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6株猪源芽孢杆菌的分离鉴定及其益生性研究
被引量：
15
1
作者
钟
罗华
邓舜洲
+4 位作者
张文波
高洋根
薛瑞
罗锋
汪建中
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2017年第2期521-529,共9页
本研究旨在通过高温处理和常规厌氧菌分离法从健康肥猪粪便中分离芽孢杆菌,并通过培养性状、生化试验、PCR、肠道耐受、抗菌活性和接种试验动物等方法鉴定筛选性状稳定、优良的益生性芽孢杆菌。结果显示,共分离到6株芽孢杆菌,其中1株巨...
本研究旨在通过高温处理和常规厌氧菌分离法从健康肥猪粪便中分离芽孢杆菌,并通过培养性状、生化试验、PCR、肠道耐受、抗菌活性和接种试验动物等方法鉴定筛选性状稳定、优良的益生性芽孢杆菌。结果显示,共分离到6株芽孢杆菌,其中1株巨大芽孢杆菌、1株死谷芽孢杆菌、2株解淀粉芽孢杆菌和2株枯草芽孢杆菌;分离菌对多黏菌素和青霉素耐药性较强,对其他12种常用药物较敏感,对致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果较好;4种芽孢杆菌均可在酸性、高胆盐和高温条件下生存,特别是巨大芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌耐受能力较强;分离的芽孢杆菌对小鼠均无致病性,其中巨大芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌有较明显的促进试验动物生长的作用。结果提示,巨大芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌可作为益生性芽孢杆菌的初步选择。
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关键词
分离鉴定
益生性
芽孢杆菌
下载PDF
职称材料
表达猪圆环病毒2型衣壳蛋白的重组猪痘病毒的构建及鉴定
被引量：
6
2
作者
钟
罗华
邓舜洲
+4 位作者
胡杨
徐昌满
罗锋
张文波
陈松昌
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2018年第2期279-290,共12页
为探索猪痘病毒(swinepox virus,SWPV)作为猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)疫苗载体的可行性,本试验以痘苗病毒启动子P11启动绿色荧光蛋白筛选标记,猪痘病毒TK基因为外源基因的插入位点,P28、P7.5启动子启动PCV2 ORF2基...
为探索猪痘病毒(swinepox virus,SWPV)作为猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)疫苗载体的可行性,本试验以痘苗病毒启动子P11启动绿色荧光蛋白筛选标记,猪痘病毒TK基因为外源基因的插入位点,P28、P7.5启动子启动PCV2 ORF2基因,以猪痘病毒JX20G株为亲本病毒,采用同源重组技术分别构建了两株表达PCV2衣壳蛋白的重组猪痘病毒rSWPV11-28C和rSWPV11-7.5C。结果显示,重组猪痘病毒rSWPV11-28C和rSWPV11-7.5C均成功表达了PCV2衣壳蛋白,表达的蛋白能与PCV2单克隆抗体6E12发生特异性反应;痘苗病毒启动子P28的启动效果明显优于P7.5,P28适合用于启动目的基因;利用重组猪痘病毒制备的PCV2灭活疫苗免疫小鼠后,rSWPV11-28C疫苗组的PCV2抗体水平与某PCV2商品疫苗相当,该重组病毒的成功构建为PCV2相关疾病及其他疫病在猪群中的防控提供了新的方向。
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关键词
猪圆环病毒2型(PCV2)
衣壳蛋白
重组猪痘病毒
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职称材料
猪痘病毒TK、ORF121、ORF143基因缺失毒株的 构建及其生物学特性的测定
被引量：
3
3
作者
刘昌锦
邓舜洲
+4 位作者
罗锋
钟
罗华
王喆
高映雪
刘小兰
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2020年第3期828-836,共9页
为筛选猪痘病毒(SWPV)复制非必需区并测定其缺失株的生物学特性,本研究根据同源重组原理分别针对SWPV的TK(ORF063)、ORF 121和ORF 143基因设计引物。应用重叠延伸PCR技术拼接同源重组左右臂及EGFP筛选标记表达盒,将拼接片段分别转染到感...
为筛选猪痘病毒(SWPV)复制非必需区并测定其缺失株的生物学特性,本研究根据同源重组原理分别针对SWPV的TK(ORF063)、ORF 121和ORF 143基因设计引物。应用重叠延伸PCR技术拼接同源重组左右臂及EGFP筛选标记表达盒,将拼接片段分别转染到感染SWPV的PK15细胞。利用荧光显微镜观察标记含EGFP的单个蚀斑,筛选获取重组毒株。应用PCR及Western blotting对重组毒株进行鉴定。分别测定各毒株感染PK15细胞的蚀斑大小和皮下接种保育猪致病性。PCR结果表明,目的基因成功整合到相应位点,成功获得重组毒株rSWPV-TK、rSWPV-121和rSWPV-143;Western blotting结果显示,连续传代的重组毒株在PK15细胞上稳定表达外源蛋白。重组毒株在PK15细胞上形成的痘斑均小于亲本毒株,其中ORF121缺失株差异极显著(P<0.01)。各毒株均可导致保育猪痘斑形成,其中ORF121缺失株引起病变时间短,产生痘斑小,毒力较亲本下降。综上所述,本研究筛选到2个SWPV基因组中可供外源蛋白插入的复制非必需区ORF121和ORF143,为构建SWPV基因工程载体奠定了基础。
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关键词
重组猪痘病毒(rSWPV)
重叠延伸PCR
复制非必需区
生物学特性
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职称材料
题名
6株猪源芽孢杆菌的分离鉴定及其益生性研究
被引量：
15
1
作者
钟
罗华
邓舜洲
张文波
高洋根
薛瑞
罗锋
汪建中
机构
江西农业大学动物科学与技术学院
南昌金牧动物保健服务有限公司
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2017年第2期521-529,共9页
基金
江西省科技支撑计划(20132BBF60038)
江西省生猪产业体系(JXARS-03-疫病防控岗位)
文摘
本研究旨在通过高温处理和常规厌氧菌分离法从健康肥猪粪便中分离芽孢杆菌,并通过培养性状、生化试验、PCR、肠道耐受、抗菌活性和接种试验动物等方法鉴定筛选性状稳定、优良的益生性芽孢杆菌。结果显示,共分离到6株芽孢杆菌,其中1株巨大芽孢杆菌、1株死谷芽孢杆菌、2株解淀粉芽孢杆菌和2株枯草芽孢杆菌;分离菌对多黏菌素和青霉素耐药性较强,对其他12种常用药物较敏感,对致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果较好;4种芽孢杆菌均可在酸性、高胆盐和高温条件下生存,特别是巨大芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌耐受能力较强;分离的芽孢杆菌对小鼠均无致病性,其中巨大芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌有较明显的促进试验动物生长的作用。结果提示,巨大芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌可作为益生性芽孢杆菌的初步选择。
关键词
分离鉴定
益生性
芽孢杆菌
Keywords
isolation and identification
probiotic
Bacillus
分类号
S852.6 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
表达猪圆环病毒2型衣壳蛋白的重组猪痘病毒的构建及鉴定
被引量：
6
2
作者
钟
罗华
邓舜洲
胡杨
徐昌满
罗锋
张文波
陈松昌
机构
江西农业大学动物科学与技术学院
江西金伊博生物科技有限公司
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2018年第2期279-290,共12页
基金
国家自然科学基金项目(31460666)
江西省科技支撑计划项目(20132BBF60044
+1 种基金
20141BBF60039)
江西省现代农业产业技术体系建设专项资金(JXARS-03)
文摘
为探索猪痘病毒(swinepox virus,SWPV)作为猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)疫苗载体的可行性,本试验以痘苗病毒启动子P11启动绿色荧光蛋白筛选标记,猪痘病毒TK基因为外源基因的插入位点,P28、P7.5启动子启动PCV2 ORF2基因,以猪痘病毒JX20G株为亲本病毒,采用同源重组技术分别构建了两株表达PCV2衣壳蛋白的重组猪痘病毒rSWPV11-28C和rSWPV11-7.5C。结果显示,重组猪痘病毒rSWPV11-28C和rSWPV11-7.5C均成功表达了PCV2衣壳蛋白,表达的蛋白能与PCV2单克隆抗体6E12发生特异性反应;痘苗病毒启动子P28的启动效果明显优于P7.5,P28适合用于启动目的基因;利用重组猪痘病毒制备的PCV2灭活疫苗免疫小鼠后,rSWPV11-28C疫苗组的PCV2抗体水平与某PCV2商品疫苗相当,该重组病毒的成功构建为PCV2相关疾病及其他疫病在猪群中的防控提供了新的方向。
关键词
猪圆环病毒2型(PCV2)
衣壳蛋白
重组猪痘病毒
Keywords
porcine circovirus type 2 （PCV2）
capsid protein
recombinant swinepox virus
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
猪痘病毒TK、ORF121、ORF143基因缺失毒株的 构建及其生物学特性的测定
被引量：
3
3
作者
刘昌锦
邓舜洲
罗锋
钟
罗华
王喆
高映雪
刘小兰
机构
江西农业大学
江西金伊博生物科技有限公司
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2020年第3期828-836,共9页
基金
国家自然科学基金项目(31460666)
江西省科技支撑计划项目(20132BBF60044、20141BBF60039)
江西省现代农业产业技术体系建设专项资金(JXARS-03)。
文摘
为筛选猪痘病毒(SWPV)复制非必需区并测定其缺失株的生物学特性,本研究根据同源重组原理分别针对SWPV的TK(ORF063)、ORF 121和ORF 143基因设计引物。应用重叠延伸PCR技术拼接同源重组左右臂及EGFP筛选标记表达盒,将拼接片段分别转染到感染SWPV的PK15细胞。利用荧光显微镜观察标记含EGFP的单个蚀斑,筛选获取重组毒株。应用PCR及Western blotting对重组毒株进行鉴定。分别测定各毒株感染PK15细胞的蚀斑大小和皮下接种保育猪致病性。PCR结果表明,目的基因成功整合到相应位点,成功获得重组毒株rSWPV-TK、rSWPV-121和rSWPV-143;Western blotting结果显示,连续传代的重组毒株在PK15细胞上稳定表达外源蛋白。重组毒株在PK15细胞上形成的痘斑均小于亲本毒株,其中ORF121缺失株差异极显著(P<0.01)。各毒株均可导致保育猪痘斑形成,其中ORF121缺失株引起病变时间短,产生痘斑小,毒力较亲本下降。综上所述,本研究筛选到2个SWPV基因组中可供外源蛋白插入的复制非必需区ORF121和ORF143,为构建SWPV基因工程载体奠定了基础。
关键词
重组猪痘病毒(rSWPV)
重叠延伸PCR
复制非必需区
生物学特性
Keywords
recombinant swinepox virus(rSWPV)
splicing by overlap extension PCR
replication non-essential regions
biological characteristics
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
6株猪源芽孢杆菌的分离鉴定及其益生性研究
钟
罗华
邓舜洲
张文波
高洋根
薛瑞
罗锋
汪建中
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2017
15
下载PDF
职称材料
2
表达猪圆环病毒2型衣壳蛋白的重组猪痘病毒的构建及鉴定
钟
罗华
邓舜洲
胡杨
徐昌满
罗锋
张文波
陈松昌
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2018
6
下载PDF
职称材料
3
猪痘病毒TK、ORF121、ORF143基因缺失毒株的 构建及其生物学特性的测定
刘昌锦
邓舜洲
罗锋
钟
罗华
王喆
高映雪
刘小兰
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2020
3
下载PDF
职称材料
已选择
0
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