与新城疫病毒 (NDV) D2 6株 F基因真核质粒 (F基因疫苗 )联合免疫 SPF雏鸡 ,观察了其诱导的免疫应答及免疫保护作用 ,以及不同免疫方式对其免疫作用的影响。结果证实了国内克隆鸡 IL- 2基因的免疫增强作用 ,以及作为免疫佐剂应用于禽类基因免疫的可行性 ,为鸡 IL- 2这一新型佐剂的实际应用提供了重要的试验依据。 展开更多

关键词 新城疫病毒 F基因 鸡IL-2 佐剂 基因疫苗 免疫

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鸡IL-2基因的克隆及序列测定 被引量：15

5

作者 陈奖励 王欢 +4 位作者 宋英晖 宋秀龙 陈红岩 姜永厚 卢景良 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2000年第4期11-13,共3页

应用逆转录多聚酶链反应 (RT- PCR)技术 ,参照 Sundick发表的鸡白细胞介素 2 (IL- 2 ) c DNA基因序列 ,利用自行设计合成的 1对引物 ,从 Con A活化的 5周龄 HWL - SPF鸡脾细胞中 ,扩增出长 4 4 5bp的鸡IL- 2 c DNA基因 ,以 p UC119为载... 应用逆转录多聚酶链反应 (RT- PCR)技术 ,参照 Sundick发表的鸡白细胞介素 2 (IL- 2 ) c DNA基因序列 ,利用自行设计合成的 1对引物 ,从 Con A活化的 5周龄 HWL - SPF鸡脾细胞中 ,扩增出长 4 4 5bp的鸡IL- 2 c DNA基因 ,以 p UC119为载体 ,克隆了扩增片段 ,经酶切鉴定及 DNA序列测定 ,确认为鸡 IL- 2基因 ,该序列与 Sundick报道的结果一致。对氨基酸的比较发现 ,鸡 IL - 2与牛 IL - 2和 IL - 15之间分别存在着 2 4 %及4 4 %的同源性 ,该基因系国内首次获得经序列测定证实的鸡 IL- 2 c DNA基因 ,这为今后进一步进行鸡 IL- 展开更多

关键词 鸡IL-2 分子克隆 RT-PCR 免疫传剂 预防接种

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鸡贫血病病毒套式PCR检测方法的建立及应用 被引量：9

6

作者 宋秀龙 陈奖励 +3 位作者 辛九庆 周方红 杨雨辉 章金刚 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第3期220-223,共4页

鸡贫血病病毒不仅引起鸡的传染性贫血 ,而且也是引起鸡免疫抑制病的主要病原。本研究首次在国内建立了鸡贫血病病毒的套式PCR检测方法。试验证明此方法具有高度的特异性和敏感性 ,以鸡马立克氏病毒、鸡网状内皮组织增生病毒、鸡传染性... 鸡贫血病病毒不仅引起鸡的传染性贫血 ,而且也是引起鸡免疫抑制病的主要病原。本研究首次在国内建立了鸡贫血病病毒的套式PCR检测方法。试验证明此方法具有高度的特异性和敏感性 ,以鸡马立克氏病毒、鸡网状内皮组织增生病毒、鸡传染性法氏囊病毒、正常MDCC_MSB1细胞DNA作为模板扩增时均未出现可见带 ,在检测鸡的各种组织病料时均未出现假阳性结果 ,该法比一次性PCR的敏感性高约 1 0 0 0倍 ,能检测到约一个拷贝的鸡贫血病病毒DNA ,而一次性PCR只能检测到3.6× 1 0 3 个拷贝。此方法已成功地应用于临床试验。对于鸡贫血病毒的许多鸡胚分离物和细胞分离物 ,一次性PCR不能扩增出可见电泳条带 ,而套式PCR都能扩增出特异的DNA片段 ,从而说明 ,套式PCR的敏感性大大高于一次性PCR 。 展开更多

关键词 鸡 套式PCR 贫血病病毒 检测方法 敏感性 特异性

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猪传染性胃肠炎华毒弱毒株纤突蛋白B、C抗原位点片段基因的克隆与序列分析 被引量：9

7

作者 冯力 佟有恩 +5 位作者 李伟杰 朱远茂 马思奇 王明 陈洪岩 陈奖励 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第5期361-365,共5页

猪传染性胃肠炎华毒 (TGEVH)是我国分离的代表毒株 ,H弱毒株是我国自行培育成功的具有良好免疫原性的疫苗株。应用RT_PCR方法扩增出 1.3kb的目的片段 ,包括S基因的编码的B、C两个主要抗原位点的片段 ,目的片段与pUC19质粒载体进行连接 ... 猪传染性胃肠炎华毒 (TGEVH)是我国分离的代表毒株 ,H弱毒株是我国自行培育成功的具有良好免疫原性的疫苗株。应用RT_PCR方法扩增出 1.3kb的目的片段 ,包括S基因的编码的B、C两个主要抗原位点的片段 ,目的片段与pUC19质粒载体进行连接 ,转化 ,鉴定后得到阳性重组质粒 ,命名为pTS1,将重组质粒插入的目的基因片段进行序列分析和比较 ,其结果表明TGEVH株S基因 5′端B、C位点片段 1190bp的核苷酸序列与国外的TGEV毒株Miller、Purdue_115、FS772 / 70及台湾省TFI毒株序列均具有很高的同源性 ,达 94.72 %以上。推导的氨基酸序列同源性为 94.70 %以上。编码抗原位点C的序列与其它毒株完全一致 ,但在B位点发生改变 ,即第 97个氨基酸发生改变 ,由Trp突变为Ser。该核苷酸该片段全长 12 6 1bp ,包括起始密码子ATG及基因间的共同序列ACTAAAC。本研究首次报道了国内的TGEV分离株_H弱毒株S基因的RT_PCR扩增及其编码的B、C抗原位点片段的分子克隆及序列分析 ,为进一步揭示TGEV强弱毒差别的分子机制。 展开更多

关键词 猪传染性胃肠炎病毒 S基因 分子克隆 序列分析

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鸡传染性贫血病毒的分离鉴定 被引量：11

8

作者 周方红 陈奖励 +5 位作者 尹训南 李成 辛桂香 王祯修 张立本 吴淑清 《中国兽医科技》 CSCD 1998年第2期6-9,共4页

在山东省从死亡率达７２％、混合感染多种病原微生物的海兰白蛋鸡和艾维茵肉鸡群中分离到３株鸡贫血病毒（ＣＡＶ），这些毒株耐体积分数５０％氯仿和７０℃水浴１５ｍｉｎ，能在ＭＤＣＣ－ＭＳＢ１细胞内增殖。用分离的细胞毒接种１日... 在山东省从死亡率达７２％、混合感染多种病原微生物的海兰白蛋鸡和艾维茵肉鸡群中分离到３株鸡贫血病毒（ＣＡＶ），这些毒株耐体积分数５０％氯仿和７０℃水浴１５ｍｉｎ，能在ＭＤＣＣ－ＭＳＢ１细胞内增殖。用分离的细胞毒接种１日龄ＳＰＦ鸡呈现典型的鸡传染性贫血特征性的临床症状和病理变化；用间接免疫荧光检查感染的ＭＤＣＣ－ＭＳＢ１细胞涂片和鸡组织触片，可见特异的核内荧光。分离毒株能被ＣＡＶ－ＴＫ５８０３株抗血清所中和；５周龄ＳＰＦ鸡接种分离细胞毒可产生ＣＡＶ抗体；电子显微镜观察，分离毒株ＭＳＢ１细胞培养物中有大量２０ｎｍ左右的病毒粒子。应用特异性ＰＣＲ引物可扩增到预计长度的病毒核酸片段，进一步证实分离株为ＣＡＶ。 展开更多

关键词 传染性贫血 贫血病毒 分离鉴定 鸡病

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鸡贫血病毒DNA的PCR扩增及其分子克隆 被引量：7

9

作者 陈奖励 周方红 +6 位作者 辛九庆 杨雨辉 陈红岩 刘滨东 卢景良 章金钢 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期417-419,共3页

用ＰＣＲ方法扩增了国内分离的鸡贫血病毒（ＣＡＶ）ＳＪ１株的含ＶＰ２、ＶＰ３以及部分ＶＰ１的１５００ｂｐＤＮＡ片段。经限制性内切酶酶切分析，该片段与Ｃｕｘ－１株的酶谱相似。同时，以ｐＵＣ１１９质粒载体克隆了这一ＤＮＡ片段。

关键词 鸡贫血病毒 聚合酶链反应 基因克隆

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鸡贫血病毒SJ1株DNA的分子克隆 被引量：1

10

作者 陈奖励 杨雨辉 +8 位作者 周方红 辛九庆 陈红岩 刘滨东 卢景良 章金钢 宋秀龙 袁吉 何昭阳 《生物技术》 CAS CSCD 1999年第3期1-3,共3页

通过ＰＣＲ方法扩增，用ｐＵＣ１１９和ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ质粒载体分段克隆了山东省分离的ＳＪ１株的全病毒ＤＮＡ。

关键词 鸡贫血病病毒 聚合酶链反应 基因克隆 PCR

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猪的消化系统疾病 被引量：5

11

作者 章金钢 宋秀龙 +2 位作者 李万猛 谢显泰 陈奖励 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1998年第8期44-47,共4页

猪／的／消／化／系／统／疾／病章金钢宋秀龙（解放军农牧大学兽医学院，长春１３００６２）李万猛谢显泰（英特威［香港］有限公司）陈奖励（中国农科院哈尔滨兽医研究所，黑龙江哈尔滨１５０００１）第二讲病毒性疾病１猪传染性胃肠... 猪／的／消／化／系／统／疾／病章金钢宋秀龙（解放军农牧大学兽医学院，长春１３００６２）李万猛谢显泰（英特威［香港］有限公司）陈奖励（中国农科院哈尔滨兽医研究所，黑龙江哈尔滨１５０００１）第二讲病毒性疾病１猪传染性胃肠炎猪传染性胃肠炎（ｔｒａｎｓｍｉｓ... 展开更多

关键词 猪病 消化系统疾病 病毒感染

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牛副结核抗体的检测以及各种检测方法的关系 被引量：5

12

作者 何昭阳 顾万钧 +3 位作者 陈奖励 逢魁春 王洪喜 李风宾 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 1991年第3期50-52,共3页

本文采用变态反应、补体结合反应和ELISA对副结核阳性牛进行细胞免疫和体液免疫检测,并比较这三种方法在副结核病的检测过程中的作用和相互关系。结果表明:机体对副结核菌的感染,首先产生的是细胞免疫,然后才是体液免疫。变态反应是检... 本文采用变态反应、补体结合反应和ELISA对副结核阳性牛进行细胞免疫和体液免疫检测,并比较这三种方法在副结核病的检测过程中的作用和相互关系。结果表明:机体对副结核菌的感染,首先产生的是细胞免疫,然后才是体液免疫。变态反应是检测细胞免疫的手段。补反和ELISA是检测体液免疫的手段。两者不能互相替代,而只能互为补充。ELISA检测方法比补反更为敏感。 展开更多

关键词 牛 副结核病 变态反应 抗体 检测

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传染性法氏囊病病毒超强毒株F9811VP_2基因的克隆及序列分析 被引量：3

13

作者 宋秀龙 李春梅 +3 位作者 王笑梅 陈冠春 陈奖励 王秀荣 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期223-226,共4页

根据 NCBIG Gene Bank记载的传染性法氏囊病病毒超强毒 ( vv IBDV) OKYM株的核苷酸序列 ,设计并合成 1对特异性扩增 IBDV主要宿主保护性抗原 VP2 基因的引物。从 IBDV F981 1感染发病鸡法氏囊组织中提取病毒 RNA,经 RT-PCR扩增出约 1 .... 根据 NCBIG Gene Bank记载的传染性法氏囊病病毒超强毒 ( vv IBDV) OKYM株的核苷酸序列 ,设计并合成 1对特异性扩增 IBDV主要宿主保护性抗原 VP2 基因的引物。从 IBDV F981 1感染发病鸡法氏囊组织中提取病毒 RNA,经 RT-PCR扩增出约 1 .5kb的基因片段 ,采用平端连接法将此基因片段克隆至p UC1 1 9质粒的 Sma 位点上。经核苷酸序列测定 ,并与国内外其他 vv IBDV VP2 基因序列进行比较分析 ,发现 F981 1与 OKYM在 VP2 基因上有 1 8个核苷酸不同 ,但在氨基酸序列上仅 2 1 2位存在差异 ,从而从分子生物学角度证明 F981 1为 vv IBDV。对 1 4 3～ 3 82氨基酸区域所作系统进化树分析表明 ,F981 1、G92 0 1与OKYM、UK661、HK4 6相近 ,而 F950 2、G93 0 3与 OKYM、U K661、HK4 6较远 ,说明我国存在许多不同的vv 展开更多

关键词 鸡 传染性法氏囊病病毒 超强毒株 基因克隆 序列分析

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4种方法诊断牛副结核病的比较 被引量：4

14

作者 何昭阳 顾万钧 +2 位作者 逢魁春 陈奖励 李卯年 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1992年第6期18-20,共3页

牛副结核病是一种慢性消耗性传染病,该病呈世界性分布,我国也存在该病,部分地区流行严重。诊断该病的方法很多,主要有临床诊断、剖检诊断、病原体的分离以及免疫学诊断。由于临床上无特征性症状,所以只凭临床症状难以确诊。

关键词 牛 副结核病 诊断法

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副结核病的诊断与防制 被引量：4

15

作者 何昭阳 陈奖励 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1991年第3期52-54,47,共4页

诊断副结核病的诊断方法很多,主要包括临床诊断、剖检诊断,病原分离培养、免疫学诊断和基因探针诊断等。一、临床及剖检副结核病的感染是一个很慢的过程,潜伏期通常为3—5年,最早4个月的犊牛就表现出临床症状,长的可达15年。人工感染则... 诊断副结核病的诊断方法很多,主要包括临床诊断、剖检诊断,病原分离培养、免疫学诊断和基因探针诊断等。一、临床及剖检副结核病的感染是一个很慢的过程,潜伏期通常为3—5年,最早4个月的犊牛就表现出临床症状,长的可达15年。人工感染则需较大剂量才能成功。 展开更多

关键词 牛 副结核病 诊断 防制

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琼脂扩散试验诊断牛副结核病 被引量：3

16

作者 何昭阳 陈奖励 +2 位作者 李卯年 金璐娟 杨文光 《中国畜禽传染病》 CSCD 1992年第3期28-29,共2页

诊断牛副结核病的方法很多,除了临床诊断、剖检诊断和病原分离培养外,免疫学诊断主要包括变态反应诊断、补体结合反应诊断、ELISA诊断和琼脂扩散(简称琼扩)诊断。前三项免疫学诊断国内均有报道,琼扩诊断目前国内尚无报道。我们经过一段... 诊断牛副结核病的方法很多,除了临床诊断、剖检诊断和病原分离培养外,免疫学诊断主要包括变态反应诊断、补体结合反应诊断、ELISA诊断和琼脂扩散(简称琼扩)诊断。前三项免疫学诊断国内均有报道,琼扩诊断目前国内尚无报道。我们经过一段摸索,初步获得结果,现报告如下。 展开更多

关键词 牛 副结核病 琼脂扩散 诊断

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鸡贫血病毒荷兰弱毒株基因序列比较研究 被引量：2

17

作者 辛九庆 宋秀龙 +3 位作者 周方红 杨雨辉 于健 陈奖励 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第2期116-119,共4页

用CA5、CA6和CA7、CA8两对引物对鸡贫血病毒荷兰弱毒株进行PCR扩增。将扩增产物 1 .5kb和 0 .8kb的DNA片段分别克隆到pUC1 1 9、pBluescript(SK +)载体质粒中 ,并进行核苷酸序列分析。通过与 2 6P4毒株进行核苷酸序列比较发现二者有 32... 用CA5、CA6和CA7、CA8两对引物对鸡贫血病毒荷兰弱毒株进行PCR扩增。将扩增产物 1 .5kb和 0 .8kb的DNA片段分别克隆到pUC1 1 9、pBluescript(SK +)载体质粒中 ,并进行核苷酸序列分析。通过与 2 6P4毒株进行核苷酸序列比较发现二者有 32个核苷酸的差异。荷兰和 2 6P4两毒株间VP1蛋白质同源率为 97% ,没有发生特异性变化 ;VP3蛋白质同源率为 95 % ,在 1～ 30个氨基酸之间发生了特异性变化 ,我们推测这些变化可能是 2 6P4致弱的主要原因。 展开更多

关键词 鸡贫血病毒 荷兰弱毒株 基因序列分析

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鸡贫血病毒山东分离株全基因克隆 被引量：2

18

作者 陈奖励 辛九庆 +4 位作者 宋秀龙 周方红 杨雨辉 章金刚 王祯修 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第5期335-338,共4页

设计了 Ｃ Ａ５、 Ｃ Ａ６ 和 Ｃ Ａ７、 Ｃ Ａ８ 两对引物，分别扩增鸡贫血病毒（ Ｃ Ａ Ｖ）山东分离株 Ｓ Ｊ１ 的 １５ Ｋｂ 和 ０８ Ｋｂ Ｄ Ｎ Ａ 片段。并将这两个片段分别克隆至 ｐ Ｕ Ｃ１１９ 和ｐ Ｂｌｕｅｓｃｒｉ... 设计了 Ｃ Ａ５、 Ｃ Ａ６ 和 Ｃ Ａ７、 Ｃ Ａ８ 两对引物，分别扩增鸡贫血病毒（ Ｃ Ａ Ｖ）山东分离株 Ｓ Ｊ１ 的 １５ Ｋｂ 和 ０８ Ｋｂ Ｄ Ｎ Ａ 片段。并将这两个片段分别克隆至 ｐ Ｕ Ｃ１１９ 和ｐ Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ（ Ｓ Ｋ＋ ）载体质粒，最后一起克隆到 ｐ Ｑ Ｅ３２ 载体质粒上，使两个片段前后连接成一个全长的病毒 Ｄ Ｎ Ａ。用该质粒转染 Ｍ Ｄ Ｃ Ｃ Ｍ Ｓ Ｂ１ 细胞，经免疫荧光抗体法和 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 检测到 Ｃ Ａ Ｖ 病毒，结果证明我们得到了一个 Ｃ Ａ Ｖ 感染性全基因克隆。 展开更多

关键词 CAV PCR 克隆 转染

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副结核分枝杆菌DNA探针的制备与应用 被引量：1

19

作者 刘思国 刘清何 +2 位作者 陈奖励 李卯年 何昭阳 《中国兽医学报》 CAS CSCD 1996年第1期43-47,共5页

以溶菌酶、ＳＤＳ、高氯酸钠等处埋提取副结核分枝杆菌Ｃ２株染色体ＤＮＡ，经限制性内切酶ＰｓｔⅠ消化后，以质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ为载体，通过Ｔ４ＤＮＡ连接酶连接，转入Ｅ。ｃｏｌｉＤＨ５ａ受体菌中，构建了副结核菌Ｃ... 以溶菌酶、ＳＤＳ、高氯酸钠等处埋提取副结核分枝杆菌Ｃ２株染色体ＤＮＡ，经限制性内切酶ＰｓｔⅠ消化后，以质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ为载体，通过Ｔ４ＤＮＡ连接酶连接，转入Ｅ。ｃｏｌｉＤＨ５ａ受体菌中，构建了副结核菌Ｃ２株的ＤＮＡ基因文库。应用反向杂交试验，从基因文库中筛选出４个重组克隆：ＰＴＰ１２、ＰＴＰ１９、ＰＴＰ３１、ＰＴＰ３８。对这４个重组克隆进行酶切、电泳分析，结果表明４个插入片段长度分别为：４．０ｋｂ、１．８ｋｂ、１．３ｋｂ、２．３ｋｂ。用光敏生物素将此４个插入片段标记成ＤＮＡ探针。通过斑点杂交试验，从４个探针中筛选出１个特异性探针ＰＴＰ３１。该探针与副结核分枝杆菌呈强杂交反应，除与堪萨斯分枝杆菌、胞内分枝杆菌Ⅲ型呈弱杂交反应外，与其他受试的分枝杆菌及大肠杆菌等非分枝杆菌均不反应。ＰＴＰ３１探针的敏感性为２ｎｇ的ＤＮＡ和１０５个细菌。以ＤＮＡ探针、粪检菌、ＥＬＩＳＡ３种方法分别对３２份副结核菌素（ＰＰＤ）变态反应阳性牛粪便及血清样品进行检测，其检出率分别为４７％（１５／３２）、５６％（１８／３２）和３４％（１１／３２）。该探针与粪检菌的符合率为６７％（１２／１８）。对随机采取的２７６份牛粪便及血清? 展开更多

关键词 核酸探针 副结核菌 ELISA 病原细菌

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牛副结核ELISA中两种亲和抗原的比较 被引量：2

20

作者 何昭阳 顾万钧 +1 位作者 钱爱东 陈奖励 《中国畜禽传染病》 CSCD 1990年第2期31-32,共2页

我们曾在牛副结核ELISA中采用的亲和层析抗原,收到了较其它抗原更为满意的结果。该抗原的最大优点是特异性较好,但不足的是经盐酸-甘氨酸(pH2.8)解吸附后,其抗原性有所减弱,致使抗原的包被量反而大于过G200凝胶柱抗原,而且通过一次亲和... 我们曾在牛副结核ELISA中采用的亲和层析抗原,收到了较其它抗原更为满意的结果。该抗原的最大优点是特异性较好,但不足的是经盐酸-甘氨酸(pH2.8)解吸附后,其抗原性有所减弱,致使抗原的包被量反而大于过G200凝胶柱抗原,而且通过一次亲和层析柱收获的抗原量也是很有限的,给大批制备抗原带来一定困难。 展开更多

关键词 ELISA 牛副结核 亲和抗原

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