肠道病毒71型山东临沂分离株全基因组序列分析 被引量：11

1

作者 温红玲 郝树彬 +5 位作者 高峰 赵丽 司鲁莹 袁晓晶 王东旭 王志玉 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期603-608,共6页

目的自1例死亡患儿的标本中分离EV71，并分析其全基因组序列特点，研究其基因序列的改变是否与其神经毒力有关。方法咽拭子标本采自山东临沂市人民医院1例死亡患儿，在人横纹肌瘤细胞（RD）上分离EV71，分段扩增获得EV71的全序列，用BL... 目的自1例死亡患儿的标本中分离EV71，并分析其全基因组序列特点，研究其基因序列的改变是否与其神经毒力有关。方法咽拭子标本采自山东临沂市人民医院1例死亡患儿，在人横纹肌瘤细胞（RD）上分离EV71，分段扩增获得EV71的全序列，用BLAST、Bioedit和MEGA4进行序列分析。结果获得1株EV71分离株SDLY107，基因组全长7405bp，全基因组核苷酸序列与2008年的阜阳株Fuyang．Anhui．P．R．C／17．08／2同源性最高，为98．6％，与原型株BrCr／70的同源性为80．O％，与神经毒型株MS／87的同源性为86．5％。系统进化分析表明，SDLY107与中国大陆的北京株、河南株、广西株、深圳株、兰州株、阜阳株、重庆株、浙江株的亲缘关系较近，按照传统的VP1基因分型方法，可归为C4亚型，是近年来我国大陆流行的主要基因亚型。氨基酸序列分析发现，SDLY107与其他毒株相比，有2个特有的突变（E947D，K1873R）。结论SDLY107分离株属于C4亚型，氨基酸突变E947D和K1873R可能与EV71的致病性有关。 展开更多

关键词 手足口病 肠道病毒71型 序列分析

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具药天然胶乳橡胶避孕套的细胞毒性试验 被引量：5

2

作者 王昕 施燕平 +1 位作者 朱雪涛 郝树彬 《齐鲁药事》 2005年第11期677-678,共2页

目的研究具药天然胶乳橡胶避孕套的细胞毒性。方法遵照ISO10993医疗器械生物学评价国际标准的试验原则,采用国际标准的试验方法,在此基础上进一步定量化,更精确的反应了产品的细胞毒性。结果及结论具药天然胶乳橡胶避孕套在浸提液浓度大... 目的研究具药天然胶乳橡胶避孕套的细胞毒性。方法遵照ISO10993医疗器械生物学评价国际标准的试验原则,采用国际标准的试验方法,在此基础上进一步定量化,更精确的反应了产品的细胞毒性。结果及结论具药天然胶乳橡胶避孕套在浸提液浓度大于1.5cm2.ml-1时具有重度细胞毒性。在浸提液浓度小于等于1cm2.ml-1时具有极轻的细胞毒性反应。 展开更多

关键词 具药天然胶乳橡胶避孕套 细胞毒性 浸提液

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氧化酶法和钒酸盐法测定血清胆红素的方法比较 被引量：6

3

作者 郝树彬 孙洪厚 +3 位作者 孙秀会 刘兴翠 王志全 孙爱国 《现代检验医学杂志》 CAS 2017年第1期113-116,120,共5页

目的通过对测定结果进行比对,研究胆红素钒酸盐氧化法和胆红素氧化酶法的反应方法原理,探讨两种方法之间异同点及结果是否具有可比性。方法以两种方法分别检测310例血清,计算回归方程,评估两种方法的相关性。对异常样本进一步实验以研... 目的通过对测定结果进行比对,研究胆红素钒酸盐氧化法和胆红素氧化酶法的反应方法原理,探讨两种方法之间异同点及结果是否具有可比性。方法以两种方法分别检测310例血清,计算回归方程,评估两种方法的相关性。对异常样本进一步实验以研究方法之间的异同。结果总胆红素测定结果的回归方程为Y=1.065 1X+1.197 2,相关系数r=0.997 0。成年人及>30天儿童直接胆红素测定结果回归方程为Y=0.945 9X+0.599 5,相关系数r=0.994 4;新生儿测定结果的回归方程为Y=0.410 4X+2.756 3,相关系数r=0.883 5;结果异常新生儿血清梯度稀释后钒酸盐氧化法结果不可接受。结论总胆红素和成人及>30天儿童的直接胆红素两种方法测定结果的相关性在可接受范围内;新生儿直接胆红素测定两种方法的相关性不可接受;钒酸盐氧化法不可用于新生儿直接胆红素测定。 展开更多

关键词 总胆红素 直接胆红素 胆红素氧化酶法 钒酸盐氧化法 新生儿直接胆红素

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一种生物指示物无菌快速检测系统的构建

4

作者 栾同青 张萌萌 +3 位作者 郝建新 刘兴翠 张小涵 郝树彬 《中国消毒学杂志》 CAS 2024年第6期410-412,共3页

目的研究一种生物指示物无菌试验的快速检测系统及其适用性。方法通过检测器和培养瓶快速检测系统,验证该生物指标快速检测系统的专属性和可行性。结果该快速检测系统的试验周期确定为45 h;经专属性验证表明培养瓶具有无菌性和促生长性... 目的研究一种生物指示物无菌试验的快速检测系统及其适用性。方法通过检测器和培养瓶快速检测系统,验证该生物指标快速检测系统的专属性和可行性。结果该快速检测系统的试验周期确定为45 h;经专属性验证表明培养瓶具有无菌性和促生长性。经检测限验证,快速检测系统的检测时间为18.8 h,检出率为75%;而常规方法的检测时间为27.4h,检出率为43%。结论本研究构建的生物指示物快速检测系统,相对于常规方法,提高了检验速度和检出率。 展开更多

关键词 生物指示物 快速检测系统 无菌检测

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BALB/c鼠脾脏T淋巴细胞体外转化试验条件的优化研究 被引量：5

5

作者 郝树彬 温红玲 +1 位作者 尹玉霞 侯丽 《中国医疗器械信息》 2011年第8期31-34,共4页

为了探索BALB/c鼠脾脏T淋巴细胞转化试验的最佳培养条件,采用四甲基偶氮唑(MTT)比色法,对脾细胞浓度和刀豆蛋白A(ConA)的浓度两个参数进行研究。结果表明,在本次实验条件下,采用5×105个/ml细胞、2.5μg/ml的ConA可获得最大的吸光度... 为了探索BALB/c鼠脾脏T淋巴细胞转化试验的最佳培养条件,采用四甲基偶氮唑(MTT)比色法,对脾细胞浓度和刀豆蛋白A(ConA)的浓度两个参数进行研究。结果表明,在本次实验条件下,采用5×105个/ml细胞、2.5μg/ml的ConA可获得最大的吸光度(A)值,两个因素间存在明显的交互效应。 展开更多

关键词 T淋巴细胞体外转化试验 MTT法 BALB/C鼠

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藻酸钙银离子抑菌敷料无菌试验方法研究 被引量：3

6

作者 栾同青 张萌萌 +1 位作者 王文庆 郝树彬 《中国医疗器械信息》 2019年第5期27-29,共3页

根据中国药典2015年版四部无菌检查法,建立适用于藻酸钙银离子抑菌敷料的无菌试验方法,通过方法适用性试验确定:约1cm×3cm大小的检验量在200mL的培养体系中无抑菌作用或其抑菌作用可以忽略不计,可按此方法进行无菌检查。

关键词 银离子 抑菌敷料 无菌检查 直接接种 方法适用性试验

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肠道病毒71型山东临沂分离株3D区遗传进化分析 被引量：4

7

作者 温红玲 郝树彬 +5 位作者 高峰 赵丽 袁晓晶 司鲁莹 王东旭 王志玉 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1283-1286,共4页

目的构建肠道病毒71型(EV71)山东临沂分离株3D区的系统进化树,进行遗传进化分析,探讨3D区与神经毒力的关系。方法于2009—2010年在山东省临沂市人民医院采集手足口病(HFMD)患儿的粪便标本和咽拭子标本107份,进行EV71的分离;用Bioedit和M... 目的构建肠道病毒71型(EV71)山东临沂分离株3D区的系统进化树,进行遗传进化分析,探讨3D区与神经毒力的关系。方法于2009—2010年在山东省临沂市人民医院采集手足口病(HFMD)患儿的粪便标本和咽拭子标本107份,进行EV71的分离;用Bioedit和MEGA 4对EV71山东临沂分离株SDLY1、SDLY11、SDLY48、SDLY96、SDLY107的3D区进行序列分析,参比序列选自GenBank。结果 3D区的系统发生树分析结果显示,5株临沂分离株在发生树上比较集中,SDLY11、96、107的3D区同源性最高,与CoxA16原型株G-10的系统发生关系较近,与EV71原型株BrCr/70的系统发生关系较远;3D区碱基构成比和氨基酸构成比分析显示,含量最高的碱基为A(29%),含量最高的氨基酸为亮氨酸(>10%);基因序列比对和氨基酸序列比对分析结果显示,碱基突变较多,但大多为静默突变,临沂分离株与CoxA16 G-10之间的氨基酸突变中有很大一部分是赖氨酸与精氨酸之间的突变,在SDLY107的3D区发现了3个特有的氨基酸突变:N37S、K142R、G261E。结论 EV71山东临沂分离株3D区的进化可能与CoxA16 G-10有关,突变N37S、K142R、G261E可能与EV71的神经毒力有关。 展开更多

关键词 手足口病(HFMD) 肠道病毒71型(EV71) 3D区 遗传进化分析

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1例手足口病患者及其密切接触者的病原检测与序列分析 被引量：2

8

作者 庄志超 颜丙新 +6 位作者 郝树彬 姜文国 白永娟 李纯 鲁燕 赵丽 王志玉 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2016年第6期-,共5页

目的 对山东省济宁市手足口病患者及其接触者标本进行病毒分离以及基因组序列测定与分析,捕捉病毒在传播过程中的变异情况.方法 使用RD细胞分离病毒,通过8对位于保守区的首尾重叠的全序列扩增引物进行扩增和序列的测定与拼接,并对全基... 目的 对山东省济宁市手足口病患者及其接触者标本进行病毒分离以及基因组序列测定与分析,捕捉病毒在传播过程中的变异情况.方法 使用RD细胞分离病毒,通过8对位于保守区的首尾重叠的全序列扩增引物进行扩增和序列的测定与拼接,并对全基因序列以及氨基酸序列与肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)各亚型标准株进行同源性分析以及遗传进化分析.结果 自1例患儿及其密切接触者各分离得到1株EV71分离株,分别命名为SDJN2015-01和SDJN2015-01.1;同源性分析显示分离到的两株病毒与C4a亚型株EU703813同源性最高;遗传进化分析显示两株病毒同属于C4a亚型.序列比对发现,两株病毒共存在12个核苷酸的差异,导致6个氨基酸的差异,分别为VP1区K98E(全编码区为K663E)和A133T(A698T)以及2C区D48N(D1159N)、V126I(V1237I)、I238V(I1349V)和N314Y(N1425Y).结论 SDJN2015-01和SDJN2015-01.1株同属EV71C4a亚型,其与C4a亚型标准株EU703813具有高度同源性;两株病毒间在VP1和2C区产生的氨基酸的变异对病毒毒力以及感染能力是否有影响有待进一步研究. 展开更多

关键词 EV71 同源性分析 遗传进化分析 氨基酸变异

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重组肠道病毒71型反向遗传系统构建 被引量：2

9

作者 李静 孙乐乐 +4 位作者 郝树彬 庄志超 赵丽 王志玉 温红玲 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1437-1440,共4页

目的利用反向遗传技术分别对肠道病毒71型(EV71)强毒株SDLY107和弱毒株SDLY1的3C和3CD编码区进行置换,拯救重组病毒。方法使用PCR技术得到重组片段3C(1)-3D-3'UTR(107)和3CD(1)-3'UTR(107),并克隆入p M D19-T。利用双酶切、T4... 目的利用反向遗传技术分别对肠道病毒71型(EV71)强毒株SDLY107和弱毒株SDLY1的3C和3CD编码区进行置换,拯救重组病毒。方法使用PCR技术得到重组片段3C(1)-3D-3'UTR(107)和3CD(1)-3'UTR(107),并克隆入p M D19-T。利用双酶切、T4连接酶将两种重组3CD-3'UTR分别置换入本室构建并保存的EV71的SDLY107株的感染性c DNA克隆p M D19-T-107,得到重组p M D19-T-107后,将其线性化并转染入横纹肌肉瘤(RD)细胞,盲传得到重组病毒107(1-3C)和107(1-3CD)。对收获病毒进行鉴定。结果构建了重组EV71全长c DNA克隆;RNA转染并盲传至第3代,36 h后RD细胞出现细胞病变(CPE),48 h出现明显的CPE,成功拯救重组病毒SDLY107(1-3C)和SDLY107(1-3CD);重组病毒产生的CPE更接近SDLY107。结论成功构建了重组EV71反向遗传系统,拯救了重组病毒SDLY107(1-3C)和SDLY107(1-3CD),为进一步研究3C与3D蛋白在EV71致病机制中的作用提供基础。 展开更多

关键词 肠道病毒71型 反向遗传技术 3CD蛋白

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一种消毒连接器对无针输液接头的消毒效果研究 被引量：1

10

作者 王文庆 栾同青 +3 位作者 郝建新 国宪虎 吴新宇 郝树彬 《中国消毒学杂志》 CAS 2022年第2期98-100,共3页

目的研究一种消毒连接器对无针输液接头的消毒效果。方法采用悬液定量杀菌试验方法和模拟现场消毒试验方法,对某消毒连接器的消毒效果进行评价。结果消毒连接器中浸有浓度为70%异丙醇,用其挤出液对悬液内表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌... 目的研究一种消毒连接器对无针输液接头的消毒效果。方法采用悬液定量杀菌试验方法和模拟现场消毒试验方法,对某消毒连接器的消毒效果进行评价。结果消毒连接器中浸有浓度为70%异丙醇,用其挤出液对悬液内表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌和白色念珠菌作用3 min,平均杀灭对数值均>5.00。将上述各试验菌接种在该消毒连接器接触消毒剂的部位,作用3 min后均检测不出存活菌,即菌数为0 cfu。结论该消毒连接器对无针输液接头有良好的消毒效果。 展开更多

关键词 消毒连接器 异丙醇 输液接头 消毒效果

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用直接投入增菌法进行药品包装材料控制菌检查的探索性研究 被引量：1

11

作者 王文庆 方良艳 +2 位作者 国宪虎 师广波 郝树彬 《中国药事》 CAS 2022年第1期78-83,共6页

目的:对复合膜、硬片、铝箔、瓶盖、垫片、干燥剂等药品包装材料构建微生物限度检查-控制菌检查的新方法,为加强药品包装材料的微生物质量控制提供一种检测新思路。方法:分别取代表性复合膜、硬片、铝箔、瓶盖、垫片、干燥剂样品,用代... 目的:对复合膜、硬片、铝箔、瓶盖、垫片、干燥剂等药品包装材料构建微生物限度检查-控制菌检查的新方法,为加强药品包装材料的微生物质量控制提供一种检测新思路。方法:分别取代表性复合膜、硬片、铝箔、瓶盖、垫片、干燥剂样品,用代表性菌株制备人工污染样品,采用国家药品包装材料标准规定的方法(以下简称供试液增菌法)以及本研究建立的直接投入增菌法进行控制菌检查,计算控制菌检出率。结果:接种菌液浓度较高时,两种方法的检出率一致,均为100%;在接种菌液浓度为50 CFU·mL^(-1)时,直接投入增菌法检出率略高于供试液增菌法,但经统计学分析,发现并没有显著差异(P>0.05),二者的检出率大致相同。此外,与供试液增菌法相比,直接投入增菌法在操作过程中具有操作简单、不易污染、未使用微生物过滤装置和滤膜而降低了成本等优势。结论:直接投入增菌法与供试液增菌法具有同样可靠的检出率,且具有操作简单、不易污染、成本较低等优势,适合用于复合膜、硬片、铝箔、瓶盖、垫片、干燥剂等药品包装材料的控制菌检查。 展开更多

关键词 药品包装材料 微生物限度检查 控制菌检查 供试液增菌法 直接投入增菌法

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抗菌敷料抗菌功效体外评价研究 被引量：2

12

作者 栾同青 王文庆 +3 位作者 张萌萌 方良艳 李翠 郝树彬 《中国药事》 CAS 2021年第10期1149-1156,共8页

目的:评价抗菌敷料的体外抗菌功效。方法:本研究基于模拟临床创面微生物的实际生长状态,构建体外创面模型并建立抗菌敷料抗菌功效评价方法,用以评价抗菌敷料对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌和白色念珠菌的体外抗菌功效。结果... 目的:评价抗菌敷料的体外抗菌功效。方法:本研究基于模拟临床创面微生物的实际生长状态,构建体外创面模型并建立抗菌敷料抗菌功效评价方法,用以评价抗菌敷料对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌和白色念珠菌的体外抗菌功效。结果:试验样品在12 h内抑制了金黄色葡萄球菌的增殖,在72 h内杀灭对数值未超过1.00;在24 h对铜绿假单胞菌的杀灭对数值达到4.24,随后大幅下降,在72 h的杀灭对数值降为0.37;在12 h对大肠杆菌的杀灭对数值达到4.10,在其后至72 h内杀灭对数值均大于3.00;在12 h对白色念珠菌的杀灭对数值达到1.11,在72 h的杀灭对数值仅为0.04。结论:该抗菌敷料对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌和白色念珠菌均显示了抗菌效果,其中对铜绿假单胞菌、大肠杆菌的抗菌功效要好于金黄色葡萄球菌和白色念珠菌。 展开更多

关键词 抗菌敷料 体外创面模型 抗菌功效 体外评价 Log降低值

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检测医疗器械非织造布包装材料中初始污染菌的方法 被引量：1

13

作者 李翠 马恒 +2 位作者 苗策禹 刘兴翠 郝树彬 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期567-571,共5页

建立了一种适合医疗器械初包装材料即非织造布包装材料的初始污染菌检测方法。通过设计不同的微生物洗脱方式及参数,根据方法回收率的比较结果得到超声波洗脱法的洗脱效果最好,微生物平均回收率(n=10)达52.2%。通过单因素试验以及正交试... 建立了一种适合医疗器械初包装材料即非织造布包装材料的初始污染菌检测方法。通过设计不同的微生物洗脱方式及参数,根据方法回收率的比较结果得到超声波洗脱法的洗脱效果最好,微生物平均回收率(n=10)达52.2%。通过单因素试验以及正交试验,确定超声波洗脱法采集微生物的最佳工艺参数,即超声时间10 min,超声功率40 kHz,洗脱液中Tween-80的用量为2 g/L,洗脱液体积200 ml,此时微生物采集回收率提高到67.2%,较未优化前提高了15.0%,为该包装材料的初始污染菌检测方法提供了参考。 展开更多

关键词 医疗器械 非织造布包装材料 初始污染菌

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无针输液接口微生物侵入试验方案设计要点

14

作者 郝树彬 王文庆 +2 位作者 刘兴翠 国宪虎 陈思彬 《中国医疗器械信息》 2019年第5期33-35,共3页

从消毒操作程序、技术路线、菌株、接种量和重复试验等设计要点入手,对无针连接件输液接口微生物侵入试验方案的设计进行了解析。

关键词 无针输液接口 微生物侵入 消毒操作程序 重复试验 试验循环 疲劳循环

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肠道病毒71型不同病毒株3D蛋白对细胞损伤的作用

15

作者 白永娟 庄志超 +6 位作者 郝树彬 李纯 王莉鸿 袁晓晶 赵丽 王志玉 温红玲 《中华传染病杂志》 CSCD 北大核心 2017年第4期227-231,共5页

目的 比较肠道病毒71型（EV71）SDLY11株和SDLY107株3D蛋白对细胞的损伤程度.方法 EV71病毒株SDLY11和SDLY107分别取自轻症手足口病患儿和重症手足口病患儿.反转录PCR扩增目的基因11-3D-Flag和107-3D-Flag,分别将其插入真核表达载体pcDN... 目的 比较肠道病毒71型（EV71）SDLY11株和SDLY107株3D蛋白对细胞的损伤程度.方法 EV71病毒株SDLY11和SDLY107分别取自轻症手足口病患儿和重症手足口病患儿.反转录PCR扩增目的基因11-3D-Flag和107-3D-Flag,分别将其插入真核表达载体pcDNA3.1中,连接产物转化至大肠杆菌DH5α,提取质粒进行酶切和测序鉴定.重组质粒转染人横纹肌肉瘤（RD）细胞,间接免疫荧光试验和蛋白质印迹检测3D蛋白表达,乳酸脱氢酶（LDH）检测3D蛋白导致的细胞损伤,噻唑蓝（MTT）比色法测定3D蛋白对细胞增殖的影响,Annexin-V/Pl双染法测定3D蛋白引起的细胞凋亡.各组间两两比较方差齐采用LSD-t检验,方差不齐采用Dunnett T3检验.结果 反转录PCR扩增获得1 400 bp片段,酶切鉴定重组质粒后分别获得1 400 bp和5 400 bp片段,测定序列与目的基因一致.间接免疫荧光试验观察到特异性荧光,蛋白质印迹显示目的蛋白相对分子质量为55×10^3.LDH结果显示SDLY11株3D蛋白转染组的吸光度（A）490值高于SDLY107株3D蛋白转染组,分别为0.790±0.048和0.641±0.018,差异有统计学意义（t=5.14,P〈0.05）,SDLY11株3D蛋白引起的细胞膜损伤情况较SDLY107株3D蛋白严重.MTT比色法结果显示SDLY11株3D蛋白转染组的A570值低于SDLY107株3D蛋白转染组,分别为1.028±0.020和1.081±0.002,差异有统计学意义（t=3.31,P〈0.05）,SDLY11株3D蛋白对细胞增殖活性的影响大于SDLY107株3D蛋白.Annexin-V/PI双染法结果显示,SDLY11株3D蛋白转染组和SDLY107株3D蛋白转染组的细胞凋亡百分比分别为（1.471±0.246）%和（1.465±0.237）%,差异无统计学意义（t=0.04,P=0.973）.结论 与SDLY11株3D蛋白相比,SDLY107株3D蛋白引起的细胞损伤程度较轻微,且对细胞增殖活性的影响较弱,更有利于病毒在细胞内的复制. 展开更多

关键词 肠道病毒A型 人 3D蛋白 细胞损伤

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肠道病毒71型3D重组病毒的拯救

16

作者 白永娟 庄志超 +6 位作者 郝树彬 王莉鸿 李纯 鲁燕 赵丽 王志玉 温红玲 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2017年第8期7-12,共6页

目的利用反向遗传技术将肠道病毒71型(EV71)弱毒株SDLY1的3D蛋白置换入强毒株SDLY107,拯救重组病毒,为EV71 3D蛋白的研究提供操作平台。方法利用重叠PCR的方法得到3D编码区的重组片段,T-A克隆插入p MDl9-T载体。通过双酶切、T4连接将其... 目的利用反向遗传技术将肠道病毒71型(EV71)弱毒株SDLY1的3D蛋白置换入强毒株SDLY107,拯救重组病毒,为EV71 3D蛋白的研究提供操作平台。方法利用重叠PCR的方法得到3D编码区的重组片段,T-A克隆插入p MDl9-T载体。通过双酶切、T4连接将其置换到含有SDLY107株全长的质粒p MD19-T-107中。体外转录获得感染性RNA,转染Vero细胞,盲传3代得到重组病毒SDLY 107(1-3D),通过PCR和q RT-PCR对重组病毒进行鉴定。结果 PCR扩增得到大小为600、1 400和200 bp的3D区及其左右片段;重叠PCR扩增得到大小为2 100 bp的1-3D片段;双酶切鉴定重组质粒得到大小为7 400和2 700 bp的片段,测序结果证实3D区置换成功;感染性RNA转染Vero细胞后,接种至第3代时观察到细胞皱缩变圆,折光性增强;PCR鉴定重组病毒得到大小为226 bp的片段;q RT-PCR检测到细胞中病毒量于24 h开始缓慢增加,48 h后快速增多,至72 h后病毒量不再增长。结论成功拯救了重组病毒SDLY107(1-3D),为进一步研究3D蛋白的毒力和其在EV71致病机制中的作用提供基础。 展开更多

关键词 肠道病毒71型 反向遗传 重组病毒 3D蛋白

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肠道病毒71型VP2蛋白对细胞损伤作用 被引量：1

17

作者 温红玲 郝树彬 +3 位作者 袁晓晶 司鲁莹 赵丽 王志玉 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期181-184,共4页

目的研究VP2蛋白在肠道病毒71型(EV71)致病机制中的作用。方法采集山东省临沂市人民医院轻症和重症手足口病(HFMD)患儿的粪便标本(SDLY 11和SDLY 107),应用MEGA 4.0软件对SDLY 11、SDLY107 VP2区氨基酸序列进行比对分析;参考SDLY 11、SD... 目的研究VP2蛋白在肠道病毒71型(EV71)致病机制中的作用。方法采集山东省临沂市人民医院轻症和重症手足口病(HFMD)患儿的粪便标本(SDLY 11和SDLY 107),应用MEGA 4.0软件对SDLY 11、SDLY107 VP2区氨基酸序列进行比对分析;参考SDLY 11、SDLY 107全序列测序结果设计VP2区扩增引物,构建表达载体VP2p Bluescript SK(+),通过体外转染Vero细胞表达VP2蛋白;乳酸脱氢酶实验检测不同临床症状病毒株的VP2蛋白对细胞损伤的影响。结果序列比对分析结果显示,SDLY 11、SDLY 107 2个病毒株的VP2蛋白在第199位氨基酸处存在差异(V199I);SDLY 11、SDLY 107的VP2蛋白可在Vero细胞中表达;乳酸脱氢酶实验结果显示,2组蛋白对细胞损伤情况差异无统计学意义(P>0.05)。结论 EV71的VP2蛋白可能对细胞损伤的影响不大,其在致病机制中的意义尚需进一步研究。 展开更多

关键词 肠道病毒71型(EV71) 手足口病(HFMD) VP2蛋白 细胞损伤

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传统型血袋无菌检测新技术研究

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作者 张萌萌 莫伟娜 +2 位作者 栾园园 马延兴 郝树彬 《中国药事》 CAS 2022年第2期154-160,共7页

目的:建立传统型血袋无菌检查新方法。方法:以传统型血袋为研究对象,采用"培养基冲洗法""培养基灌装法" 2种新的无菌检查方法和传统薄膜过滤法进行方法适用性试验,以确定所设计方法对该产品的适用性;另选取萎缩芽... 目的:建立传统型血袋无菌检查新方法。方法:以传统型血袋为研究对象,采用"培养基冲洗法""培养基灌装法" 2种新的无菌检查方法和传统薄膜过滤法进行方法适用性试验,以确定所设计方法对该产品的适用性;另选取萎缩芽孢杆菌(ATCC 9372)作为代表性菌株污染血袋,选取4个稀释梯度,进行3种方法的检出率对比研究以得到最优的无菌检查方法。结果:方法适用性试验中试验菌均生长良好;3种不同方法中培养基灌装法检出率最高,其次为培养基冲洗法,均优于传统的薄膜过滤法。结论:3种方法均适用于传统型血袋产品的无菌检查;但培养基灌装法检出率高且降低了假阳性概率及试验操作成本,为传统型血袋无菌检验的首选方法。若存在产品材质影响结果观察等情况,可选择培养基冲洗法进行该类产品的无菌检验。 展开更多

关键词 传统型血袋 无菌检查 方法适用性 薄膜过滤法 培养基冲洗法 培养基灌装法

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中国和欧盟医用外科口罩细菌检测方法对回收率的影响

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作者 王文庆 李翠 +2 位作者 马恒 方良艳 郝树彬 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期256-260,共5页

目的明确我国和欧盟医用外科口罩细菌检测方法回收率的差异。方法采用微生物回收的方法对中国《医用外科口罩(YY 0469—2011)》和欧盟《医用口罩要求和试验方法(EN 14683—2019)》中的检测方法回收率进行对比分析,并探索两种方法中最优... 目的明确我国和欧盟医用外科口罩细菌检测方法回收率的差异。方法采用微生物回收的方法对中国《医用外科口罩(YY 0469—2011)》和欧盟《医用口罩要求和试验方法(EN 14683—2019)》中的检测方法回收率进行对比分析,并探索两种方法中最优方法的环节。结果EN 14683—2019检测方法回收率高达65.1%,高于YY 0469—2011标准近4倍;洗脱方式为机械振摇,洗脱效果不如手动振摇法(回收率为68.6%);EN 14683—2019的可接受标准严于YY 0469—2011的可接受标准。结论EN 14683—2019的洗脱液中含有表面活性成分(吐温20),提高了检测方法的回收率;YY 0469—2011方法中手动振摇的洗脱方式对微生物的洗脱效果要优于EN 14683—2019方法中的机械振摇法。 展开更多

关键词 医用外科口罩 细菌检测 回收率 可接受标准

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