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血清6型鸭疫里默氏杆菌发酵工艺与攻毒模型的建立 被引量：1
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作者 崔松奇 饶潇君 +13 位作者 赵海明 田春利 阎燊 张文芳 张丹丹 李娥 刘洋 余海涛 刘兴刚 孔敏 高月花 胡峰 黄兵 李玉峰 《家禽科学》 2022年第1期12-19,共8页
本试验对不同地区分离的3株血清6型鸭疫里默氏杆菌,通过摇瓶试验筛选出血清6型鸭疫里默氏杆菌适宜的增菌液体培养基和细菌计数培养基,通过5 L发酵罐各菌株生长曲线的对比,筛选出适合工业化发酵的菌株以及发酵工艺参数,通过鸭疫里默氏杆... 本试验对不同地区分离的3株血清6型鸭疫里默氏杆菌,通过摇瓶试验筛选出血清6型鸭疫里默氏杆菌适宜的增菌液体培养基和细菌计数培养基,通过5 L发酵罐各菌株生长曲线的对比,筛选出适合工业化发酵的菌株以及发酵工艺参数,通过鸭疫里默氏杆菌疾病模型条件筛选确立了攻毒模型。结果显示:WF201910株和TA201912株适宜的增菌液体培养基为商品化的RA培养基,LY202001株适宜的增菌液体培养基为商品化的TSB培养基,三个菌株适宜的细菌计数培养基均为TSA培养基;5L发酵罐发酵TA201912株在RA液体培养基最高菌数可以达到3.28×10;CFU/mL,通过500L发酵罐放大工艺验证,该工艺参数适合于规模化生产;4周龄雏鸭腿部肌肉注射鸭疫里默氏杆菌3 d后开始发病,发病与死亡高峰期为攻毒后3~6 d,临床症状与病原学鉴定均符合血清6型鸭疫里默氏杆菌疾病。本试验为血清6型鸭疫里默氏杆菌灭活疫苗的研制打下了基础。 展开更多
关键词 鸭疫里默氏杆菌 血清型 发酵工艺 攻毒模型
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基于中药大分子探讨芍药甘草汤镇痛的物质基础及作用机制 被引量：9
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作者 高源 郭琴 +5 位作者 王欢欢 董莹莹 赵宁 阎政燊 杨玉琴 柏冬 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1138-1148,共11页
为了研究芍药甘草汤的镇痛作用,本文从中药大分子角度探讨其物质基础及作用机制。本实验从中药复方煎煮后汤液浑浊的现象出发,以芍药甘草汤为研究对象,研究其煎煮时沉淀物的形成过程,结果表明汤剂在煎煮过程中会形成具有一定形貌的聚集... 为了研究芍药甘草汤的镇痛作用,本文从中药大分子角度探讨其物质基础及作用机制。本实验从中药复方煎煮后汤液浑浊的现象出发,以芍药甘草汤为研究对象,研究其煎煮时沉淀物的形成过程,结果表明汤剂在煎煮过程中会形成具有一定形貌的聚集体,通过静置离心得到沉淀物。定性、定量分析发现沉淀物主要由芍药苷、芍药内酯苷、甘草酸、甘草苷、异甘草苷和没食子酸6种小分子和蛋白质、多糖类大分子组成,虽然其成分与芍药甘草汤组成一致,但去除沉淀物的芍药甘草汤镇痛药效显著降低。在此基础上,本研究从芍药甘草汤中分离得到小分子化合物、多糖及蛋白质部位,各部位的含量分别为60.4、700.7和207.2 mg·g^(-1),大分子蛋白质、多糖含量较小分子含量高,按照多糖∶小分子=11.6∶1、蛋白质∶小分子=3.4∶1的比例在模拟煎煮的状态下制备沉淀物。粒径表征结果表明共同加热后两种沉淀物的粒径会发生明显变化,含量测定结果表明形成沉淀物后游离的小分子化合物芍药苷、芍药内酯苷、甘草酸、甘草苷、异甘草苷和没食子酸含量均明显降低,因此推测小分子成分分别与蛋白质、多糖发生了相互作用。醋酸扭体实验证明模拟制备的沉淀物具有很好的镇痛作用,并能有效降低炎症因子前列腺素E2和一氧化氮的水平,提高抗炎因子白介素-10水平。以上结果证明芍药甘草汤中的沉淀物是其发挥镇痛作用的重要物质基础,而大分子如蛋白质、多糖是构成沉淀物的主要成分,沉淀物发挥镇痛作用的化学机制是大分子与小分子间发生了相互作用。对于芍药甘草汤沉淀物中大分子的研究,不仅为阐明芍药甘草汤的药效物质基础提供新的思路和方法,也为解析传统汤剂起效的科学性提供了参考。 展开更多
关键词 芍药甘草汤 沉淀物 蛋白质 多糖 镇痛
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两种不同取血部位制备桂枝汤含药血清对其抗炎作用影响差异的研究
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作者 阎政燊 张立石 +4 位作者 高焕 郭琴 宋剑南 高源 柏冬 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 2024年第5期828-835,共8页
目的基于两种不同取血部位制备桂枝汤含药血清,探讨其抗炎作用差异。方法取雄性SD大鼠按10倍临床剂量给药(桂枝汤汤剂生药1 g/mL),取门静脉血、外周血含药血清,采用快速液相-三重四级杆质谱联用仪(rapid resolution liquid chromatograp... 目的基于两种不同取血部位制备桂枝汤含药血清,探讨其抗炎作用差异。方法取雄性SD大鼠按10倍临床剂量给药(桂枝汤汤剂生药1 g/mL),取门静脉血、外周血含药血清,采用快速液相-三重四级杆质谱联用仪(rapid resolution liquid chromatography-triple quadrupole mass spectrometry,RRLC-QQQ-MS/MS),建立桂枝汤汤剂、含药血清中8种化学成分含量测定方法,并对含量进行测定。取对数生长期小鼠脑微血管内皮细胞(brain-derived endothelial cells.3,bEnd.3)模型,用白细胞介素(interleukin,IL)-1β刺激,建立细胞炎症模型,使用bEnd.3细胞作为正常组。除正常组、模型组外,设置桂枝汤汤剂高、中、低剂量组(分别含5%、2.5%、1.25%桂枝汤汤剂),门静脉含药血清高、中、低剂量组(分别含20%、10%、5%门静脉含药血清)和外周血含药血清高、中、低剂量组(分别含20%、10%、5%外周血含药血清),ELISA法测定细胞外液中的前列腺素(prostaglandin,PG)E_(2)含量。结果含量测定结果显示汤剂中芍药苷、芍药内酯、甘草苷、甘草酸比例相对较高,血清中肉桂酸、6-姜酚含量相对较高,较汤剂中新出现甘草次酸等代谢物。门静脉血清中以上8种化合物含量均高于外周血血清。5%桂枝汤汤剂中甘草酸含量为798.13 ng/mL,20%门静脉含药血清中甘草酸含量为316.22 ng/mL,20%外周血中甘草酸含量为481.17 ng/mL,药物中成分的含量在同一数量级。与模型组比较,将高、中、低剂量桂枝汤汤剂添加到bEnd.3细胞培养体系中,高、中、低剂量桂枝汤组细胞外液中PGE_(2)的水平均明显高于模型组(P<0.05),而门静脉或外周血含药血清组细胞外液中PGE_(2)的水平均明显低于模型组(P<0.05),且门静脉血清的药效作用显著强于相同浓度的外周血血清(P<0.05)。结论桂枝汤汤剂经胃肠道给药后,门静脉含药血清相较外周血含药血清显示出更高的成分含量与抗炎作用。这一发现提示� 展开更多
关键词 桂枝汤 门静脉含药血清 外周血含药血清 含量测定 药效实验
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