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羟基脲诱导胚胎样血红蛋白表达对小鼠缺氧的改善作用
1
作者 周晓英 矫力 +5 位作者 崔宇 李晓栩 阳一栋 杨诚忠 王辰元 黄缄 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期93-101,共9页
目的 探讨羟基脲(hydroxyurea,HU)对密闭缺氧小鼠的保护作用及机制。方法 将60只6~8周龄、体质量18~22g的雄性C57BL/6J小鼠随机分成常氧对照组(NC组,n=10)、常氧HU组(NHU组,n=10)、缺氧对照组(HC组,n=20)、缺氧HU组(HHU组,n=20)。HU组... 目的 探讨羟基脲(hydroxyurea,HU)对密闭缺氧小鼠的保护作用及机制。方法 将60只6~8周龄、体质量18~22g的雄性C57BL/6J小鼠随机分成常氧对照组(NC组,n=10)、常氧HU组(NHU组,n=10)、缺氧对照组(HC组,n=20)、缺氧HU组(HHU组,n=20)。HU组每天腹腔注射HU100mg/kg;对照组每天注射等量生理盐水。4周后取NHU组和NC组小鼠的骨髓进行转录组测序;再将HHU组和HC组置于密封瓶,进行密闭缺氧,记录其生存时间;在缺氧15min时,取脑、肾组织进行免疫组化,同时取未缺氧的NHU组和NC组脑、肾组织进行对照;并对骨髓进行RT-qPCR验证,外周血进行Westernblot验证。结果 HHU组小鼠密闭缺氧的生存时间显著延长(P<0.05);脑和肾脏缺氧程度显著降低(P<0.05)。外周血氧亲和力显著提高,且P50与小鼠生存时间存在显著的负相关关系(Pearson=-0.738,P<0.01)。转录组共检测到65389个基因,其中NHU组上调基因50个,下调基因272个(|log2FC|≥1,Q<0.05),对差异显著的基因进行功能富集,结果发现在分子组成上,血红蛋白复合体居于首位;分子功能上,主要富集到影响血红蛋白各亚基结合的分子;生物学功能上主要富集到红细胞发育相关的生物学过程。差异分子中,Erfe、Hbb-y、Hbb-bh1、Hba-x>1.5倍以上,而下调基因有红系发育相关基因Klf1、Sox6、Gata1等;经验证,NHU组Hbb-y、Hbb-bh1、Hba-x的mRNA显著升高,外周血HbE(ε-globin)蛋白表达增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 HU对密闭缺氧小鼠具有明显的保护作用,可能与HU诱导高氧亲和力的胚胎样血红蛋白表达,从而促进携氧的作用有关。 展开更多
关键词 羟基脲 低氧 胚胎样血红蛋白 胎儿血红蛋白
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以胜任力为导向的"特殊环境医学"课程内容体系的构建 被引量：1
2
作者 周晓英 黄缄 +4 位作者 矫力 崔宇 李晓栩 阳一栋 杨诚忠 《中华医学教育探索杂志》 2022年第5期525-529,共5页
目的以学员岗位胜任力为导向构建新开课程“特殊环境医学”的课程内容体系。方法结合军校学员特点,分析中国医师岗位胜任力需求,利用科学的方法进行课程内容体系构建。本研究采用德尔菲法和层次分析法构建特殊环境医学课程内容体系。遴... 目的以学员岗位胜任力为导向构建新开课程“特殊环境医学”的课程内容体系。方法结合军校学员特点,分析中国医师岗位胜任力需求,利用科学的方法进行课程内容体系构建。本研究采用德尔菲法和层次分析法构建特殊环境医学课程内容体系。遴选的专家意见用Kendall’s W协调系数表示,用卡方检验进行统计分析。各级条目层级和权重采用层次分析法,一致性比率(CR)作统计检验。通过检验(CR<0.1)方可纳入体系内。结果遴选的专家权威性、积极性高,专家意见一致性好,并形成了5条Ⅰ级条目、15条Ⅱ级条目、54条Ⅲ级条目的教材内容体系和13个知识模块用于实际授课,以及1种综合研讨课。结论以中国医师岗位胜任力的需求为指导,通过定性和定量相结合的研究方法,构建了特殊环境医学教学课程内容体系。 展开更多
关键词 德尔菲法 课程内容体系 特殊环境医学 胜任力
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基于试卷分析的高原生理学教学工作评价和改进 被引量：1
3
作者 杨诚忠 崔宇 +5 位作者 李晓栩 黄缄 矫力 阳一栋 周晓英 谭小玲 《中国高等医学教育》 2021年第11期27-29,共3页
目的:通过统计学手段分析高原生理学课程考试试卷,为试卷质量和教学质量的提升提供理论依据。方法:根据教学测量学原理对试卷的信度、效度、难度和区分度进行分析。结果:试卷符合课程结业考试要求,但主观题难度较低,中等难度题分值比例... 目的:通过统计学手段分析高原生理学课程考试试卷,为试卷质量和教学质量的提升提供理论依据。方法:根据教学测量学原理对试卷的信度、效度、难度和区分度进行分析。结果:试卷符合课程结业考试要求,但主观题难度较低,中等难度题分值比例较小。结论:试卷分析是教学研究的常用方法,可为考试命题提供质控参考,为教学工作的改进找准切入点。 展开更多
关键词 高原生理学 试卷分析 教学研究
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利用Seahorse XF-96探讨不同细胞浓度和血清对线粒体功能的影响
4
作者 李晓栩 崔宇 +6 位作者 阳一栋 周晓英 矫力 王辰元 杨诚忠 史诗 黄缄 《局解手术学杂志》 2022年第4期284-291,共8页
目的利用Seahorse XF-96探讨不同细胞浓度和血清对HUVEC细胞和U87细胞线粒体功能的影响。方法利用细胞线粒体应激试剂盒,在不同浓度的HUVEC细胞和U87细胞中加入抑制剂(寡霉素、解偶联剂、鱼藤酮和抗霉素A),根据细胞浓度分为2000组、400... 目的利用Seahorse XF-96探讨不同细胞浓度和血清对HUVEC细胞和U87细胞线粒体功能的影响。方法利用细胞线粒体应激试剂盒,在不同浓度的HUVEC细胞和U87细胞中加入抑制剂(寡霉素、解偶联剂、鱼藤酮和抗霉素A),根据细胞浓度分为2000组、4000组、6000组和8000组,根据有无血清和不同的解偶联剂浓度分为血清+低解偶联剂组、血清+高解偶联剂组、无血清+低解偶联剂组和无血清+高解偶联剂组。在Seahorse XF-96中测定线粒体的耗氧率(OCR)和细胞外酸化率(ECAR),并比较HUVEC细胞和U87细胞各组线粒体的基础氧耗、质子漏、最大呼吸能力、非线粒体的氧耗、储备的呼吸能力、三磷酸腺苷(ATP)生成能力、线粒体呼吸潜力和偶联效率;比较HUVEC细胞和U87细胞之间上述指标的差异;观察血清和解偶联剂浓度对HUVEC细胞线粒体功能的影响。结果在HUVEC细胞和U87细胞中,2000组OCR显著低于4000组、6000组和8000组(P<0.01);2000组的ECAR显著低于4000组(P<0.01),4000组显著低于6000组和8000组(P<0.01)。在HUVEC细胞中,与2000组比较,6000组和8000组的基础氧耗、储备的呼吸能力、ATP生成能力和最大呼吸能力增强(P<0.05),8000组非线粒体的氧耗和质子漏增强(P<0.05);在U87细胞中,与2000组比较,6000组和8000组的基础氧耗、非线粒体的氧耗和最大呼吸能力增强(P<0.05),8000组ATP生成能力、储备的呼吸能力和质子漏增强(P<0.05);HUVEC细胞和U87细胞各组间线粒体的偶联效率和线粒体呼吸潜力比较差异均无统计学意义(P>0.05)。U87细胞8000组的质子漏高于HUVEC细胞(P<0.05);HUVEC细胞2000组、6000组和8000组的偶联效率高于U87细胞(P<0.05);HUVEC细胞6000组的ATP生成能力和储备的呼吸能力高于U87细胞(P<0.05);HUVEC细胞和U87细胞各组基础氧耗、最大呼吸能力、非线粒体的氧耗、线粒体呼吸潜力比较差异均无统计学意义(P>0.05)。血清+低解偶联剂组储备的呼吸能� 展开更多
关键词 线粒体 能量代谢 氧耗 SEAHORSE
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DNase 2α在缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用及机制研究
5
作者 耿建慧 陈建 +6 位作者 张二龙 阳一栋 陈德伟 吴刚 王羽 赵文琦 高钰琪 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期731-739,共9页
目的 探讨DNase 2α在缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(rat pulmonary artery smooth muscle cells, RPASMCs)增殖中的作用及机制。方法 培养原代RPASMCs,采用3%O;缺氧处理细胞构建缺氧诱导细胞增殖模型。采用小干扰RNA(small interfering... 目的 探讨DNase 2α在缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(rat pulmonary artery smooth muscle cells, RPASMCs)增殖中的作用及机制。方法 培养原代RPASMCs,采用3%O;缺氧处理细胞构建缺氧诱导细胞增殖模型。采用小干扰RNA(small interfering RNA sequence, siRNA)敲低Dnase2a的表达,采用质粒过表达上调细胞中Dnase2a和Hif1a的表达。采用外源性加入线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)诱导细胞增殖,使用脯氨酸羟化酶抑制剂ROXA作为HIF-1α激动剂上调细胞中HIF-1α的表达。采用MTS法检测各组细胞增殖能力,实时荧光定量PCR法检测Dnase2a的mRNA表达,Western blot法检测DNase 2α、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)和细胞周期蛋白(cell cycle protein D1,Cyclin D1)的表达。结果 缺氧可诱导RPASMCs增殖,并上调DNase 2α的表达(P<0.05)。siRNA可显著降低RPASMCs中Dnase2a的表达(P<0.05),并显著增强缺氧诱导的RPASMCs增殖(P<0.05),同时显著上调PCNA和Cyclin D1的蛋白表达(P<0.05)。过表达Dnase2a可显著上调RPASMCs中DNase 2α的表达(P<0.05),并显著抑制缺氧诱导RPASMCs增殖(P<0.05)。外源性加入mtDNA可诱导RPASMCs增殖,而过表达Dnase2a可显著抑制mtDNA诱导的RPASMCs增殖(P<0.05)。过表达Hif1a或使用脯氨酸羟化酶抑制剂ROXA可显著上调HIF-1α表达,并显著上调DNase 2α的蛋白表达(P<0.05)。结论 DNase 2α可抑制缺氧或线粒体DNA诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖,缺氧诱导的DNase 2α表达上调与HIF-1α有关。 展开更多
关键词 DNase 2α 线粒体DNA 大鼠肺动脉平滑肌细胞 缺氧 增殖
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