重复经颅磁刺激在脑卒中康复治疗中的研究进展 被引量：38

1

作者 王奎 邹礼梁 +2 位作者 陈健尔 杜宇鹏 钦博 《中国康复》 2015年第3期177-180,共4页

据国家卫生计生委2015年最新统计数据显示,我国脑卒中已成为致死率最高的疾病,每年新发脑卒中患者多达250万。脑卒中的致残率和复发率分别为80%和41%[1]。用于治疗脑卒中后患者的康复疗法较多,主要有强制性运动疗法、运动再学习疗法、... 据国家卫生计生委2015年最新统计数据显示,我国脑卒中已成为致死率最高的疾病,每年新发脑卒中患者多达250万。脑卒中的致残率和复发率分别为80%和41%[1]。用于治疗脑卒中后患者的康复疗法较多,主要有强制性运动疗法、运动再学习疗法、运动想象疗法等,但疗效均不十分理想[2]。 展开更多

关键词 重复经颅磁刺激 脑卒中 功能障碍 康复治疗

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牛IFN-γ原核表达、单克隆抗体制备及其ELISA检测方法的建立 被引量：18

2

作者 李川 谭亚娣 +7 位作者 陈颖钰 胡巧云 马艳 张桂荣 钦博 晁彦杰 陈焕春 郭爱珍 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期40-45,共6页

实验旨在建立牛重组IFN-γ（BovIFN-γ）的ELISA检测技术，为牛传染病的免疫学诊断提供新方法。PHA刺激体外培养的奶牛外周血白细胞，从培养细胞中提取总RNA，经过RT-PCR扩增出BovIFN-γ基因cDNA，进一步克隆至pET28a，转化大肠杆菌，经... 实验旨在建立牛重组IFN-γ（BovIFN-γ）的ELISA检测技术，为牛传染病的免疫学诊断提供新方法。PHA刺激体外培养的奶牛外周血白细胞，从培养细胞中提取总RNA，经过RT-PCR扩增出BovIFN-γ基因cDNA，进一步克隆至pET28a，转化大肠杆菌，经IPTG诱导，表达出预期大小（18kD左右）组氨酸标记蛋白，经鉴定为BovIFN-γ；以纯化的重组BovIFN-γ为免疫原，应用淋巴细胞杂交瘤技术，获得4株能稳定分泌抗BovIFN-γ单克隆抗体的细胞株，分别命名为A7、A10、G6与G10。免疫球蛋白亚类鉴定证明杂交瘤细胞所分泌的抗体均为IgG1，腹水效价在1：2^10×100～1：2^11×100之间。Western-blot分析显示，4株单抗均能特异性结合重组BovIFN-γ。ELISA试验表明，4株单抗只与融合蛋白BovIFN-γ反应，而不与非相关性蛋白Ag85B、ESAT-6-CFP-10、GM-CSF等发生反应。选取A10细胞株分泌的单克隆抗体、纯化的多克隆抗体及辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗免IgG，建立了检测BovIFN-γ的双抗体夹心ELISA方法。实验结果表明，此方法检测敏感性达到2ng／mL，特异性良好，为进一步建立灵敏、特异的病原感染诊断方法奠定了基础。 展开更多

关键词 牛IFN-γ 单克隆抗体 ELISA 克隆 表达

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牛型分枝杆菌MPB70蛋白胶乳凝集方法的建立及应用 被引量：9

3

作者 钦博 万学济 +5 位作者 胡巧云 喻正军 晁彦杰 郭爱珍 陈焕春 谭亚娣 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期58-62,共5页

为了研究牛结核病新型诊断试剂,提高诊断的特异性和敏感性,我们用大肠杆菌工程菌表达了牛型分枝杆菌特异性抗原MPB70并提纯蛋白建立了牛结核病乳胶凝集试验(LAT)诊断方法。MPB70是一种牛型分枝杆菌特异性分泌而卡介苗BCG缺失的蛋白质,... 为了研究牛结核病新型诊断试剂,提高诊断的特异性和敏感性,我们用大肠杆菌工程菌表达了牛型分枝杆菌特异性抗原MPB70并提纯蛋白建立了牛结核病乳胶凝集试验(LAT)诊断方法。MPB70是一种牛型分枝杆菌特异性分泌而卡介苗BCG缺失的蛋白质,热稳定性好,用此蛋白建立的乳胶凝集方法具有良好的敏感性、特异性以及较长的保存期,检测70份临床奶牛血清,与皮内变态反应和间接血凝方法相比较分别具有71.4%和88.6%的符合率。该方法还可鉴别诊断自然感染和疫苗免疫接种。我们建立的牛型分枝杆菌MPB70蛋白乳胶凝集试验诊断方法将分子生物学手段和经典试验方法有机结合,为临床快速检测牛结核病血清特异性抗体水平提供了行之有效的方法,。 展开更多

关键词 牛型分枝杆菌 牛结核病 MPB70 胶乳凝集 间接血凝

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间接ELISA检测牛分枝杆菌抗体方法的建立及初步应用 被引量：8

4

作者 张桂荣 万学济 +7 位作者 陈颖钰 吴波 晁彦杰 吕文 钦博 郭爱珍 陈焕春 谭亚娣 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期555-560,568,共7页

针对现行牛结核病检疫方法结核菌素皮内变态反应(TST)的不足,本研究选用牛分枝杆菌特异性抗原MPB83、MPB70及CFP10与ESAT-6融合蛋白(CFP10-ESAT-6)分别建立了检测牛分枝杆菌特异抗体的间接酶联免疫吸附方法(ELISA)。上述3种抗原中一种... 针对现行牛结核病检疫方法结核菌素皮内变态反应(TST)的不足,本研究选用牛分枝杆菌特异性抗原MPB83、MPB70及CFP10与ESAT-6融合蛋白(CFP10-ESAT-6)分别建立了检测牛分枝杆菌特异抗体的间接酶联免疫吸附方法(ELISA)。上述3种抗原中一种以上抗原的特异性抗体为阳性时,即可判断为结核检测阳性。以TST为标准,判断ELISA方法的敏感性与特异性。结果证明,ELISA方法具有较好的敏感性(71.4%)。对ELISA检测为强阳性的奶牛进行细菌分离,并对5头结核菌分离阳性奶牛进行TST检测,结果有3头为TST阳性,2头可疑,显示出ELISA方法对严重感染牛的检测较TST具有更高的敏感性。由于TST与ELISA分别以细胞免疫与体液免疫为基础,两种检测方法结合应用可进一步提高牛结核病的检出率。 展开更多

关键词 牛分枝杆菌 ELISA CFP10-ESAT-6 MPB83 MPB70 结核 检疫

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无偿献血者人类免疫缺陷病毒感染分析 被引量：4

5

作者 朱守兵 刘祎 +2 位作者 李素娥 傅立强 钦博 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第23期5500-5502,共3页

目的了解无偿献血者人类免疫缺陷病毒（HIV）感染状况,为更好的做好献血招募工作提供理论基础。方法对2009-2013年221 715名无偿献血者抗-HIV筛查结果进行分析,对确认为阳性者的资料进行回顾性研究,数据采用SPSS 17.0软件进行统计分析... 目的了解无偿献血者人类免疫缺陷病毒（HIV）感染状况,为更好的做好献血招募工作提供理论基础。方法对2009-2013年221 715名无偿献血者抗-HIV筛查结果进行分析,对确认为阳性者的资料进行回顾性研究,数据采用SPSS 17.0软件进行统计分析。结果 2009-2013年绍兴地区221 715名无偿献血者抗-HIV初筛阳性率为1.27‰,经确认为阳性的有17人,确认后阳性率7.67/10万;确认阳性者均为抗-HIV-1阳性,以未婚、19~35岁、高中/中专以下学历、初次献血、男性为主,阳性率分别为58.82%、88.24%、70.59%、70.59%、88.24%,本地户籍人口和外地户籍人口接近,以街头和站内自愿无偿献血者（64.71%）为主,可以追溯到的9名献血者均为性传播,且男男同性传播占较大比例,占44.44%。结论无偿献血者抗-HIV筛查阳性率及确认阳性率均处于较低水平,街头无偿献血的模式并不比单位团体组织采血模式更安全,献血前征询工作还需进一步加强。 展开更多

关键词 无偿献血者 人类免疫缺陷病毒 男性 行为 梅毒

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核酸联检反应性鉴别非反应性献血者中隐匿性乙肝感染状况分析

6

作者 朱守兵 陆盈 +1 位作者 孙建杨 钦博 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期837-842,共6页

研究联检反应性鉴别非反应性献血者(Non⁃discriminating reactive donation,NDRD)中隐匿性乙肝感染(Occult hepatitis⁃B virus infection,OBI)情况,对既往在绍兴地区献血的NDRD进行追踪,首先使用化学发光试验检测HBsAg,使用核酸检测技... 研究联检反应性鉴别非反应性献血者(Non⁃discriminating reactive donation,NDRD)中隐匿性乙肝感染(Occult hepatitis⁃B virus infection,OBI)情况,对既往在绍兴地区献血的NDRD进行追踪,首先使用化学发光试验检测HBsAg,使用核酸检测技术检测HBV DNA,首次追踪检测增加化学发光试验检测HBsAb,同时选取HBsAg阴性且HBV DNA也阴性合格献血者标本76份和确认为OBI的献血者标本52份作为对照检测HBsAb,经追踪检测HBsAg阴性且HBV DNA阳性的献血者判定为OBI,对不同人群血清中HBsAb阳性比例进行统计分析,对不同性别、不同年龄、不同学历、不同血清HBsAb浓度及不同追踪检测次数确定为OBI的情况进行统计分析。本次研究共追踪检测66人,其中经确认为OBI的12人,NDRD中OBI的比例18.18%,不同性别、不同学历的献血者确认为OBI的比例差异无统计学意义(P>0.05),不同年龄组的献血者确认为OBI的比例差异有统计学意义(P<0.05),HBsAg阴性且HBV DNA阴性合格献血者、NDRD和确认为OBI的献血者中HBsAb阳性的比例差异无统计学意义(P>0.05),NDRD中不同血清HBsAb浓度的献血者确认为OBI的比例差异有统计学意义(P<0.05),不同追踪检测次数组OBI检出比例有统计学差异(P<0.05)。NDRD中OBI的比例较高,年龄越大的NDRD确定为OBI比例越高,血清HBsAb浓度大于300IU/L的NDRD中未发现OBI,HBsAb浓度大于300IU/L可以用作NDRD归队和保留的指标,追踪检测5次及以上的NDRD确认为OBI的比例明显增高,为增加NDRD中OBI的检出率,可以增加核酸检测次数至5次及以上。 展开更多

关键词 核酸联检反应性鉴别非反应性 献血者 核酸检测 隐匿性乙肝感染 HBsAb 检测次数

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质谱法与雄激素多指标联合检测在多囊卵巢综合征诊断中的应用 被引量：2

7

作者 马雪莲 陆月红 +3 位作者 严李萍 钦博 丁杰锋 应群华 《中国卫生检验杂志》 CAS 2022年第18期2237-2241,共5页

目的通过液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)对多囊卵巢综合征(PCOS)患者进行雄激素多指标的联合检测,以提升PCOS的诊断率,并探讨实现PCOS高雄激素血症(HA)早期筛查的临床意义。方法LC-MS/MS法检测85例PCOS患者及40例对照女性各雄激素指标,... 目的通过液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)对多囊卵巢综合征(PCOS)患者进行雄激素多指标的联合检测,以提升PCOS的诊断率,并探讨实现PCOS高雄激素血症(HA)早期筛查的临床意义。方法LC-MS/MS法检测85例PCOS患者及40例对照女性各雄激素指标,绘制ROC曲线,计算曲线下面积(AUC),运用联合指标提升PCOS的诊断效能,并区分PCOS高雄激素血症的不同雄激素表型;比较LC-MS/MS法与化学发光法对HA的检出率,同时比较LC-MS/MS法筛选出的HA组和非HA组内分泌及代谢异常发生率。结果睾酮(T)、游离睾酮(FT)和雄烯二酮(A4)三联指标的AUC为0.856,诊断价值高,T、A4、FT、DHEAS、DHEA五联指标AUC为0.855,诊断价值较高,LC-MS/MS法检出HA患者40例(占40.00%),显著高于化学发光法检出的25例(占29.41%)(P<0.05),而由该法筛选出的HA组内分泌及代谢异常发生率显著高于非HA组。结论LC-MS/MS法与雄激素多指标联合检测灵敏性高、准确度好,优于单指标检测,能有效提升PCOS的诊断率,实现HA的早期筛查,预防远期并发症;同时该法能识别PCOS高雄激素血症的不同雄激素表型,有利于临床实施精准治疗。 展开更多

关键词 液相色谱-串联质谱法 多囊卵巢综合征 高雄激素血症 雄激素多指标联合检测 雄激素表型

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绍兴市手足口病肠道病毒71型基因特征研究

8

作者 何婷婷 陈金堃 +4 位作者 张建华 蒋卓婧 胡雪娜 傅利军 钦博 《浙江预防医学》 2014年第9期897-900,共4页

目的研究绍兴市2012—2013年手足口病患者的肠道病毒71型（EV 71）病毒分离株的基因特征。方法采集手足口病患者粪便、疱疹液和咽拭子标本,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）特异性扩增进行EV 71鉴定,阳性的样本进行病毒分离,对10株分... 目的研究绍兴市2012—2013年手足口病患者的肠道病毒71型（EV 71）病毒分离株的基因特征。方法采集手足口病患者粪便、疱疹液和咽拭子标本,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）特异性扩增进行EV 71鉴定,阳性的样本进行病毒分离,对10株分离株分A、B、C、D和E五段进行分段PCR,测序后并拼接成全长,以EV 71 A、B和C各基因型的参考毒株和以往中国EV 71的分离毒株为参考株,基于核苷酸序列和氨基酸序列对VP1区分别进行同源性分析和系统发生树构建。结果 RT-PCR结果证实分离的10株病毒均为EV 71,与C4a亚型亲缘关系最近,它们之间核苷酸和氨基酸同源性分别为95.06%-97.87%和93.60%-98.99%;与亲缘关系最远的参考毒株Cox A16的核苷酸和氨基酸同源性分别为61.17%-62.74%和68.00%-71.38%。在系统发生树上,这10株EV 71均在C基因型中,与属C4a亚型的病毒株属同一分支。结论绍兴地区手足口病患者中分离的EV 71毒株属C基因型的C4a亚型进化分支。 展开更多

关键词 手足口病 肠道病毒71型 基因型 同源性

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坤复康片中芍药内酯苷在Caco-2细胞模型中的吸收特征研究 被引量：1

9

作者 王爱萍 周萍 +3 位作者 张涛 潘海滔 钦博 徐人杰 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期20-26,共7页

目的研究坤复康片中的芍药内酯苷在Caco-2细胞模型中的跨膜吸收特征,探讨人小肠对芍药内酯苷的吸收和转运。方法研究了不同药物浓度、pH值、温度和抑制剂对芍药内酯苷在Transwell细胞培养板中从顶膜(apical,AP)到基底(basolateral,BL)... 目的研究坤复康片中的芍药内酯苷在Caco-2细胞模型中的跨膜吸收特征,探讨人小肠对芍药内酯苷的吸收和转运。方法研究了不同药物浓度、pH值、温度和抑制剂对芍药内酯苷在Transwell细胞培养板中从顶膜(apical,AP)到基底(basolateral,BL)的双向渗透吸收的影响。结果芍药内酯苷以3种测试浓度给药时(5,20和100μmol·L^(−1)),从AP到BL方向的表观渗透系数(P_(app))值范围为(3.27~5.37)×10^(–7) cm·s^(–1)。相反,从BL到AP,P_(app)值范围为(6.64~9.63)×10^(–7) cm·s^(–1)。数据表明,芍药内酯苷转运具有pH和温度依赖性。芍药内酯苷的细胞通透性受多种抑制剂影响,包含Na^(+)/K^(+)离子通道抑制剂钒酸钠,多耐药蛋白抑制剂MK571和吲哚美辛及乳腺癌耐药蛋白抑制剂芹菜素。当坤复康溶液加入后,芍药内酯苷从AP到BL方向的P_(app)值显著增加。结论芍药内酯苷在Caco-2细胞模型中的肠道吸收较差,其吸收机制可能涉及多种蛋白介导的主动转运。 展开更多

关键词 芍药内酯苷 CACO-2 口服给药 吸收机制

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坤复康片中异泽兰黄素小肠吸收特征研究

10

作者 徐人杰 张涛 +2 位作者 潘海滔 钦博 周萍 《中国现代医生》 2022年第6期38-42,共5页

目的研究坤复康片中的异泽兰黄素小肠吸收和坤复康片对其吸收的影响。方法Caco-2细胞模型研究不同药物浓度、pH值、温度和抑制剂对异泽兰黄素双向渗透吸收的影响。采用药动学实验研究坤复康片在体内对异泽兰黄素吸收的影响。结果数据表... 目的研究坤复康片中的异泽兰黄素小肠吸收和坤复康片对其吸收的影响。方法Caco-2细胞模型研究不同药物浓度、pH值、温度和抑制剂对异泽兰黄素双向渗透吸收的影响。采用药动学实验研究坤复康片在体内对异泽兰黄素吸收的影响。结果数据表明,异泽兰黄素在Caco-2细胞模型中吸收较差,三种待测浓度下其吸收仅为3.27×10^(-7)cm/s至5.37×10^(-7)cm/s[从顶膜端(AP)到底膜端(BL)]和从6.27×10^(-7)cm/s至9.63×10^(-7)cm/s(从BL到AP),其转运具有pH和温度依赖性。异泽兰黄素的细胞通透性受多耐药蛋白抑制剂MK571和吲哚美辛的影响。当坤复康溶液加入后,异泽兰黄素的吸收显著性增加,从4.41×10^(-7)cm/s至6.43×10^(-7)cm/s(从AP到BL)。在药动学实验中,坤复康组的异泽兰黄素相对于单体组有更大的吸收入血暴露量。结论坤复康片中某些成分会显著促进异泽兰黄素的吸收。 展开更多

关键词 异泽兰黄素 CACO-2 口服 吸收机制 坤复康片

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多倍体生物研究进展 被引量：28

11

作者 宋灿 刘少军 +5 位作者 肖军 何伟国 周毅 覃钦博 张纯 刘筠 《中国科学：生命科学》 CSCD 北大核心 2012年第3期173-184,259-265,共12页

多倍体是含有3套或3套以上完整染色体组的生物体,在动植物中广泛存在,是物种发生的一种重要方式.近年来的动植物基因组测序结果及相关分子系统学、生物信息学的研究,支持物种在演化过程中经历过全基因组复制的观点.多倍体的稳定性依赖... 多倍体是含有3套或3套以上完整染色体组的生物体,在动植物中广泛存在,是物种发生的一种重要方式.近年来的动植物基因组测序结果及相关分子系统学、生物信息学的研究,支持物种在演化过程中经历过全基因组复制的观点.多倍体的稳定性依赖于其形成后发生的基因组快速重组和基因表达调控的变化;多倍体的形成及其二倍体化过程是物种长期演化过程中的重要组成部分.多倍体可通过多种方式形成,其中,通过远缘杂交形成能产生不减数配子的杂交生物体,导致其后代染色体加倍,是快速、高效的形成多倍体的途径之一.可育多倍体的形成不仅促进了物种间的遗传物质交流,丰富了物种多样性,而且为多倍体育种奠定了基础.对多倍体生物的研究不仅具有重要的理论意义,而且有重要的应用价值.动植物多倍体育种在生产上的应用带来了显著的经济效益和社会效益. 展开更多

关键词 多倍体 全基因组复制 二倍体化 远缘杂交 多倍体育种

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鱼类远缘杂交育种技术的建立及应用 被引量：19

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作者 王石 汤陈宸 +11 位作者 陶敏 覃钦博 张纯 罗凯坤 赵如榕 王静 任力 肖军 胡方舟 周蓉 段巍 刘少军 《中国科学：生命科学》 CSCD 北大核心 2018年第12期1310-1329,共20页

杂交是广泛应用的重要育种技术,然而,在鱼类中,杂交育种长期以来缺乏系统的理论和技术支撑.通过长期的系统研究,本课题组探索出了鱼类远缘杂交相关的遗传和繁殖规律,形成了适合于远缘杂交和近缘杂交的一步法育种技术和多步法育种技术,... 杂交是广泛应用的重要育种技术,然而,在鱼类中,杂交育种长期以来缺乏系统的理论和技术支撑.通过长期的系统研究,本课题组探索出了鱼类远缘杂交相关的遗传和繁殖规律,形成了适合于远缘杂交和近缘杂交的一步法育种技术和多步法育种技术,创制了一批二倍体鱼品系和四倍体鱼品系,研制了一批优良鱼类.另外,通过查阅国内外有关鱼类杂交的相关文献,对鱼类杂交育种途径、技术方法及效果等进行了广泛讨论.该文对鱼类杂交育种研究及应用具有重要的参考价值. 展开更多

关键词 鱼类 远缘杂交 近缘杂交 品系 育种技术

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2017年中国大陆期刊发表的临床实践指南的报告质量评价 被引量：20

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作者 杨钦博 周奇 +6 位作者 黄天相 高霞 陈煜 张先卓 杨楠 张静怡 陈耀龙 《中国循证医学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第11期1325-1332,共8页

目的评价2017年中国大陆期刊发表的临床实践指南(以下简称指南)的报告质量。方法计算机检索CNKI、CBM和WanFang Data数据库,同时补充检索医脉通数据库,检索时限均为2017年1月1日至2017年12月31日。由2名评价员独立筛选文献并交叉核对,... 目的评价2017年中国大陆期刊发表的临床实践指南(以下简称指南)的报告质量。方法计算机检索CNKI、CBM和WanFang Data数据库,同时补充检索医脉通数据库,检索时限均为2017年1月1日至2017年12月31日。由2名评价员独立筛选文献并交叉核对,采用实践指南报告工具RIGHT清单对纳入指南的报告质量进行评价。结果最终纳入107篇指南,RIGHT清单总的报告率为34.8%±0.1%。在RIGHT的7大领域中,基本信息领域(56.8%)的报告率最高,评审和质量保证领域(9.3%)的报告率最低。相比之下,中国科学引文数据库(Chinese Science Citation Database,CSCD)收录的指南对RIGHT清单条目的平均报告率低于非CSCD指南[MD=-0.73,95%CI(-0.78,-0.68)];中华医学会系列杂志(Chinese Medical Association,CMA)发表的指南对RIGHT清单条目的平均报告率高于非中华医学会系列杂志发表的指南[MD=2.30,95%CI(2.26,2.34)];由各类学会或协会制订的指南对RIGHT清单条目平均报告率低于非学会或协会制订的指南[MD=-3.78,95%CI(-3.83,-3.73)];中医领域指南对RIGHT清单条目平均报告率高于西医领域指南[MD=21.94,95%CI(21.91,21.97)]。结论 2017年中国大陆期刊发表的指南报告质量总体不佳,尤其体现在评审和质量保证、资助与利益冲突声明和管理、指南获取途径及局限性等其他方面的报告。建议指南制订者严格按照国际标准进行指南的制订和报告,从而提高临床实践指南的质量。 展开更多

关键词 RIGHT 临床实践指南 报告质量

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动物远缘杂交研究进展 被引量：16

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作者 张卓慧 陈婕 +6 位作者 黎玲 陶敏 张纯 覃钦博 肖军 刘筠 刘少军 《中国科学：生命科学》 CSCD 北大核心 2014年第2期161-174,共14页

远缘杂交是指亲缘关系在种间及种间以上的生物之间的杂交,它可以使基因组从一个物种转移到另一个物种中,从而导致杂交后代的表现型和基因型都发生改变.如果远缘杂交后代两性可育,则可以通过自交繁衍形成遗传变异的品系,它们在生物进化... 远缘杂交是指亲缘关系在种间及种间以上的生物之间的杂交,它可以使基因组从一个物种转移到另一个物种中,从而导致杂交后代的表现型和基因型都发生改变.如果远缘杂交后代两性可育,则可以通过自交繁衍形成遗传变异的品系,它们在生物进化、遗传和育种方面具有重要作用.本文在分析和归纳大量国内外有关动物远缘杂交文献的基础上,结合本实验室长期从事鱼类远缘杂交的研究结果,对动物远缘杂交研究的最近概况及其相关问题进行了较全面综述,其中介绍了动物门间、纲间、目间、科间、亚科间、属间和种间的杂交状况,阐述了鱼类远缘杂交品系的形成规律和遗传变异特性及它们在生产上的应用等.本文在生物进化和动物遗传育种方面具有意义. 展开更多

关键词 远缘杂交 品系 四倍体 三倍体 遗传育种 应用

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改良三倍体鲫鱼的生物学特性研究 被引量：14

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作者 陈松 王静 +6 位作者 刘少军 覃钦博 肖军 段巍 罗凯坤 刘锦辉 刘筠 《中国科学（C辑）》 CSCD 北大核心 2009年第5期479-484,共6页

利用鱼类远缘杂交和雌核发育相结合的方法培育出改良四倍体鲫鲤和改良二倍体红鲫,两者交配制备出一种改良三倍体鲫鱼(湘云鲫2号).对改良三倍体鲫鱼的染色体数目和组型、性腺和垂体结构、外形特征、生长速度等方面进行了系统的研究.结果... 利用鱼类远缘杂交和雌核发育相结合的方法培育出改良四倍体鲫鲤和改良二倍体红鲫,两者交配制备出一种改良三倍体鲫鱼(湘云鲫2号).对改良三倍体鲫鱼的染色体数目和组型、性腺和垂体结构、外形特征、生长速度等方面进行了系统的研究.结果表明,改良三倍体鲫鱼的染色体数目为3n=150,核型公式为33m+51sm+33st+33t;其精巢和卵巢在繁殖季节不能产生成熟配子,垂体超微结构显示,GTH细胞内的分泌颗粒和分泌小球在繁殖季节没有大量排出,该特征从内分泌的角度证明了它们的不育性;改良三倍体鲫鱼具有体背高、尾柄短和头部小的优良外形特征.与三倍体湘云鲫相比,改良三倍体鲫鱼不但保留了三倍体鱼生长速度快、不育等特点,而且在体形方面表现出明显的改良特征,是一种新型改良三倍体鲫鱼. 展开更多

关键词 改良三倍体鲫鱼染色体 性腺 垂体 改良特征

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合方鲫及其亲本肌肉营养成分分析 被引量：14

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作者 刘庆峰 王静 +8 位作者 肖军 陈璇 齐艳华 李武辉 陶敏 张纯 覃钦博 罗凯坤 刘少军 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1133-1139,共7页

采用生化分析手段对合方鲫及其亲本的肌肉营养成分进行比较研究。结果显示,合方鲫肌肉中水分含量为71.00%,显著低于其亲本的水分含量(日本白鲫:75.60%,红鲫:75.50%),说明合方鲫具有低水分的特征。合方鲫的蛋白质含量为17.70%,高于红鲫... 采用生化分析手段对合方鲫及其亲本的肌肉营养成分进行比较研究。结果显示,合方鲫肌肉中水分含量为71.00%,显著低于其亲本的水分含量(日本白鲫:75.60%,红鲫:75.50%),说明合方鲫具有低水分的特征。合方鲫的蛋白质含量为17.70%,高于红鲫的蛋白质含量(17.00%),且显著高于日本白鲫的蛋白质含量(14.80%)。在15种检测的氨基酸含量中,合方鲫的氨基酸总量(15.87%)、必需氨基酸总含量(6.55%)均高于红鲫的氨基酸总量(15.52%)和必需氨基酸总含量(6.46%),且显著高于日本白鲫的氨基酸总量(13.13%)和必需氨基酸总含量(5.27%)。值得一提的是合方鲫的呈味氨基酸总含量高达6.26%,高于红鲫的呈味氨基酸总含量(6.07%),且显著高于日本白鲫的呈味氨基酸总含量(5.29%)。研究表明,合方鲫是一种营养价值高、肉味鲜美的鱼类,为其生产上的应用提供了理论支撑。 展开更多

关键词 合方鲫 杂交品系 肌肉 营养成分 氨基酸

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远缘杂交形成的二倍体鱼和多倍体鱼生殖细胞染色体研究 被引量：12

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作者 张纯 刘少军 +6 位作者 孙远东 肖俊 覃钦博 王静 何伟国 尤翠平 刘筠 《分子细胞生物学报》 CSCD 北大核心 2008年第1期53-60,共8页

本文采用性腺染色体制片及组织学切片方法,系统地研究了不同发育时期的鲫鲤杂交第二代(F2)(2n=100)、异源四倍体鲫鲤(4n=200)、三倍体鲫鱼(3n=150))、雌核发育二倍体鲫鲤第二代(G2)(2n=100)及鲤鱼(CyprinuscarpioL)(2n=100)(对照组)生... 本文采用性腺染色体制片及组织学切片方法,系统地研究了不同发育时期的鲫鲤杂交第二代(F2)(2n=100)、异源四倍体鲫鲤(4n=200)、三倍体鲫鱼(3n=150))、雌核发育二倍体鲫鲤第二代(G2)(2n=100)及鲤鱼(CyprinuscarpioL)(2n=100)(对照组)生殖细胞的染色体特征。研究结果表明,对照组中鲤鱼精原细胞染色体数与体细胞染色体数一致,为二倍体精原细胞(2n=100),而远缘杂交形成的二倍体鱼和多倍体鱼的生殖细胞中则观察到明显的染色体数加倍现象,其中,鲫鲤杂交第二代(F2)精巢生殖细胞染色体数加倍现象特别丰富,占检测的染色体分裂相的21.6%,为其产生不减半的二倍体配子提供了直接的细胞学证据,同时也说明远缘杂交是导致生殖细胞染色体数加倍的一个重要因素。该研究在探讨多倍体鱼的发生及鱼类遗传育种方面具有重要意义。 展开更多

关键词 二倍体杂交鱼 多倍体杂交鱼 生殖细胞染色体 卵巢 精巢 有丝分裂 减数分裂

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水产育种生物技术发展战略研究 被引量：4

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作者 陈松林 徐文腾 +10 位作者 卢昇 胡炜 王德寿 胡晓丽 周茜 刘清华 赵紫霞 覃钦博 王师 刘洋 崔忠凯 《中国工程科学》 CSCD 北大核心 2023年第4期214-226,共13页

生物技术是水产种业可持续发展的核心驱动力,全面提升水产育种生物技术创新能力并实现种源自主可控,对于保障国家食品安全具有重要意义。本文梳理了我国水产育种的发展现状和存在的问题,总结了国内外水产行业在转基因育种、倍性育种、... 生物技术是水产种业可持续发展的核心驱动力,全面提升水产育种生物技术创新能力并实现种源自主可控,对于保障国家食品安全具有重要意义。本文梳理了我国水产育种的发展现状和存在的问题,总结了国内外水产行业在转基因育种、倍性育种、分子标记辅助育种、基因组选择育种、基因组编辑育种、分子设计育种、生殖干细胞移植等生物技术方向的研究进展与应用情况,进一步分析了相关技术方向上的未来研发需求。研究提出了未来水产育种生物技术的发展目标,包括水产生物优异种质资源收集、保存与精准鉴定,重要性状遗传基础与调控机制深度解析,高效精准育种技术创建,突破性新品种创制在内的重点任务。研究建议,优化水产种业发展政策、推动水产育种技术创新、建立水产良种创制与转化平台、设立专门项目推动技术创新和种业发展,以此推动我国由水产种业大国向水产种业强国的深刻转变。 展开更多

关键词 生物技术 水产育种技术 传统育种技术 分子育种技术 智能育种技术

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用雄核发育方法制备改良异源四倍体鲫鲤群体 被引量：6

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作者 段巍 覃钦博 +5 位作者 陈松 刘少军 王静 张纯 孙远东 刘筠 《中国科学（C辑）》 CSCD 北大核心 2007年第5期530-539,共10页

用UV照射金鱼的卵子使其卵核的遗传物质失活,再与异源四倍体鲫鲤(AT)产生的二倍体精子受精,在无雄核染色体加倍处理情况下,成功地获得了两性可育的二倍体雄核发育鱼(A0).Ⅱ龄性成熟的A0自交形成了雄核发育鱼自交子一代(A1).本研究对10月... 用UV照射金鱼的卵子使其卵核的遗传物质失活,再与异源四倍体鲫鲤(AT)产生的二倍体精子受精,在无雄核染色体加倍处理情况下,成功地获得了两性可育的二倍体雄核发育鱼(A0).Ⅱ龄性成熟的A0自交形成了雄核发育鱼自交子一代(A1).本研究对10月龄A1的染色体数目、性腺的显微和亚显微结构以及外型特征进行了观察,实验结果表明:(ⅰ)A1中包含有四倍体(A1-4n)、三倍体(A1-3n)以及二倍体后代(A1-2n),他们所占比例分别为85%,10%和5%,其染色体数目分别为4n=200,3n=150和2n=100.其中四倍体和三倍体的形成证明二倍体A0能产生二倍体配子.二倍体雄核发育鲫鲤杂交鱼产生二倍体配子的原因与早期生殖细胞的核内复制机制有关.(ⅱ)A1-4n的性腺为两性型且发育正常.其中雄性个体能挤出白色精液,其中的二倍体精子头部明显比红鲫的单倍体精子头部大.这些二倍体精子具有正常结构,由头部和尾部组成,头部与尾部交接处有多个线粒体,精子尾巴的中央轴有典型的"9+2"微管结构.A1-4n雌性个体的卵巢发育饱满,其中含有大量Ⅱ,Ⅲ和Ⅳ时相的卵母细胞.在Ⅳ时相卵母细胞的放射膜上能观察到受精孔.同时期的A1-2n,A1-3n的性腺发育异常,均表现为不育.A1-2n的不育性与其为远源杂交二倍体有关,A1-3n的不育性与其为远源杂交三倍体有关.(ⅲ)与AT相比,A1-4n不仅具有生长速度快、抗逆性强的优点,而且在外型上具有体背高、尾柄短、头部小等优良性状.本实验说明运用雄核发育技术不仅能获得两性可育的四倍体鱼,而且能对异源四倍体鲫鲤进行有效的遗传改良,这在细胞遗传研究和鱼类育种方面都具有重要意义. 展开更多

关键词 异源四倍体鲫鲤 二倍体精子 单倍体卵子 雄核发育 雄核发育二倍体

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新型高背型鲫鱼的形成及其生物学特征研究 被引量：7

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作者 王静 覃钦博 +7 位作者 陈松 刘少军 段巍 刘锦辉 张纯 罗凯坤 肖俊 刘筠 《中国科学（C辑）》 CSCD 北大核心 2008年第7期635-642,共8页

利用鱼类远缘杂交技术和雌核发育方法获得了新型四倍体鲫鲤(G1×AT).在G1×AT中发现2%的高背型个体,其自交后代性状发生分离并形成3种两性可育的二倍体鱼:高背型红鲫、高背型双尾金鱼和青灰色鲤鱼.其中高背型红鲫自交,后代性状... 利用鱼类远缘杂交技术和雌核发育方法获得了新型四倍体鲫鲤(G1×AT).在G1×AT中发现2%的高背型个体,其自交后代性状发生分离并形成3种两性可育的二倍体鱼:高背型红鲫、高背型双尾金鱼和青灰色鲤鱼.其中高背型红鲫自交,后代性状继续发生分离,形成高背型红鲫、花鲫和青鲫.本文主要对这3种高背型鲫鱼及其自交后代的外形特征、染色体数目、性腺显微和超微结构以及繁殖力等方面进行了研究.结果表明:(ⅰ)这3种高背型鲫鱼在外形上都具有体背高、尾柄短、头部小的优良特性.高背型红鲫、花鲫和青鲫的体高/体长值分别为0.54,0.51和0.54,三者明显高于普通红鲫的体高/体长值0.41(P<0.01);(ⅱ)3种高背型鲫鱼染色体数目与普通红鲫染色体数目一致,都为2n=100;(ⅲ)这3种高背型鲫鱼都具有正常的卵巢和精巢,它们分别能产生成熟的卵子和精子,为二倍体高背型鲫鱼品系的形成奠定了基础;(ⅳ)与普通红鲫相比,3种高背型鲫鱼具有产卵(产精)量大、繁殖期长、受精率和孵化率高等优点.它们通过自交培育出了具有高背特征的二倍体鲫鱼群体;(ⅴ)3种高背型鲫鱼既具有较高的观赏和食用价值,也可以作为优良的二倍体亲本与四倍体鱼交配来制备高背型三倍体鲫鱼.这3种高背型鲫鱼的形成在生物进化研究和鱼类遗传育种研究方面都具有重要意义. 展开更多

关键词 高背型鲫鱼 性状分化 外形特征 染色体 性腺结构

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