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巨噬细胞炎症蛋白-1α通过骨硬化蛋白抑制骨髓瘤骨病患者成骨细胞功能研究 被引量：8
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作者 王晓桃 何玉婵 +4 位作者 王航飞 阳少芳 张俊艳 高彤彤 吴春叶 《重庆医学》 CAS 2019年第8期1261-1266,共6页
目的探讨巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)对骨髓瘤骨病(MBD)患者成骨细胞抑制功能的研究。方法采用人骨髓瘤细胞株H929细胞及MBD患者骨髓基质细胞(BMSCs)分化成熟的第三代成骨细胞(OB),实验分5组:对照组、MIP-1α组、骨硬化蛋白(Scl)组、... 目的探讨巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)对骨髓瘤骨病(MBD)患者成骨细胞抑制功能的研究。方法采用人骨髓瘤细胞株H929细胞及MBD患者骨髓基质细胞(BMSCs)分化成熟的第三代成骨细胞(OB),实验分5组:对照组、MIP-1α组、骨硬化蛋白(Scl)组、抗MIP-1α单抗(MIP-1α-Ab)组和抗Scl单抗(SclAb)组。分离并原代培养BMSCs分化的OB,传代培养H929;ELISA定量检测H929培养上清液中的MIP-1α和Scl水平;碱性磷酸酶染色及茜素红染色鉴定OB,Brαdford法定量检测OB的碱性磷酸酶(ALP)活性;Western blot检测OB的ALP的表达水平;茜素红染色法检测OB钙离子沉积结节;流式细胞仪检测OB的凋亡率。结果体外成功分离培养BMSCs为OB;Scl组及Scl-Ab组MIP-1α水平较对照组改变不明显(均P>0.05),MIP-1α组Scl的水平明显高于对照组(P<0.05),MIP-1α-Ab组中的Scl水平较对照组明显下降(P<0.05);MIP-1α-Ab组、Scl-Ab组中OB的钙离子沉积结节、ALP活性、ALP蛋白较对照组明显增高(均P<0.05),而OB的凋亡率则明显低于对照组(P<0.05);MIP-1α、Scl组中OB的钙离子沉积结节、ALP活性、ALP蛋白较对照组组明显降低(均P<0.05),而OB的凋亡率明显高于对照组(P<0.05)。结论 MIP-1α能抑制MBD患者OB分化成熟,促进OB的凋亡,其机制可能是通过增加Scl水平来实现的。 展开更多
关键词 骨髓瘤骨病 成骨细胞 巨噬细胞炎症蛋白-1Α 骨硬化蛋白
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运用液体流动装置模拟的流体剪切应力下骨髓瘤细胞对骨细胞、破骨细胞和骨细胞表达RANKL的影响 被引量：3
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作者 王晓桃 田申 +5 位作者 何玉婵 吴春叶 张俊艳 阳少芳 王航飞 You Lidan 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第2期251-256,共6页
背景:骨髓瘤骨病因骨骼疼痛、溶骨性破坏导致患者可能懒动而导致骨质丢失增加、骨病加重。目的:探讨运用液体流动装置模拟人机械运动时产生的流体剪切力在骨髓瘤环境下,瘤细胞(U266细胞)对骨细胞(Y4细胞)、破骨细胞的作用,及其对骨细胞... 背景:骨髓瘤骨病因骨骼疼痛、溶骨性破坏导致患者可能懒动而导致骨质丢失增加、骨病加重。目的:探讨运用液体流动装置模拟人机械运动时产生的流体剪切力在骨髓瘤环境下,瘤细胞(U266细胞)对骨细胞(Y4细胞)、破骨细胞的作用,及其对骨细胞分泌的RANKL表达的影响。方法:(1)建立液体流动装置,实验组为U266细胞培养液,对照组为Y4标准培养液,每组均设流动和不流动模式;体外细胞传代培养骨髓瘤细胞系U266细胞和小鼠骨细胞系Y4细胞;(2)再取新的Y4细胞,按实验分组再培养48 h,显微镜下观察骨细胞、破骨细胞的形态并计数;(3)ELISA定量检测RANKL的水平;Western Blotting检测RANKL蛋白;(4)建立RANKL+实验样品+标准培养液的体系,取RAW264.7细胞体外培养,用RANKL干预诱导,TRAP染色观察RAW264.7细胞株分化的破骨细胞数量及状态。结果与结论:(1)与对照组相比,U266细胞培养上清下的Y4细胞计数显著下降,形态变化明显;TRAP阳性细胞数增加和RANKL蛋白表达显著升高(P均<0.05);(2)动模式较非流量模式,Y4细胞数量明显增多,TRAP阳性细胞数明显减少,骨细胞表达的RANKL蛋白降低(P均<0.05);(3)结果说明,骨髓瘤细胞可以抑制正常骨细胞的生长和促进RANKL蛋白和破骨细胞的增殖。与静态相比,流体切应力可促进骨细胞的增殖,RANKL蛋白表达受抑制和抑制破骨细胞的增殖。因此,推测机械运动可以防止骨髓瘤骨病进展。 展开更多
关键词 骨髓瘤骨病 流动液体室装置 骨细胞:破骨细胞 核转录因子κB配体 RANKL 组织构建 多发性骨髓瘤 破骨细胞 RANK配体 组织工程
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