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非洲猪瘟的扩散风险点及防控对策 被引量:35
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作者 刘梅芬 刘影 +3 位作者 王翠 赵雪丽 谢彩华 《中国动物检疫》 CAS 2019年第2期47-49,共3页
为有效防控非洲猪瘟疫情,降低非洲猪瘟的扩散风险,本文结合非洲猪瘟流行现状及部分国际已发疫情,对非洲猪瘟扩散风险点进行简要分析。分析认为:养殖环节风险点主要是养殖场(户)生物安全水平低及饲喂餐厨剩余物(泔水);流通环节风险点主... 为有效防控非洲猪瘟疫情,降低非洲猪瘟的扩散风险,本文结合非洲猪瘟流行现状及部分国际已发疫情,对非洲猪瘟扩散风险点进行简要分析。分析认为:养殖环节风险点主要是养殖场(户)生物安全水平低及饲喂餐厨剩余物(泔水);流通环节风险点主要存在于生猪及猪肉产品长距离调运、猪肉及其产品销售;屠宰环节关键风险点是私屠滥宰。因此,应严禁泔水及猪源性蛋白饲料产品饲喂生猪,加强生猪养殖场(户)生物安全措施,完善活畜禽长途调运监管,强化生猪屠宰企业管理等。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 扩散风险点 防控对策
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猪链球菌病研究进展 被引量:21
2
作者 拜廷阳 +3 位作者 吴志明 普志平 盛敏 杨增岐 《动物医学进展》 CSCD 2007年第9期83-87,共5页
猪链球菌(Streptococcus suis)是一种重要的人兽共患病病原体,能够引起猪的疫病,人类感染该菌可导致脑膜炎、败血症,甚至死亡。该菌对养猪业造成严重经济影响,对公共卫生事业构成巨大威胁。由于猪链球菌血清型较多,抗原结构复杂,在临床... 猪链球菌(Streptococcus suis)是一种重要的人兽共患病病原体,能够引起猪的疫病,人类感染该菌可导致脑膜炎、败血症,甚至死亡。该菌对养猪业造成严重经济影响,对公共卫生事业构成巨大威胁。由于猪链球菌血清型较多,抗原结构复杂,在临床上又可呈现不同的症状,如败血症、脑膜脑炎、心内膜炎、肺炎、化脓性淋巴结炎、关节炎等,还常常与其他疾病发生合并感染。近几年来,该病的发病率和死亡率有逐年上升趋势。链球菌的致病性已引起临床工作者和科研人员的广泛关注和重视,国内外许多学者对猪链球菌做了大量的研究工作,已发现的猪链球菌2型的致病因子包括荚膜多糖、溶菌酶释放蛋白、细胞外因子、蛋白质片段和IgG结合蛋白、溶血素等。 展开更多
关键词 猪链球菌 致病因子 人兽共患病
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河南省致病性猪链球菌血清型及耐药性状况调查 被引量:17
3
作者 赵明军 +3 位作者 张志凌 盛敏 方先珍 吴志明 《河南畜牧兽医》 2007年第05S期25-27,共3页
猪链球菌病是由多种不同群、不同血清型的链球菌引起的不同临诊类型的传染病的总称,其病原为猪链球菌,主要引起猪脑膜炎、关节炎、心内膜炎、败血症和突然死亡等。各年龄段的猪都可感染该病,多发生于3~12周龄的猪,尤以断奶仔猪易... 猪链球菌病是由多种不同群、不同血清型的链球菌引起的不同临诊类型的传染病的总称,其病原为猪链球菌,主要引起猪脑膜炎、关节炎、心内膜炎、败血症和突然死亡等。各年龄段的猪都可感染该病,多发生于3~12周龄的猪,尤以断奶仔猪易感染该病。猪链球菌亦可引起人类的感染,导致脑膜炎等严重疾患甚至引起人的死亡,是一种重要的人兽共患病的病原体。 展开更多
关键词 猪链球菌病 血清型 致病性 河南省 性状 耐药 突然死亡 人兽共患病
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采用PCR方法对猪场猪瘟病毒、猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒、猪圆环病毒2型混合感染的诊断研究 被引量:16
4
作者 吴志明 +3 位作者 赵明军 盛敏 赵雪丽 赵德明 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第1期86-89,共4页
采用猪瘟-猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒(CSFV-PRRSV)多重PCR诊断试剂盒和猪圆环病毒2型(PCV-2)PCR诊断试剂盒对来自河南省不同地区的6个规模猪场送检的60份临床疑似病料进行了病原学PCR检测。结果表明:60份样品中CSFV、PRRSV、PCV-2感... 采用猪瘟-猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒(CSFV-PRRSV)多重PCR诊断试剂盒和猪圆环病毒2型(PCV-2)PCR诊断试剂盒对来自河南省不同地区的6个规模猪场送检的60份临床疑似病料进行了病原学PCR检测。结果表明:60份样品中CSFV、PRRSV、PCV-2感染的阳性率分别为38.3%、30%和43.3%;3种病毒共感染样品数目占所有样品的13.3%,CSFV-PCV-2双感染的比例最高,达到31.7%,PRRSV-PCV-2双感染比例为18.3%,而CSFV-PRRSV双感染比例只有15%。自感染猪内脏器官和血清中均能成功检测出病毒。本研究结果表明PCR诊断可作为临床上这3种病的病原学快速、灵敏的诊断方法,并为猪场猪瘟、猪繁殖障碍与呼吸道综合征、猪圆环病毒2型3种病的流行病学和检测方法的研究奠定了一定的基础。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒 猪圆环病毒2型 PCR 检测
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流感病毒基因组结构及其编码蛋白研究进展 被引量:14
5
作者 杜向党 《动物医学进展》 CSCD 2004年第1期32-35,共4页
由流感病毒引起的流感是严重危害人类和畜禽健康的一种传染病。此病的暴发给世界上许多国家和地区造成了巨大的经济损失。对流感病毒基因组结构及其编码蛋白质的研究有助于进一步加强对流感的治疗和预防。流感病毒含 8个负链单股独立的 ... 由流感病毒引起的流感是严重危害人类和畜禽健康的一种传染病。此病的暴发给世界上许多国家和地区造成了巨大的经济损失。对流感病毒基因组结构及其编码蛋白质的研究有助于进一步加强对流感的治疗和预防。流感病毒含 8个负链单股独立的 RNA片段 ,共编码1 0种蛋白。每种蛋白具有不同的结构和功能。文章主要对流感病毒不同基因片段的结构特征及其编码的结构蛋白及非结构蛋白的形态结构、功能。 展开更多
关键词 流感病毒 基因组结构 编码蛋白 人畜共患病 负链单股 形态结构 免疫学特性 分子生物学
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猪附红细胞体病诊断与防控 被引量:17
6
作者 拜廷阳 赵德明 +2 位作者 吴志明 普志平 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第8期106-109,共4页
猪附红细胞体病是由猪附红细胞体引起的一种以黄疸和贫血为主要特征的人畜共患传染病。该病流行范围广泛,对养猪业危害严重。根据其16 S RNA序列,现将猪附红细胞体划为支原体属的单个新种。猪附红细胞体主要通过接触被病原污染的血液、... 猪附红细胞体病是由猪附红细胞体引起的一种以黄疸和贫血为主要特征的人畜共患传染病。该病流行范围广泛,对养猪业危害严重。根据其16 S RNA序列,现将猪附红细胞体划为支原体属的单个新种。猪附红细胞体主要通过接触被病原污染的血液、胎盘感染、蚊虫叮咬等途径传播。猪附红细胞体对干燥敏感,对低温的抵抗力较强;对青霉素类药物不敏感,但对强力霉素敏感。通过引种时做好种猪的选育、在夏秋季节加强畜舍消灭蚊蝇工作、加强饲养管理以增强猪体抵抗力、采用敏感药物进行早期治疗等相关措施可对该病起到积极预防作用。论文主要对猪附红细胞体的病原学、流行病学、临床症状、病理变化、诊断、预防及治疗等进行了综述。 展开更多
关键词 猪附红细胞体 病原学 流行病学 诊断 防控
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2012年河南省猪流行性腹泻病毒分离株S1基因遗传变异分析 被引量:16
7
作者 陈慧娟 吴志明 +7 位作者 赵雪丽 赵明军 周兵强 孔刚锐 志玲 程俊贞 靳利粉 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第3期14-18,共5页
为分析2012年河南省猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传变异情况,本研究设计合成2对扩增s1基因的特异性引物,利用RT—PCR方法,对2012年分离的5株PEDV毒株的S1基因进行扩增、克隆和序列测定,并对其进行遗传进化分析。结果表明,5株PEDVs... 为分析2012年河南省猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传变异情况,本研究设计合成2对扩增s1基因的特异性引物,利用RT—PCR方法,对2012年分离的5株PEDV毒株的S1基因进行扩增、克隆和序列测定,并对其进行遗传进化分析。结果表明,5株PEDVs1基因核苷酸和氨基酸同源性分别为98.3%~99.5%和97.1%~98.9%;与2011年以来国内登录的PEDV流行变异株核苷酸同源性为88.6%~98.0%,氨基酸同源性为85.3%~98.7%;与经典毒株cV777核苷酸同源性为88.7%~89.1%,氨基酸同源性为87.3%~88.4%。5株分离株s1基因均存在相同的插入和缺失,与2011年以来国内登录的流行变异毒株相比没有大的变异,但与参考毒株CV777相比,在163l66bp处有3个核苷酸插入;在l73l74bp之间有9个核苷酸插人;在405—406bp之间有3个核苷酸插入;在463464bp之间有3个核苷酸缺失,这些位点核苷酸的插入和缺失导致了其编码的氨基酸相应改变。s1基因系统进化树分析结果表明,5株分离株与2011年以来国内登录的流行变异毒株均属于基因Ⅲ群,与2011年国内登录的少部分PEDV基因Ⅰ群流行毒株的核苷酸同源性为88.6%~89.3%,氨基酸同源性为85.3%~86.9%,而经典毒株CV777所在分支群属于基因Ⅱ群。本试验结果表明,2011年以来,中国流行的PEDV毒株中同时有基因Ⅲ和Ⅰ群的存在,但以基因Ⅲ群毒株为主,其致病性和抗原性差异仍有待进一步研究。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 S1基因 遗传变异 分析
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鸡α干扰素/白细胞介素2基因的融合表达及活性研究 被引量:16
8
作者 谢彩华 +3 位作者 吴志明 张志凌 刘光辉 刘梅芬 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期594-604,共11页
【目的】研究高效广谱鸡基因工程重组复合抗病毒制剂以对鸡的病毒性疾病进行防治。【方法】采用重叠延伸PCR(splicing by overlap extension-PCR,SOE-PCR)方法通过一基因柔性接头将鸡α干扰素(chicken interferon alpha,ChIFN-α)与鸡... 【目的】研究高效广谱鸡基因工程重组复合抗病毒制剂以对鸡的病毒性疾病进行防治。【方法】采用重叠延伸PCR(splicing by overlap extension-PCR,SOE-PCR)方法通过一基因柔性接头将鸡α干扰素(chicken interferon alpha,ChIFN-α)与鸡白细胞介素2(chicken interleukin-2,ChIL-2)基因构建成ChIFN-α-linker-ChIL-2嵌合基因并克隆入pGEM-T Easy载体,将嵌合基因亚克隆入pQE-30表达载体中进行原核表达。通过尿素变性、低浓度蛋白复性液复性、PBS溶液透析等步骤对表达的重组融合蛋白(rChIFN-α-linker-ChIL-2)进行纯化。采用细胞病变抑制法检测rChIFN-α-linker-ChIL-2蛋白在细胞上抑制水泡性口炎病毒(VSV)和传染性法氏囊病毒(IBDV)增殖活性。采用ChIL-2ELISA试验方法检测rChIFN-α-linker-ChIL-2蛋白与抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应的活性。分别测定rChIFN-α-linker-ChIL-2蛋白在SPF鸡胚上对新城疫病毒(NDV)和禽流感H9N2亚型病毒(AIV H9N2)的抑制活性以测定其在鸡胚内抗病毒活性。分别测定rChIFN-α-linker-ChIL-2蛋白在鸡体内对NDV活疫苗和灭活疫苗的免疫增强作用以测定其在鸡体内的活性。【结果】成功构建并克隆了ChIFN-α-linker-ChIL-2嵌合基因。嵌合基因在大肠杆菌中表达的rChIFN-α-linker-ChIL-2蛋白分子量大小约35.9kD,蛋白经纯化后纯度在96%以上。rChIFN-α-linker-ChIL-2蛋白在CEF细胞上具有明显抗病毒活性,其抗VSV和IBDV活性明显高于单一rChIFN-α的抗病毒活性;rChIFN-α-linker-ChIL-2蛋白可以和抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应。IFN-α活性单位为200IU的rChIFN-α-linker-ChIL-2蛋白在SPF鸡胚内可明显降低NDV和AIV H9N2所引起的鸡胚死亡和胚体出血,并能显著延长鸡胚存活时间,但过高剂量的rChIFN-α-linker-ChIL-2蛋白抑制鸡胚死亡和出血能力有所下降。合适剂量的rChIFN-α-linker-ChIL-2蛋白在鸡体内具有显著的抗病毒活性和免疫增强活性。【结论】rChIFN-α-li 展开更多
关键词 鸡α干扰素 鸡白细胞介素2 嵌合基因 融合表达 活性
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猪传染性胃肠炎与流行性腹泻病毒二重RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量:15
9
作者 安春霞 +4 位作者 刘淑敏 赵雪丽 郭小玲 赵明军 吴志明 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第9期38-42,共5页
为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)与流行性腹泻病毒(PEDV)的快速鉴别诊断方法,本研究根据GenBank已登录的TGEV核蛋白(N)基因和PEDV膜蛋白(M)基因保守区域序列分别设计了1对特异性引物,以TGEV和PEDV混合总RNA为反转录模板,建立了TGEV和PED... 为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)与流行性腹泻病毒(PEDV)的快速鉴别诊断方法,本研究根据GenBank已登录的TGEV核蛋白(N)基因和PEDV膜蛋白(M)基因保守区域序列分别设计了1对特异性引物,以TGEV和PEDV混合总RNA为反转录模板,建立了TGEV和PEDV的二重RT-PCR检测方法,并进行了特异性、敏感性和重复性试验;利用所建立的检测方法对临床疑似样品进行了应用检测,并对检测到的阳性样品进行克隆测序。结果表明,成功建立了TGEV和PEDV二重RT-PCR检测方法,该方法的检测灵敏度最低极限为10TCID50/mL病毒含量,重复性好,特异性强,可特异性地扩增TGEV和PEDV细胞培养物,但对ST细胞和其他7种病原对照扩增不出任何条带;对22份临床疑似TGEV和PEDV感染样品检测结果与测序结果完全一致。本研究成功建立了TGEV与PEDV二重RT-PCR检测方法,可适用于猪传染性胃肠炎和流行性腹泻病的快速鉴别诊断。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎病毒 猪流行性腹泻病毒 二重RT-PCR 检测 建立 应用
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2018年河南省兽医系统实验室检测能力比对结果分析 被引量:15
10
作者 程果 赵美雪 +7 位作者 朱前磊 张利平 宋丹 杨海波 刘敏 方先珍 班付国 《中国动物检疫》 CAS 2019年第5期29-33,共5页
为评价和提高实验室检测能力和水平,建立省市县三级动物疫情监测预警机制和风险评估模型,2018年河南省组织开展了兽医实验室检测能力比对,共有18个省辖市、10个省直管县/市和117个县/区级实验室参加,其检测结果平均正确率分别为97.30%、... 为评价和提高实验室检测能力和水平,建立省市县三级动物疫情监测预警机制和风险评估模型,2018年河南省组织开展了兽医实验室检测能力比对,共有18个省辖市、10个省直管县/市和117个县/区级实验室参加,其检测结果平均正确率分别为97.30%、93.68%、91.97%。结果表明,全省大部分兽医实验室均已具备相应的检测能力,能够为河南省动物疫情风险评估提供技术支撑,但市、县两级实验室检测水平存在一定差距,县级兽医实验室检测诊断能力和水平有待提高。这提示应进一步加大实验室资金投入与实验室建设,增强实验室内外管理水平,提升技术人员业务能力,加强技术支撑,完善检测标准体系等。 展开更多
关键词 兽医实验室 检测能力 比对 风险评估 检测标准
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Mx蛋白研究进展 被引量:9
11
作者 吴文学 +1 位作者 夏春 李新生 《动物医学进展》 CSCD 2004年第6期52-55,共4页
Mx蛋白是干扰素诱导表达的抗病毒蛋白家族中的成员之一。人、哺乳动物、鱼类、家禽体内都有Mx蛋白。Mx蛋白具有GTP酶活性 ,在其肽链氨基端均包含一个氨基酸序列高度保守的的三联GTP结合区域 ,羧基端存在有亮氨酸拉链区域。人和鼠的Mx蛋... Mx蛋白是干扰素诱导表达的抗病毒蛋白家族中的成员之一。人、哺乳动物、鱼类、家禽体内都有Mx蛋白。Mx蛋白具有GTP酶活性 ,在其肽链氨基端均包含一个氨基酸序列高度保守的的三联GTP结合区域 ,羧基端存在有亮氨酸拉链区域。人和鼠的Mx蛋白有抗病毒活性。家禽中鸭的Mx蛋白无抗病毒活性 ;鸡的Mx蛋白的抗病毒活性受 6 31位氨基酸的影响 ,当 6 31位氨基酸为天冬酰胺时有抗病毒活性 ,为丝氨酸时则无抗病毒活性。 展开更多
关键词 MX蛋白 抗病毒蛋白 抗病毒活性 禽类
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猪链球菌9型荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量:12
12
作者 拜廷阳 杨增岐 +3 位作者 吴志明 普志平 赵明军 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2008年第1期7-12,共6页
【目的】建立猪链球菌9型(SS9)的快速诊断和定量分析方法。【方法】根据GenBank已登录的SS9cps9H基因保守部分序列设计合成引物和TaqMan荧光探针,建立了SS9的TaqMan荧光定量PCR检测方法(Taq-Man FQ-PCR),并进行了敏感性、特异性和重复... 【目的】建立猪链球菌9型(SS9)的快速诊断和定量分析方法。【方法】根据GenBank已登录的SS9cps9H基因保守部分序列设计合成引物和TaqMan荧光探针,建立了SS9的TaqMan荧光定量PCR检测方法(Taq-Man FQ-PCR),并进行了敏感性、特异性和重复性试验;利用所建立的检测方法对河南省11例疑似猪链球菌临床样品进行了应用检测,并与常规PCR方法进行了对比。【结果】成功建立了SS9的FQ-PCR检测方法和定量标准曲线,FQ-PCR方法的检测灵敏度可达1.0拷贝/μL,特异性高且重复性良好;利用该方法对11份临床疑似猪链球菌感染组织病料进行的应用检测表明,其中有3份样品为阳性,与常规PCR方法检测的阳性符合率为100%。【结论】成功建立的SS9 FQ-PCR诊断方法,可用于临床SS9型病菌感染的快速诊断及样品中细菌含量的定量分析。 展开更多
关键词 猪链球菌9型 荧光定量PCR TaqMan荧光探针 检测方法
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热辅快速生物发酵分解工艺无害化处理病死猪尸体效果评估 被引量:14
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作者 陈腾飞 吴志明 +4 位作者 刘阳利 谢彩华 王淑娟 李勤楠 《动物医学进展》 北大核心 2015年第5期81-85,共5页
为评估热辅快速生物发酵分解工艺无害化处理病死猪尸体的处理效果,利用病毒分离培养、RT-PCR(PCR)等方法对热辅快速生物发酵分解工艺处理的病死猪尸体样品进行病原检测,通过处理前及处理后病原微生物检出率的对比,对该工艺无害化处理病... 为评估热辅快速生物发酵分解工艺无害化处理病死猪尸体的处理效果,利用病毒分离培养、RT-PCR(PCR)等方法对热辅快速生物发酵分解工艺处理的病死猪尸体样品进行病原检测,通过处理前及处理后病原微生物检出率的对比,对该工艺无害化处理病死猪尸体的效果进行评估。结果显示,除猪瘟病毒外,猪圆环病毒、伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪链球菌等常见病原微生物在处理72h后均能被杀死,说明经热辅快速生物发酵分解工艺无害化处理病死猪尸体基本达到了无害化处理要求。 展开更多
关键词 生物发酵 无害化处理 病死猪尸体 效果 评估
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2012-2014年河南省猪伪狂犬病病毒gE基因和TK基因的遗传变异分析 被引量:13
14
作者 李宁 吴志明 +6 位作者 赵雪丽 王淑娟 马震原 周兵强 刘毅 张珂 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1653-1657,共5页
为了解河南地区猪伪狂犬病病毒(PRV)流行株的遗传变异情况,本研究对2012-2014年14株河南PRV分离株的2个主要毒力基因gE和TK进行扩增、克隆测序和遗传进化分析。结果显示:14株河南分离株的gE基因氨基酸同源性为95.7%~99.8%,与2012年之前... 为了解河南地区猪伪狂犬病病毒(PRV)流行株的遗传变异情况,本研究对2012-2014年14株河南PRV分离株的2个主要毒力基因gE和TK进行扩增、克隆测序和遗传进化分析。结果显示:14株河南分离株的gE基因氨基酸同源性为95.7%~99.8%,与2012年之前国内分离的毒株同源性较低(96.6%~98.9%),并在多个部位存在碱基的插入与替换,与2012年之后中国流行的毒株的同源性较高(除XX1外同源性为98.7%~99.5%);14株TK基因的氨基酸同源性为98.1%~100.0%,与疫苗株Bartha株同源性为98.1%~99.4%,与2012年之后流行株的氨基酸同源性为98.4%~99.7%。进化树分析显示:PRV流行毒株gE基因和TK基因均可分为3个群,与国内分离的大多数毒株同处于基因1群。分析结果表明:14个分离株与ZJ-01株、TJ株亲缘关系较近,与Ea株、Min-A株、LA株次之,与Becker株、Kaplan株和P-Prv株亲缘关系较远。TK基因较为保守,gE基因存在很多点突变,提示可能是当前流行毒株毒力增强从而导致当前疫苗免疫保护力下降的主要原因。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 GE基因 TK基因 遗传变异分析
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2012-2014年河南省猪流行性腹泻病毒M基因和ORF3基因的遗传变异分析 被引量:13
15
作者 周兵强 吴志明 +4 位作者 赵雪丽 赵明军 陈慧娟 李宁 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1236-1243,共8页
为了解河南省猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传变异情况,对2012-2014年河南省不同猪场的150份腹泻样品进行了PEDV检测,并对其中14株PEDV的M基因和ORF3基因进行克隆测序和遗传进化分析。结果显示,这14个流行毒株M基因编码的氨基酸序列的同... 为了解河南省猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传变异情况,对2012-2014年河南省不同猪场的150份腹泻样品进行了PEDV检测,并对其中14株PEDV的M基因和ORF3基因进行克隆测序和遗传进化分析。结果显示,这14个流行毒株M基因编码的氨基酸序列的同源性为96.9%~99.6%,与CV777经典毒株、韩国毒株及2010年以后国内流行的大多数毒株的氨基酸序列的同源性分别为97.4%~99.1%、96.9%~99.6%和97.8%~99.6%。这14个毒株中有2株ORF3基因与CV777疫苗株核苷酸序列的同源性为100%,存在49个核苷酸缺失;其余12株之间氨基酸序列的同源性为98.8%~100%,与CV777经典毒株、CV777疫苗株和韩国毒株氨基酸序列的同源性分别为95.1%~96.0%、90.2%~91.1%和97.3%~99.1%,与2010年以后国内流行的大多数毒株氨基酸序列的同源性为97.3%~99.6%。进化树分析显示,M基因可分为4个群,河南PEDV流行毒株主要以基因3群为主,其中CHHeN ZZ-2012毒株属于基因2群;ORF3基因分为3个群,CHHeN DF2-2012毒株和CHHeN ZZ-2012毒株分布于基因2群,其余12个毒株属于基因3群。结果表明,当前河南省主要流行的PEDV毒株M基因和ORF3基因与2010年以后国内流行的大多数毒株的同源性较高,与韩国毒株的亲缘关系较近;与经典毒株和疫苗株相比,其M基因和ORF3基因发生了变异,且临床出现或与疫苗株相似或与变异株相似的流行毒株。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 M基因 ORF3基因 遗传变异分析
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鸡白细胞介素-6的原核表达及其对疫苗免疫增强效果的研究 被引量:10
16
作者 谢彩华 +4 位作者 崔保安 赵雪丽 吴志明 张志凌 张健 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期557-561,共5页
本研究采用PCR技术,扩增、克隆了鸡白细胞介素-6(ChIL-6)成熟肽基因并进行原核表达,对表达的鸡白细胞介素-6组蛋白(rChIL-6)通过尿素变性、复性液复性、PBS溶液透析等步骤进行纯化,经测定rChIL-6的促小鼠脾脏淋巴母细胞的增殖能力来评... 本研究采用PCR技术,扩增、克隆了鸡白细胞介素-6(ChIL-6)成熟肽基因并进行原核表达,对表达的鸡白细胞介素-6组蛋白(rChIL-6)通过尿素变性、复性液复性、PBS溶液透析等步骤进行纯化,经测定rChIL-6的促小鼠脾脏淋巴母细胞的增殖能力来评估重组蛋白的生物学活性;用4个不同浓度的rChIL-6在不同部位与NDV活疫苗、AIVH5N1灭活疫苗同时肌肉注射来评价其免疫增强作用。研究结果表明,表达rChIL-6为25ku左右,经纯化后的蛋白纯度在95%以上;100pg/mLrChIL-6注射组具有较高的促小鼠脾淋巴母细胞增殖活性;不同浓度的rChIL-6注射组对NDV和AIVH5N1疫苗都具有较好的免疫增强作用,但对其免疫抗体产生时间及抗体滴度峰值出现和维持时间均没有明显的影响,其中0.03μg/mLrChIL-6浓度注射组的对鸡疫苗的免疫增强作用最明显,过高或过低浓度的rChIL-6对疫苗免疫增强作用不显著。这些研究为新型免疫增强佐剂开发以及鸡免疫失败性疫病的预防和治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 鸡白细胞介素-6 基因克隆 蛋白表达 免疫活性 免疫增强
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猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用 被引量:13
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作者 王淑娟 刘梅芬 +6 位作者 班付国 赵雪丽 马震原 王华俊 王翠 赵明军 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第7期2112-2118,共7页
为建立一种快速、敏感、特异的猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)实时荧光定量PCR检测方法,本研究根据GenBank中CSFV E2基因保守区域序列,设计了一对特异性引物和一条特异性探针,以CSFV总RNA为反转录模板,经优化反应条件,建立... 为建立一种快速、敏感、特异的猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)实时荧光定量PCR检测方法,本研究根据GenBank中CSFV E2基因保守区域序列,设计了一对特异性引物和一条特异性探针,以CSFV总RNA为反转录模板,经优化反应条件,建立CSFV实时荧光定量PCR检测方法,并对其进行了特异性、敏感性、重复性试验;利用所建立的方法对35份临床疑似CSFV感染样品进行了检测。结果表明,本研究建立的CSFV实时荧光定量PCR检测方法在101~106拷贝/μL范围内有很好的线性关系,相关系数为0.999;CSFV细胞培养物出现阳性扩增信号,但ST正常细胞对照和其他8种病原对照未出现扩增,特异性良好;该方法重复性好、敏感性高,最低检测模板浓度为10拷贝/μL,并且CSFV的最低检测限为1TCID50/mL;自35份疑似CSFV感染样品中检出19份阳性样品,与本课题组建立的CSFV Nested RT-PCR检测结果和克隆测序结果一致。本研究成功建立了CSFV实时荧光定量PCR检测方法,可用于CSFV的快速检测。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 实时荧光定量PCR 特异性 重复性 敏感性 应用
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2019年河南省小反刍兽疫专项监测评估 被引量:13
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作者 刘敏 方先珍 +1 位作者 付盼盼 《中国动物检疫》 CAS 2019年第11期6-10,共5页
为有效防范风险,扎实做好河南省小反刍兽疫监测工作,全面掌握小反刍兽疫感染状况和流行趋势,落实国家小反刍兽疫消灭计划,按照《河南省2019年动物疫病监测与流行病学调查计划》要求,对全省种羊场和部分商品羊场开展了小反刍兽疫专项监测... 为有效防范风险,扎实做好河南省小反刍兽疫监测工作,全面掌握小反刍兽疫感染状况和流行趋势,落实国家小反刍兽疫消灭计划,按照《河南省2019年动物疫病监测与流行病学调查计划》要求,对全省种羊场和部分商品羊场开展了小反刍兽疫专项监测,分别用竞争ELISA、荧光RT-PCR试验方法,检测小反刍兽疫免疫抗体与病毒核酸。结果显示:河南省小反刍兽疫平均免疫抗体合格率为80.58%,其中种畜场(82.48%)高于商品场(79.74%);3种不同企业生产疫苗的免疫合格率均在73%以上,不同地区的免疫抗体合格率在55.47%~100%之间,免疫2次及以上的免疫抗体合格率(86.36%)高于只免疫1次的(76.50%);未检出小反刍兽疫病毒核酸阳性样品。结果表明,河南省小反刍兽疫整体防控效果较好,未发现病毒感染,免疫抗体水平均在国家规定的最低标准(70%)以上,说明近期省内发生小反刍兽疫的风险较低,但部分地区免疫效果较差,存在一定的发生风险。因此,河南省仍需继续做好小反刍兽疫的强制免疫、监测和流行病学调查工作,科学评估免疫效果和疫情风险,同时加强羊只的引种检疫和流通监管,提高基层兽医工作者和养殖户的防控意识,从而最终达到消灭小反刍兽疫的目标。 展开更多
关键词 小反刍兽疫 监测 评估 免疫抗体 病毒核酸
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禽流感血清抗体与卵黄抗体消长规律比较研究 被引量:13
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作者 席文平 李吉轩 +1 位作者 岳建新 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第1期103-105,共3页
应用禽流感病毒二价(H5、H9)油乳剂灭活疫苗免疫160日龄非免疫蛋鸡,免疫接种后分别于第0、71、4、21、283、5 d采集相应的鸡蛋和血清,采用血凝抑制(HI)试验监测血清及卵黄中H5、H9抗体的消长规律,结果表明:H5、H9血清抗体于免疫后7 d时... 应用禽流感病毒二价(H5、H9)油乳剂灭活疫苗免疫160日龄非免疫蛋鸡,免疫接种后分别于第0、71、4、21、283、5 d采集相应的鸡蛋和血清,采用血凝抑制(HI)试验监测血清及卵黄中H5、H9抗体的消长规律,结果表明:H5、H9血清抗体于免疫后7 d时开始产生,14 d时到中等水平,21 d时达到最高值,一直维持到35 d之后;而H5、H9卵黄抗体与血清抗体水平相比相对滞后7 d左右;卵黄抗体与血清抗体在28 d时均达到高峰值并一直维持到35 d之后,28 d后血清和卵黄抗体达到相同水平。本研究为临床上以禽流感卵黄抗体检测替代血清抗体检测及以后禽流感高免卵黄抗体的研究提供了依据和数据。 展开更多
关键词 禽流感 血清抗体 卵黄抗体 消长 检测
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禽流感病毒T细胞表位与体外重建鸡MHCⅠ类分子结合试验 被引量:13
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作者 李新生 陈红英 +3 位作者 高凤山 方勤美 夏春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1335-1340,共6页
为探讨体外重建的MHCⅠ复合体BF2-linker-β2 m鉴定病毒抗原肽系统能否在体外结合抗原多肽,以及不同类的MHCⅠ类分子结合相同和不同抗原多肽表位能力的差异,本研究采用人工合成的禽流感病毒的3条多肽,猪口蹄疫病毒的2条多肽,以及来源于... 为探讨体外重建的MHCⅠ复合体BF2-linker-β2 m鉴定病毒抗原肽系统能否在体外结合抗原多肽,以及不同类的MHCⅠ类分子结合相同和不同抗原多肽表位能力的差异,本研究采用人工合成的禽流感病毒的3条多肽,猪口蹄疫病毒的2条多肽,以及来源于草鱼呼肠孤病毒的2条多肽分别与4类体外重建的串联鸡MHCⅠ类分子复合体BF2-linker-β2 m进行了体外结合试验。BF2-linker-β2 m与不同的病毒抗原九肽按照1∶10的摩尔比进行混合,作用后取反应混合物离心除去未与MHCⅠ类分子结合的抗原多肽;然后取BF2-linker-β2 m分别与抗原多肽形成的复合体,利用酸洗法将结合的多肽自MHCⅠ类分子的抗原多肽结合槽中洗脱,洗脱后的蛋白和多肽混合物离心收集洗脱的多肽溶液,随后利用C18柱对洗脱的多肽进行去盐、脱酸处理;将多肽样品冻干,用基质溶解后直接点样进行一级质谱(MS)和二级质谱(MSMS)测定,结果表明,3类体外重建的BF2-linker-β2 m可与禽流感病毒多肽KILTIYSTV和LLLAIVSLV结合,而不与禽流感病毒多肽TIGECPKYV以及猪口蹄疫病毒和草鱼呼肠孤病毒的4条多肽结合。证实由于MHCⅠ类分子的多态性导致复等位基因的MHCⅠ类分子结合病毒抗原表位的能力存在差异;病毒的T细胞抗原表位是MHCⅠ类分子限制性的;KILTIYSTV和LLLAIVSLV是禽流感病毒的候选表位。 展开更多
关键词 MHC Ⅰ类分子 T细胞表位 质谱
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