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虚拟仿真实验平台在生物技术专业本科实践教学中的应用 被引量:19
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作者 杨丽萍 赵永斌 《长春师范大学学报》 2019年第2期139-140,共2页
在高校中开展虚拟仿真实验教学是教育信息化的重要表现。本文阐述了在高校生物实践教学中开展虚拟仿真教学的必要性、优势及作用,并针对虚拟仿真教学中存在的几个共性问题,提出相应的解决策略。
关键词 教育信息化 虚拟仿真 实践教学
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植物中瞬时表达外源基因的新型侵染技术 被引量:13
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作者 杨丽萍 +2 位作者 徐洪伟 李华 周晓馥 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期111-117,共7页
由于瞬时表达系统的局限性使其不利于规模化生产的应用,本文介绍了一种新型的瞬时表达侵染技术—种子吸收法在植物中进行外源蛋白的表达。利用种子自然吸收来源于TMV病毒载体的农杆菌重悬液在番茄中成功的表达了报告基因GFP,并优化了影... 由于瞬时表达系统的局限性使其不利于规模化生产的应用,本文介绍了一种新型的瞬时表达侵染技术—种子吸收法在植物中进行外源蛋白的表达。利用种子自然吸收来源于TMV病毒载体的农杆菌重悬液在番茄中成功的表达了报告基因GFP,并优化了影响基因表达的各种因素,包括菌液重悬液浓度和其他侵染条件。与其它侵染方法相比,该方法具有独特优势,如操作过程简便,有利于外源蛋白的规模化生产,并能够进一步扩大植物生物反应器的宿主范围。我们推测种子吸收法将有利于重组药用蛋白在植物中的工业规模化生产。 展开更多
关键词 植物生物反应器 瞬时表达系统 种子吸收法 GFP
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利用农杆菌侵染新技术在豌豆中瞬时表达ha FGF 被引量:9
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作者 杨丽萍 周晓馥 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期71-75,共5页
采用一种操作简单的侵染方法,通过豌豆种子吸收携带病毒载体PEBV的农杆菌菌液进行ha FGF蛋白的表达,并采用半定量RT-PCR、Western blotting和考马斯亮蓝法对蛋白表达的结果进行定量分析。结果表明,利用来源于PEBV的病毒载体在豌豆(Pisum... 采用一种操作简单的侵染方法,通过豌豆种子吸收携带病毒载体PEBV的农杆菌菌液进行ha FGF蛋白的表达,并采用半定量RT-PCR、Western blotting和考马斯亮蓝法对蛋白表达的结果进行定量分析。结果表明,利用来源于PEBV的病毒载体在豌豆(Pisum sativumL.)中成功表达了GFP和ha FGF蛋白,对菌液浓度等条件的优化显著提高了GFP的表达效率,植物中药用蛋白ha FGF的表达水平占总可溶性蛋白的2.6%。该瞬时表达体系具有独特优势,如简便、高效、表达稳定,在生产药用蛋白方面具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 人酸性成纤维细胞生长因子 种子吸收法 豌豆早褐病毒 绿色荧光蛋白
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非生物胁迫处理后拟南芥过氧化氢含量变化的分析 被引量:5
4
作者 杨丽萍 韩晗 +3 位作者 石淼 闵菲 丁晓月 《吉林师范大学学报(自然科学版)》 2022年第1期107-110,共4页
干旱、低温、盐胁迫和重金属污染等非生物胁迫,对植物的生长发育会产生严重的抑制作用.在这些条件下,植物细胞内各种代谢过程会有一定程度的受损或不工作,将会导致活性氧(Reactive oxygen species,ROS)在植物体内过量积累.过氧化氢是植... 干旱、低温、盐胁迫和重金属污染等非生物胁迫,对植物的生长发育会产生严重的抑制作用.在这些条件下,植物细胞内各种代谢过程会有一定程度的受损或不工作,将会导致活性氧(Reactive oxygen species,ROS)在植物体内过量积累.过氧化氢是植物体内中最稳定形式的活性氧之一,植物体内积累过量的过氧化氢会严重威胁植物细胞的膜系统.在本实验中,选取了野生型拟南芥(Arabidopsis thaliana)为材料,分别进行低温处理、盐处理和干旱处理,并通过对未处理的和非生物胁迫处理的植物中过氧化氢含量变化进行比较分析.实验结果表明,胁迫处理后,拟南芥植物体内的过氧化氢含量不同程度地增加,为深入研究植物对逆境响应的分子机制奠定研究基础. 展开更多
关键词 非生物胁迫 拟南芥 过氧化氢含量
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利用AH1基因的遗传转化改良紫花苜蓿耐盐性 被引量:6
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作者 孟大伟 +1 位作者 王悦 杨丽萍 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1724-1729,共6页
由于盐胁迫严重限制了苜蓿的产量,研究构建了沙打旺(Astragalus adsurgens Pall)解螺旋酶基因AH1的植物表达载体p Cambia-AH1,并利用农杆菌介导法将目的基因转化到紫花苜蓿(Medicago sativa L.)中,旨在获得抗盐胁迫能力强的转基因植株... 由于盐胁迫严重限制了苜蓿的产量,研究构建了沙打旺(Astragalus adsurgens Pall)解螺旋酶基因AH1的植物表达载体p Cambia-AH1,并利用农杆菌介导法将目的基因转化到紫花苜蓿(Medicago sativa L.)中,旨在获得抗盐胁迫能力强的转基因植株。半定量RT-PCR检测和Northern杂交表明AH1基因在5个转基因株系中稳定表达。在盐胁迫条件下,与野生型对照植株相比,AH1转基因株系对中度盐胁迫(200 mmol/L Na Cl)具有较强的耐受性。而且,在中度盐胁迫条件下(200 mmol/L Na Cl),转基因植株累积了大量的游离脯氨酸和可溶糖。研究表明AH1基因可以改善植物盐渗透调节能力,从而导致了AH1转基因植株的抗盐胁迫能力的提高。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 AH1 转基因苜蓿 耐盐性
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“问题式”教学法培养学生生命观念的运用——以高中生物“细胞呼吸的原理和应用”一节为例
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作者 张琬羚 杨丽萍 《国外畜牧学(猪与禽)》 2024年第4期83-85,共3页
生命观念是生物学学科核心素养的基础与标志,文章以“细胞呼吸的原理和应用”一节为例,合理运用问题式教学法,通过采用设计问题,创设情景,社会议题等方法,有助于培养学生发散性思维,引导他们思考社会问题,培养学生的生命观念。
关键词 高中生物 生命观念 问题式教学法
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利用根部真空侵染法在烟草中瞬时表达外源蛋白 被引量:5
7
作者 杨丽萍 许亚男 +2 位作者 刘雨晴 孟大伟 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期3385-3389,共5页
由于植物瞬时表达系统具有经济、安全、快速、高效的特殊优势,已经成为药用蛋白表达和生产的最理想的"分子工厂"。我们利用根部真空侵染法在烟草(Nicotiana tabatum L.)中瞬时表达了报告基因GFP,并利用半定量RT-PCR和Western ... 由于植物瞬时表达系统具有经济、安全、快速、高效的特殊优势,已经成为药用蛋白表达和生产的最理想的"分子工厂"。我们利用根部真空侵染法在烟草(Nicotiana tabatum L.)中瞬时表达了报告基因GFP,并利用半定量RT-PCR和Western Blot对外源蛋白的表达水平进行了分子水平上的检测。结果表明外源蛋白GFP在烟草(N.tabacum)中成功获得了表达。此外,我们优化了新表达体系的各种侵染条件,为利用新型生物技术生产药用蛋白提供了帮助。 展开更多
关键词 烟草 绿色荧光蛋白 药用蛋白 根部真空侵染技术
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农杆菌介导大豆遗传转化新技术的建立及优化 被引量:1
8
作者 石淼 韩晗 +6 位作者 陈玥 刘涵玉 林姝含 丁晓月 闵菲 杨丽萍 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2023年第16期5295-5300,共6页
农杆菌介导的植物稳定遗传转化在提高作物产量、质量及其抗逆性的分子育种中起到至关重要的作用。转基因大豆育种的遗传转化主要通过组织培养的方法获得。由于组织培养法具有实验周期长、容易污染和转化效率低的局限性,本研究在大豆(Gly... 农杆菌介导的植物稳定遗传转化在提高作物产量、质量及其抗逆性的分子育种中起到至关重要的作用。转基因大豆育种的遗传转化主要通过组织培养的方法获得。由于组织培养法具有实验周期长、容易污染和转化效率低的局限性,本研究在大豆(Glycine max(Linn.)Merr.)中建立并优化了一种新的快速、高效的稳定遗传转化体系,即农杆菌介导的发芽种子真空侵染法。本研究利用这种新体系完成了β-葡萄糖苷酸酶(β-glucuronidase,GUS)在大豆(Glycine max(Linn.)Merr.)品种‘沈农9号’中的表达;同时,还完成了农杆菌菌液浓度和真空侵染条件的优化。当真空侵染压强为0.08 MPa,农杆菌重悬液浓度OD_(600)为2.0时,稳定遗传转化效率达到10%。GUS化学组织染色检测结果表明,转基因T_(1)代中获得16个GUS转基因大豆植株。半定量RT-PCR结果表明,在T_(2)代转基因植株中GUS基因获得了稳定表达。本研究建立的体系具有快速、操作简单和遗传转化效率较高的优势,为大豆稳定遗传转化研究提供了新的技术方法。 展开更多
关键词 大豆 稳定遗传转化 发芽种子真空侵染法 β-葡萄糖苷酸酶
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以创新创业能力培养为目标的实践教学体系改革 被引量:1
9
作者 杨丽萍 +1 位作者 赵永斌 朴京培 《赤峰学院学报(自然科学版)》 2023年第9期82-84,共3页
创新是引领发展的第一动力,创新创业实践教学是大学生创新创业教育培训的关键环节。目前,高校专业创新创业实践教学存在教学目标不明确,课程体系不系统,评价体系不完善,专业实践教育与创新创业教育割裂等问题。为解决上述问题,提高学生... 创新是引领发展的第一动力,创新创业实践教学是大学生创新创业教育培训的关键环节。目前,高校专业创新创业实践教学存在教学目标不明确,课程体系不系统,评价体系不完善,专业实践教育与创新创业教育割裂等问题。为解决上述问题,提高学生创新能力,吉林师范大学生物技术专业从健全实践教学课程体系,整合创新平台,转变教学理念,改革教学方法和考核方式,加强师资队伍建设等方面进行探索,取得了较好的成效,为高校探索创新创业人才培养进行了有益尝试。 展开更多
关键词 创新创业 实践教学 生物技术
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非生物胁迫诱导拟南芥中防御基因表达的分子机制
10
作者 闵菲 +4 位作者 李一荻 丁晓月 韩晗 石淼 杨丽萍 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期60-65,共6页
以缺水处理、低温胁迫和盐胁迫的拟南芥(Arabidopsis thaliana)植物作为试验材料,采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(RT-qPCR),检测水杨酸(SA)途径调控基因AtACD6和下游防御基因AtPR5的表达水平。分析结果证实了非生物胁迫处理的植物... 以缺水处理、低温胁迫和盐胁迫的拟南芥(Arabidopsis thaliana)植物作为试验材料,采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(RT-qPCR),检测水杨酸(SA)途径调控基因AtACD6和下游防御基因AtPR5的表达水平。分析结果证实了非生物胁迫处理的植物中这些防御基因的表达水平明显增加。亚硫酸盐测序结果证明非生物胁迫诱导AtACD6基因启动子区域的DNA去甲基化,导致该基因的转录激活。进一步研究证实,沉默抑制因子1(ROS1)介导的DNA去甲基化,在低温诱导AtACD6基因表达的过程中起重要作用。揭示了植物水杨酸途径防御基因应答非生物胁迫相关的分子机制中ROS1起重要作用,为探索植物适应不利环境的表观调控机制提供参考。 展开更多
关键词 非生物胁迫 水杨酸 拟南芥 沉默抑制因子
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苜蓿次生胚遗传转化系统优化 被引量:4
11
作者 王悦 +2 位作者 吴艳菊 孟大伟 杨丽萍 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第20期6685-6690,共6页
稳定高效的遗传转化系统是对苜蓿进行基因改良的重要前提条件。本实验以吉林省适产苜蓿品种为实验材料,对农杆菌介导的次生胚遗传转化系统中的各种关键影响因素进行了优化:胚性愈伤诱导培养基中2,4-D和KT的最适浓度分别为2 mg/L和0.5 mg... 稳定高效的遗传转化系统是对苜蓿进行基因改良的重要前提条件。本实验以吉林省适产苜蓿品种为实验材料,对农杆菌介导的次生胚遗传转化系统中的各种关键影响因素进行了优化:胚性愈伤诱导培养基中2,4-D和KT的最适浓度分别为2 mg/L和0.5 mg/L;体胚分化培养基中6-BA和NAA的最适浓度均为0.5 mg/L;该法最适受体基因型为公农系列苜蓿品种;遗传转化过程中,胚性愈伤诱导培养基及体胚分化培养基中添加的卡那霉素浓度分别为75 mg/L和50 mg/L。通过GUS基因表达检测和定量RT-PCR分析表明,外源基因已经顺利整合进苜蓿基因组染色体中,遗传转化效率为20%左右。本实验为培育吉林省转基因苜蓿新品种工作提供了科学依据。 展开更多
关键词 苜蓿(Medicago SATIVA L.) 遗传转化 次生胚
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植物败育机理的研究进展
12
作者 丁晓月 +2 位作者 闵菲 李一荻 杨丽萍 《吉林师范大学学报(自然科学版)》 2023年第2期113-116,共4页
雄性不育是导致植物败育的一种普遍现象.植物败育遗传机制的研究能够为深入认识植物败育的发生过程及其相关应用提供重要的理论依据.本文重点概述了植物雄性不育的分子机理、植物败育的影响因子和植物败育的分子机制,并介绍了胚败育的... 雄性不育是导致植物败育的一种普遍现象.植物败育遗传机制的研究能够为深入认识植物败育的发生过程及其相关应用提供重要的理论依据.本文重点概述了植物雄性不育的分子机理、植物败育的影响因子和植物败育的分子机制,并介绍了胚败育的遗传机制和相关不育基因的研究进展,以期为未来更深入探究植物雄性败育机制和利用雄性不育进行作物育种提供参考. 展开更多
关键词 雄性不育 生长素 转录因子TCP
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种子真空侵染法遗传转化体系的建立与优化 被引量:4
13
作者 杨丽萍 王悦 +2 位作者 孟大伟 吴艳菊 《延边大学农学学报》 2019年第1期58-61,共4页
针对植物遗传转化体系中周期长、表达效率低等的局限性,在拟南芥中建立并优化了一种新的遗传转化体系,称为发芽种子真空侵染法。以发芽种子作为真空侵染的材料,在拟南芥中成功地表达了β-葡萄糖苷酸酶(β-Glucuronidase,GUS),并对影响... 针对植物遗传转化体系中周期长、表达效率低等的局限性,在拟南芥中建立并优化了一种新的遗传转化体系,称为发芽种子真空侵染法。以发芽种子作为真空侵染的材料,在拟南芥中成功地表达了β-葡萄糖苷酸酶(β-Glucuronidase,GUS),并对影响基因表达的侵染条件进行了优化。结果表明:当农杆菌细胞浓度(OD600)为1.2,真空泵的压强为0.07 MPa时,植物中GUS基因的表达效率更高。RT-PCR检测结果表明,利用这种体系在紫花苜蓿(Medicago sativa L.)中有效表达了外源基因GUS。这种体系具有快速和高效的优势,为农杆菌介导的植物遗传转化体系提供了新的途径。 展开更多
关键词 发芽种子真空侵染 稳定转化体系 β-葡萄糖苷酸酶 拟南芥
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拟南芥植物中ROS1介导AtGSTF14基因的DNA去甲基化
14
作者 闵菲 +4 位作者 李一荻 丁晓月 韩晗 石淼 杨丽萍 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2023年第18期6031-6036,共6页
植物中沉默抑制因子(repressor of silencing 1, ROS1)能够主动去除DNA甲基化,并负调控RNA介导的DNA去甲基化(RdDM)途径。本试验重点研究非生物胁迫诱导抗逆基因AtGSTF14表达的分子机制。定量PCR (quantitative PCR, qPCR)检测结果表明... 植物中沉默抑制因子(repressor of silencing 1, ROS1)能够主动去除DNA甲基化,并负调控RNA介导的DNA去甲基化(RdDM)途径。本试验重点研究非生物胁迫诱导抗逆基因AtGSTF14表达的分子机制。定量PCR (quantitative PCR, qPCR)检测结果表明非生物胁迫处理后拟南芥(Arabidopsis thaliana)植物中AtGSTF14基因表达显著上调。DNA测序结果证明非生物胁迫诱导AtGSTF14基因启动子区域DNA去甲基化。研究证实ROS1介导的DNA去甲基化在低温胁迫诱导AtGSTF14基因转录表达的过程中起重要作用,为植物适应环境的表观调控机制探索提供了研究基础。 展开更多
关键词 拟南芥 非生物胁迫 沉默抑制因子1
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玉米种子消毒条件的优化及成熟胚愈伤组织诱导的研究 被引量:4
15
作者 王洪振 陈徐 +4 位作者 黄二冲 程军 周晓馥 刘春明 《吉林师范大学学报(自然科学版)》 2014年第4期91-94,共4页
平育2B、神50、神56三种玉米种子,分别用2%次氯酸钠溶液进行不同时间的消毒处理,目的是优化以次氯酸钠为消毒剂的玉米种子消毒条件.结果表明,优化后的消毒条件分别是2%次氯酸钠溶液处理玉米种子平玉2B 8分钟,处理玉米种子神50 8分钟,处... 平育2B、神50、神56三种玉米种子,分别用2%次氯酸钠溶液进行不同时间的消毒处理,目的是优化以次氯酸钠为消毒剂的玉米种子消毒条件.结果表明,优化后的消毒条件分别是2%次氯酸钠溶液处理玉米种子平玉2B 8分钟,处理玉米种子神50 8分钟,处理玉米种子神56 10分钟.以此优化后的消毒条件处理玉米种子神56,在成熟胚诱导培养基上成功诱导出愈伤组织,在k3玉米成熟胚诱导培养基上诱导效果较好. 展开更多
关键词 玉米 种子 消毒条件 组织培养
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拟南芥中AtACO3基因启动子DNA甲基化的调控机制
16
作者 李一荻 +4 位作者 丁晓月 石淼 闵菲 韩晗 杨丽萍 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2023年第20期6739-6745,共7页
RNA介导的DNA甲基化途径(RdDM)在基因表达调控过程中起重要作用。沉默抑制因子(repressor of silencing 1,ROS1)能负调控RdDM途径。定量RT-PCR(quantitative RT-PCR,RT-qPCR)被利用检测拟南芥(Arabidopsis thaliana)中ABA途径相关基因At... RNA介导的DNA甲基化途径(RdDM)在基因表达调控过程中起重要作用。沉默抑制因子(repressor of silencing 1,ROS1)能负调控RdDM途径。定量RT-PCR(quantitative RT-PCR,RT-qPCR)被利用检测拟南芥(Arabidopsis thaliana)中ABA途径相关基因AtACO3表达水平,结果表明非生物胁迫诱导后AtACO3表达水平显著上调。重亚硫酸盐测序结果证明非生物胁迫诱导该基因启动子重复序列的DNA去甲基化,并导致该基因的转录激活。进一步研究证实ROS1在诱导该基因启动子DNA去甲基化的过程中起作用。本研究揭示了非生物胁迫诱导逆境响应基因AtACO3表达的分子机制,为探索植物适应非生物胁迫的表观遗传调控机制提供了科学依据。 展开更多
关键词 DNA去甲基化 拟南芥 沉默抑制因子1
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“互联网+”背景下师范类专业教育实践的困境与发展趋势
17
作者 赵永斌 邱美玲 +2 位作者 郝亚南 王秀文 《中国新通信》 2023年第14期168-170,共3页
教育实践在师范专业人才培养过程中扮演着重要角色,备受大家重视。为了促进教育实践的发展,大学、政府和中小学三方联合,形成了协同育人机制。然而,受诸多因素影响,当前师范类专业实践教学仍面临诸多问题。本文从实际出发,探讨了师范类... 教育实践在师范专业人才培养过程中扮演着重要角色,备受大家重视。为了促进教育实践的发展,大学、政府和中小学三方联合,形成了协同育人机制。然而,受诸多因素影响,当前师范类专业实践教学仍面临诸多问题。本文从实际出发,探讨了师范类专业教育实践的困境,结合信息技术与教学融合的发展前景,初步分析了师范类专业教育实践发展的机遇,以期为相关研究提供一定参考。 展开更多
关键词 教育实践 信息技术 三位一体协同育人
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非生物胁迫激活ABA途径ACO3基因的表达 被引量:3
18
作者 郎晨婧 +3 位作者 孟大伟 王悦 吴艳菊 杨丽萍 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第16期5330-5334,共5页
DNA甲基化在植物生长发育和应答非生物胁迫过程中起重要作用。本研究揭示了ABA途径相关基因ACO3应答非生物胁迫的分子机制。定量PCR (quantitative PCR, qPCR)的检测结果表明用野生型拟南芥(Col-0)作对照,被干旱、低温和盐处理的拟南芥... DNA甲基化在植物生长发育和应答非生物胁迫过程中起重要作用。本研究揭示了ABA途径相关基因ACO3应答非生物胁迫的分子机制。定量PCR (quantitative PCR, qPCR)的检测结果表明用野生型拟南芥(Col-0)作对照,被干旱、低温和盐处理的拟南芥植物中ACO3基因表达水平显著增加。重亚硫酸盐测序的数据分析表明非生物胁迫能够诱导ACO3启动子DNA去甲基化并激活该基因的表达。RNA介导的DNA甲基化(RNA directed DNA methylation, RdDM)途径突变体ago4和dcl3中ACO3基因表达水平明显增加,暗示RdDM途径在调控ACO3基因应答非生物胁迫过程中起重要作用。 展开更多
关键词 非生物胁迫 RNA介导的DNA甲基化 拟南芥
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利用叶片真空侵染法表达外源蛋白GFP 被引量:3
19
作者 孟大伟 +4 位作者 刘璐 廖艺红 张爽 罗佳尧 杨丽萍 《吉林农业科技学院学报》 2015年第4期40-42,共3页
植物瞬时表达系统已经成为近些年来国内外的研究热点之一,该表达系统主要的侵染技术为叶片注射法和真空侵染法。本研究成功构建了植物瞬时表达载体p35S-30B-GFP,并利用叶片真空侵染技术在烟草中表达外源基因GFP的研究,RT-PCR检测结果说... 植物瞬时表达系统已经成为近些年来国内外的研究热点之一,该表达系统主要的侵染技术为叶片注射法和真空侵染法。本研究成功构建了植物瞬时表达载体p35S-30B-GFP,并利用叶片真空侵染技术在烟草中表达外源基因GFP的研究,RT-PCR检测结果说明我们成功地表达了外源基因GFP。研究中对植物瞬时表达体系进行了优化试验,为植物中进行外源蛋白的快速表达奠定了研究基础。 展开更多
关键词 烟草 瞬时表达 烟草花叶病毒 绿色荧光蛋白
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新时代高校教学秘书岗位定位与工作方法探究 被引量:3
20
作者 郝亚南 赵永斌 +1 位作者 易国栋 《通化师范学院学报》 2021年第11期123-127,共5页
教学秘书是高校教学管理体系的组成部分,是保障教学高效运行的中坚力量。在当前高校内涵式发展和信息技术与教育教学深度融合的新形势下,高校教学秘书工作面临更多要求和更高挑战,要使教学秘书队伍真正融入到人才培养体系当中,教学秘书... 教学秘书是高校教学管理体系的组成部分,是保障教学高效运行的中坚力量。在当前高校内涵式发展和信息技术与教育教学深度融合的新形势下,高校教学秘书工作面临更多要求和更高挑战,要使教学秘书队伍真正融入到人才培养体系当中,教学秘书的工作方式也应该由传统的文件处理、消息传达转变为教学大数据整理与分析,并努力从事相关教学研究,实现教学秘书岗位定位和工作方法与新时代高校教育教学的契合。 展开更多
关键词 新时代 高校 教学秘书 岗位定位 工作方法
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