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家蚕Tret1-X1基因对家蚕核型多角体病毒(BmNPV)的基因表达和基因组复制的影响
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作者 宋秋云 高娟 +3 位作者 邵露璐 张业顺 方瑷 张国政 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期244-253,共10页
家蚕促海藻糖转运蛋白1异构体X1(Bombyx mori facilitated trehalose transporter Tret1-like isoform X1,BmTret1-X1)主要参与家蚕糖代谢过程。为探究其在家蚕抗BmNPV感染过程中的作用,克隆BmNPV抗性家蚕品系AN与易感品系C108的BmTret1... 家蚕促海藻糖转运蛋白1异构体X1(Bombyx mori facilitated trehalose transporter Tret1-like isoform X1,BmTret1-X1)主要参与家蚕糖代谢过程。为探究其在家蚕抗BmNPV感染过程中的作用,克隆BmNPV抗性家蚕品系AN与易感品系C108的BmTret1-X1基因,发现基因编码区存在4个SNP导致的氨基酸改变,两者的预测蛋白质结构存在差异。利用pIZT/V5-His-mCherry表达载体在BmN细胞中过表达BmTret1-X1,BmNPV感染后24 h、48 h的BmNPV增殖受到抑制,BmNPV基因lef-3、vp39、p10和gp64的转录水平低于对照组(P<0.05),其中感染后24 h vp39基因的表达量与对照组相比差异达1 089倍,细胞中病毒基因组DNA复制也受到明显抑制。转染BmTret1-X1基因siRNA使BmN细胞中该基因表达量降低约一半,BmNPV的lef-3、vp39、p10和gp64转录水平升高,但BmNPV增殖和基因组DNA复制水平未见明显变化。综上所述,BmN细胞中BmTret1-X1基因的高表达对BmNPV的基因表达、DNA复制及病毒增殖具有抑制作用,该基因在家蚕对BmNPV的抗性形成过程中具有一定作用。 展开更多
关键词 家蚕 BmTret1-X1基因 BmNPV抗性 病毒复制 病毒基因表达
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家蚕BmVNCP基因表达与BmNPV感染增殖相关性的鉴定分析 被引量：1
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作者 邵露璐 何小柏 +6 位作者 高娟 宋秋云 张业顺 方瑷 武康晖 王学杨 张国政 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期293-301,共9页
为解析家蚕AN品系高抗BmNPV的分子机制,采用家蚕抗性品系AN与易感品种C108杂交及多代回交,结合累代BmNPV攻毒选择,构建了高抗BmNPV的近等基因系C108_AN;在5龄起蚕经口添食BmNPV多角体1×10^(8) mL^(-1)悬浊液浸渍桑叶对C108及C108_A... 为解析家蚕AN品系高抗BmNPV的分子机制,采用家蚕抗性品系AN与易感品种C108杂交及多代回交,结合累代BmNPV攻毒选择,构建了高抗BmNPV的近等基因系C108_AN;在5龄起蚕经口添食BmNPV多角体1×10^(8) mL^(-1)悬浊液浸渍桑叶对C108及C108_AN攻毒,对感染后12、24、36、48、60 h的中肠组织进行转录组测序发现,C108_AN样本中检出BmNPV基因个数与表达量均大幅减少,病毒虽然能够侵染但不能完成复制;转录组中编码230 aa的家蚕病毒核衣壳蛋白基因(命名为BmVNCP)在C108_AN样本中显著高表达,表明与BmNPV抗性可能具有关联性。在BmN细胞中过表达BmVNCP基因可以抑制BmNPV的增殖,在BmN细胞中进行靶向BmVNCP的CRISPR/Cas9基因编辑,未能观察到BmNPV增殖和vp39基因表达的稳定增加;BmN细胞内过表达BmVNCP基因可以明显提高宿主IMD信号通路中Dredd基因的表达水平,对FADD基因转录水平无影响,PGRP-LB和PGRP-LF基因表达量极低以致qRT-PCR无法检出。综合分析上述结果认为,家蚕细胞或组织中BmVNCP基因高水平表达不能够阻止BmNPV侵染,但能够降低BmNPV侵染后病毒基因的表达以及病毒增殖,BmVNCP基因产物可能是通过IMD信号通路触发免疫机制。 展开更多
关键词 家蚕 家蚕核型多角体病毒 家蚕病毒核衣壳蛋白基因 基因过表达 病毒感染 病毒增殖
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