目的探讨人附睾蛋白4(HE4)过表达对子宫内膜癌(EC)细胞增殖、侵袭能力及肿瘤形成的影响。方法构建HE4过表达质粒载体(pc DNA 3.1/Myc-His-HE4)和HE4特异性小干扰RNA(siRNA)表达质粒载体(siRNA-HE4),分别转染HEC-1B(HE4过表达组)和Ark2(...目的探讨人附睾蛋白4(HE4)过表达对子宫内膜癌(EC)细胞增殖、侵袭能力及肿瘤形成的影响。方法构建HE4过表达质粒载体(pc DNA 3.1/Myc-His-HE4)和HE4特异性小干扰RNA(siRNA)表达质粒载体(siRNA-HE4),分别转染HEC-1B(HE4过表达组)和Ark2(HE4低表达组)两个EC细胞系;以空载体pc DNA 3.1/Myc-His转染的HEC-1B细胞为HE4过表达组的阴性对照,以非特异性序列siRNA转染的Ark2细胞为HE4低表达组的阴性对照;不进行转染处理、正常培养的EC细胞系为正常对照组。转染后,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测HE4 mRNA表达水平,MTT比色法测定细胞增殖活性,体外迁移和侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭能力。构建移植性肿瘤小鼠模型,比较各组动物的形成瘤体积。结果与正常对照组和阴性对照组的HEC-1B细胞比,转染pc DNA 3.1/Myc-His-HE4后HEC-1B细胞中HE4 mRNA表达水平显著升高(P<0.05),细胞增殖活性、穿膜细胞数明显升高(P<0.05);与正常对照组和阴性对照组的Ark2细胞比,转染siRNA-HE4后Ark2细胞中HE4 mRNA表达水平显著降低(P<0.05),细胞增殖活性、穿膜细胞数明显降低(P<0.05);而阴性对照组与正常对照组之间比较差异无统计学意义(P>0.05);HE4过表达组的移植性肿瘤体积和重量明显大于其对照组(P<0.05),而HE4低表达组的移植性肿瘤体积和重量明显小于其对照组(P<0.05)。结论 HE4过表达可导致EC细胞的增殖、迁移及侵袭能力增强,促进肿瘤形成;下调HE4基因表达可明显抑制EC细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制肿瘤生长。展开更多
文摘目的探讨人附睾蛋白4(HE4)过表达对子宫内膜癌(EC)细胞增殖、侵袭能力及肿瘤形成的影响。方法构建HE4过表达质粒载体(pc DNA 3.1/Myc-His-HE4)和HE4特异性小干扰RNA(siRNA)表达质粒载体(siRNA-HE4),分别转染HEC-1B(HE4过表达组)和Ark2(HE4低表达组)两个EC细胞系;以空载体pc DNA 3.1/Myc-His转染的HEC-1B细胞为HE4过表达组的阴性对照,以非特异性序列siRNA转染的Ark2细胞为HE4低表达组的阴性对照;不进行转染处理、正常培养的EC细胞系为正常对照组。转染后,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测HE4 mRNA表达水平,MTT比色法测定细胞增殖活性,体外迁移和侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭能力。构建移植性肿瘤小鼠模型,比较各组动物的形成瘤体积。结果与正常对照组和阴性对照组的HEC-1B细胞比,转染pc DNA 3.1/Myc-His-HE4后HEC-1B细胞中HE4 mRNA表达水平显著升高(P<0.05),细胞增殖活性、穿膜细胞数明显升高(P<0.05);与正常对照组和阴性对照组的Ark2细胞比,转染siRNA-HE4后Ark2细胞中HE4 mRNA表达水平显著降低(P<0.05),细胞增殖活性、穿膜细胞数明显降低(P<0.05);而阴性对照组与正常对照组之间比较差异无统计学意义(P>0.05);HE4过表达组的移植性肿瘤体积和重量明显大于其对照组(P<0.05),而HE4低表达组的移植性肿瘤体积和重量明显小于其对照组(P<0.05)。结论 HE4过表达可导致EC细胞的增殖、迁移及侵袭能力增强,促进肿瘤形成;下调HE4基因表达可明显抑制EC细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制肿瘤生长。