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题名庆大霉素生物合成基因genD2的研究
被引量:2
- 1
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作者
阙新桥
陈泽斌
洪文荣
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机构
福州大学生物科学与工程学院
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出处
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第2期237-241,共5页
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基金
国家"重大新药创制"科技重大专项资助项目(No.2012ZX09201101-008)
国家自然科学基金资助项目(No.31070093)~~
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文摘
以绛红小单孢菌G1008基因组为模板,PCR扩增genD2的上下游序列作为同源交换臂,在温敏型穿梭质粒pKC1139的基础上,构建同源重组质粒pDB303;通过接合转移,将质粒pDB303导入绛红小单孢菌G1008,经影印筛选得到一株genD2框内缺失的工程菌GD238。发酵并提取代谢产物,质谱分析表明,工程菌GD238只积累庆大霉素A2和A2e,证明genD2参与了庆大霉素加洛糖胺上C-3″位氨甲基化,可能是编码脱氢酶基因。
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关键词
庆大霉素A2
genD2基因
生物合成
绛红小单孢菌
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Keywords
gentamicinA2
genD2
biosynthesis
Micromonospora purpurea
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分类号
R914
[医药卫生—药物化学]
TQ465
[医药卫生—药学]
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题名一株产G418单组分工程菌的构建
被引量:1
- 2
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作者
阙新桥
林艺辉
胡育龙
肖剑萍
洪文荣
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机构
福州大学生物科学与工程学院
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出处
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第2期307-314,共8页
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基金
国家自然科学基金项目(No.31070093)
国家"重大新药创制"科技重大专项项目(No.2012ZX09201101-008)
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文摘
【目的】定向改造庆大霉素产生菌绛红小单孢菌G1008,获得产G418单组分工程菌。【方法】以温敏型穿梭质粒p KC1139为载体,构建敲除基因genQ*重组质粒p QB303,通过接合转移,导入绛红小单孢菌G1008中,影印筛选和PCR鉴定genQ*框内缺失突变菌,利用TLC和MS分析其代谢产物组分。【结果】获得一株genQ*缺失工程菌Micromonospora purpurea GQ175,其代谢产物为G418单组分,生物效价达828 mg/L,与出发菌G1008的产抗能力相当。【结论】工程菌GQ175产G418单组分,具有很好的工业开发价值。同时,证明绛红小单孢菌G1008中,庆大霉素C-6′脱氢酶基因为genQ*,且无其他同功酶基因。
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关键词
绛红小单孢菌
G418
基因敲除
genQ+
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Keywords
Micromonospora purpurea, G418, Gene knock-out, genQ*
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分类号
Q93
[生物学—微生物学]
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题名一株主产庆大霉素C2a工程菌的构建
- 3
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作者
林强
陈洲琴
阙新桥
洪文荣
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机构
福州大学生物科学与工程学院
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出处
《宁夏大学学报(自然科学版)》
CAS
2016年第1期90-93,98,共5页
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基金
国家自然科学基金资助项目(31070093)
国家重大新药创制科技专项基金资助项目(2012ZX09201101-008)
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文摘
为更好生产单组分庆大霉素C2a,拟构建一株主产庆大霉素C2a的工程菌.通过序列比对分析,锁定genB2为构建该工程菌的关键基因.以绛红小单孢菌G1008基因组为模板,PCR扩增genB2的上下游序列为同源交换臂,构建同源重组质粒pZB303.通过接合转移,将质粒pZB303导入绛红小单孢菌G1008,安普抗性及PCR扩增筛选得到一株genB2框内缺失工程菌GB102.发酵并提取代谢产物,再经TLC,HPLC,MS分析.结果表明,工程菌GB102主要积累庆大霉素C2a.有望用于生产单组分庆大霉素C2a.
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关键词
庆大霉素C2a
genB2
绛红小单孢菌
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Keywords
GentamicinC2a
genB2
Micromonospora purpurea
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分类号
Q93
[生物学—微生物学]
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