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黑米、薏米、荞麦混合挤压膨化工艺及机理的研究 被引量：15
1
作者 郝彦玲 张守文 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 2004年第4期22-28,共7页
以优质的黑米、薏米、荞麦粉为原料,采用先进的现代挤压膨化技术,研制集营养、保健、食用为一体的五谷杂粮膨化粉及主食品。通过双螺杆挤压机、单螺杆挤压机对物料进行对比膨化实验,确定相应的混合物料挤压膨化工艺流程及参数。结果表明... 以优质的黑米、薏米、荞麦粉为原料,采用先进的现代挤压膨化技术,研制集营养、保健、食用为一体的五谷杂粮膨化粉及主食品。通过双螺杆挤压机、单螺杆挤压机对物料进行对比膨化实验,确定相应的混合物料挤压膨化工艺流程及参数。结果表明,双螺杆挤压比单螺杆挤压膨化效果理想,3种物料混合后膨化效果好,各原料比例为:m(黑米)∶m(薏米)∶m(荞麦粉)=45∶15∶40。对混合物料膨化的操作参数为:物料水分15%～20%,挤压温度171～184℃,螺杆转速90～114r/min,膨化物的糊化度可达83.3%～86.4%。本文还讨论了混合物挤压膨化的物理化学变化和机理。 展开更多
关键词 挤压膨化 薏米 黑米 荞麦粉 双螺杆挤压机 物理化学变化 糊化度 物料 化工 单螺杆
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应用ICP-MS/ICP-AES测定榆钱中22种微量元素的含量 被引量：13
2
作者 芮玉奎 郝彦玲 +2 位作者 张福锁 金银花 郭晶 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第10期2111-2113,共3页
榆钱是我国民间的一种优良野生食品资源。随着人们对食品安全意识的增强,其营养成分与有毒成分的含量逐渐受到人们的重视。借助ICP-MS/ICP-AES技术对野生榆树榆钱中的22种微量元素进行了研究。结果发现榆钱中含有丰富的人体所必需的元素... 榆钱是我国民间的一种优良野生食品资源。随着人们对食品安全意识的增强,其营养成分与有毒成分的含量逐渐受到人们的重视。借助ICP-MS/ICP-AES技术对野生榆树榆钱中的22种微量元素进行了研究。结果发现榆钱中含有丰富的人体所必需的元素,特别是Mg,Ca,Mn,Fe,Cu,Zn,Sr和Rb,分别达到224.57,269.73,9.23,64.93,1.68,4.79,7.68和2.21μg.g-1(FW)(FW表示鲜重(下同));Li,B,V,Co,Ni,Se,Br,Mo和Sn,也分别达到318.43,518.83,265.52,108.50,411.21,34.51,51.72,109.90和31.51ng.g-1(FW)。除了有益元素以外,重金属元素Pb,Cd,As,Hg和Cr的含量也分别达557.87,8.81,345.55,0.78和347.97ng.g-1(FW),其含量偏高,虽然符合国家食品卫生标准,但是应当注意重金属含量的监测。 展开更多
关键词 ICP-MS/ICP-AES 微量元素 榆钱 食品安全
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向日葵遗传转化中抗生素适宜筛选浓度的研究 被引量：10
3
作者 段晓昱 栾春光 +1 位作者 郝彦玲 罗云波 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2004年第3期239-244,共6页
以油用向日葵新葵杂6号品种为材料,采用不同浓度梯度抗生素处理茎尖、子叶、胚轴转化外植体的方法,研究了不同浓度的卡那霉素和潮霉素对向日葵茎尖、子叶、胚轴不同部位遗传转化外植体的筛选效果。结果表明,卡那霉素对向日葵茎尖、子叶... 以油用向日葵新葵杂6号品种为材料,采用不同浓度梯度抗生素处理茎尖、子叶、胚轴转化外植体的方法,研究了不同浓度的卡那霉素和潮霉素对向日葵茎尖、子叶、胚轴不同部位遗传转化外植体的筛选效果。结果表明,卡那霉素对向日葵茎尖、子叶、胚轴不同部位转化外植体的筛选适宜浓度为25～30 mg/mL,潮霉素对向日葵茎尖、子叶、胚轴不同部位转化外植体的筛选适宜浓度为7～10 mg/mL;PCR检测结果显示阳性植株外源基因已导入;不同部位的转化外植体对卡那霉素和潮霉素的敏感性存在一定的差异,但未见明显梯度。 展开更多
关键词 向日葵 遗传转化 抗生素
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1株产细菌素植物乳杆菌的筛选及所产细菌素的理化性质分析 被引量：12
4
作者 刘丽 郝彦玲 +2 位作者 张红星 谢英 周绪宝 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第6期47-52,共6页
从浙江省生产的一种火腿制品中分离筛选到1株具有抑菌活性的乳酸菌菌株LH-09,对单核细胞增生李斯特菌ATCC54003的生长具有良好的抑制作用。16SrRNA序列同源性分析鉴定乳酸菌LH-09为植物乳杆菌。在排除有机酸、过氧化氢的干扰后,确定该... 从浙江省生产的一种火腿制品中分离筛选到1株具有抑菌活性的乳酸菌菌株LH-09,对单核细胞增生李斯特菌ATCC54003的生长具有良好的抑制作用。16SrRNA序列同源性分析鉴定乳酸菌LH-09为植物乳杆菌。在排除有机酸、过氧化氢的干扰后,确定该抑菌物质为蛋白类物质,即细菌素。理化性质分析表明细菌素LH-09具有较好的热稳定性、酸碱稳定性,可被人体内蛋白酶降解。N-羟甲基甲基甘氨酸-SDS-PAGE电泳确定细菌素LH-09的分子质量在2～6kDa之间。 展开更多
关键词 细菌素 乳酸菌 理化性质
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乳酸菌载体pMG36e的应用现状 被引量：11
5
作者 丁寅寅 马会勤 +2 位作者 左芳雷 郝彦玲 陈尚武 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期106-111,共6页
乳酸乳球菌通用表达质粒pMG36e是一个经典的人工构建的组成型表达载体,是以乳酸乳球菌乳脂亚种蛋白酶基因的转录和翻译信号为基础构建而成的。它包含一个强启动子,能够在多种细菌中表达外源蛋白。已用于研究细菌素作用机制,乳酸菌基因... 乳酸乳球菌通用表达质粒pMG36e是一个经典的人工构建的组成型表达载体,是以乳酸乳球菌乳脂亚种蛋白酶基因的转录和翻译信号为基础构建而成的。它包含一个强启动子,能够在多种细菌中表达外源蛋白。已用于研究细菌素作用机制,乳酸菌基因工程菌株的改造以及口服疫苗的开发等,应用领域十分广泛,已成为乳酸菌基因工程研究的重要工具质粒之一。现主要从载体构成、基因表达与食品级载体改造等三方面的应用对其进行综述,旨在为该质粒今后研究提供资料。 展开更多
关键词 pMG36e 表达载体 食品级载体 乳酸菌
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风干肠中戊糖片球菌所产细菌素L5-6的理化特性研究 被引量：11
6
作者 张红星 刘丽 +1 位作者 谢英 郝彦玲 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第1期75-79,共5页
目的:对从风干肠中筛选的戊糖片球菌所产细菌素L5-6的理化特性进行系统研究,为开发安全高效的食品生物防腐剂奠定理论基础。方法:采用管碟法做抑菌试验,利用N-羟甲基甲基甘氨酸-SDS-PAGE电泳确定细菌素的相对分子质量。结果:抑菌物质L5-... 目的:对从风干肠中筛选的戊糖片球菌所产细菌素L5-6的理化特性进行系统研究,为开发安全高效的食品生物防腐剂奠定理论基础。方法:采用管碟法做抑菌试验,利用N-羟甲基甲基甘氨酸-SDS-PAGE电泳确定细菌素的相对分子质量。结果:抑菌物质L5-6对胰蛋白酶、蛋白酶K、链霉蛋白酶E敏感,证明此抑菌物质为细菌素;细菌素L5-6在100℃ 30min,pH2～10的条件下具有极强的抑菌活性;当戊糖片球菌生长到稳定期且pH为4.2时,达到最大抑菌活性2560AU,确定其最佳收获时期为18h;细菌素对单核细胞增生李斯特菌的作用方式为杀死细菌,能抑制金黄色葡萄球菌、植物乳杆菌、徳氏乳杆菌保加利亚亚种等革兰氏阳性菌以及大肠杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌等革兰氏阴性菌;N-羟甲基甲基甘氨酸-SDS-PAGE电泳确定细菌素L5-6的相对分子质量约为4kDa。结论:细菌素L5-6具有较好的热稳定性和酸碱稳定性,抑菌谱广,可被人体内蛋白酶降解。细菌素L5-6在食品防腐保鲜领域具有应用前景。 展开更多
关键词 风干肠 戊糖片球菌 细菌素 理化特性
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卷枝毛霉Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆及在酿酒酵母中的高效表达(英文) 被引量：3
7
作者 郝彦玲 王颖 +2 位作者 朱本忠 栾春光 罗云波 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第3期303-308,共6页
为获得产高γ 亚麻酸的酿酒酵母工程菌株,应用RT PCR技术,从卷枝毛霉中扩增出△6 脂肪酸脱氢酶 基因,亚克隆到大肠杆菌和酿酒酵母的穿梭表达载体pYES2.0,在大肠杆菌中筛选到含有目的基因的重组质粒 pYES412,用醋酸锂方法转化到酿酒... 为获得产高γ 亚麻酸的酿酒酵母工程菌株,应用RT PCR技术,从卷枝毛霉中扩增出△6 脂肪酸脱氢酶 基因,亚克隆到大肠杆菌和酿酒酵母的穿梭表达载体pYES2.0,在大肠杆菌中筛选到含有目的基因的重组质粒 pYES412,用醋酸锂方法转化到酿酒酵母缺陷型菌株INVScI中,在SC ura合成培养基中筛选到转化酵母,在合适 的培养基及培养条件下,加入外源底物亚油酸,经半乳糖诱导后,收集菌体,通过气相色谱对转化酵母进行脂肪酸 色谱分析,结果表明:γ 亚麻酸占总脂肪的50.07%。迄今为止,这是国内外△6 脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母表 达量最高的报道。 展开更多
关键词 △^6—脂肪酸脱氢酶 卷枝毛霉 γ—亚麻酸 酿酒酵母
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可抑制口腔致病菌的乳酸菌筛选及其抑菌特性研究 被引量：8
8
作者 乔荣更 贾宇 +5 位作者 张红星 谢远红 金君华 刘慧 蒋林树 郝彦玲 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期75-81,共7页
为了得到可抑制口腔致病菌的乳酸菌,从四川大凉山农家泡菜中分离筛选出9株乳酸菌,使用牛津杯法,以变异链球菌、白色念珠菌、具核梭杆菌、牙龈卟啉单胞菌为指示菌,对筛选的菌株进行抑菌试验,随后进行16S rRNA基因序列鉴定。每隔4 h测定菌... 为了得到可抑制口腔致病菌的乳酸菌,从四川大凉山农家泡菜中分离筛选出9株乳酸菌,使用牛津杯法,以变异链球菌、白色念珠菌、具核梭杆菌、牙龈卟啉单胞菌为指示菌,对筛选的菌株进行抑菌试验,随后进行16S rRNA基因序列鉴定。每隔4 h测定菌株SD26上清液的pH值及对白色念珠菌的抑菌活力,并将不同pH的SD26上清液与白色念珠菌共培养,测定其对白色念珠菌生长过程的影响。将SD26上清液进行酸碱和盐析处理,测定其对白色念珠菌的抑菌活力。最后测定SD26上清液对食源性致病菌的抑菌谱。结果表明,初筛的9株乳酸菌中SD26对白色念珠菌的抑菌活性最高,抑菌圈直径为(26.63±0.30)mm。经鉴定SD26为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),培养20 h时,上清液pH为3.81,对白色念珠菌的抑菌圈直径最大,且SD26上清液对白色念珠菌抑制作用具有低pH环境的依赖性,盐析中性沉淀复溶液无抑菌活性。SD26上清液对食源性致病菌中单核细胞增生李斯特氏菌(CMCC54002)的抑菌作用最强,抑菌圈直径为(22.68±0.06)mm。研究表明,SD26上清液中对白色念珠菌起抑菌作用的物质为有机酸,该研究为应用乳酸菌防治口腔致病菌提供了基础。 展开更多
关键词 菌种筛选 16S rRNA 植物乳杆菌 白色念珠菌 有机酸 口腔致病菌
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市售酸奶中发酵剂乳酸菌的耐药性及耐药基因研究进展 被引量：7
9
作者 王炜哲 翟征远 郝彦玲 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2022年第2期34-37,共4页
乳酸菌作为酸奶发酵剂,被普遍认为是安全的。然而近年来,研究人员观察到耐药基因在益生菌和致病菌之间的转移,食源性耐药乳酸菌携带的耐药基因可能给食品安全带来潜在风险。本文主要针对市售酸奶发酵剂乳酸菌的耐药性检测方法、乳酸菌... 乳酸菌作为酸奶发酵剂,被普遍认为是安全的。然而近年来,研究人员观察到耐药基因在益生菌和致病菌之间的转移,食源性耐药乳酸菌携带的耐药基因可能给食品安全带来潜在风险。本文主要针对市售酸奶发酵剂乳酸菌的耐药性检测方法、乳酸菌的耐药表型、乳酸菌的耐药基因分布及其与表型的匹配情况以及耐药基因转移性进行阐述,明确了加强发酵剂乳酸菌抗药性监测的重要意义,为发酵剂乳酸菌耐药性监测及耐药基因转移研究提供参考。 展开更多
关键词 酸奶 乳酸菌 耐药性 耐药基因 耐药转移性
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Bt玉米中微量元素锂、硒、钼、铬含量测定 被引量：8
10
作者 郝彦玲 芮玉奎 +3 位作者 郭晶 罗云波 黄昆仑 朱本忠 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1638-1639,共2页
随着转基因食品的推广应用,人们越来越关心其食用安全性。以转Bt基因玉米及其亲本为实验材料,借助于ICP-MS对其中人体必需的微量元素锂、硒、钼和铬进行了测定。结果显示,外源基因的整合导致了锂、硒、钼和铬含量减少,这对玉米的营养价... 随着转基因食品的推广应用,人们越来越关心其食用安全性。以转Bt基因玉米及其亲本为实验材料,借助于ICP-MS对其中人体必需的微量元素锂、硒、钼和铬进行了测定。结果显示,外源基因的整合导致了锂、硒、钼和铬含量减少,这对玉米的营养价值非常不利;特别是转Bt基因玉米中硒和钼,成倍减少。这些结果说明转基因技术如果控制不严可能会对玉米的食用安全性产生不良影响,转基因植物的推广应用应当严格审查。转Bt基因玉米吸收上述微量元素减少的原因尚需进一步研究。 展开更多
关键词 转基因食品安全 ICP-MS 微量元素
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玉米转基因成分的非同源模板竞争定量PCR检测 被引量：5
11
作者 栾春光 马林 +2 位作者 郝彦玲 朱本忠 罗云波 《郑州工程学院学报》 北大核心 2004年第1期19-21,28,共4页
建立了玉米转基因成分中35S启动子非同源模板的竞争定量PCR检测系统.竞争定量PCR的关键问题是内标物的制备.实验中非同源模板的构建是采用PCR方法对大肠杆菌基因组进行低严紧型扩增,回收预期DNA片段并将其构建到T easy载体上.通过调整... 建立了玉米转基因成分中35S启动子非同源模板的竞争定量PCR检测系统.竞争定量PCR的关键问题是内标物的制备.实验中非同源模板的构建是采用PCR方法对大肠杆菌基因组进行低严紧型扩增,回收预期DNA片段并将其构建到T easy载体上.通过调整非同源模板浓度使竞争物PCR产物亮度与1%GMO玉米的亮度相同,从而确定转基因玉米的检出限为1%.然后以确定的内标物浓度与不同含量的GMO玉米样品进行竞争定量PCR反应,以此进一步确定样品中GMO的含量范围. 展开更多
关键词 转基因成分 非同源模板 竞争定量PCR检测系统 转基因玉米
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乡村振兴战略背景下农业技术推广工作实施对策 被引量：5
12
作者 董天浴 王爱东 郝彦玲 《农业工程技术》 2023年第8期109-110,共2页
近年来,农业技术的持续更新推动了中国农业的持续稳健发展,特别是积极开展好农技推广工作,不断推进农业现代化建设,能够为乡村振兴战略目标的实现带来充分保障。同时,过去的推广模式和工作机制制约了现代农业的发展,乡村振兴战略对当前... 近年来,农业技术的持续更新推动了中国农业的持续稳健发展,特别是积极开展好农技推广工作,不断推进农业现代化建设,能够为乡村振兴战略目标的实现带来充分保障。同时,过去的推广模式和工作机制制约了现代农业的发展,乡村振兴战略对当前农技推广工作提出了新的要求。基于此,该文结合实际工作,探讨了乡村振兴战略背景下农业技术推广工作的实施对策。 展开更多
关键词 乡村振兴 农业技术 推广 必要性 对策
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HIV-1 CN54 Gag P55和P24蛋白的高效表达、纯化和鉴定 被引量：5
13
作者 王道毅 刘勇 +6 位作者 郝彦玲 马民强 傅晶晶 李海山 王贻杰 陈静娴 邵一鸣 《中国输血杂志》 CAS CSCD 2004年第1期1-4,共4页
目的　探讨HIV 1中国株CN5 4GagP5 5和P2 4重组蛋白的高效表达并纯化 ,为研究HIV疫苗和诊断试剂创造条件。方法　分别将CN5 4GagP5 5和P2 4基因克隆至 pBV2 2 0和 pThioHisC载体 ,构建非融合表达载体 ;将重组质粒转化大肠杆菌BL2 1codon... 目的　探讨HIV 1中国株CN5 4GagP5 5和P2 4重组蛋白的高效表达并纯化 ,为研究HIV疫苗和诊断试剂创造条件。方法　分别将CN5 4GagP5 5和P2 4基因克隆至 pBV2 2 0和 pThioHisC载体 ,构建非融合表达载体 ;将重组质粒转化大肠杆菌BL2 1codonplus RIL ,对工程菌进行诱导表达。Western Blot检测目的蛋白 ,用DEAE SeparoseFF阴离子交换层析柱纯化目的蛋白 ;纯化的P5 5和P2 4抗原蛋白分别包被酶标板作ELISA检测。结果　P5 5以包涵体的形式表达 ,表达量占菌体总蛋白的 30 % ,P2 4实现了可溶性表达 ,表达量占总菌体总蛋白的4 0 % ;纯化后P5 5纯度达到 80 % ,P2 4纯度超过 90 %。Western Blot和ELISA检测均显示了良好的的灵敏度和特异性。结论　HIV 1CN5 4GagP5 5和P2 4抗原蛋白可在大肠杆菌中高效表达 ,纯化的抗原蛋白具有良好抗原性 。 展开更多
关键词 HIV-1/CN54 Gag蛋白/P55 Gag蛋白/P24表达纯化鉴定
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MF59与氢氧化铝佐剂对 HIV-1 gp140三聚体蛋白诱导的体液免疫增强效应的研究 被引量：6
14
作者 任莉 朱美玲 +4 位作者 侯佳利 刘建东 洪坤学 邵一鸣 郝彦玲 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期367-372,共6页
目的：研究MF59佐剂与氢氧化铝佐剂对HIV gp140三聚体蛋白诱导HIV抗原特异性体液免疫应答的增强效应，为HIV疫苗寻找更加有效的新型佐剂。方法豚鼠随机分为3组：MF59全剂量组、MF59半剂量组和Al（ OH）3组。于第0、3、6周按抗原佐剂体积... 目的：研究MF59佐剂与氢氧化铝佐剂对HIV gp140三聚体蛋白诱导HIV抗原特异性体液免疫应答的增强效应，为HIV疫苗寻找更加有效的新型佐剂。方法豚鼠随机分为3组：MF59全剂量组、MF59半剂量组和Al（ OH）3组。于第0、3、6周按抗原佐剂体积比1∶1（ MF59全剂量组）、1∶0．5（MF59半剂量组）和1∶1[Al（OH）3组]免疫豚鼠，第9周取血分离血清。 ELISA间接法检测血清抗HIV-1 gp120结合抗体和抗HIV-1 gp70V1V2结合抗体，TZM-bl假病毒方法检测血清对4个亚型8个假病毒的中和抗体。结果 HIV-1 gp120结合抗体滴度，MF59全剂量组与MF59半剂量组均显著高于Al（OH）3组（P＝0．027和P＝0．041）；HIV-1 gp70V1V2结合抗体A405读数MF59全剂量组显著高于Al（OH）3组（P＝0．029），MF59半剂量组与Al（OH）3组比较差异无统计学意义（P＝0．34）。假病毒中和活性检测，除去MF59半剂量组不能中和B亚型的两个假病毒REJO4541和TR-JO4551外，各组对8个假病毒均有不同强度的中和活性。8个假病毒中和活性半数抑制剂量（ ID50）的几何平均值比较：MF59全剂量组＞Al（ OH）3组＞MF59半剂量组。结论与传统的氢氧化铝佐剂相比，全剂量的MF59佐剂与HIV-1 gp140三聚体蛋白共同免疫豚鼠，血清抗原特异性结合抗体的水平显著提高，中和抗体的水平亦有提高的趋势。 展开更多
关键词 MF59 氢氧化铝 HIV-1 HIV特异性抗体 佐剂
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植物乳杆菌LB-B1产细菌素发酵条件的优化 被引量：6
15
作者 谢英 覃倩倩 +2 位作者 张京声 张列兵 郝彦玲 《中国酿造》 CAS 北大核心 2010年第10期22-25,共4页
为提高分离自新疆传统发酵乳制品酸马奶中植物乳杆菌LB—B1产细菌素的能力，对其产细菌素的发酵条件进行了优化，分别研究了培养条件（时问、温度、培养基初始pH值）和培养基成分对细菌素产量的影响。通过单因素试验和正交试验，确定产... 为提高分离自新疆传统发酵乳制品酸马奶中植物乳杆菌LB—B1产细菌素的能力，对其产细菌素的发酵条件进行了优化，分别研究了培养条件（时问、温度、培养基初始pH值）和培养基成分对细菌素产量的影响。通过单因素试验和正交试验，确定产植物乳杆菌LB-B1的最佳培养条件为37℃静置培养20h，培养基初始pH值为6～7；最佳培养基成分组合为葡萄糖30g／L、胰蛋白胨10g／L、牛肉膏10g／L、酵母粉5g／L、无水乙酸钠5g／L、柠檬酸铵2g／L、磷酸氢二钾2g／L、硫酸镁0．28g／L、硫酸锰0．25g／L、吐温－804mL／L。在优化发酵条件下，植物乳杆菌LB－B1产细菌素高达10240AU／mL，提高了3倍。 展开更多
关键词 植物乳杆菌LB—B1 细菌素 发酵条件 优化
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向日葵遗传转化研究进展 被引量：6
16
作者 郝彦玲 罗云波 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期25-28,共4页
综述了PEC、基因枪和农杆菌介导的转化方法应用于向日葵遗传转化研究所取得的进展,并对影响向日葵遗传转化效率的因素和研究前景进行了探讨。
关键词 向日葵 遗传转化 PEG 基因枪 农杆菌 Γ-亚麻酸 育种
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PCR技术检测啤酒中腐败菌的研究进展 被引量：6
17
作者 张小军 寇晓虹 +1 位作者 郝彦玲 罗云波 《酿酒科技》 北大核心 2006年第11期94-96,共3页
对传统方法和PCR技术检测啤酒中腐败菌的原理进行了分析和比较,对传统检测方法更有优势的PCR检测技术进行了综述。综合分析了目前国内外PCR技术检测的最新研究,重点讨论了标志性基因(抗酒花基因)和引物设计在PCR检测技术中应用,并对PCR... 对传统方法和PCR技术检测啤酒中腐败菌的原理进行了分析和比较,对传统检测方法更有优势的PCR检测技术进行了综述。综合分析了目前国内外PCR技术检测的最新研究,重点讨论了标志性基因(抗酒花基因)和引物设计在PCR检测技术中应用,并对PCR技术检测啤酒中腐败菌的应用前景进行了分析。 展开更多
关键词 分析检测 啤酒腐败菌 PCR技术 乳酸菌 短乳杆菌
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一例 HIV-1 广谱中和者体内病毒膜蛋白基因 进化特征及中和敏感性研究 被引量：2
18
作者 苑珍珍 李康 +3 位作者 胡彩琴 郝彦玲 冯毅 王铮 《疾病监测》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期443-450,共8页
目的分析一例HIV-1广谱中和者体内病毒膜蛋白基因(env)进化特征及其中和敏感性。方法从感染者两个随访时间点的全血样本中提取前病毒DNA,使用单拷贝基因组扩增(SGA)方法扩增全长env基因,测序后进行序列比对和进化树构建,分析env基因可... 目的分析一例HIV-1广谱中和者体内病毒膜蛋白基因(env)进化特征及其中和敏感性。方法从感染者两个随访时间点的全血样本中提取前病毒DNA,使用单拷贝基因组扩增(SGA)方法扩增全长env基因,测序后进行序列比对和进化树构建,分析env基因可变区特征及CD4结合位点(CD4bs)的氨基酸特征。将有代表性的env基因克隆到pcDNA^(TM)3.1载体上,与骨架质粒pSG3△env共转染293T细胞制备假病毒,检验其感染能力,筛选出功能性膜蛋白,再将有功能性的假病毒与不同的广谱中和抗体进行中和试验,分析膜蛋白的中和特征。结果从两个时间点全血样本中共获得43条全长env基因,进化树分析显示两个时间点的env序列交叉聚集,膜蛋白序列的基因距离随时间推移而增加。对病毒膜蛋白基因可变区的分析显示,V5区的糖基化位点数目随时间的推移而减少,后一时间点有16%的序列在V1区进化出两个额外的半胱氨酸;中和实验显示V1区半胱氨酸插入不会影响病毒针对V3环中和抗体的敏感性,V5区N460糖基化位点缺失导致假病毒对CD4bs类抗体的敏感性略有下降。结论病毒膜蛋白基因在体液免疫的压力下持续进化;关键中和表位中氨基酸变异导致病毒发生中和逃逸。 展开更多
关键词 艾滋病病毒 膜蛋白基因 假病毒 糖基化位点 免疫逃逸
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新疆酸马奶中乳酸片球菌所产细菌素05-8的理化特性及分子量确定 被引量：5
19
作者 郝彦玲 黄莹 +2 位作者 赵潞 张世湘 张列兵 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2009年第11期12-14,共3页
首先对分离自新疆酸马奶中的乳酸片球菌所产细菌素05-8的理化特性进行研究,通过酶敏感性实验,确定乳酸片球菌05-8所产抑菌物质为细菌素,该细菌素在100℃90min和121℃10min具有较好的热稳定性,同时在pH值为2～8的范围内有抑菌活性。当细... 首先对分离自新疆酸马奶中的乳酸片球菌所产细菌素05-8的理化特性进行研究,通过酶敏感性实验,确定乳酸片球菌05-8所产抑菌物质为细菌素,该细菌素在100℃90min和121℃10min具有较好的热稳定性,同时在pH值为2～8的范围内有抑菌活性。当细菌生长到稳定期时,达到最大产量1280AU,最佳收获期为13h。以单核细胞增生李斯特氏菌为指示菌,确定其对细菌的作用方式为杀死细菌,此外,还能抑制戊糖片球菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌La4、短乳杆菌AS1.12等革兰氏阳性菌。然后通过Tricine-SDS-PAGE活性抑菌实验测定此细菌素的分子量在14.4ku以下,初步确定细菌素05-8为Ⅱa类细菌素。 展开更多
关键词 酸马奶 乳酸片球菌 细菌素 理化特性 分子量
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产γ-氨基丁酸乳杆菌高效筛选方法的建立
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作者 范城飞 翟征远 +6 位作者 王然 郝彦玲 孙婷 马霞 刘福东 赵雯 洪维錬 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2024年第4期34-37,49,共5页
本研究首先发现11株短乳杆菌皆产生大量气体导致培养管盖子弹起,进一步对48 h发酵液pH进行测定,发现有3株菌的发酵液具有较高pH,薄层层析结果表明产生大量气体且发酵液pH较高的菌株能够产生γ-氨基丁酸(GABA),进一步通过质谱实验验证,... 本研究首先发现11株短乳杆菌皆产生大量气体导致培养管盖子弹起,进一步对48 h发酵液pH进行测定,发现有3株菌的发酵液具有较高pH,薄层层析结果表明产生大量气体且发酵液pH较高的菌株能够产生γ-氨基丁酸(GABA),进一步通过质谱实验验证,产量分别是124.14、203.00、211.50 mg/L。通过高效测序发现11株短乳杆菌GABA合成基因簇结构和核酸序列基本相同,因此在基因层面无法实现高效筛选。根据GABA生物合成过程中产生二氧化碳及消耗氢离子的现象建立高效筛选方法。进一步对220株植物乳杆菌进行产气观察结合pH测定判定菌株是否产GABA,并通过薄层色谱进行验证,表明此方法可行。该方法具有低成本高效的特点,能够快速从大量乳杆菌中筛选出产GABA菌株。 展开更多
关键词 Γ-氨基丁酸 乳杆菌 高效
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