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抗人肺腺鳞癌单克隆抗体的研制 被引量：2
1
作者 沈琼 杨瑶琴 +3 位作者 郭虹汾 莫忠根 朱明洁 李斯德 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期9-12,共4页
将人肺腺癌细胞ＳＰＣ、Ａ５４９、Ａ４２７序贯免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０融合。获得一株稳定分泌抗肺腺鳞癌单克隆抗体的杂交瘤细胞株──Ｓ５Ａ１０─２，制备了小鼠腹水抗体并进行了纯化，腹水效价... 将人肺腺癌细胞ＳＰＣ、Ａ５４９、Ａ４２７序贯免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０融合。获得一株稳定分泌抗肺腺鳞癌单克隆抗体的杂交瘤细胞株──Ｓ５Ａ１０─２，制备了小鼠腹水抗体并进行了纯化，腹水效价为１．０２×１０７，亚型测定为ＩｇＧ１．免疫组化分析ｓ５Ａ１０－２单抗与肺腺、鳞癌和肺鳞癌有较好的选择反应性，与正常组织无交叉反应，ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ测定Ｓ５Ａｌ０─２在ＳＰＣ细胞膜上的抗原分子量为４０Ｋｄ、５０Ｋｄ和８０Ｋｄ，在Ａ５４９，细胞膜上的抗原分子量为４３Ｋｄ，而与Ａ４２７细胞膜蛋白无明显反应。该抗体的亲和常数为８．４３×１０１０Ｍ－１，Ｓ５Ａ１０－２杂交瘤细胞株，经液氮冻存后复苏，其分泌抗体能力不受影响。 展开更多
关键词 肺肿瘤 腺癌 鳞癌 杂交瘤 抗体 单克隆抗体 研制
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免疫球蛋白变区基因的体外扩增及人－鼠嵌合抗体的表达 被引量：2
2
作者 刘健 潘志美 +2 位作者 郭虹汾 王斌 田培坤 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第3期264-269,共6页
应用聚合酶链反应法体外扩增抗人小细胞肺癌单克隆抗体的变区基因，经核苷酸序列分析，轻链变区基因为３２４ｂｐ，编码１０８个氨基酸；重链变区基因为３５１ｂｐ，编码１１７个氨基酸。将重链变区基因克隆至ｐＳＶ_２△ＨｇｐｔＨｕγ... 应用聚合酶链反应法体外扩增抗人小细胞肺癌单克隆抗体的变区基因，经核苷酸序列分析，轻链变区基因为３２４ｂｐ，编码１０８个氨基酸；重链变区基因为３５１ｂｐ，编码１１７个氨基酸。将重链变区基因克隆至ｐＳＶ_２△ＨｇｐｔＨｕγ_３质粒，经一系列克隆、筛选，得一插入方向正确的表达人－鼠嵌合重链抗体的载体－ｐＳＶ_２△Ｈｇｐｔ２Ｆ７ＶＨＨｕγ_３。用电穿孔方法将该质粒导入鼠源骨髓瘤细胞Ｊ５５８Ｌ，用霉酚酸进行初步筛选，最终用兔抗人免疫球蛋白ＩｇＧＦｃ片段的抗体筛选得七株阳性克隆，免疫印迹法结果表明在与人ＩｇＧ相同位置上有一阳性条带。 展开更多
关键词 免疫球蛋白 变区基因 人鼠嵌合抗体
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人─鼠抗人小细胞肺癌嵌合重链基因在小鼠骨髓瘤细胞中的表达
3
作者 郭虹汾 刘健 +3 位作者 潘志美 王斌 田培坤 李斯德 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期138-141,共4页
采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法获得小鼠抗人小细胞肺癌单克隆抗体的变区基因（ｃＤＮＡ），构建成含人──鼠抗人小细胞肺癌嵌合重链基因质粒（ｐＳＶ＿２△Ｈｇｐｔ２Ｆ＿７Ｖ＿ＨＨｕγ＿３）ＤＮＡ通过电脉冲介导基因转移的方法，... 采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法获得小鼠抗人小细胞肺癌单克隆抗体的变区基因（ｃＤＮＡ），构建成含人──鼠抗人小细胞肺癌嵌合重链基因质粒（ｐＳＶ＿２△Ｈｇｐｔ２Ｆ＿７Ｖ＿ＨＨｕγ＿３）ＤＮＡ通过电脉冲介导基因转移的方法，转染小鼠骨髓瘤细胞Ｊ５５８Ｌ，并经选择培养基筛选出含有构建质粒基因的克隆，进一步按ＥＬＩＳＡ方法测定细胞表面和培养上清液中嵌合重链抗体的表达效率，最终选出表达抗体效率较高的单克隆细胞株为５Ｃ＿２，１２Ｂ＿９，２９Ｃ＿６。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法检测证明，阳性克隆细胞总ＲＮＡ经电泳后在１８Ｓ附近处与鼠抗人小细胞肺癌单抗的重链变区ｃＤＮＡ探针有明显的阳性杂交带出现。细胞抽提蛋白经ＳＤＳ──ＰＡＧＥ电泳分离显示在正常人ＩｇＧ重链分子相当的位置有一清晰条带出现，分子量约为５８ＫＤ，免疫印迹方法同样检测出此条带特异他与兔抗人ＩｇＧ（重链特异）抗体反应，证实人──鼠抗人小细胞肺癌嵌合重链基因在小鼠骨髓癌细胞中表达成功。 展开更多
关键词 嵌合抗体 基因转移 肺肿瘤 癌
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人白细胞介素2(IL-2)对小鼠移植性Louis肺癌抑制作用的研究
4
作者 刘玉欣 杨瑶琴 +1 位作者 郭虹汾 吴朝庵 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 1990年第3期103-105,共3页
用特异抗原和植物凝集素刺激的T辅助淋巴细胞和用植物凝集素刺激的NK细胞能释放淋巴因子,其中的一种是IL-2。在IL-2存在时,体外培养入的外周血淋巴细胞或小鼠脾淋巴细胞能导致产生具有溶解各种新鲜或培养的肿瘤细胞群称为淋巴因子活化... 用特异抗原和植物凝集素刺激的T辅助淋巴细胞和用植物凝集素刺激的NK细胞能释放淋巴因子,其中的一种是IL-2。在IL-2存在时,体外培养入的外周血淋巴细胞或小鼠脾淋巴细胞能导致产生具有溶解各种新鲜或培养的肿瘤细胞群称为淋巴因子活化的杀伤细胞(LAK)。 展开更多
关键词 IL-2 肺癌 小鼠
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人－大鼠嵌合抗双滩病毒抗体重链基因重组表达质粒的构建
5
作者 程卫青 杨为松 +6 位作者 徐海峰 白雪帆 尚高峰 刘健 郭虹汾 张文祥 李斯德 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1994年第2期55-56,共2页
人－大鼠嵌合抗双滩病毒抗体重链基因重组表达质粒的构建程卫青，杨为松，徐海峰，白雪帆，尚高峰（第四军医大学唐都医院传染科西安７１００３２）刘健，郭虹汾，张文祥，李斯德（上海市肿瘤研究所免疫室，上海２０００３９）早在八十... 人－大鼠嵌合抗双滩病毒抗体重链基因重组表达质粒的构建程卫青，杨为松，徐海峰，白雪帆，尚高峰（第四军医大学唐都医院传染科西安７１００３２）刘健，郭虹汾，张文祥，李斯德（上海市肿瘤研究所免疫室，上海２０００３９）早在八十年代中期，国外就已开展了入－鼠嵌合... 展开更多
关键词 抗汉淮病毒 抗体 重链基因 质粒
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大鼠抗汉滩病毒单抗重链可变区基因的体外扩增、克隆和序列分析
6
作者 程卫青 杨为松 +5 位作者 徐海峰 白雪帆 尚高峰 刘健 郭虹汾 李斯德 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1994年第2期57-58,共2页
大鼠抗汉滩病毒单抗重链可变区基因的体外扩增、克隆和序列分析程卫青，杨为松，徐海峰，白雪帆，尚高峰（第四军医大学唐都医院传染科西安７１００３２）刘健，郭虹汾，李斯德（上海市肿瘤研究所免疫室，上佝２０００３２）目前基因工... 大鼠抗汉滩病毒单抗重链可变区基因的体外扩增、克隆和序列分析程卫青，杨为松，徐海峰，白雪帆，尚高峰（第四军医大学唐都医院传染科西安７１００３２）刘健，郭虹汾，李斯德（上海市肿瘤研究所免疫室，上佝２０００３２）目前基因工程抗体的研究正方兴未艾。制备基因工... 展开更多
关键词 抗汉滩病毒 单克隆抗体 重链基因
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