CD14抗原的结构与功能 被引量：6

1

作者 闫玉河 张改平 张云汉 《国外医学（免疫学分册）》 1999年第4期228-231,共4页

ＣＤ１４ 主要存在于巨噬细胞、单核细胞和中性白细胞表面，它是一种分子量为５３－５５ＫＤ的糖蛋白，以糖基磷脂酰肌醇（ＧＰＩ）的形式锚在细胞膜上，为脂多糖／脂多糖结合蛋白复合物的受体。ＣＤ１４ 与配体结合后可触发机体的一系... ＣＤ１４ 主要存在于巨噬细胞、单核细胞和中性白细胞表面，它是一种分子量为５３－５５ＫＤ的糖蛋白，以糖基磷脂酰肌醇（ＧＰＩ）的形式锚在细胞膜上，为脂多糖／脂多糖结合蛋白复合物的受体。ＣＤ１４ 与配体结合后可触发机体的一系列免疫应答和免疫病理过程，在由革兰氏阴性菌引起的疾病的发生、发展和转归方面起着重要的作用。 展开更多

关键词 CD14 结构 功能 抗原

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鸽新城疫病毒分离株F0裂解位点的基因克隆及序列分析 被引量：8

2

作者 陈春花 闫玉河 +1 位作者 卢景良 童光志 《中国畜禽传染病》 CSCD 1997年第4期5-8,共4页

为探索鸽新城疫的流行特点，在分子水平上阐明鸽新城疫病毒分离株与鸡新城疫病毒株之间的相互关系，我们用ＲＴ－ＰＣＲ技术获得了分离株Ｆ０裂解位点附近３００ｂｐ的基因片段，将其克隆到ｐＵＣ１９载体上得到一重组克隆ｐＮＤＶ２１... 为探索鸽新城疫的流行特点，在分子水平上阐明鸽新城疫病毒分离株与鸡新城疫病毒株之间的相互关系，我们用ＲＴ－ＰＣＲ技术获得了分离株Ｆ０裂解位点附近３００ｂｐ的基因片段，将其克隆到ｐＵＣ１９载体上得到一重组克隆ｐＮＤＶ２１，序列分析表明，插入片段与鸡新城疫强毒Ｔｅｘａｓ相应区域的同源性为８７．７％；而与弱毒株Ｄ２６／７６及ＬａＳｏｔａ的同源性分别是９１．７％和９８％。其Ｆ０裂解点的氨基酸顺序为Ｇｌｙ－Ａｒｇ－Ｇｌｎ－Ｇｌｙ－Ａｒｇ。 展开更多

关键词 鸽 新城疫 病毒株 F10 裂解位点 基因克隆

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双价工程菌K_(88)K_(99)表达蛋白提取方法的探讨及抗原性分析 被引量：4

3

作者 李学伍 闫玉河 +2 位作者 张改平 杨艳艳 郭军庆 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第2期140-142,共3页

本研究应用酸脱毛法 ,将供试工程菌培养物进行脱毛、提取制备表达蛋白 ,并对酸脱毛法的最适pH值、最佳温度、最佳时间进行了探讨 ,SDS_PAGE分析结果证明 ,酸脱毛法脱毛pH值为 2、脱毛温度为 6 0℃、脱毛时间为 30分钟时 ,表达蛋白分离... 本研究应用酸脱毛法 ,将供试工程菌培养物进行脱毛、提取制备表达蛋白 ,并对酸脱毛法的最适pH值、最佳温度、最佳时间进行了探讨 ,SDS_PAGE分析结果证明 ,酸脱毛法脱毛pH值为 2、脱毛温度为 6 0℃、脱毛时间为 30分钟时 ,表达蛋白分离提取的效果最佳。对提取蛋白进行琼扩 ,SDS_PAGE、Western_blot分析 ,结果表明所提取蛋白具有较高的抗原活性 ,并能被K88K99单克隆抗体所识别。 展开更多

关键词 K88K99纤毛蛋白 酸脱毛法 抗原性 ETEC 猪

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双抗体夹心-ELISA用于旋毛虫活动性感染的诊断及疗效考核 被引量：3

4

作者 张月清 温艳 +3 位作者 吴赵永 黄敏君 马全智 闫玉河 《实用寄生虫病杂志》 CAS 2000年第3期97-101,共5页

目的检测宿主血清中旋毛虫循环抗原 ( CAg)以诊断本病和考核药物疗效。方法双抗体夹心 -ELISA法。结果 94只实验感染旋毛虫小鼠 ,受染 3d后 ,即有 7%的小鼠显示阳性反应 ,受染 30 d,无论受染幼虫数目多寡 ( 50、1 50及 30 0条幼虫 /只 ... 目的检测宿主血清中旋毛虫循环抗原 ( CAg)以诊断本病和考核药物疗效。方法双抗体夹心 -ELISA法。结果 94只实验感染旋毛虫小鼠 ,受染 3d后 ,即有 7%的小鼠显示阳性反应 ,受染 30 d,无论受染幼虫数目多寡 ( 50、1 50及 30 0条幼虫 /只 ) ,全部受染鼠 ( 1 0 0 % )均显示阳性反应。给予丙硫咪唑治疗后的第 1周 ,CAg的阳性率仍为 1 0 0 % ,但在治疗后第 2、3及 4周 ,则分别降为 60 %、2 0 %及 1 0 %。检测 61头感染旋毛虫猪血清中 CAg,4 0头 ( 65.6%± 6.1 % )呈阳性反应。 1 0 0头正常猪均为阴性 ,30头感染囊尾蚴和 30头感染弓形虫的猪 ,仅 1头感染弓形虫的猪出现轻度交叉反应。检测 36例旋毛虫病人血清中 CAg,2 6例 ( 72 .2 % )呈阳性反应。 50例正常人皆为阴性。 1 4 2例其他 9种寄生虫病人 ,仅 1例囊尾蚴病人出现轻度交叉反应。结论旋毛虫 CAg的检测具有早期诊断和考核药物疗效的价值。 展开更多

关键词 旋毛虫 循环抗原 ELISA 诊断 旋毛虫病 治疗

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牛海绵状脑病的研究现状及进展 被引量：4

5

作者 闫玉河 卢景良 陈春花 《中国动物检疫》 CAS 1996年第3期31-34,共4页

关键词 牛病 海绵状脑病 流行病学 病原因子

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旋毛虫病检测技术及ES抗原的研究进展 被引量：1

6

作者 袁慧君 闫玉河 《河南职业技术师范学院学报》 1999年第2期36-39,共4页

论述了旋毛虫病检测技术和ＥＳ抗原研究现状及其存在问题，利用旋毛虫肌幼虫的排泄分泌抗原（ＥＳ抗原）建立酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）可成功地用于旋毛虫病检测。

关键词 旋毛虫病 检测技术 ES抗原 研究进展 猪

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K88和K99双价基因工程菌C株与E株表达效果的比较 被引量：1

7

作者 李学伍 陈辉 +6 位作者 杨艳艳 闫玉河 郭成留 邓瑞广 郭军庆 李青梅 张改平 《中国畜禽传染病》 CSCD 1998年第3期149-151,共3页

应用ＬＢ培养基３７℃、１５０ｒ／ｍｉｎ振荡培养１７小时，室温４０００ｒ／ｍｉｎ，离心３０分钟，收集沉淀菌体，用ＰＢＳ离心洗涤一次，沉淀物重悬于适量的ＰＢＳ中。三等分菌体悬浮液分别用超声波、冻融、热休克等方法处理后，室... 应用ＬＢ培养基３７℃、１５０ｒ／ｍｉｎ振荡培养１７小时，室温４０００ｒ／ｍｉｎ，离心３０分钟，收集沉淀菌体，用ＰＢＳ离心洗涤一次，沉淀物重悬于适量的ＰＢＳ中。三等分菌体悬浮液分别用超声波、冻融、热休克等方法处理后，室温８０００ｒ／ｍｉｎ离心３０分钟，取上清液加入饱和硫酸铵４℃过夜，沉淀蛋白经透析，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０过柱纯化。应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、凝胶扫描测定Ｋ８８、Ｋ９９蛋白的分子量及浓度，双向免疫扩散、ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ试验测定其抗原性。结果表明，热休克法分离纤毛抗原是最好的方法，从Ｃ株Ｅ株分离得到的纤毛抗原，在分子量大小及对单抗亲和反应能力方面没有明显的差异。 展开更多

关键词 纤毛蛋白 K88 K99 表达 特性 基因工程

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K_(88).K_(99)工程菌不同佐剂苗对鸡免疫效果的比较 被引量：1

8

作者 李学伍 杨艳艳 +7 位作者 郭成留 闫玉河 邓瑞广 张改平 郭军庆 李青梅 陈直 袁慧君 《河南农业科学》 CSCD 1997年第11期35-37,共3页

采用白油佐剂、弗氏不完全佐剂、氢氧化铝佐剂，分别同抗原（Ｋ８８Ｋ９９工程菌）混合、乳化，制成不同的佐剂苗。以ＰＢＳ（ｐＨ７．２、０．０１ｍｏｌ／ｌ）悬浮的细菌培养物为对照，分别对产蛋鸡进行免疫，用琼扩及ＥＬＩＳＡ检... 采用白油佐剂、弗氏不完全佐剂、氢氧化铝佐剂，分别同抗原（Ｋ８８Ｋ９９工程菌）混合、乳化，制成不同的佐剂苗。以ＰＢＳ（ｐＨ７．２、０．０１ｍｏｌ／ｌ）悬浮的细菌培养物为对照，分别对产蛋鸡进行免疫，用琼扩及ＥＬＩＳＡ检测卵黄抗体。结果表明，白油苗能够诱导产生高效价（１∶１２８）卵黄抗体，而且稳定时间在３０天内。 展开更多

关键词 佐剂 抗体 工程菌 鸡 免疫效果

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牛IgG Fc受体Ⅲ的分子克隆和序列分析 被引量：2

9

作者 闫玉河 张改平 +1 位作者 李学伍 李青梅 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期20-23,共4页

目的研究牛IgGFc受体的结构与功能的关系。方法在构建了牛肺巨噬细胞cDNA文库的基础上,用PCR方法获得了编码牛IgGFc受体(boFcγR)的全长编码基因。结果通过分子克隆和序列分析,发现其编码基因为507bp,共编码168个氨基酸,其中含有信号肽... 目的研究牛IgGFc受体的结构与功能的关系。方法在构建了牛肺巨噬细胞cDNA文库的基础上,用PCR方法获得了编码牛IgGFc受体(boFcγR)的全长编码基因。结果通过分子克隆和序列分析,发现其编码基因为507bp,共编码168个氨基酸,其中含有信号肽序列、穿膜区和胞内结构域以及3个N-连接糖基化位点。与COLLINS等克隆的boFcγR相比,在它的胞外区中缺失了82个氨基酸,仅有一个胞外结构域。结论我们所克隆的cDNA片段属于编码牛的FcγRA(CD16-) 展开更多

关键词 牛 分子克隆 序列分析 免疫球蛋白 Fc受体Ⅲ

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用RT-PCR方法快速诊断禽流感 被引量：2

10

作者 闫玉河 陈春花 +1 位作者 邓瑞广 李学伍 《河南农业科学》 CSCD 2000年第11期30-31,共2页

禽流感是危害养禽业最重要的传染病之一 ,但目前尚无快速特异的检测方法。研究采用RT -PCR技术建立了禽流感的诊断方法。实践表明 ,该法快速特异 。

关键词 RT-PCR 快速诊断 禽流感

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用标记磁微粒技术克隆牛CD14基因

11

作者 闫玉河 张改平 +1 位作者 李学伍 李青梅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第4期241-245,共5页

为获得牛ＣＤ１４ 的全长编码基因，以探讨牛ＣＤ１４ 基因结构与功能的关系，进一步阐明其作用机理，我们用抗牛ＣＤ１４ 的单克隆抗体（ｍＡｂ）ＣＣＧ３３ 标记的磁微粒作为探针，从转染有牛肺泡巨噬细胞ｃＤＮＡ文库的ＣＯＳ７... 为获得牛ＣＤ１４ 的全长编码基因，以探讨牛ＣＤ１４ 基因结构与功能的关系，进一步阐明其作用机理，我们用抗牛ＣＤ１４ 的单克隆抗体（ｍＡｂ）ＣＣＧ３３ 标记的磁微粒作为探针，从转染有牛肺泡巨噬细胞ｃＤＮＡ文库的ＣＯＳ７细胞中进行筛选。并对获得的牛ＣＤ１４ ｃＤＮＡ进行了克隆和序列分析。结果表明，牛ＣＤ１４ 基因全长为１１２２ ｂｐ，共编码３７３ 个氨基酸，其中含有信号肽序列和３ 个可识别的Ｎ连接糖基化位点，但缺少穿膜结构域及细胞内区。证实牛ＣＤ１４ 以糖基磷脂酰肌醇（ＧＰＩ） 锚定在靶细胞膜上；其氨基酸序列与人和小鼠ＣＤ１４ 的同源性分别为７３－５ ％ 和６１－４ ％ ，三者共有的保守序列约为５５％ 。 展开更多

关键词 牛 CD14 磁微粒 分子克隆 序列分析

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旋毛虫病检测技术及检测抗原研究的新进展 被引量：1

12

作者 闫玉河 卢景良 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 1996年第6期41-44,共4页

介绍了免疫学检测技术、分子杂交和 PCR 技术在旋毛虫病诊断上的应用研究,详尽阐述了国外用 DNA 重组技术研制旋毛虫基因重组抗原的最新进展。

关键词 旋毛虫病 检测 抗原 新疆

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斑点酶免疫试验检测牛体内囊尾蚴循环抗原的方法 被引量：1

13

作者 闫玉河 陈春花 《国外兽医学（畜禽疾病）》 CSCD 1996年第1期38-39,共2页

斑点酶免疫试验检测牛体内囊尾蚴循环抗原的方法闫玉河，陈春花摘译于三科校本研究是在Ｂｒａｎｄｔ等（１９９２）试验的基础上，用单抗建立的一种更加简便易行的ｄ。ｔ—ＥＬＩＳＡ方法。所用的单抗（２Ｈ和１２ＧＳ）是Ｂｒａｎｄｔ... 斑点酶免疫试验检测牛体内囊尾蚴循环抗原的方法闫玉河，陈春花摘译于三科校本研究是在Ｂｒａｎｄｔ等（１９９２）试验的基础上，用单抗建立的一种更加简便易行的ｄ。ｔ—ＥＬＩＳＡ方法。所用的单抗（２Ｈ和１２ＧＳ）是Ｂｒａｎｄｔ用牛囊尾蚴的排泄──分泌抗原经浓缩... 展开更多

关键词 斑点酶免试验 牛病 囊尾蚴 抗原 检测

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非鼠源性单克隆抗体技术及其在兽医学上的应用

14

作者 闫玉河 陈春华 《畜牧与兽医》 北大核心 1992年第2期86-88,85,共4页

自从1975年kohler和Milstcin创立淋巴细胞杂交瘤技术以来,单克隆抗体(mAb)已在生物学和医学领域显示了极其广阔的应用前景.但是,由于鼠源性mAb存在着难以识别动物种类之间的等位差异性和用于动物(包括人)

关键词 非鼠源性 单克隆抗体 兽医 应用

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旋毛虫单克隆抗体特性鉴定

15

作者 王克领 李春华 +3 位作者 马增全 闫玉河 袁文甫 许威光 《华北农学报》 CSCD 北大核心 1994年第S1期96-99,共4页

用已建立的抗旋毛虫单克隆抗体杂交瘤细胞株(D_4,E_2)所分泌的单克隆抗体(McAb),经纯化后电泳分析,其重链分子量为55KD,轻链分子量为29KD,符合IgG抗体特点。两株单克隆抗体与旋毛虫阳性猪血清所针对的旋毛虫抗原决定簇相同,都不与猪的... 用已建立的抗旋毛虫单克隆抗体杂交瘤细胞株(D_4,E_2)所分泌的单克隆抗体(McAb),经纯化后电泳分析,其重链分子量为55KD,轻链分子量为29KD,符合IgG抗体特点。两株单克隆抗体与旋毛虫阳性猪血清所针对的旋毛虫抗原决定簇相同,都不与猪的其它寄生虫发生交叉反应,与抗原的相对亲和力E_2>D_4,单克隆抗体亲和层析纯化抗原的分子量为49KD,经免疫斑点染色证明为糖蛋白。 展开更多

关键词 旋毛虫 杂交瘤细胞株 单克隆抗体 亲和纯化抗原

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传染性海绵状脑炎病原因子的研究进展

16

作者 闫玉河 卢景良 《国外医学（病毒学分册）》 1996年第1期12-15,共4页

传染性海绵状脑炎病原因子是一类具有侵染性的蛋白颗粒，它对紫外线照射、电离辐射和加热处理等有极强的抵抗力，并能抗核酸酶的水解作用，但对蛋白酶较敏感。目前有四种有关该病原因子的结构理论，即：非常规病毒假说、朊病毒假说、蛋... 传染性海绵状脑炎病原因子是一类具有侵染性的蛋白颗粒，它对紫外线照射、电离辐射和加热处理等有极强的抵抗力，并能抗核酸酶的水解作用，但对蛋白酶较敏感。目前有四种有关该病原因子的结构理论，即：非常规病毒假说、朊病毒假说、蛋白侵染因子假说和统一学说。研究表明，ＰｒＰ在海绵状脑炎的发生及发展过程中起着关键作用。对ＰｒＰ的深入研究将为传染性海绵状脑炎的检测和免疫预防奠定基础。 展开更多

关键词 脑炎 海棉状脑炎 传染性 病原因子

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鸽新城疫病毒分离株F0裂解位点的基因克隆及序列分析

17

作者 陈春花 闫玉河 +1 位作者 卢景良 童光志 《郑州牧专学报》 1998年第1期1-3,11,共4页

为探索鸽新城疫的流行特点,在分子水平上阐明鸽新城疫病毒分离株与鸡新城疫毒株之间的相互关系,我们用RT-PCR技术获得了分离株FO裂解位点附近300bp的基因片段,将其克隆到pUC19载体上得到一重组克隆pNDV21,序列分析表明,插入片段与鸡新... 为探索鸽新城疫的流行特点,在分子水平上阐明鸽新城疫病毒分离株与鸡新城疫毒株之间的相互关系,我们用RT-PCR技术获得了分离株FO裂解位点附近300bp的基因片段,将其克隆到pUC19载体上得到一重组克隆pNDV21,序列分析表明,插入片段与鸡新城疫强毒Texas相应区域的同源性为87.7%;而与弱毒株D26/76及La Sota的同源性分别是91.7%和98%.其FO裂解点的氨基酸顺序为Giy Arg-Gln-Gly-Arg.证明该分离株属于新城疫弱毒. 展开更多

关键词 鸽 新城疫 病毒分离 基因克隆 序列分析 传染病

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密西西比奶牛对牛免疫缺陷病毒和牛白血病病毒的双重感染

18

作者 Co.,KSC 闫玉河 《国外兽医学（畜禽传染病）》 1996年第2期10-11,共2页

关键词 牛病 乳牛 免疫缺陷病毒 白血病病毒

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致弱的门哥病毒——研制活重组疫苗的新载体

19

作者 Ralf Altmeyer 闫玉河 《生物技术通报》 CAS CSCD 1996年第5期4-5,共2页

门哥病毒(Mengo Virus)的一些与众不同的特点使其成为用于疫苗载体研究的良好候选株,该病毒具有广泛的宿主范围,其中包括啮齿类动物、猪、猴,很可能还有人类,并能特异地在感染细胞的胞浆中表达自己的基因。将其基因组5′端的非编码区部... 门哥病毒(Mengo Virus)的一些与众不同的特点使其成为用于疫苗载体研究的良好候选株,该病毒具有广泛的宿主范围,其中包括啮齿类动物、猪、猴,很可能还有人类,并能特异地在感染细胞的胞浆中表达自己的基因。将其基因组5′端的非编码区部分缺失后,致弱病株可以稳定地复制。本文报道了一种致弱的门哥病毒重组体(vLCMG4),它含有编码淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)核蛋白的一种免疫显性细胞毒T—淋巴细胞的表位基因。经对BALB/c鼠小剂量一次性免疫后,以vLCMG4可使小鼠对致死量的LCMV的攻击产生保护性免疫,并可诱导出一种LCMV特异的CD8^+细胞毒T淋巴细胞应答。表明重组门哥病毒疫苗是通过诱导细胞免疫应答而发挥其抗传染病的保护作用的。 展开更多

关键词 重组疫苗 保护性免疫 核蛋白 致弱 CTL活性 病毒疫苗 淋巴细胞性 疫苗载体 细胞毒活性 BALB/c小鼠

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旋毛虫肌幼虫ES抗原基因TSPGⅡ在真核细胞中的表达 被引量：2

20

作者 袁慧君 闫玉河 +1 位作者 张改平 李建强 《西南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 1999年第3期266-269,共4页

用限制性内切酶ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎｄⅢ从克隆载体ｐＵＴＳⅡ中切出一个０．９８８ｋｂＴＳＰＧⅡ基因，经ＥｃｏＲⅠ和ＢｓｔＸⅠ酶切鉴定；表达载体用相同的酶切，经琼脂糖凝胶电泳，分别回收ＴＳＰＧⅡ基因和ｐＳＶ·ＳＰＯＲＴ... 用限制性内切酶ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎｄⅢ从克隆载体ｐＵＴＳⅡ中切出一个０．９８８ｋｂＴＳＰＧⅡ基因，经ＥｃｏＲⅠ和ＢｓｔＸⅠ酶切鉴定；表达载体用相同的酶切，经琼脂糖凝胶电泳，分别回收ＴＳＰＧⅡ基因和ｐＳＶ·ＳＰＯＲＴⅠ表达载体，用Ｔ４ＤＮＡ连接酶定向连接，转化大肠杆菌感受态细胞，挑取重组子，经ＥｃｏＲⅠ，ＢｓｔＸⅠ和ＨｉｎｄⅢ酶切鉴定，构建了重组表达质粒ｐＳＶ·ＴＳⅡ。利用脂质体作载体，将重组表达质粒转染ｃｏｓ７细胞，４８～６０ｈ后用酶联免疫吸附试验检测，显示表达产物能与猪旋毛虫病的阳性血清反应。 展开更多

关键词 旋毛虫 EC抗原 基因表达 TSPGⅡ 真核表达

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