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青蒿琥酯调控Thl7/Treg平衡抑制慢性移植物抗宿主病的实验研究 被引量：6
1
作者 陈晓梅 翁建宇 +7 位作者 赖沛龙 王玉连 黄欣 耿素霞 郭礼妍 黄恬 曾令基 杜欣 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期63-68,共6页
目的探讨青蒿琥酯抗慢性移植物抗宿主病(cGVHD)的作用及可能机制。方法将B10D2小鼠的骨髓细胞和脾脏细胞混合悬液通过尾静脉输入近交系雌性BALB/c小鼠体内建立cGVHD模型,分别予青蒿琥酯(实验组)和丙酮腹腔(对照组)注射治疗。观察两组小... 目的探讨青蒿琥酯抗慢性移植物抗宿主病(cGVHD)的作用及可能机制。方法将B10D2小鼠的骨髓细胞和脾脏细胞混合悬液通过尾静脉输入近交系雌性BALB/c小鼠体内建立cGVHD模型,分别予青蒿琥酯(实验组)和丙酮腹腔(对照组)注射治疗。观察两组小鼠的cGVHD临床表现、生存时间和组织病理学改变;应用流式细胞术分析小鼠外周血和脾脏Th17和Treg细胞比例;免疫磁珠分选BALB/c小鼠脾脏CD4+T细胞,分别予丙酮和青蒿琥酯进行干预72 h,流式细胞术分析两组Th17/Treg细胞比例。结果①实验组小鼠cGVHD临床症状较对照组明显减轻,生存时间延长[(55.71±6.99)d对(46.57±7.83)d,χ^2=5.457,P=0.020]。②实验组小鼠皮肤及肺脏cGVHD病理损伤较轻。③与对照组比较,实验组小鼠外周血、脾脏Th17细胞比例均降低[(0.58±0.19)%对(1.51±0.18)%,t=7.233,P<0.001;(0.71±0.18)%对(1.48±0.38)%,t=3.653,P=0.011],Treg细胞比例增高[(8.40±0.23)%对(4.45±0.04)%,t=15.680,P<0.001;(10.48±0.48)%对(6.62±0.24)%,t=6.590,P=0.003],Th17/Treg细胞比值均下降(0.09±0.03对0.34±0.05,t=7.621,P=0.002;0.06±0.02对0.19±0.03,t=6.993,P=0.002)。④体外培养小鼠脾脏CD4+T细胞,青蒿琥酯干预组较对照组Th17细胞比例减低[(0.82±0.37)%对(3.39±1.22)%,t=4.044,P=0.007],Treg细胞比例明显增高[(34.63±1.29)%对(14.28±1.69)%,t=19.119,P<0.001],Th17/Treg细胞比值下降(0.24±0.09对0.02±0.01,t=4.780,P=0.003)。结论青蒿琥酯可通过减少Th17细胞及增加Treg细胞,恢复Th17/Treg平衡,减轻cGVHD的临床与病理学损伤,从而发挥抗cGVHD作用。 展开更多
关键词 青蒿琥酯 TH17细胞 调节性T细胞 Th17/Treg平衡 慢性移植物抗宿主病
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γ干扰素联合脂多糖诱导人脐带间充质干细胞向MSC2极化 被引量：1
2
作者 黄恬 黄欣 +9 位作者 赖沛龙 耿素霞 陈晓梅 王玉连 郭礼妍 曾高淳 韩凤珍 李晓红 杜欣 翁建宇 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第13期2020-2027,共8页
背景:间充质干细胞的免疫调节特性已被临床广泛应用于自身免疫性疾病和移植物抗宿主病,但是其免疫调节的可塑性导致间充质干细胞临床治疗效果出现异质性和不稳定性。目的:探索γ干扰素联合脂多糖模拟炎症微环境诱导人脐带间充质干细胞向... 背景:间充质干细胞的免疫调节特性已被临床广泛应用于自身免疫性疾病和移植物抗宿主病,但是其免疫调节的可塑性导致间充质干细胞临床治疗效果出现异质性和不稳定性。目的:探索γ干扰素联合脂多糖模拟炎症微环境诱导人脐带间充质干细胞向MSC2极化的作用。方法:体外分离培养人脐带间充质干细胞,进行形态学、表面标志物、成脂及成骨诱导分化能力鉴定。分别用γ干扰素(10μg/L)、脂多糖(100μg/L)及二者联合刺激人脐带间充质干细胞24h,与植物凝集素刺激的外周血单个核细胞直接共培养或Transwell间接共培养5 d。流式细胞术检测共培养不同时间点调节性T细胞和Th1细胞比例,荧光定量PCR检测人脐带间充质干细胞的Toll样受体2,3,4 mRNA表达水平。结果与结论:①人脐带间充质干细胞呈梭形或成纤维形,高表达CD73、CD90、CD105,低表达CD34、CD45、HLA-DR;②在直接与间接共培养条件下,γ干扰素联合脂多糖刺激人脐带间充质干细胞均可增加调节性T细胞的比例,优于γ干扰素或脂多糖单独刺激组、未刺激组及外周血单个核细胞对照组(P <0.05);③Th1细胞比例随共培养时间的延长呈逐渐下降的趋势;④在间接共培养的条件下,γ干扰素联合脂多糖刺激人脐带间充质干细胞更早向免疫抑制型MSC2极化,Toll样受体3表达显著增高(P <0.05);⑤以上结果表明间接共培养体系下γ干扰素(10μg/L)联合脂多糖(100μg/L)是诱导人脐带间充质干细胞向MSC2极化的高效组合,并且MSC2的免疫抑制作用不依赖于细胞间的直接接触,为MSC2来源外泌体将来应用于临床研究奠定实验基础。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 Γ干扰素 脂多糖 调节性T细胞 TOLL样受体
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人脐带间充质干细胞来源外泌体对Treg和TH17细胞的调节作用 被引量：16
3
作者 郭礼妍 赖沛龙 +5 位作者 耿素霞 陈晓梅 王玉连 黄恬 杜欣 翁建宇 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期221-226,共6页
目的:探讨人脐带间充质干细胞来源外泌体对Treg和TH17细胞的影响。方法:应用超高速离心法获取脐带间充质干细胞培养上清来源的外泌体,通过电子显微镜检、Nanosight和Western blot方法对外泌体形态、粒径和所含蛋白进行鉴定。在外周血单... 目的:探讨人脐带间充质干细胞来源外泌体对Treg和TH17细胞的影响。方法:应用超高速离心法获取脐带间充质干细胞培养上清来源的外泌体,通过电子显微镜检、Nanosight和Western blot方法对外泌体形态、粒径和所含蛋白进行鉴定。在外周血单个核细胞(PBMC)的培养体系中,以外泌体共培养为实验组,PBS组为对照组,应用流式细胞术检测实验组与对照组Treg及TH17细胞比例。结果:人脐带间充质干细胞来源的外泌体在电子显微镜下呈杯状圆盘形,平均粒径142 nm,表达外泌体标志性蛋白CD9及CD63。流式细胞术结果显示,外泌体组Treg(CD4^+CD25^+Foxp3^+)细胞比例明显高于无外泌体组(5.30±0.13%vs 3.38±0.09%)(P<0.001),而外泌体组TH17(CD4^+IL17A^+)细胞比例明显低于无外泌体组(7.78±0.31%vs 11.33±0.24%)(P<0.001)。结论:人脐带间充质干细胞来源的外泌体能通过上调Treg和下调TH17参与免疫调节,提示有望成为新的"非细胞"免疫调节制剂。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 外泌体 免疫调节 调节性T细胞 TH17细胞
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