根据双抗体夹心检测原理,以Ara h 2鼠源单抗(mAb)为捕获抗体, Ara h 2兔源多抗(pAb)为检测抗体,建立ELISA方法,通过棋盘法优化抗体工作浓度,并对方法的灵敏度、准确度、特异性、稳定性等检测特性进行鉴定。结果表明, mAb和pAb最佳工作...根据双抗体夹心检测原理,以Ara h 2鼠源单抗(mAb)为捕获抗体, Ara h 2兔源多抗(pAb)为检测抗体,建立ELISA方法,通过棋盘法优化抗体工作浓度,并对方法的灵敏度、准确度、特异性、稳定性等检测特性进行鉴定。结果表明, mAb和pAb最佳工作浓度分别为1︰15 000稀释和1︰10 000稀释,在此基础上建立的标准曲线线性范围为2~128 ng/mL,检测限为2.32 ng/mL,添加回收试验平均回收率为87.6%~93.3%,且方法与其他常见致敏蛋白无交叉反应,并可在4℃避光密封条件下保持90 d内检测结果稳定。所建立的双抗体夹心ELISA方法检测特性良好,可用于花生致敏蛋白Ara h 2快速筛查,为食品标签中花生致敏物质标识信息的高效监管提供技术支撑。展开更多
文摘根据双抗体夹心检测原理,以Ara h 2鼠源单抗(mAb)为捕获抗体, Ara h 2兔源多抗(pAb)为检测抗体,建立ELISA方法,通过棋盘法优化抗体工作浓度,并对方法的灵敏度、准确度、特异性、稳定性等检测特性进行鉴定。结果表明, mAb和pAb最佳工作浓度分别为1︰15 000稀释和1︰10 000稀释,在此基础上建立的标准曲线线性范围为2~128 ng/mL,检测限为2.32 ng/mL,添加回收试验平均回收率为87.6%~93.3%,且方法与其他常见致敏蛋白无交叉反应,并可在4℃避光密封条件下保持90 d内检测结果稳定。所建立的双抗体夹心ELISA方法检测特性良好,可用于花生致敏蛋白Ara h 2快速筛查,为食品标签中花生致敏物质标识信息的高效监管提供技术支撑。
