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布鲁氏菌环介导等温扩增(LAMP)可视化检测方法的建立 被引量:25
1
作者 许邹亮 南文龙 +6 位作者 周洁 明哲 郭玉广 谭鹏飞 毛开荣 彭大新 陈义平 《中国动物检疫》 CAS 2011年第8期37-40,共4页
应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立了布鲁氏菌可视化快速检测方法。针对布鲁氏菌外膜蛋白OMP25基因保守区设计6条特异引物,反应前加入染料羟基萘芬蓝(HNB)作为LAMP扩增的指示剂,63℃恒温反应60min,根据HNB的颜色变化进行结果判定。分别... 应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立了布鲁氏菌可视化快速检测方法。针对布鲁氏菌外膜蛋白OMP25基因保守区设计6条特异引物,反应前加入染料羟基萘芬蓝(HNB)作为LAMP扩增的指示剂,63℃恒温反应60min,根据HNB的颜色变化进行结果判定。分别评价所建立LAMP方法的特异性和灵敏性,并对60份牛布鲁氏菌病虎红平板凝集试验(RBT)阳性血清样本,经LAMP和B4/B5-PCR方法进行平行检测。结果显示,本方法最低检出限约为17fg布鲁氏菌基因组DNA。本方法特异性良好,布鲁氏菌反应管均出现特异性LAMP扩增反应,而猪大肠杆菌K99、巴氏杆菌C48-1、猪链球菌ST171、绿脓杆菌等对照组均未出现扩增。针对60份RBT阳性血清的平行检测结果显示,LAMP和B4/B5-PCR这两种方法间的结果符合率为85.0%。B4/B5-PCR检测为阳性的43份样品,经本方法检测全部为阳性;B4/B5-PCR检测为阴性的17份样品,经本方法检测,9份为阳性,8份为阴性。LAMP的敏感性高于B4/B5-PCR方法。实验表明,本文所建立的基于颜色判定的布鲁氏菌LAMP检测方法具有特异、灵敏、设备要求简单等特点,适用于基层兽医部门进行布鲁氏菌的快速检测。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 环介导等温扩增(LAMP) 可视化检测
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用ELISA检测猪链球菌病血清抗体(初报) 被引量:13
2
作者 陈兴扶 徐瑞 +6 位作者 尹燕博 明哲 郭福生 蒋正军 吴时友 孙淑芳 毕道荣 《中国动物检疫》 CAS 1999年第4期1-4,共4页
以2.5%NaCl浸提猪链球菌荚膜多糖抗原,选用2%明胶作封闭液,4%PEG-PBS为血清稀释液,用ELISA检测猪链球菌病血清抗体,特异性强,比琼扩敏感25-250倍,简便快速,在本病诊断、检疫中有一定实用价值。
关键词 猪链球菌病 ELISA 血清抗体
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伪狂犬病检测技术研究进展 被引量:15
3
作者 王莉娟 明哲 +2 位作者 陈义平 曹洪敬 蔡丽娟 《中国畜牧兽医》 CAS 2005年第6期42-44,共3页
伪狂犬病(pseudorabies,PR)是一种可感染多种动物的高度接触性传染病,作者综述了到目前为止的伪狂犬病诊断技术,其中包括传统的病毒分离技术、实验室的血清学检测技术以及分子生物学诊断技术等,着重对目前在全世界应用广泛的ELISA技术... 伪狂犬病(pseudorabies,PR)是一种可感染多种动物的高度接触性传染病,作者综述了到目前为止的伪狂犬病诊断技术,其中包括传统的病毒分离技术、实验室的血清学检测技术以及分子生物学诊断技术等,着重对目前在全世界应用广泛的ELISA技术进行了介绍。 展开更多
关键词 伪狂犬病 检测技术 ELISA
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口蹄疫诊断技术研究进展 被引量:14
4
作者 王莉娟 徐天刚 +4 位作者 赵云玲 明哲 陈义平 曹洪敬 蔡丽娟 《中国畜牧兽医》 CAS 2005年第3期41-44,共4页
口蹄疫是偶蹄动物的一种重要的烈性传染病 ,可使世界范围内的畜牧业遭受严重的经济损失 ,作者综述了目前的口蹄疫诊断技术研究进展 ,其中包括了传统的病毒分离技术 ,实验室的血清学检测技术以及分子生物学诊断技术等 ,着重对目前在全世... 口蹄疫是偶蹄动物的一种重要的烈性传染病 ,可使世界范围内的畜牧业遭受严重的经济损失 ,作者综述了目前的口蹄疫诊断技术研究进展 ,其中包括了传统的病毒分离技术 ,实验室的血清学检测技术以及分子生物学诊断技术等 ,着重对目前在全世界应用广泛的 EL ISA技术进行了重点介绍 ,并对口蹄疫诊断技术进行了展望。 展开更多
关键词 口蹄疫 诊断技术 偶蹄动物 分子生物学诊断 烈性传染病 畜牧业 经济损失 研究进展 血清学检测 ELISA
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应用PCR检测非洲猪瘟病毒的研究 被引量:6
5
作者 蒋正军 龚振华 +6 位作者 尹燕博 王树双 蔡丽娟 郭福生 明哲 孙承英 宣华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第S1期239-242,共4页
采用PCR对非洲猪瘟病毒(ASFV)Spain 70株、Malawi 83株、Malta 78株、Uganda株的细胞培养毒以及ASFV组织病料和 200份田间样品进行检测,结果表明两对引物 P1+ P2和 P3+ P4对 ... 采用PCR对非洲猪瘟病毒(ASFV)Spain 70株、Malawi 83株、Malta 78株、Uganda株的细胞培养毒以及ASFV组织病料和 200份田间样品进行检测,结果表明两对引物 P1+ P2和 P3+ P4对 ASFV具有较好的特异性和灵敏性。运用 PCR检测 AS-FV操作简单、快速,检测结果与HAD自动玫瑰花环试验的阳性符合率为100%,该方法明显优于常规的血清学方法。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 PCR
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鸵鸟新城疫实验病理学研究 被引量:6
6
作者 尹燕博 单虎 +5 位作者 王建琳 刘福辰 田振宇 将正军 郭福生 明哲 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期946-952,共7页
用鸡源新城疫(ND)强毒株F48E9和鸵鸟源新城疫强毒株O-XJ99-12,对不同免疫状态下2~4月龄鸵鸟进行动物试验。动物发病后经剖检、组织切片、病毒分离等方法证实:鸵鸟源和鸡源新域疫病毒(NDV)毒株,经静脉和黏膜感染非免疫鸵鸟,均可引起特征... 用鸡源新城疫(ND)强毒株F48E9和鸵鸟源新城疫强毒株O-XJ99-12,对不同免疫状态下2~4月龄鸵鸟进行动物试验。动物发病后经剖检、组织切片、病毒分离等方法证实:鸵鸟源和鸡源新域疫病毒(NDV)毒株,经静脉和黏膜感染非免疫鸵鸟,均可引起特征性的鸵鸟ND症状和病变,对鸡胚致病力强的NDV毒株,对非免疫鸵鸟的致病力也强;鸵鸟ND的免疫临界点,HI抗体效价最低为5log2。 展开更多
关键词 鸵鸟 新城疫 实验病理学
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猪伪狂犬病病毒囊膜糖蛋白gD主要抗原表位区基因的克隆及原核表达 被引量:5
7
作者 罗飞 李宇琴 +3 位作者 周洁 南文龙 明哲 陈义平 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第11期83-86,共4页
本试验通过PCR方法以猪伪狂犬病病毒SD株的基因组DNA为模板扩增得到了含gD主要抗原表位编码区的片段,将该PCR产物克隆到pGEM-T载体上,酶切后插入原核表达载体pET-32a的T7启动子下游。构建的重组质粒pET-gD经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3... 本试验通过PCR方法以猪伪狂犬病病毒SD株的基因组DNA为模板扩增得到了含gD主要抗原表位编码区的片段,将该PCR产物克隆到pGEM-T载体上,酶切后插入原核表达载体pET-32a的T7启动子下游。构建的重组质粒pET-gD经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达。SDS-PAGE结果显示,表达产物分子质量约为45.2ku,主要以包涵体形式存在。表达产物用His亲和层析柱纯化。Western blotting结果显示,该纯化蛋白能与猪伪狂犬病病毒抗体阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的抗原反应性,可以作为猪血清伪狂犬病病毒抗体诊断用抗原。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 gD糖蛋白 主要抗原表位 原核表达
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高致病性禽流感(H_5N_1)的临床特征及控制措施 被引量:4
8
作者 王玉东 郭福生 +7 位作者 龚振华 明哲 刘俊辉 王娟 黄秀梅 张衍海 郑增忍 曲志娜 《山东家禽》 2002年第4期33-34,共2页
关键词 高致病性禽流感 流行病学 病因 症状 病理变化 诊断 综合防制
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口蹄疫3A蛋白基因的表达及其抗原性研究 被引量:3
9
作者 龚振华 蒋正军 +9 位作者 刘俊辉 孙淑芳 王永玲 曲志娜 黄秀梅 周清燕 明哲 司红伟 王玉东 郑增忍 《中国动物检疫》 CAS 2003年第12期23-25,共3页
从pUCm-3ABC质粒切割FMDV的3A蛋白基因DNA,将其与pET-30c(+)载体连接,构建pET30C3A原核重组表达质粒,序列分析表明,pET30C3A重组质粒的插入3A蛋白基因的阅读框架正确。pET30C3A-BL21经IPTG诱导后可表达3A融合蛋白。Western Blot试验证... 从pUCm-3ABC质粒切割FMDV的3A蛋白基因DNA,将其与pET-30c(+)载体连接,构建pET30C3A原核重组表达质粒,序列分析表明,pET30C3A重组质粒的插入3A蛋白基因的阅读框架正确。pET30C3A-BL21经IPTG诱导后可表达3A融合蛋白。Western Blot试验证明该表达蛋白具有较好的抗原活性,提示可进一步用重组表达的FMDV 3A蛋白作抗原检测PMD。 展开更多
关键词 口蹄疫 3A蛋白基因 基因表达 抗原性
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2023年我国春季甲流的流行病学特征分析及防控建议 被引量:1
10
作者 郑邵华 明哲 林俊葵 《口岸卫生控制》 2023年第3期28-31,35,共5页
本文通过我国南、北省份哨点医院报告的2023年春季流感样病例情况,对比2019-2022年同期水平,综合分析甲流的流行病学特征,提出接种疫苗、使用药物预防及治疗、培养良好的生活习惯等防控建议,为下一轮的甲流防控提供科学依据。
关键词 甲流 流行病学 疫苗接种 防控建议
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山东部分鸡致病性大肠杆菌菌株抗药性测试 被引量:2
11
作者 徐瑞 尹燕博 +3 位作者 蒋正军 郭福生 明哲 王娟 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第S1期137-139,共3页
用24株致病性大肠杆菌(E.coli),对21种药敏试纸进行抗药性测试。结果表明24株E.coli抗药性相当严重,每种药物的敏感性也有差异。 21种药物只有 2种药最敏感, 8种药完全不敏感,其余 11种药也只对 3- 8... 用24株致病性大肠杆菌(E.coli),对21种药敏试纸进行抗药性测试。结果表明24株E.coli抗药性相当严重,每种药物的敏感性也有差异。 21种药物只有 2种药最敏感, 8种药完全不敏感,其余 11种药也只对 3- 8个菌株产生高度敏感, 1-9个菌株产生中度敏感,对8-19个菌株产生完全不敏感。 展开更多
关键词 致病性大肠杆菌 抗药性
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鸡全胚成纤维细胞在鸡痘细胞活疫苗生产中的应用 被引量:3
12
作者 齐铁英 张亚华 +7 位作者 南锡 明哲 佐颖 姜力 齐琳 南文龙 武佳斌 李鑫 《中国兽药杂志》 2002年第11期45-47,共3页
采用鸡胚全部组织(全胚法)制备鸡胚成纤维单层细胞和采用鸡胚部分组织(常规法)制备鸡胚成纤维单层细胞生产了鸡痘细胞活疫苗,接毒后均产生大量的感染多核细胞和典型细胞融合性病变(胡椒粒样)。鸡胚效价检测表明,鸡痘细胞苗和鸡痘组织苗... 采用鸡胚全部组织(全胚法)制备鸡胚成纤维单层细胞和采用鸡胚部分组织(常规法)制备鸡胚成纤维单层细胞生产了鸡痘细胞活疫苗,接毒后均产生大量的感染多核细胞和典型细胞融合性病变(胡椒粒样)。鸡胚效价检测表明,鸡痘细胞苗和鸡痘组织苗均可引起鸡胚绒毛尿囊膜水肿、增厚或痘斑,但鸡痘细胞苗产生痘斑数量明显高于鸡痘组织苗。鸡体刺种结果表明,鸡痘细胞苗诱发的免疫反应(发痘)好于鸡痘组织苗;与常规法相比,全胚成纤维单层细胞制备方法可提高鸡胚利用率2倍以上。全胚法也可应用于制备其他鸡成纤维细胞疫苗。 展开更多
关键词 鸡全胚成纤维细胞 鸡痘细胞活疫苗生产 应用
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布鲁菌Cycling探针荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:2
13
作者 许邹亮 南文龙 +4 位作者 明哲 周洁 谭鹏飞 陈义平 毛开荣 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2012年第2期13-16,共4页
根据布鲁菌BCSP31基因序列设计布鲁菌通用检测引物和探针,建立了布鲁菌Cycling探针荧光定量PCR检测方法。以构建的含BCSP31基因的质粒标准品10倍递进稀释为模板检测其敏感性,结果显示,本方法能检测约10个拷贝的阳性质粒,且标准曲线的线... 根据布鲁菌BCSP31基因序列设计布鲁菌通用检测引物和探针,建立了布鲁菌Cycling探针荧光定量PCR检测方法。以构建的含BCSP31基因的质粒标准品10倍递进稀释为模板检测其敏感性,结果显示,本方法能检测约10个拷贝的阳性质粒,且标准曲线的线性关系良好。用本方法检测5株不同种的布鲁菌以及猪大肠杆菌K99、巴氏杆菌C48-1、猪链球菌ST171、绿脓杆菌等4株对照菌。结果显示,5株不同种的布鲁菌均出现典型的"S"型扩增曲线,4株对照菌40个循环内均无CT值出现。用本方法和B4/B5-PCR方法对来自布鲁菌病流行地区3个不同牛场的40份血样、奶样和血清样进行平行检测。结果显示,本方法和B4/B5-PCR方法的结果符合率为80.0%。B4/B5-PCR检测为阳性的27份样品经本方法检测均为阳性;B4/B5-PCR检测为阴性的13份样本,经本方法检测,其中8份呈阳性,5份为阴性。本方法的敏感性明显高于B4/B5-PCR方法。试验表明,所建立的Cycling探针荧光定量PCR方法具有敏感、特异、稳定等特点,可用于布鲁菌感染的快速检测。 展开更多
关键词 布鲁菌 Cycling探针荧光定量PCR
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口蹄疫3ABC蛋白基因的克隆与序列分析的研究 被引量:1
14
作者 龚振华 郑增忍 +8 位作者 刘俊辉 明哲 郭福生 蒋正军 王玉东 张衍海 黄秀梅 李葳 李玉清 《中国动物检疫》 CAS 2003年第11期25-27,共3页
摘要:采用RT-PCR扩增FMDV的3ABC蛋白DNA,将其与pUCm-T载体连接,构建pUCm-3ABC重组质粒,序列分析表明,pUCm-3ABC重组质粒的插入DNA与多种血清型FMDV的相同DNA区段有较高的同源性,提示可进一步用pUCm-3ABC重组质粒研究FMDV3ABC蛋白的表达... 摘要:采用RT-PCR扩增FMDV的3ABC蛋白DNA,将其与pUCm-T载体连接,构建pUCm-3ABC重组质粒,序列分析表明,pUCm-3ABC重组质粒的插入DNA与多种血清型FMDV的相同DNA区段有较高的同源性,提示可进一步用pUCm-3ABC重组质粒研究FMDV3ABC蛋白的表达抗原。 展开更多
关键词 口蹄疫 3ABC蛋白基因 基因克隆 序列分析 传染病 反转录反应
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猪伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gB主要抗原表位区基因的克隆及原核表达 被引量:1
15
作者 罗飞 陈义平 +5 位作者 明哲 彭大新 周洁 李宇琴 徐宝娟 南文龙 《中国动物检疫》 CAS 2009年第12期27-28,36,共3页
参照GenBank发表的猪伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gB主要抗原表位的编码区基因序列,设计一对引物,通过PCR扩增后,将约为600bp的目的片段克隆到pGEM-T载体上,酶切后插入原核表达载体pET-32(a)的T7启动子下游,构建的重组质粒pET-gB经IPTG诱导,在... 参照GenBank发表的猪伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gB主要抗原表位的编码区基因序列,设计一对引物,通过PCR扩增后,将约为600bp的目的片段克隆到pGEM-T载体上,酶切后插入原核表达载体pET-32(a)的T7启动子下游,构建的重组质粒pET-gB经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达。SDS-PAGE结果显示,表达产物分子量约为42.4KDa,主要以包涵体形式存在。BandScan分析表明,表达量约占菌体蛋白的60.5%。利用His亲和层析方法得到了纯化的表达产物。Western blotting结果显示,重组蛋白能与阳性血清发生特异性反应,具有较好的抗原反应原性,可以作为检测用抗原。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒 囊膜糖蛋白gB 主要抗原表位 原核表达
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湛江海港口岸1例境外输入性新型冠状病毒肺炎病例流行病学调查及应急处置 被引量:1
16
作者 李孝松 周聪 +3 位作者 陈伟 明哲 方鹏举 何太平 《华南预防医学》 2021年第4期503-505,共3页
目的分析湛江海港口岸1例境外输入性新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎)病例的流行病学特点,为制定海港口岸新冠肺炎疫情的防控策略提供依据。方法对病例及其密切接触者开展现场流行病学调查,采集相关标本送上级实验室检测,并运用描述流行... 目的分析湛江海港口岸1例境外输入性新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎)病例的流行病学特点,为制定海港口岸新冠肺炎疫情的防控策略提供依据。方法对病例及其密切接触者开展现场流行病学调查,采集相关标本送上级实验室检测,并运用描述流行病学方法进行分析。结果该病例为菲律宾籍船员,男,25岁,于2020年7月24日从菲律宾马尼拉港换班上船,之后靠泊口岸作业时均未登陆,也未与登轮作业的引航员、测量员和代理近距离密切接触。7月24日至8月1日期间与新冠病毒核酸阳性病例有密切接触,9月26日出现轻微咽痛、胸部不适,10月1日经湛江海关保健中心实验室初步确定为新冠病毒核酸阳性,IgM抗体弱阳,IgG抗体阳性,10月2日湛江市疾控中心实验室复检确认为新冠病毒核酸阳性。10月2日湛江中心人民医院胸部CT平扫+MPR,右肺中叶外侧段及双肺下叶胸膜下少许淡薄密度影。该患者否认发病前14 d内接触过发热、咳嗽病人,未直接接触过冷冻食品,其同船14名船员核酸检测均为阴性。结论该病例为湛江海港口岸境外输入新型冠状病毒肺炎病例,感染来源为菲律宾的可能性大。无明显症状的感染者长时间存在,提示港口作业人员做好个人防护、检疫人员严谨细致的排查、病例的隔离治疗和病例密切接触者的集中隔离医学观察是防范海港口岸疫情扩散的主要措施。 展开更多
关键词 新型冠状病毒肺炎 输入病例 流行病学调查 疫情处置
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灭球液对鸡巨型、柔嫩艾美耳球虫 混合感染的防治试验
17
作者 刘镇明 沈祥广 +2 位作者 明哲 李有贵 曾海彬 《中国家禽》 北大核心 1996年第1期10-12,共3页
灭球液对鸡巨型、柔嫩艾美耳球虫 混合感染的防治试验刘镇明,沈祥广,陆明哲,李有贵,曾海彬(华南农业大学动物医学系510642)鸡球虫病是一种世界性广泛分布的寄生虫病,常引起15—50日龄的雏鸡发病,死亡率可高达80%... 灭球液对鸡巨型、柔嫩艾美耳球虫 混合感染的防治试验刘镇明,沈祥广,陆明哲,李有贵,曾海彬(华南农业大学动物医学系510642)鸡球虫病是一种世界性广泛分布的寄生虫病,常引起15—50日龄的雏鸡发病,死亡率可高达80%。为了有效地控制鸡球虫病的发生,克... 展开更多
关键词 鸡病 球虫病 混合感染 防治
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湛江口岸2005~2008年出入境人员HCV抗体检测结果分析
18
作者 唐小红 明哲 孙志彦 《旅行医学科学》 2010年第3期24-26,共3页
目的掌握湛江口岸出入境人员丙型肝炎感染及人群分布情况,以确定监测工作重点,为制定丙肝防控措施提供科学的依据。方法用酶联免疫法(ELISA)对出入境人员进行HCV抗体检测;并对感染者进行流行病学调查。结果在9226名不同人群的出入境人员... 目的掌握湛江口岸出入境人员丙型肝炎感染及人群分布情况,以确定监测工作重点,为制定丙肝防控措施提供科学的依据。方法用酶联免疫法(ELISA)对出入境人员进行HCV抗体检测;并对感染者进行流行病学调查。结果在9226名不同人群的出入境人员HCV抗体检测中,检出阳性63例,检出率0.68%,其中劳务输出检出率最高,2.00%;按年龄段的分类分析21~30岁检出率最高,1.06%;63例丙肝感染者中21人ALT偏高,占33.3%;63例感染者中51人有静脉吸毒史,占81.0%。结论加强HCV抗体检测和丙型肝炎的防治知识宣传教育,确保出入境人员身体健康,严防传染性疾病的传入、传出。 展开更多
关键词 HCV抗体 检测 流行病学调查
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湛江市部分人群登革病毒抗体检测报告
19
作者 明哲 王斌 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 1999年第3期143-144,共2页
为对湛江市登革热流行情况进行监测,湛江卫生检疫局在湛江市民中随机抽样200名做登革病毒抗体检测,结果检出IgG抗体阳性1例,阳性率为0.5%,IgM抗体全部阴性。
关键词 湛江市 人群 登革病毒 抗体 检测 登革热 疾病监测 卫生检疫
全文增补中
湛江地区出入境人员甲型肝炎免疫水平检测
20
作者 明哲 孙志彦 +2 位作者 蔡晶晶 唐小红 陈晓红 《中国卫生产业》 2015年第34期61-62,共2页
目的通过检测湛江地区出入境人员甲型肝炎抗体,分析甲肝流行的风险,为甲肝防控提供科学数据。方法对人群进行血清学酶法HAV-Ig G检测,分析人群甲型肝炎免疫水平。结果共检测5947份血清,HAV-Ig G阳性5670例,感染率95.3%;男性感染率95.9%... 目的通过检测湛江地区出入境人员甲型肝炎抗体,分析甲肝流行的风险,为甲肝防控提供科学数据。方法对人群进行血清学酶法HAV-Ig G检测,分析人群甲型肝炎免疫水平。结果共检测5947份血清,HAV-Ig G阳性5670例,感染率95.3%;男性感染率95.9%高于女性88.4%;感染率随年龄增长而递增,≤20岁为90.7%,>60岁为99.2%;不同人群中商务人员感染率最高为95.9%,留学生最低92.6%。结论湛江地区出入境人群甲型肝炎免疫水平较高,甲型肝炎暴发流行风险小。 展开更多
关键词 湛江地区 出入境人员 甲型肝炎 免疫水平
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