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EGFR基因突变及其检测方法的研究进展 被引量:42
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作者 高云 +1 位作者 朱振宇 彭焕玉 《分子诊断与治疗杂志》 2011年第1期51-57,共7页
表皮生长因子受体(EGFR)属于酪氨酸激酶受体,它介导的信号转导途径调节细胞的生长、增殖和分化。在癌症中发现EGFR酪氨酸激酶区常发生各种突变,这些突变和酪氨酸激酶抑制剂的疗效密切相关。因此,EGFR突变的检测对癌症的个体化治疗具有... 表皮生长因子受体(EGFR)属于酪氨酸激酶受体,它介导的信号转导途径调节细胞的生长、增殖和分化。在癌症中发现EGFR酪氨酸激酶区常发生各种突变,这些突变和酪氨酸激酶抑制剂的疗效密切相关。因此,EGFR突变的检测对癌症的个体化治疗具有重要的参考价值。目前常用的EGFR突变检测方法有测序法、PCR-SSCP、突变体富集PCR、ARMS、微数字PCR、HRM、DHPLC。 展开更多
关键词 EGFR 突变 检测
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动物线粒体DNA的特异结构及应用分子系统学分析的方法 被引量:10
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作者 徐其放 +3 位作者 朱世杰 申煜 刘运忠 常弘 《中国比较医学杂志》 CAS 2005年第5期315-319,共5页
动物线粒体是一种存在真核生物细胞质中的细胞器,根据已经测序的动物线粒体DNA,它可编码13种蛋白质,2种rRNA,22种tRNA,和非编码区(D-Loop),已有报道发现了新的R-Loop结构,呈现母性遗传特点,且其平均进化速度是核基因组的10倍,尤其是D-L... 动物线粒体是一种存在真核生物细胞质中的细胞器,根据已经测序的动物线粒体DNA,它可编码13种蛋白质,2种rRNA,22种tRNA,和非编码区(D-Loop),已有报道发现了新的R-Loop结构,呈现母性遗传特点,且其平均进化速度是核基因组的10倍,尤其是D-Loop区.同时在线粒体DNA控制区中发现的重复序列在种间甚至种内存在着差异可作为动物特异的分子标记。根据线粒体的结构和遗传特点,借助生物信息学手段和丰富的数据库资源,对动物种间及种内群体进行分子系统学的研究,并确定分类地位,亲缘关系。 展开更多
关键词 线粒体 控制区序列 序列分析 DNA 分子系统学 生物信息学
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从唾液获取人体DNA的简易方法与应用 被引量:8
3
作者 张红宇 +3 位作者 彭瑾瑜 付艳艳 叶伟超 常弘 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第B04期171-173,共3页
[目的]探索一种对人体无伤害、无痛苦的获取基因组DNA的方法。[方法]比对①获取口腔黏膜细胞的不同途径,②改进的微量血提取试剂盒和常规的碘化钾法提取唾液中的DNA的效果,③经过不同的储存条件、时间梯度所获得的DNA的得率和纯度,④分... [目的]探索一种对人体无伤害、无痛苦的获取基因组DNA的方法。[方法]比对①获取口腔黏膜细胞的不同途径,②改进的微量血提取试剂盒和常规的碘化钾法提取唾液中的DNA的效果,③经过不同的储存条件、时间梯度所获得的DNA的得率和纯度,④分别以提取的DNA和唾液沉淀作为模板PCR扩增管家基因GAPDH、唾液特异蛋白基因PRB- 3、线粒体D-loop区。[结果]从0.1 mL的唾液中即可以提取出约4.5μg的基因组DNA。从新鲜唾液中获得的DNA得率和纯度最高,但即使唾液经过长时间的保存,直接使用唾液的细胞沉淀也同样能够扩增出各种正确大小的基因片段。[结论]唾液作为获取基因组DNA的简易来源,完全可以取代常规的取血采样,也比棉拭子刮取口腔细胞、滤纸唾液斑法、漱口水收集等方法简便、经济、快速。该法不会对被收集者造成任何不适,容易被接收,因而能最大限度的扩大复杂遗传疾病研究的取样范围,特别适合分子流行病学大面积调查。 展开更多
关键词 唾液 基因组DNA 遗传疾病 大面积调查
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Y染色体微缺失及其检测方法 被引量:8
4
作者 高云 +1 位作者 彭焕玉 朱振宇 《分子诊断与治疗杂志》 2011年第5期326-329,共4页
全世界大约有15%的夫妇不育,其中男性不育约占50%。Y染色体长臂上的AZF缺失是导致男性不育的重要因素。AZF进一步分为AZFa、AZFb和AZFc3个区域,不同区域的微缺失引起不同程度的精子发生障碍。因此Y染色体微缺失的检测对男性不育的诊治... 全世界大约有15%的夫妇不育,其中男性不育约占50%。Y染色体长臂上的AZF缺失是导致男性不育的重要因素。AZF进一步分为AZFa、AZFb和AZFc3个区域,不同区域的微缺失引起不同程度的精子发生障碍。因此Y染色体微缺失的检测对男性不育的诊治有很重要的指导意义。目前Y染色体微缺失常用的检测方法有多重定性PCR法、实时荧光PCR法、基因芯片法和荧光原位杂交法。 展开更多
关键词 Y染色体微缺失 男性不育 AZF
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MS-HRM检测游离甲基化SEPT9在结直肠癌早期诊断中的应用 被引量:6
5
作者 王侦 +4 位作者 何琼 彭焕玉 朱振宇 华云 李明 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1732-1734,共3页
目的建立一种稳定的甲基化敏感高分辨率熔解曲线(MS-HRM)定量检测血浆游离甲基化SEPT9的方法,并初步探讨利用此方法进行结直肠癌早期诊断的可行性。方法按照不同比例混合甲基化和未甲基化DNA建立标准品,复管反应作出标准熔解曲线,定量检... 目的建立一种稳定的甲基化敏感高分辨率熔解曲线(MS-HRM)定量检测血浆游离甲基化SEPT9的方法,并初步探讨利用此方法进行结直肠癌早期诊断的可行性。方法按照不同比例混合甲基化和未甲基化DNA建立标准品,复管反应作出标准熔解曲线,定量检测36例结直肠癌患者血浆样本和20例正常人血浆样本甲基化SEPT9,并与Methylight进行比较。梯度稀释其中1例结直肠癌血浆游离DNA,分析其甲基化程度与DNA量是否独立。随机取2例结直肠癌样本重复甲基化修饰至MS-HRM分析,以排除修饰不完全对实验结果的影响。结果 SEPT9 MS-HRM法可检出混合甲样本中1%的甲基化,其检测灵敏度达1%。36例结直肠癌患者血浆中检测到25例(69.44%)有不同程度SEPT9基因甲基化,20例正常人血浆样本有2例(10%)呈现1%~5%甲基化。不同DNA量甲基化程度恒定,初步确定检测范围可达皮克级DNA。2例独立重复检测样本检测结果基本符合初次实验结果。结论 MS-HRM法检测游离的甲基化SEPT9简单易行,快速,稳定,敏感性高,检测样本范围广,有望为结直肠癌筛查开拓一个新平台。 展开更多
关键词 结直肠癌 SEPT9 甲基化 高分辨率熔解曲线 MS-HRM
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微卫星座位对实验动物beagle犬的遗传分析 被引量:5
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作者 徐其放 刘运忠 +4 位作者 朱世杰 申煜 召威 常弘 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2006年第1期27-31,共5页
目的对美国进口、广州自养beagle犬基因组中存在的微卫星结构进行分析,研究其群体的微卫星多态性,以此探索在分子水平上对作为实验动物的beagle犬进行检测。方法通过微卫星分子标记技术进行遗传背景分析,并结合微卫星位点测序结果,研究... 目的对美国进口、广州自养beagle犬基因组中存在的微卫星结构进行分析,研究其群体的微卫星多态性,以此探索在分子水平上对作为实验动物的beagle犬进行检测。方法通过微卫星分子标记技术进行遗传背景分析,并结合微卫星位点测序结果,研究DNA分子特征。结果在研究位点上共发现6个复等位基因,进口犬群体共有6个等位基因片段,自养犬群体共有5个等位基因片段,根据基因型计算各群体等位基因频率,由相关公式计算杂合度、群体多态信息含量(PIC)、基因纯合率、基因分化系数。结论两群体的杂合度、PIC值均较高(分别为0.7010、0.6747和0.7876、0.7515),基因分化系数很低(0.021),表明两群体没有形成明显的独立群。 展开更多
关键词 BEAGLE犬 微卫星位点 遗传学技术 测序
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基于探针熔解曲线分析的多重PCR同步鉴定6种腹泻病原菌
7
作者 任继轩 胡朝晖 +4 位作者 王维世 刘向东 刘鑫源 李颖 《检验医学》 CAS 2024年第8期793-799,共7页
目的基于多重聚合酶链反应(PCR)和探针熔解曲线分析技术,建立可同时鉴定6种常见急性感染性腹泻病原菌的高灵敏度诊断方法,并验证其检测性能。方法采用熔解曲线分析6种常见急性感染性腹泻病原菌熔解温度(Tm)值,建立基于探针熔解曲线分析... 目的基于多重聚合酶链反应(PCR)和探针熔解曲线分析技术,建立可同时鉴定6种常见急性感染性腹泻病原菌的高灵敏度诊断方法,并验证其检测性能。方法采用熔解曲线分析6种常见急性感染性腹泻病原菌熔解温度(Tm)值,建立基于探针熔解曲线分析的多重PCR检测方法,并评价其灵敏度、特异性和重复性。采用该方法检测175例疑似感染性腹泻患者粪便样本,比较该方法鉴定结果与细菌培养法和荧光PCR法鉴定结果的差异,不一致结果通过测序进行确认。结果建立的多重PCR检测方法可实现单次PCR同步检测6种肠道病原菌,检测限为1×10^(3)~1×10^(4)拷贝·mL^(-1),不同病原菌间无交叉反应,特异性高。175例腹泻患者粪便样本中共检出91例(52%)阳性样本。6种病原菌的检测内变异系数(CV)均<0.1%。与细菌培养法相比,该方法检测沙门菌、志贺菌的符合率分别为94.85%(kappa=0.894)、100.00%(kappa=1.000);与荧光PCR相比,该方法检测艰难梭菌的符合率为98.28%(kappa=0.900)。结论建立的基于探针熔解曲线分析的多重PCR方法同时鉴定6种腹泻病原菌具有较高的灵敏度和特异性,可为急性感染性腹泻的临床诊断及时提供实验室依据。 展开更多
关键词 多重聚合酶链反应 熔解曲线分析 感染性腹泻 病原菌
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多重PCR点突变筛查技术在CYP2C19基因分型中的应用 被引量:4
8
作者 高云 +4 位作者 王侦 彭焕玉 李明 朱振宇 华云 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第32期2293-2296,共4页
目的建立一种多重PCR点突变筛查技术,用以细胞色素氧化酶P4502C19(CYP2C19)的基因分型。方法设计含有拱桥式次黄嘌呤的多重PCR引物(DMP)。在一个PCR管内,同时检测CYP2C19的。*1、*2、*3等位基因。结果多重PCR点突变筛查技术,... 目的建立一种多重PCR点突变筛查技术,用以细胞色素氧化酶P4502C19(CYP2C19)的基因分型。方法设计含有拱桥式次黄嘌呤的多重PCR引物(DMP)。在一个PCR管内,同时检测CYP2C19的。*1、*2、*3等位基因。结果多重PCR点突变筛查技术,最低检测下限可以达到2.8ng,具有较高的检测灵敏度。其成功检出248份健康人抗凝静脉血CYP2C19等位基因*1、*2、*3。并与部分标本测序法结果比较,结果与测序法结果完全一致。结论成功建立了多重PCR点突变筛查技术,该技术特异性高、操作简单、价格低廉,为基础研究、个体化用药提供了合理可靠的检测手段。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 细胞色素C氧化酶 基因分型
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基于游离RNA的无创性产前诊断研究进展 被引量:4
9
作者 王侦 +1 位作者 华云 朱振宇 《分子诊断与治疗杂志》 2011年第5期356-360,共5页
孕妇血浆血清中游离RNA作为一种新的胎儿遗传信息材料给无创性产前诊断带来了新的契机。已经证实,游离胎儿RNA分子主要来源于胎盘,且稳定存在于母体血循环中,易于检测。同时,其由于无需依赖胎儿性别或父源性多态性位点而具有十分明显的... 孕妇血浆血清中游离RNA作为一种新的胎儿遗传信息材料给无创性产前诊断带来了新的契机。已经证实,游离胎儿RNA分子主要来源于胎盘,且稳定存在于母体血循环中,易于检测。同时,其由于无需依赖胎儿性别或父源性多态性位点而具有十分明显的应用优势。目前,已经有研究将血浆血清中游离RNA与胎儿非整倍体、宫内发育迟缓以及子痫前期等妊娠相关疾病联系起来,并且取得了十分可喜的研究成果。 展开更多
关键词 游离RNA 胎儿非整倍体 宫内发育迟缓 子痫前期 无创性产前诊断
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高质量知识产权公共服务体系构建思考 被引量:1
10
作者 《中国质量监管》 2023年第6期82-83,共2页
经济社会的快速发展,给高质量知识产权服务体系提供了新的发展契机。当前,我国知识产权服务体系存在着“大而不精”问题,影响了体系效果的发挥。2022年,国家知识产权局印发《知识产权公共服务“十四五”规划》,要求各级单位合理规划知... 经济社会的快速发展,给高质量知识产权服务体系提供了新的发展契机。当前,我国知识产权服务体系存在着“大而不精”问题,影响了体系效果的发挥。2022年,国家知识产权局印发《知识产权公共服务“十四五”规划》,要求各级单位合理规划知识产权服务体系,助力经济社会发展。基于此,文章探讨了当前知识产权服务体系存在的问题以及高质量知识产权公共服务体系构建的对策方法。 展开更多
关键词 知识产权 公共服务体系 法律制度
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血源性乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒和艾滋病病毒核酸筛查系统的建立与应用 被引量:3
11
作者 泽惠 +1 位作者 丁渭 华云 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第2期347-352,共6页
目的:建立同时实现乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)、丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)、艾滋病病毒(human Immunodeficiency Virus,HIV)检测的多重核酸筛查系统。方法:以HBV、HCV、HIV的保守序列为模板设计特异性引物和探针,... 目的:建立同时实现乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)、丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)、艾滋病病毒(human Immunodeficiency Virus,HIV)检测的多重核酸筛查系统。方法:以HBV、HCV、HIV的保守序列为模板设计特异性引物和探针,通过核酸自动提取系统结合一步法RT-PCR技术平台,优化相关反应体系和条件,建立多重多色实时荧光PCR检测血源性传播病毒的核酸筛查系统。将该系统用于101387例血浆样本的筛查。结果:本研究建立的核酸筛查系统特异性好,HBV灵敏度可以达到20IU/ml,HCV灵敏度可以达到100IU/ml,HIV灵敏度可以达到50IU/mL。结论:本研究建立的核酸筛查系统具有高度自动化、高灵敏度、低成本等特点,适合我国血站系统推广使用。 展开更多
关键词 血液筛查 荧光定量PCR 灵敏度 特异性
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汉坦病毒及其检测方法的研究进展 被引量:2
12
作者 高云 +1 位作者 彭焕玉 朱振宇 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期246-248,共3页
今年9月份在河南等地发生蜱虫叮咬致多人死亡事件,中国疾控中心有关部门从患者身上分离出一种新型布尼亚病毒。布尼亚病毒(bunyavirus)自然感染见于许多脊椎动物(鼠、兔等)和节肢动物(蚊、蜱、白蛉等),感染人类后可引起多种急... 今年9月份在河南等地发生蜱虫叮咬致多人死亡事件,中国疾控中心有关部门从患者身上分离出一种新型布尼亚病毒。布尼亚病毒(bunyavirus)自然感染见于许多脊椎动物(鼠、兔等)和节肢动物(蚊、蜱、白蛉等),感染人类后可引起多种急性出血热,如立夫特谷热和克里米亚一刚果出血热。汉坦病毒(hantavirus,HV)是引起肾综合征出血热(HFRS)和汉坦病毒肺综合征(HPS)的病原体,属于布尼亚病毒科汉坦病毒属.汉坦病毒在全球范围内都有分布. 展开更多
关键词 汉坦病毒肺综合征 布尼亚病毒 肾综合征出血热 刚果出血热 检测 中国疾控中心 汉坦病毒属 死亡事件
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PS-TaqMan PCR检测巯基嘌呤甲基转移酶基因多态性 被引量:1
13
作者 邱耕 符蓉 +2 位作者 王莹 何蕴韶 《分子诊断与治疗杂志》 2010年第3期193-196,共4页
目的为临床开展巯基嘌呤类药物的个体化用药需要,发展一种适合临床实验室检测TPMT的基因多态性的方法。方法改进TaqMan错配扩增突变检测法(TaqMAMA),建立引物特异性TaqMan聚合酶链反应(PS-TaqManPCR),检测245例临床样本的TPMT*3C突变,... 目的为临床开展巯基嘌呤类药物的个体化用药需要,发展一种适合临床实验室检测TPMT的基因多态性的方法。方法改进TaqMan错配扩增突变检测法(TaqMAMA),建立引物特异性TaqMan聚合酶链反应(PS-TaqManPCR),检测245例临床样本的TPMT*3C突变,结果用双向测序方法验证。结果 PS-TaqManPCR能够准确检测TPMT*3C突变,TMPT*1/*3C基因型频率是2.4%。结论成功发展PS-TaqManPCR作为临床检测TPMT基因多态性的方法 ,该方法可靠、高通量且效率高,适合临床实验室对样本大规模检测的需要。 展开更多
关键词 巯基嘌呤甲基转移酶 单核苷酸多态性 实时荧光定量PCR
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论新《保险法》中的弃权和禁止反言原则 被引量:1
14
作者 胡佳宵 《合肥学院学报(社会科学版)》 2010年第2期114-118,共5页
新《保险法》规定了弃权和禁止反言原则。从保险实务的角度分析,弃权的构成要件包括保险人知悉投保方违反义务及保险人放弃权利;禁止反言的构成要件包括保险人作出错误表示及投保方的合理信赖。在保险法中适用弃权和禁止反言的具体原则... 新《保险法》规定了弃权和禁止反言原则。从保险实务的角度分析,弃权的构成要件包括保险人知悉投保方违反义务及保险人放弃权利;禁止反言的构成要件包括保险人作出错误表示及投保方的合理信赖。在保险法中适用弃权和禁止反言的具体原则及诚实信用原则有先后之分,弃权与禁止反言的举证难度也有所区别,同时现行法律还规定了适用上述制度的限制。 展开更多
关键词 保险法 弃权 禁止反言
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靶向捕获高通量测序技术在检测早期乳腺癌胚系突变中的应用价值 被引量:3
15
作者 袁牧歌 吴文坚 +5 位作者 胡朝晖 于世辉 欧小华 毛琳琳 吴海艳 《检验医学》 CAS 2021年第3期325-329,共5页
目的应用靶向捕获高通量测序技术探究早期乳腺癌患者血浆胚系突变情况与临床病理特征的相关性。方法选取99例早期乳腺癌女性患者,采用靶向捕获高通量测序技术对其血浆标本进行21个乳腺癌易感基因测序,对检测到的突变位点进行筛选和分类... 目的应用靶向捕获高通量测序技术探究早期乳腺癌患者血浆胚系突变情况与临床病理特征的相关性。方法选取99例早期乳腺癌女性患者,采用靶向捕获高通量测序技术对其血浆标本进行21个乳腺癌易感基因测序,对检测到的突变位点进行筛选和分类,并分析其与临床病理特征的相关性。结果有48例患者检测出18个基因的55个突变位点,其中包含45个错义突变、1个无义突变、8个插入缺失突变、1个剪切位点突变。突变最多的为BRCA基因,检测出10个突变位点。55个突变位点中有9个(16.4%)为致病性突变,4个(7.3%)为无害突变,42个(76.3%)为意义未明突变;其中15个突变位点在ExAC、ClinVar、dbSNP、HGMD数据库中均未提及。统计分析结果显示,致病性胚系突变在不同年龄组和增殖细胞核抗原(Ki67)阳性与否的比较中,差异有统计学意义(P=0.044、0.024);>40岁和Ki67阳性患者发生致病性突变的概率更高。结论靶向捕获高通量测序技术应用于早期乳腺癌易感基因的筛查有一定意义,为临床个体化治疗提供了理论基础和实验依据。 展开更多
关键词 靶向捕获高通量测序技术 早期乳腺癌胚系突变 新发基因突变 临床应用
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血浆血清中游离核酸用于分子诊断的研究进展 被引量:1
16
作者 王侦 +1 位作者 华云 朱振宇 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第17期2354-2356,共3页
传统分子诊断的靶点主要集中于检测细胞遗传物质的改变,存在着取材困难,且对患者有较大程度伤害的局限性,如羊膜腔穿刺和绒毛膜取样进行产前诊断有1%的流产率。肿瘤的影像学检查有设备以及操作人员技术依赖性,最终确诊都依靠活体... 传统分子诊断的靶点主要集中于检测细胞遗传物质的改变,存在着取材困难,且对患者有较大程度伤害的局限性,如羊膜腔穿刺和绒毛膜取样进行产前诊断有1%的流产率。肿瘤的影像学检查有设备以及操作人员技术依赖性,最终确诊都依靠活体组织检查,会使患者承受一定痛苦。 展开更多
关键词 分子诊断 游离核酸 血清 血浆 细胞遗传物质 活体组织检查 绒毛膜取样 羊膜腔穿刺
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论过失引起纯粹经济损失中的责任排除规则
17
作者 胡佳宵 《合肥学院学报(社会科学版)》 2009年第6期85-88,121,共5页
对于过失引起纯粹经济损失的赔付是理论界及实务界中面临的共同难题。通过上百年的发展,英美法、德国法在这个问题上已建立了各具特色的的责任排除规则,但英美法和德国法又分别采取过失侵权行为类型化和纯粹经济损失"权力化"... 对于过失引起纯粹经济损失的赔付是理论界及实务界中面临的共同难题。通过上百年的发展,英美法、德国法在这个问题上已建立了各具特色的的责任排除规则,但英美法和德国法又分别采取过失侵权行为类型化和纯粹经济损失"权力化"对责任排除规则进行突破。我国侵权行为法应采取一般条款及类型化的方式解决这一问题。 展开更多
关键词 纯粹经济损失 责任排除规则 突破 一般条款 类型化
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血浆血清中游离核酸在结直肠癌基因诊断中的应用
18
作者 王侦 +1 位作者 华云 朱振宇 《分子诊断与治疗杂志》 2012年第1期62-65,共4页
结直肠癌是威胁人类健康的一类常见的消化道恶性肿瘤,血浆血清中游离核酸的发现为结直肠癌的基因诊断开辟了一个新的方向。结直肠癌病人血浆血清中肿瘤相关基因的改变,如染色体微卫星不稳定性、癌基因突变、杂合性缺失等,与原发灶的改... 结直肠癌是威胁人类健康的一类常见的消化道恶性肿瘤,血浆血清中游离核酸的发现为结直肠癌的基因诊断开辟了一个新的方向。结直肠癌病人血浆血清中肿瘤相关基因的改变,如染色体微卫星不稳定性、癌基因突变、杂合性缺失等,与原发灶的改变相一致,使得利用血浆血清中游离核酸作为结直肠癌早期诊断和预后判断的素材有一定的靶向性。 展开更多
关键词 结直肠癌 游离核酸 基因诊断
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注意缺陷多动障碍与突触体联系蛋白25基因的关联研究
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作者 张红宇 朱彦博 +1 位作者 常弘 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期564-569,共6页
目的探讨中国汉族人群中注意缺陷多动障碍(ADHD)与突触体联系蛋白25(SNAP-25)基因微卫星(STR)和单核苷酸多态性(SNP)的关系。方法本组100例,均为学龄期的ADHD患儿,通过唾液取样获取他们及其父母的DNA样本。同时选取符合年龄... 目的探讨中国汉族人群中注意缺陷多动障碍(ADHD)与突触体联系蛋白25(SNAP-25)基因微卫星(STR)和单核苷酸多态性(SNP)的关系。方法本组100例,均为学龄期的ADHD患儿,通过唾液取样获取他们及其父母的DNA样本。同时选取符合年龄段的正常儿童97名作为对照组,DNA样本从血液中提取。检测100个ADHD核心家系和97个对照的SNAP-25基因STR,同时对rs363006和rs362549两段SNP进行基因分型,并进行病例对照的关联分析和传递不平衡检验(TDT)。结果STR病例对照分析结果显示ADHD组和对照组(TAAA)n的等位基因频率和基因型频率差异无统计学意义(P均〉0.05);rs363006和rs362549两段SNP的家系TDT研究表明,SNAP-25基因和ADHD之间不存在关联(P均〉0.05)。按照亚型分组后,rs362549在注意缺陷型中有优先传递等位基因A的趋势(χ^2=8.00,P〈0.01),而在混合型中有优先传递等位基因G的趋势(χ^2=4.122,P〈0.05)。结论SNAP-25基因STR和上述两段SNP和ADHD之间也许不存在关联,但rs362549这段SNP的多态性和ADHD亚型可能存在关联,尚需扩大样本进一步验证才能得出确切结论。 展开更多
关键词 注意力缺陷障碍伴多动 遗传 多态性 单核苷酸
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排除β-肌动蛋白假基因对反转录聚合酶链反应的干扰
20
作者 李森华 +3 位作者 彭瑾瑜 付艳艳 叶伟超 常弘 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2006年第6期412-414,428,共4页
目的筛选合适的β-肌动蛋白(β-actin)引物以排除RNA样本中残存的DNA对人类基因表达分析的干扰。方法利用EMBL、PSEUDOGENE等生物信息数据库,寻找β-actin的假基因。同时自行设计和从国内外文献中筛选了众多β-actin引物。选用其中具有... 目的筛选合适的β-肌动蛋白(β-actin)引物以排除RNA样本中残存的DNA对人类基因表达分析的干扰。方法利用EMBL、PSEUDOGENE等生物信息数据库,寻找β-actin的假基因。同时自行设计和从国内外文献中筛选了众多β-actin引物。选用其中具有代表性的5对跨过内含子的引物,分别将基因组DNA、未经逆转录的RNA、cDNA作为模板,对这5对引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增。结果生物信息学分析发现β-actin有37个假基因并且发现绝大多数的研究者所使用的引物都存在假基因干扰问题。当分别用DNA和cDNA作为模板时,5对引物中的1对跨过内含子的引物能扩增出大小不同的条带。结论使用该对引物能有效发现和排除RNA样本中所残存的DNA的干扰,令人类基因表达分析得出更准确的结果。 展开更多
关键词 Β-肌动蛋白 加工后假基因 基因表达分析 反转录聚合酶链反应
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