食管鳞癌RASSF1A基因启动子区甲基化研究 被引量：4

1

作者 丁士刚 吴笛 +3 位作者 邹检平 邢秀娟 鲁凤民 陈香梅 《中国微创外科杂志》 CSCD 2007年第12期1213-1216,共4页

目的研究肿瘤抑制基因RASSF1A启动子区甲基化所致该基因表达抑制在我国食管鳞癌发生中的作用及可能机制。方法用甲基化特异PCR技术(MSP)检测43例原发性食管鳞癌标本及6例对照食管上皮组织标本、食管鳞癌细胞系TE11和TE12中RASSF1A启动... 目的研究肿瘤抑制基因RASSF1A启动子区甲基化所致该基因表达抑制在我国食管鳞癌发生中的作用及可能机制。方法用甲基化特异PCR技术(MSP)检测43例原发性食管鳞癌标本及6例对照食管上皮组织标本、食管鳞癌细胞系TE11和TE12中RASSF1A启动子甲基化状态;逆转录(RT)-PCR法检测5-氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理前后食管鳞癌细胞系中RASSF1A mRNA表达水平;Western blot方法检测食管鳞癌细胞系中细胞微管蛋白的表达。结果20.9%(9/43)原发性食管鳞癌标本有RASSF1A启动子超甲基化,正常食管上皮组织未发现该基因超甲基化改变。RASSF1A基因甲基化与食管癌患者的性别和TNM分期无关(P>0.05),但在不同年龄组间的差异有统计学意义(P<0.05)。TE12细胞RASSF1A启动子发生甲基化,RT-PCR检测不到RASSF1A mRNA。TE11细胞系启动子未发生甲基化,RT-PCR检测其有RASSF1A mRNA表达。5-Aza-CdR处理可使TE12重新表达RASSF1A mRNA。TE12细胞的β-微管蛋白水平比TE11细胞低87.8%。结论原发性食管鳞癌存在RASSF1A启动子超甲基化,该基因甲基化与年龄相关。RASSF1A在食管鳞癌细胞系表达抑制与其甲基化状态有关。RASSF1A表达缺失可能导致β-微管蛋白减少。 展开更多

关键词 食管鳞癌 甲基化 RASSF1A Β-微管蛋白 抑癌基因

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血管内皮细胞生长因子的表达及其单克隆抗体的制备 被引量：5

2

作者 徐静 李树香 +4 位作者 刘立成 刘敬 王欣怡 许丽锋 邹检平 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第11期1002-1005,共4页

目的表达、纯化血管内皮细胞生长因子(VEGF165)蛋白,并制备其单克隆抗体。方法将pGEX-4T-1/VEGF165表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中,IPTG诱导表达GST-VEGF165融合蛋白,并采用十二烷基肌氨酸钠溶解,亲和层析纯化。用获得的GST-VE... 目的表达、纯化血管内皮细胞生长因子(VEGF165)蛋白,并制备其单克隆抗体。方法将pGEX-4T-1/VEGF165表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中,IPTG诱导表达GST-VEGF165融合蛋白,并采用十二烷基肌氨酸钠溶解,亲和层析纯化。用获得的GST-VEGF165蛋白免疫小鼠,制备抗GST-VEGF165单克隆抗体,并进行鉴定及初步应用。结果表达的GST-VEGF165融合蛋白相对分子质量约为45000,表达量约占菌体总蛋白的20%,纯化后蛋白纯度大于90%,并具有与其受体结合的活性,亲和力约为109L/mol。免疫小鼠后,获得1株抗GST-VEGF165的单克隆抗体,反应原性良好,亚类为IgG2a,解离常数为2×10-9mol/L。以此单抗为包被抗体,建立了双抗体夹心ELISA法,VEGF165的最佳检测范围为1.5625～25ng/ml。结论成功表达、纯化了VEGF165蛋白,并制备出VEGF165单克隆抗体,为VEGF检测试剂盒的研制奠定了基础。 展开更多

关键词 血管内皮细胞生长因子 表达 单克隆抗体 ELISA

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米非司酮调控乳腺癌细胞增殖的研究 被引量：3

3

作者 郭永 何森 +3 位作者 苏晨 张瑶楠 王乾兴 邹检平 《生殖医学杂志》 CAS 2014年第4期306-311,共6页

目的研究米非司酮对乳腺癌细胞系MCF-7和T47D的增殖抑制作用。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测米非司酮对乳腺癌细胞系MCF-7和T47D的半数抑制浓度(IC50)。不同浓度米非司酮(0.25、2.5、25和50μmol/L)分别处理人乳腺癌细胞系MCF-7和T... 目的研究米非司酮对乳腺癌细胞系MCF-7和T47D的增殖抑制作用。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测米非司酮对乳腺癌细胞系MCF-7和T47D的半数抑制浓度(IC50)。不同浓度米非司酮(0.25、2.5、25和50μmol/L)分别处理人乳腺癌细胞系MCF-7和T47D1、2、3d后,观察细胞形态变化,以及检测各组细胞生长曲线。结果米非司酮对乳腺癌MCF-7和T47D细胞均有抑制作用,其抑制率均随着米非司酮浓度的增加而变化,存在明显的量效关系。通过对两种细胞抑制率(IR)值直线回归分析,米非司酮对MCF-7细胞的IC50为51.21μmol/L,对T47D细胞的IC50为54.29μmol/L。形态学观察发现,各组细胞体积变小,细胞间的链接消失,细胞内明显有黑色小颗粒聚集。25和50μmol/L浓度米非司酮对MCF-7乳腺癌细胞株生长抑制作用明显,特别是50μmol/L干预24h后在高倍镜下可见明显的核质浓缩。结论米非司酮对病理分型、激素受体型不同的乳腺癌MCF-7和T47D细胞均具有抑制增殖的作用,并呈时间和剂量依赖效应。 展开更多

关键词 米非司酮 乳腺癌 细胞增殖 半数抑制浓度

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一种快速制备甲胎蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞系的方法 被引量：1

4

作者 丁宁 石心泉 +2 位作者 郭永 张瑶楠 邹检平 《生殖医学杂志》 CAS 2013年第5期360-363,共4页

目的建立一种快速制备甲胎蛋白单克隆抗体(AFP-McAb)杂交瘤细胞系的方法。方法以常规和改良两种方式同时免疫8～12周Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合并行次黄嘌呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养。用间接酶链免疫吸附试验法(E... 目的建立一种快速制备甲胎蛋白单克隆抗体(AFP-McAb)杂交瘤细胞系的方法。方法以常规和改良两种方式同时免疫8～12周Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合并行次黄嘌呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养。用间接酶链免疫吸附试验法(ELISA)筛选阳性克隆株,并建立细胞系。结果在较短时间内,改良法能获得高效价的免疫抗体,与常规免疫法相比有极显著差异(P<0.01),同时改良法的细胞融合率和抗体阳性率也显著高于常规免疫法(P<0.001)。筛选获得的高效分泌抗人AFP-McAb的阳性杂交瘤细胞珠进行了初步鉴定。结论新的改良疗法优化了常规的McAb制备中动物免疫程序,并能成功筛选出AFP-McAb杂交瘤细胞系。 展开更多

关键词 甲胎蛋白 杂交瘤 单克隆抗体

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肿瘤治疗的新型药物研究 被引量：1

5

作者 崔芳芳 邹检平 《河南大学学报（医学版）》 CAS 2011年第3期200-205,共6页

分子生物学的发展导致抗肿瘤靶点以及抗肿瘤药物的剧增,新的靶点药物与传统细胞毒化疗药物不同,它们的特异性更强,并且副作用更少。对此,我们通过对近年来国外有关细胞信号传导类药物、细胞内信号激酶类药物、肿瘤脉管系统类药物以及表... 分子生物学的发展导致抗肿瘤靶点以及抗肿瘤药物的剧增,新的靶点药物与传统细胞毒化疗药物不同,它们的特异性更强,并且副作用更少。对此,我们通过对近年来国外有关细胞信号传导类药物、细胞内信号激酶类药物、肿瘤脉管系统类药物以及表观遗传调节因子相关药物等文献进行了回顾,搜集了得到大家广泛关注的一系列的肿瘤靶点及其一些将来可能进入早期临床试验的药物进行简单的介绍,希望能对肿瘤的临床治疗提供一些帮助。 展开更多

关键词 抗肿瘤药物 靶点 肿瘤治疗

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脆性X智力低下蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化

6

作者 李芳芳 郭永 +3 位作者 崔芳芳 丁宁 张嵘 邹检平 《中国计划生育学杂志》 2012年第6期410-414,共5页

目的:在大肠杆菌中对脆性X智力低下蛋白(FMRP)进行重组表达,获得高产量及高纯度的可溶性重组蛋白。方法:以人脑cDNA文库为模板,PCR扩增FMR1基因后将其克隆至融合表达载体pGEX-6P-1中,重组载体转化进入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,并用IPTG... 目的:在大肠杆菌中对脆性X智力低下蛋白(FMRP)进行重组表达,获得高产量及高纯度的可溶性重组蛋白。方法:以人脑cDNA文库为模板,PCR扩增FMR1基因后将其克隆至融合表达载体pGEX-6P-1中,重组载体转化进入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,并用IPTG进行诱导表达。应用谷胱甘肽-琼脂糖凝胶4B进行亲和层析纯化GST-FMRP融合蛋白,并以SDS-PAGE电泳和Westernblot对融合蛋白的表达进行检测。结果:亲和纯化后的融合蛋白经FMRP及GST单抗分别进行Westernblot鉴定为GST-FMRP融合蛋白。结论:大肠杆菌中FMRPISO10的重组表达产量高,纯化得到可溶性重组蛋白,为FMRP抗体的制备及FXS检测试剂盒的开发奠定基础。 展开更多

关键词 脆性X综合征 FMRP重组表达 蛋白纯化

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米非司酮调控乳腺癌细胞凋亡的研究

7

作者 郭永 何森 +2 位作者 苏晨 王乾兴 邹检平 《中国计划生育学杂志》 2014年第5期300-303,共4页

目的:研究米非司酮促进乳腺癌T47D细胞凋亡的作用。方法:根据米非司酮的处理浓度分为0.25μmol/L组、2.5μmol/L组、25μmol/L组和50μmol/L组,各组分别加入相应浓度米非司酮处理人乳腺癌T47D细胞2d后,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的d... 目的:研究米非司酮促进乳腺癌T47D细胞凋亡的作用。方法:根据米非司酮的处理浓度分为0.25μmol/L组、2.5μmol/L组、25μmol/L组和50μmol/L组,各组分别加入相应浓度米非司酮处理人乳腺癌T47D细胞2d后,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法检测细胞凋亡,在荧光显微镜下观察绿色荧光细胞数量和荧光强度,采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化吡啶法在流式细胞仪上检测凋亡细胞百分率。结果:25μmol/L组和50μmol/L组与对照组比较,阳性绿色荧光细胞的数量更多,荧光强度更强;25μmol/L组和50μmol/L组的凋亡细胞百分比(分别为16.1±3.5%和17.2±3.8%)高于对照组(5.1±2.3%),差异有统计学意义(分别为P=0.010和P=0.009);0.25μmol/L组和2.5μmol/L组的凋亡细胞百分比与对照组比较差异无统计学意义(分别为P=0.818和P=0.884)。结论:米非司酮能够促进乳腺癌T47D细胞的凋亡,且随着米非司酮剂量的升高,凋亡细胞数量增加。 展开更多

关键词 米非司酮 乳腺癌 T47D 细胞凋亡 流式检测

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乳腺癌和卵巢癌易感基因2及2a编码蛋白N端的原核表达

8

作者 邹检平 杜冠华 吴春富 《生物技术通讯》 CAS 2007年第4期568-570,共3页

目的:分别表达乳腺癌和卵巢癌易感基因BRCA2编码蛋白的N端500个氨基酸残基(nBRCA2)及其缺乏第3个外显子编码的蛋白(nBRCA2a),为分析比较含与不含第3个外显子所表达蛋白的功能差异准备条件。方法:采用RT-PCR,从BT-474细胞系的RNA扩增获得... 目的:分别表达乳腺癌和卵巢癌易感基因BRCA2编码蛋白的N端500个氨基酸残基(nBRCA2)及其缺乏第3个外显子编码的蛋白(nBRCA2a),为分析比较含与不含第3个外显子所表达蛋白的功能差异准备条件。方法:采用RT-PCR,从BT-474细胞系的RNA扩增获得nBRCA2(编码1～500氨基酸残基)和nBRCA2a(编码1～18-105～500氨基酸残基)的基因片段,通过体外重组技术将目的基因片段连接到原核表达载体pGEX-2TK中,将经酶切和测序鉴定正确的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS受体菌,用IPTG诱导重组融合蛋白(与GST融合)的表达并进行纯化。结果和结论:构建了含有和不含有第3个外显子的重组原核表达质粒pGEX-2TK/nBRAC2和pGEX-2TK/nBRCA2a;融合表达产物经SDS-PAGE鉴定,并采用十二烷基肌氨酸钠进行了可溶性纯化,获得了相对分子质量分别为81000和71000的融合表达蛋白。 展开更多

关键词 乳腺癌易感基因 2 RT-PCR 原核表达

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血管内皮生长因子定量测定试剂盒(酶联免疫吸附法)的性能验证及评价

9

作者 赵晓君 王磊 +1 位作者 陆浩 邹检平 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2020年第6期681-683,688,共4页

目的验证北京健平九星生物医药科技有限公司研发的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)定量测定试剂盒(酶联免疫吸附法)的性能。方法依据美国临床和实验室标准协会(Clinical and Laboratory Standards Institute... 目的验证北京健平九星生物医药科技有限公司研发的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)定量测定试剂盒(酶联免疫吸附法)的性能。方法依据美国临床和实验室标准协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)批准的EP15-A2文件方法验证精密度及准确度,EP6-A文件方法验证线性范围,C28-A3文件方法验证生物学参考区间。结果高、低浓度混合血清样本精密度检测结果CV分别为5.64%和7.67%,均小于15%;准确度验证中,VEGF含量理论值为150 pg/mL的国际参考品5 d测量均值为157 pg/m L,标准差为2.30 pg/mL,验证区间为149.53~164.47 pg/mL;理论值为350 pg/m L的国际参考品5 d测量均值为365.80 pg/mL,标准差为5.03 pg/mL,验证区间为349.47~382.13 pg/mL;验证区间均包括定值,且相对差值均不超过±10%。线性范围验证中,高、低浓度混合血清样本的测定值与预测值差别不大,相关系数r^2=0.991,线性较好(斜率b接近1)。生物学参考区间验证中,20份健康人血清样本中有19份VEGF含量均在厂家设定的6.25~142.20 pg/m L参考值范围内,满足20例参考个体中不超过2例的检测值不在参考范围内。结论北京健平九星生物医药科技有限公司研发的VEGF定量测定试剂盒的精密度、线性范围、准确度和生物学参考范围均达到了临床应用的实验要求,各性能指标的验证方法均可为相关实验室提供参考。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子 酶联免疫吸附法 试剂盒 精密度 准确度 线性范围 参考区间

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血管内皮生长因子定量检测试剂盒的研制

10

作者 李树香 王欣怡 +3 位作者 刘敬 周亚 徐静 邹检平 《国际生物制品学杂志》 CAS 2011年第4期180-183,共4页

目的 研制血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）检测试剂盒（酶标法）.方法 以一株特异性抗VEGF单克隆抗体作为捕获抗体,另一株单克隆抗体作为检测抗体,通过棋盘滴定法确定两抗体的最佳浓度组合.制备冻干VEGF16... 目的 研制血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）检测试剂盒（酶标法）.方法 以一株特异性抗VEGF单克隆抗体作为捕获抗体,另一株单克隆抗体作为检测抗体,通过棋盘滴定法确定两抗体的最佳浓度组合.制备冻干VEGF165参考品,并对样本稀释液、封闭液等实验条件进行优化.检测自制试剂盒的特异性并对其进行初步应用.结果 棋盘滴定法确定捕获抗体的质量浓度为10μg/ml,检测抗体的稀释倍数为1：20 000.冻干VEGF165的质量浓度为720～880 pg/ml,样本间变异系数〈10%.以5%牛血清白蛋白作为封闭液和样本稀释液最为合适.自制试剂盒与10种细胞因子均无交叉反应,具有较高的特异性和灵敏度.结论 成功研制出VEGF检测试剂盒. 展开更多

关键词 血管内皮生长因子类 试剂盒 抗体 单克隆

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脆性X综合征分子病理及治疗研究进展

11

作者 丁宁 李芳芳 邹检平 《中国计划生育学杂志》 北大核心 2011年第9期574-576,共3页

脆性X综合征（FXS）是一种常见的遗传性智力低下综合征，其发病率仅次于唐氏综合征，呈X连锁遗传。FXS的发病率男性为1／4000，女性为1／6000。99％以上的FXS患者，其发病的分子遗传学基础是FXS智力低下基因1（FMR1）动态突变，使其编... 脆性X综合征（FXS）是一种常见的遗传性智力低下综合征，其发病率仅次于唐氏综合征，呈X连锁遗传。FXS的发病率男性为1／4000，女性为1／6000。99％以上的FXS患者，其发病的分子遗传学基础是FXS智力低下基因1（FMR1）动态突变，使其编码的脆性X蛋白（FMRP）表达减少或者缺失。本文拟探讨FXS的分子遗传学发病机理和治疗新进展。 展开更多

关键词 脆性X综合征 分子病理 治疗 分子遗传学基础 智力低下综合征 智力低下基因 唐氏综合征 X连锁遗传

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血管内皮生长因子检测试剂盒质控标准的确定

12

作者 李树香 王欣怡 +3 位作者 刘敬 周亚 徐静 邹检平 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第2期203-205,共3页

目的确定血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)检测试剂盒的质控标准。方法对已制备的VEGF检测试剂盒反应体系的线性范围、最低检出限、精密性、准确性、稳定性进行质量评价,确定质控标准。结果 VEGF检测试剂盒... 目的确定血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)检测试剂盒的质控标准。方法对已制备的VEGF检测试剂盒反应体系的线性范围、最低检出限、精密性、准确性、稳定性进行质量评价,确定质控标准。结果 VEGF检测试剂盒的线性范围为0～400 pg/ml;最低检出限为0 pg/ml;检测不同浓度VEGF样品的批内精密性为9.83%～13.73%,不同时间检测VEGF的批内精密性为5.47%～14.08%,批间精密性为7.88%;检测不同浓度VEGF的回收率为94%～105%,确定试剂盒的质控标准为批内、批间精密性<15%,回收率在90%～110%之间。3批试剂盒于4℃分别放置6个月,各项指标均符合已确定的质控标准。结论已确定了VEGF检测试剂盒的质控标准,为其进一步应用于临床奠定了基础。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子 精密性 准确性

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阿米巴肝脓肿小鼠腹腔巨噬细胞内环核苷酸及酸...

13

作者 邹检平 马家骅 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期156-159,共4页

关键词 肝脓肿环 核苷酸 阿米巴

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专注成就事业

14

作者 邹检平 徐妍 《神州学人》 2014年第11期41-43,共3页

回国创业,仅仅始于一个念头,但创业成功,却需要执著和专注。执著于事业不偏离,专注于事业不退缩,持之以恒,才能有所收获。我专注于肿瘤防治,源于早年在同济医科大学求学时。当时同窗好友的父亲患了癌症,转了4次医院,换了不知道多少套治... 回国创业,仅仅始于一个念头,但创业成功,却需要执著和专注。执著于事业不偏离,专注于事业不退缩,持之以恒,才能有所收获。我专注于肿瘤防治,源于早年在同济医科大学求学时。当时同窗好友的父亲患了癌症,转了4次医院,换了不知道多少套治疗方案,直致原本家境富足的他最终辍学打工为父治病,连家里的房子都典卖了,最后他的父亲还是离开了人世。此事对我震动很大,当时我发誓一定要认清肿瘤,改变肿瘤患者因治疗而人财两空的残酷结局。 展开更多

关键词 人财两空 创业成功 肿瘤防治 同济医科大学 同窗好友 创业梦想 创业经历 生物医药技术 不知道 生物医药科技

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阿米巴肝脓肿细胞免疫学研究进展

15

作者 邹检平 章翰 《中国实验临床免疫学杂志》 1989年第1期76-78,共3页

关键词 阿米巴病 肝脓肿 免疫学

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血管内皮生长因子及其功能 被引量：12

16

作者 丁宁 崔芳芳 邹检平 《中国计划生育学杂志》 北大核心 2011年第3期189-191,共3页

血管内皮生长因子（VEGF）是一类具有高度生物活性的功能性糖蛋白,由于能够有效地刺激内皮细胞有丝分裂和诱导血管生成而得名[1]。它在许多病理生理过程中都有表达,

关键词 血管内皮生长因子 细胞有丝分裂 病理生理过程 生物活性 血管生成 糖蛋白 功能性

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血管内皮生长因子和抗肿瘤血管新生药物研究进展 被引量：2

17

作者 周亚 徐静 邹检平 《生物技术通讯》 CAS 2009年第6期852-855,共4页

肿瘤的生长与迁移离不开新血管的形成,这使得抗血管新生成为肿瘤治疗的重要途径之一。血管内皮生长因子(VEGF)是针对内皮细胞作用最强、特异性最高的血管新生促进因子,因而VEGF是抗肿瘤治疗的重要靶点。我们简要介绍了VEGF的一些生物学... 肿瘤的生长与迁移离不开新血管的形成,这使得抗血管新生成为肿瘤治疗的重要途径之一。血管内皮生长因子(VEGF)是针对内皮细胞作用最强、特异性最高的血管新生促进因子,因而VEGF是抗肿瘤治疗的重要靶点。我们简要介绍了VEGF的一些生物学特点及肿瘤血管新生,着重介绍了一些抗血管新生药物的最新研究成果及其临床应用。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子 肿瘤 血管新生 贝伐单抗

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米非司酮调控乳腺癌细胞中BRCA基因表达变化的研究 被引量：2

18

作者 何森 郭永 +2 位作者 张瑶楠 张嵘 邹检平 《生殖医学杂志》 CAS 2013年第6期441-445,共5页

目的研究米非司酮处理乳腺癌细胞系T47D后,BRCA1和BRCA 2在mRNA水平的表达变化。方法使用不同浓度米非司酮(0.25、2.5、25μmol/L)分别处理人乳腺癌细胞系T47D 1d后,应用荧光实时定量聚合酶链反应(Realtime-PCR)的方法检测各浓度组和对... 目的研究米非司酮处理乳腺癌细胞系T47D后,BRCA1和BRCA 2在mRNA水平的表达变化。方法使用不同浓度米非司酮(0.25、2.5、25μmol/L)分别处理人乳腺癌细胞系T47D 1d后,应用荧光实时定量聚合酶链反应(Realtime-PCR)的方法检测各浓度组和对照组BRCA1、2基因的表达差异。结果不同浓度米非司酮(0.25、2.5、25μmol/L)分别处理人乳腺癌细胞系T47D 1 d后,BRCA1、2基因在mRNA水平上表达均降低。米非司酮25μmol/L组分别与对照组和0.25μmol/L组比较,BRCA1基因在mRNA水平上表达均降低,且具有统计学差异(P<0.05)。与对照组比较,米非司酮2.5μmol/L组BRCA2基因在mRNA水平上表达降低,且具有统计学差异(P<0.05);米非司酮25μmol/L组分别与对照组和0.25μmol/L组比较,BRCA2基因在mRNA水平上表达降低,均具有统计学差异(P<0.01)。结论在乳腺癌细胞中,米非司酮在转录水平上调控BRCA1、2基因的表达。 展开更多

关键词 米非司酮 乳腺癌 BRCA基因

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血管内皮生长因子化学发光免疫测定试剂盒的研制及验证 被引量：1

19

作者 李雅微 王磊 +2 位作者 张国强 夏焕章 邹检平 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第9期938-942,946,共6页

目的研制血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）化学发光免疫测定试剂盒,并对该试剂盒进行验证。方法以试剂盒的技术指标和血清检测结果为参考依据,建立检测方法,确定检测范围,并对包被抗体（1∶500、1∶1 000和... 目的研制血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）化学发光免疫测定试剂盒,并对该试剂盒进行验证。方法以试剂盒的技术指标和血清检测结果为参考依据,建立检测方法,确定检测范围,并对包被抗体（1∶500、1∶1 000和1∶2 000倍稀释）及酶标抗体浓度（1∶3 000、1∶5 000、1∶6 000和1∶8 000倍稀释）、包被温度（室温和4℃）、封闭液成分（1%小牛血清、1%和0.5%牛血清白蛋白）及干燥方法（超净台吹干和使用真空干燥机进行干燥）进行优化;同时对试剂盒的线性、检出限、精密性、准确度、特异性及热稳定性进行验证;采用本试剂盒对139例非肿瘤人群和100例肿瘤患者的血清样本进行初步检测。结果方法的最佳检测条件为：包被抗体浓度为1∶1 000,酶标抗体浓度为1∶3 000,对血清样本的检测范围为6.25～800 pg/ml,最佳包被浓度为4℃,最佳封闭液成分为0.5%牛血清白蛋白,最佳干燥方法为真空干燥法。试剂盒线性相关系数r〉0.99,校准曲线各点偏差的绝对值〈10%,最低检出限≤3.125 pg/ml,空白检出限≤3.125 pg/ml,批内差异〈5%,批间差异〈7%,回收率为85%～99%;特异性检验结果为本试剂盒对EGF、FGF-2、PDGF-AA、Pl GF-1、Pl GF-2、HGF、TNF-α、TNF-β检测的交叉反应率≤0.52%;经37℃保存3、7 d后,试剂盒线性相关系数r〉0.99,空白检出限≤3.125 pg/ml,批内差异〈8%,回收率为80%～82%。139例非肿瘤人群和100例肿瘤患者的血清样本中VEGF的中位水平（M）分别为44.6和83.4 pg/ml。结论本研究开发的试剂盒具有较高的准确性、灵敏性、特异性,适用于血清VEGF的临床检测,具有较好的临床应用前景。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子 化学发光免疫分析

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