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钩吻生物碱对肺癌的抑制作用及其机制
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作者 金明静 李艳萍 +3 位作者 周欢思 王彬睿 吴卓玲 卢春花 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第23期2629-2641,共13页
目的 探讨钩吻素子(koumine,KOU)及钩吻总生物碱(total alkaloids of Gelsemium elegans Benth,TAG)抗肺癌的作用及其机制。方法 采用活细胞动态分析系统、集落形成实验研究低、中、高浓度(100、150、200μg/mL)KOU对人肺腺癌细胞A549、... 目的 探讨钩吻素子(koumine,KOU)及钩吻总生物碱(total alkaloids of Gelsemium elegans Benth,TAG)抗肺癌的作用及其机制。方法 采用活细胞动态分析系统、集落形成实验研究低、中、高浓度(100、150、200μg/mL)KOU对人肺腺癌细胞A549、SPCA1的增殖作用。构建肺癌细胞小鼠移植瘤模型,分为模型组(Model组)、环磷酰胺组(CTX组,剂量为20 mg/kg)、KOU组(剂量为2 mg/kg)和TAG组(剂量为0.5 mg/kg),CTX组和KOU、TAG组按0.1 mL/10 g隔天腹腔注射,给药10 d检测KOU和TAG对肺癌实体瘤生长的作用,采用HE、免疫组化(immunohistochemistry,IHC)及TUNEL染色观察肿瘤组织,并计算肿瘤体积和肿瘤抑制率。对TAG作用48 h的A549细胞进行RNA测序分析,筛选差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),并进行KEGG(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)和GO(Gene Ontology,GO)功能富集分析。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,real-time-qPCR)进一步分析验证相关基因的表达。结果 活细胞动态分析系统拟合出A549、SPCA1细胞融合度下降,细胞数目减少,生长状态变差。集落形成实验结果证实KOU使细胞克隆数目形成减少,在高浓度200μg/mL时最为显著(P<0.01)。动物实验表明KOU组、TAG组的肿瘤抑制率依次可达24.55%、36.08%,与Model组相比,TAG组肿瘤体积显著下降(P<0.05)。RNA测序分析筛选出DEGs总数为2 793个,其中上调基因1 433个,下调基因1 360个。富集分析发现DEGs主要富集于IL-17信号通路、肿瘤坏死因子信号通路及p53信号通路等。RT-qPCR验证结果与RNA测序分析结果一致,GADD34、ZFP36、GADD45A、GADD45B、TP53INP2基因在TAG组显著表达增加(P<0.01)。结论 在体内、外水平钩吻生物碱均抑制肺癌增殖,转录组学发现其抑制肺癌作用的多个DEGs和通路。 展开更多
关键词 钩吻 生物碱 肺癌 转录组学 细胞增殖
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消瘤藤乙酸乙酯提取物对结直肠癌细胞增殖、凋亡及Bax/Bcl-2/Caspase-3信号通路的影响
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作者 周欢思 李艳萍 +3 位作者 金明静 赵湘培 赵昱倩 卢春花 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第10期1767-1773,共7页
目的:研究消瘤藤乙酸乙酯提取物(XLTE)对人结直肠癌HCT116和HT29细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响,并探索其与Bax/Bcl-2/Caspase-3信号通路的关系。方法:通过Incucyte S3活细胞动态分析系统监测XLTE作用下HCT116和HT29细胞形态变化并拟合... 目的:研究消瘤藤乙酸乙酯提取物(XLTE)对人结直肠癌HCT116和HT29细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响,并探索其与Bax/Bcl-2/Caspase-3信号通路的关系。方法:通过Incucyte S3活细胞动态分析系统监测XLTE作用下HCT116和HT29细胞形态变化并拟合48 h的IC50值,采用CCK-8实验、集落形成实验、细胞周期实验检测细胞增殖能力;通过Hoechst 33258染色、Rhodamine 123染色和Western blot检测细胞凋亡情况和Bax、Bcl-2、Caspase-3基因的表达。结果:XLTE可以抑制HCT116、HT29细胞增殖,48 h的IC50分别为567μg/mL和549μg/mL,XLTE作用下细胞周期主要阻滞在G0/G1期,并促进细胞凋亡,细胞染色质发生固缩或断裂,线粒体膜电位降低,Bax、Caspase-3基因的表达量增加,Bcl-2基因的表达量降低。结论:研究表明XLTE抑制人结直肠癌HCT116、HT29细胞增殖并促进细胞凋亡,与阻滞细胞周期在G0/G1期和激活Bax/Bcl-2/Caspase-3通路有关。 展开更多
关键词 消瘤藤 结直肠癌 细胞周期 线粒体膜电位 细胞凋亡
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钩吻总碱对肺腺癌细胞增殖和凋亡作用的研究
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作者 金明静 李艳萍 +3 位作者 周欢思 杨梅 赵昱倩 卢春花 《中国现代医学杂志》 CAS 2024年第9期30-38,共9页
目的 以人肺腺癌细胞(A549、SPCA1)为研究对象,通过在培养液中加入不同浓度的钩吻总碱(TAG)研究其抗肿瘤作用。方法 采用加热回流、萃取等方法提取TAG,利用薄层色谱法鉴定TAG的提取,通过Incucyte S3活细胞动态分析系统拟合不同浓度的TA... 目的 以人肺腺癌细胞(A549、SPCA1)为研究对象,通过在培养液中加入不同浓度的钩吻总碱(TAG)研究其抗肿瘤作用。方法 采用加热回流、萃取等方法提取TAG,利用薄层色谱法鉴定TAG的提取,通过Incucyte S3活细胞动态分析系统拟合不同浓度的TAG作用A549、SPCA1细胞的细胞融合度并观察A549、SPCA1细胞的形态,采用CCK-8法、集落形成实验检测细胞增殖,Hoechst33258染色、Rhodamine123染色检测细胞凋亡,碘化丙啶单染法检测细胞周期,Western blotting检测凋亡指标蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达。结果 经薄层色谱法鉴定成功提取TAG。Incucyte S3活细胞动态分析系统拟合出TAG作用A549、SPCA1细胞的EC50值分别是99.2、82.0μg/mL,由此确定TAG作用A549、SPCA1细胞的低、中、高浓度依次为50、100、150μg/mL,且细胞拍照观察到随着药物浓度增加细胞融合度下降、细胞数目减少。CCK-8法和集落形成实验结果表明TAG抑制A549、SPCA1细胞增殖(P <0.05)。Hoechst 33258细胞核染色实验发现给药组细胞出现核碎裂;流式细胞术检测Rhodamine123探针发现给药组出现荧光信号强度增加,检测细胞周期发现TAG使A549、SPCA1细胞周期阻滞在G_2/M期;Western blot结果显示TAG诱导Bcl-2蛋白表达下调,Bax表达上调、Caspase-3蛋白切割活化增加,通过细胞染色实验、流式细胞术及Western blotting表明TAG促进A549、SPCA1细胞凋亡(P <0.05)。结论 TAG抑制肺腺癌细胞增殖,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 肺腺癌 钩吻总碱 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期
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