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抗CD3单克隆抗体重、轻链可变区基因的克隆及序列分析
1
作者
张囡
陈明洁
+6 位作者
陈敬
金海陵
张爱华
闭兰
左建民
王志友
史良如
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第9期608-610,共3页
目的 :抗CD3单克隆抗体 (WuT3)可变区基因克隆及序列分析。方法 :采用RT PCR技术 ,从WuT3杂交瘤细胞总RNA中扩增VH 、VL 片段 ,经酶切后通过链接反应构建重组克隆载体 ,测序鉴定。结果 :通过国际联机检索发现VH 、VL 基因与Ig同源 ,分...
目的 :抗CD3单克隆抗体 (WuT3)可变区基因克隆及序列分析。方法 :采用RT PCR技术 ,从WuT3杂交瘤细胞总RNA中扩增VH 、VL 片段 ,经酶切后通过链接反应构建重组克隆载体 ,测序鉴定。结果 :通过国际联机检索发现VH 、VL 基因与Ig同源 ,分别符合小鼠IgVH 、Vκ基因特征。VH 基因属于鼠重链VH 第IIB亚类 ,全长 36 3bp ,可编码 12 1个氨基酸 ;VL 基因属于鼠κ轻链第III亚类 ,全长 330bp ,可编码 110个氨基酸。结论 :成功获得WuT3单抗的重、轻链可变区基因。
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关键词
McAb
WuT3
基因克隆
DNA序列分析
抗CD3单克隆抗体
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职称材料
抗人CD3单链抗体的构建、表达及纯化
2
作者
张会平
江洪
+3 位作者
黄晓华
金海陵
史良如
陈敬
《上海免疫学杂志》
CSCD
北大核心
1998年第5期277-279,282,共4页
采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从鼠抗人CD3杂交瘤细胞WuT3中扩增克隆出抗体重、轻链可变区基因,测序结果证实:V_H属鼠抗体重链可变区亚组Ⅱ(β)、V_L属鼠抗体Kappa轻链可变区亚组Ⅵ.将V_H、V_L基因片段克隆到单链抗体表达载体POPE51...
采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从鼠抗人CD3杂交瘤细胞WuT3中扩增克隆出抗体重、轻链可变区基因,测序结果证实:V_H属鼠抗体重链可变区亚组Ⅱ(β)、V_L属鼠抗体Kappa轻链可变区亚组Ⅵ.将V_H、V_L基因片段克隆到单链抗体表达载体POPE51中,使V_H、V_L基因片段分别直接与一多肽连接子的两端相连,构建成单链抗体(ScFv)基因.克隆筛选证明,阳性克隆近100%.细菌用20μmol/L IPTG诱导培养,经固定金属离子亲和层析和分子筛凝胶过滤,从细胞间质中提取纯化ScFv,每升培养液可获得5mg纯度大于90%的ScFv.FACS活性检测结果表明,纯化的WuT3 ScFv与亲代结果一致.
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关键词
单链抗体
聚合酶链反应
基因表达
构建
纯化
原文传递
粘虫核型多角体病毒pdv-e66基因的序列测定及比较研究
3
作者
金天权
齐义鹏
+2 位作者
金海陵
黄永秀
苏霏
《武汉大学学报（自然科学版）》
CSCD
1998年第2期233-237,共5页
测定了ＬｓＮＰＶｐｄｖ－ｅ６６基因１８９６ｂｐ序列，与其它杆状病毒ｐｄｖ－ｅ６６基因进行了同源性比较，其与ＡｃＮＰＶｐｄｖ－ｅ６６基因核苷酸同源性为５１．９％，氨基酸同源性为３８．８％，分析指出，ＬｓＮＰＶｐｄｖ－ｅ...
测定了ＬｓＮＰＶｐｄｖ－ｅ６６基因１８９６ｂｐ序列，与其它杆状病毒ｐｄｖ－ｅ６６基因进行了同源性比较，其与ＡｃＮＰＶｐｄｖ－ｅ６６基因核苷酸同源性为５１．９％，氨基酸同源性为３８．８％，分析指出，ＬｓＮＰＶｐｄｖ－ｅ６６基因中有５个高度保守区和一个ＮＴＳ．５端具有典型的晚期基因启动子特征．
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关键词
pdv-e66
基因序列
粘虫
核型多角体病毒
病毒
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职称材料
粘虫核多角体病毒0.6kb SalI/HindⅢ片段序列的测定及分析
4
作者
李小锋
王家旺
+2 位作者
金海陵
黄永秀
齐义鹏
《病毒学报》
CAS
CSCD
北大核心
1996年第1期83-87,共5页
粘虫核多角体病毒０．６ｋｂＳａｌＩ／ＨｉｎｄⅢ片段序列的测定及分析李小锋，王家旺，金海陵，黄永秀，齐义鹏（武汉大学病毒研究所，武汉４３００７２）关键词粘虫，核多角体病毒，序列测定，早期基因核多角体病毒（Ｎｕｃｌｅａｒ...
粘虫核多角体病毒０．６ｋｂＳａｌＩ／ＨｉｎｄⅢ片段序列的测定及分析李小锋，王家旺，金海陵，黄永秀，齐义鹏（武汉大学病毒研究所，武汉４３００７２）关键词粘虫，核多角体病毒，序列测定，早期基因核多角体病毒（ＮｕｃｌｅａｒＰｌｏｙｈｅｄｒｏｓｉｓＶｉｒｕｓ...
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关键词
昆虫病毒
粘虫
核多角体病毒
序列测定
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职称材料
题名
抗CD3单克隆抗体重、轻链可变区基因的克隆及序列分析
1
作者
张囡
陈明洁
陈敬
金海陵
张爱华
闭兰
左建民
王志友
史良如
机构
武汉生物制品研究所免疫研究室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第9期608-610,共3页
文摘
目的 :抗CD3单克隆抗体 (WuT3)可变区基因克隆及序列分析。方法 :采用RT PCR技术 ,从WuT3杂交瘤细胞总RNA中扩增VH 、VL 片段 ,经酶切后通过链接反应构建重组克隆载体 ,测序鉴定。结果 :通过国际联机检索发现VH 、VL 基因与Ig同源 ,分别符合小鼠IgVH 、Vκ基因特征。VH 基因属于鼠重链VH 第IIB亚类 ,全长 36 3bp ,可编码 12 1个氨基酸 ;VL 基因属于鼠κ轻链第III亚类 ,全长 330bp ,可编码 110个氨基酸。结论 :成功获得WuT3单抗的重、轻链可变区基因。
关键词
McAb
WuT3
基因克隆
DNA序列分析
抗CD3单克隆抗体
Keywords
CD3 McAb WuT3 Gene cloning DNA sequence analysis
分类号
R392－33 [医药卫生—免疫学]
下载PDF
职称材料
题名
抗人CD3单链抗体的构建、表达及纯化
2
作者
张会平
江洪
黄晓华
金海陵
史良如
陈敬
机构
卫生部武汉生物制品研究所免疫学研究室
出处
《上海免疫学杂志》
CSCD
北大核心
1998年第5期277-279,282,共4页
文摘
采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从鼠抗人CD3杂交瘤细胞WuT3中扩增克隆出抗体重、轻链可变区基因,测序结果证实:V_H属鼠抗体重链可变区亚组Ⅱ(β)、V_L属鼠抗体Kappa轻链可变区亚组Ⅵ.将V_H、V_L基因片段克隆到单链抗体表达载体POPE51中,使V_H、V_L基因片段分别直接与一多肽连接子的两端相连,构建成单链抗体(ScFv)基因.克隆筛选证明,阳性克隆近100%.细菌用20μmol/L IPTG诱导培养,经固定金属离子亲和层析和分子筛凝胶过滤,从细胞间质中提取纯化ScFv,每升培养液可获得5mg纯度大于90%的ScFv.FACS活性检测结果表明,纯化的WuT3 ScFv与亲代结果一致.
关键词
单链抗体
聚合酶链反应
基因表达
构建
纯化
Keywords
single-chain Fv antibody
polymerase chain reaction
gene expression
immobilized metal affinity chromatography
size-exclusion chromatography
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
R329－33 [医药卫生—基础医学]
原文传递
题名
粘虫核型多角体病毒pdv-e66基因的序列测定及比较研究
3
作者
金天权
齐义鹏
金海陵
黄永秀
苏霏
机构
武汉大学病毒研究所
出处
《武汉大学学报（自然科学版）》
CSCD
1998年第2期233-237,共5页
基金
国家自然科学基金
文摘
测定了ＬｓＮＰＶｐｄｖ－ｅ６６基因１８９６ｂｐ序列，与其它杆状病毒ｐｄｖ－ｅ６６基因进行了同源性比较，其与ＡｃＮＰＶｐｄｖ－ｅ６６基因核苷酸同源性为５１．９％，氨基酸同源性为３８．８％，分析指出，ＬｓＮＰＶｐｄｖ－ｅ６６基因中有５个高度保守区和一个ＮＴＳ．５端具有典型的晚期基因启动子特征．
关键词
pdv-e66
基因序列
粘虫
核型多角体病毒
病毒
Keywords
LsNPV pdv e66,sequencing,AcNPV
分类号
Q965.8 [生物学—昆虫学]
Q939.44
下载PDF
职称材料
题名
粘虫核多角体病毒0.6kb SalI/HindⅢ片段序列的测定及分析
4
作者
李小锋
王家旺
金海陵
黄永秀
齐义鹏
机构
武汉大学病毒研究所
出处
《病毒学报》
CAS
CSCD
北大核心
1996年第1期83-87,共5页
基金
国家自然科学基金
博士点基金
文摘
粘虫核多角体病毒０．６ｋｂＳａｌＩ／ＨｉｎｄⅢ片段序列的测定及分析李小锋，王家旺，金海陵，黄永秀，齐义鹏（武汉大学病毒研究所，武汉４３００７２）关键词粘虫，核多角体病毒，序列测定，早期基因核多角体病毒（ＮｕｃｌｅａｒＰｌｏｙｈｅｄｒｏｓｉｓＶｉｒｕｓ...
关键词
昆虫病毒
粘虫
核多角体病毒
序列测定
Keywords
: Leucania separata, Neuclear Polyhedrosis Virus,Sequencing, Early gene(Institute of Plant Quaranting, Ministry of Agriculture. Beijing 100029.) (National Laboratory for Aguo-biotechnology of Beijing Agricltural University, Beijing 100094)
分类号
Q965.8 [生物学—昆虫学]
S476.13 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗CD3单克隆抗体重、轻链可变区基因的克隆及序列分析
张囡
陈明洁
陈敬
金海陵
张爱华
闭兰
左建民
王志友
史良如
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002
0
下载PDF
职称材料
2
抗人CD3单链抗体的构建、表达及纯化
张会平
江洪
黄晓华
金海陵
史良如
陈敬
《上海免疫学杂志》
CSCD
北大核心
1998
0
原文传递
3
粘虫核型多角体病毒pdv-e66基因的序列测定及比较研究
金天权
齐义鹏
金海陵
黄永秀
苏霏
《武汉大学学报（自然科学版）》
CSCD
1998
0
下载PDF
职称材料
4
粘虫核多角体病毒0.6kb SalI/HindⅢ片段序列的测定及分析
李小锋
王家旺
金海陵
黄永秀
齐义鹏
《病毒学报》
CAS
CSCD
北大核心
1996
0
下载PDF
职称材料
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